專利名稱：從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷及其方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體為從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷及其方法。
背景技術(shù)：
SAquilaria sinensis (Lour.) Gilg,(Thymelaeaceae)自 (Aqui laria Lam.)常綠喬木，為我們特有樹種，1999年被國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)為國(guó)家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物，《2000年世界自然保護(hù)聯(lián)盟受威脅植物紅色名錄》將其列為易危植物。白木香具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，主要用于生產(chǎn)白木香，其未結(jié)香木材可作普通用材或粉碎作為燃香的原料，白木香碎料可壓制成香熏片，用于改善居室環(huán)境，對(duì)呼吸道疾病和心臟病、心絞痛也有很好的緩解、治療作用(梅全喜等，2007)。其種子含油量達(dá)68.5%，遠(yuǎn)高于其他木本植物，可為我國(guó)的生物質(zhì)燃料油工業(yè)提供豐富的可再生原料，且有緩瀉作用，具有開發(fā)成天然減肥藥和緩瀉制劑的潛力(麗艷等，2008)。其花可以提取成香料或香精。其樹皮可用于造紙。白木香的樹葉已被開發(fā)成具有助睡眠、養(yǎng)顏美容、消脹氣、排宿便、去油脂作用的白木香
ο白木香樹形美觀，樹姿優(yōu)雅，枝繁葉茂，四季常青，還是一種觀賞價(jià)值很高的園林綠化樹種(林偉強(qiáng)等，200幻。正是由于白木香樹全身都是寶，具有非常大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和市場(chǎng)前景，加上各級(jí)政府部門的重視和大力支持，白木香人工種植成為熱潮，現(xiàn)在已經(jīng)在廣東、廣西、海南、福建、云南、臺(tái)灣、四川等地大量人工種植，種植面積已達(dá)到十余萬畝以上。 但白木香適宜刺激結(jié)香的樹齡為7-8年以上，此期間除了進(jìn)行少量的白木香茶生產(chǎn)和園林綠化用樹外，基地在白木香樹上幾無收入。每年修剪下的數(shù)萬噸枝葉被當(dāng)著廢棄物集中扔掉或者燒掉，造成了資源的嚴(yán)重浪費(fèi)及環(huán)境污染。顯然，科學(xué)地開發(fā)利用白木香枝葉廢棄物具有重要意義。芒果苷(manifferin)，又稱芒果素、莞知母寧，為四羥基吡酮碳糖苷，屬雙苯吡酮類化合物。文獻(xiàn)報(bào)道芒果苷具有平喘止咳化痰，解熱、鎮(zhèn)靜、消炎、止痛，抗氧化、抗高血脂、 保肝利膽，免疫調(diào)節(jié)、抗細(xì)菌、抗病毒，抗腫瘤、抗結(jié)核、抗糖尿病，抗肥胖、抗輻射、抗抑郁、 抗神經(jīng)衰弱，防治高尿酸血癥、痛風(fēng)，抑制骨吸收等作用，廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥、化妝品、保健品行業(yè)。(見(1)余勝民，鐘鳴.芒果甙藥理研究進(jìn)展[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，1999,6(3) :F003 ； (2)呂紅，吳雅紅，周培蕾，等.芒果甙的藥理研究進(jìn)展.西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，1 Κ4) 146 ； (3)廖洪利，吳秋業(yè)，葉光明，等.芒果苷藥理研究進(jìn)展.天津藥學(xué)，2005，17 O) 50 ；
(4)黃瀟，彭志剛.芒果苷藥理作用概況.中國(guó)藥師，2007，10(1)73；(5)廖洪利，蘇春麗， 胡小蘭，等.芒果苷藥理研究新進(jìn)展.藥學(xué)實(shí)踐雜志，2008，沈(3) :161)。由于芒果苷具有廣泛的用途，因此從天然產(chǎn)物中提取、分離、精制該化合物的專利較多。名稱為《芒果葉總苷止咳中藥制劑及其生產(chǎn)方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?03125270. 2)公開了一種以芒果葉或扁桃葉為原料，經(jīng)粉碎、乙醇回流提取、非極性溶劑萃取、脫色、過濾、結(jié)晶等工藝，提取芒果葉總苷，并將其制備成具有止咳、化痰、平喘、抗炎作用是中藥制劑的方法。名稱為《芒果總甙制劑及其生產(chǎn)方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?3U8M7.4)公布了一種以芒果葉或扁桃葉為原料，經(jīng)乙醇水提取、非極性有機(jī)溶劑萃取、再用高濃度乙醇水提取得總苷混合物，該總苷混合物含量總和達(dá)到50%以上，可能含有異芒果苷、高芒果苷、新芒果苷和沒食子酸，并以此總苷混合物為基礎(chǔ)制備具有止咳祛痰作用的中藥制劑的方法。名稱為《一種提取芒果甙的方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?200510093658. 2)公布了一種以芒果葉、扁桃葉或含有芒果苷的植物為原料，經(jīng)提取溶媒提取、濃縮、分離純化、結(jié)晶、干燥得到芒果苷的方法，該發(fā)明以水或甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、 丁醇等作為溶媒，采用熱回流、超聲、微波等提取方法，得到的芒果苷含量60%以上。名稱為 《高純度芒果苷的制備方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?00610079234. 5)公布了一種以含有芒果苷的植物為提取原料，優(yōu)選芒果葉和扁桃葉及知母，經(jīng)甲(乙)醇水溶液提取、 提取液經(jīng)樹脂脫色、濃縮干燥、重結(jié)晶等提取出芒果苷的方法，該發(fā)明得到的芒果苷純度 >90%。名稱為《提取芒果苷的一種方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?007100663M.6) 公布了一種以芒果葉或扁桃葉為原料，經(jīng)高溫高壓溶媒提取、膜濃縮、大孔樹脂分離純化等步驟提取芒果苷的方法，該發(fā)明得到的芒果苷純度達(dá)60%以上，所采用的溶媒為水或甲醇、 乙醇、丙醇、丁醇(水)溶液。名稱為《芒果苷的制備方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?200910175781.7)公布了一種以芒果葉為原料，經(jīng)粉碎、酶處理、石油醚脫脂、乙醇水提取、 噴霧干燥、溶解、離心過濾、濃縮干燥、重結(jié)晶2次等步驟獲得芒果苷的方法；該發(fā)明得到的芒果苷純度可到98%。名稱為《一種芒果苷的制備方法》的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?200910234065. 1)公布了一種以芒果葉或扁桃葉為原料，采用飽和石灰水溶液浸泡提取、大孔樹脂吸附、水和不同濃度乙醇溶液分段洗脫、減壓濃縮結(jié)晶、甲醇調(diào)酸重結(jié)晶等工藝提取芒果苷的方法；該工藝所得芒果苷純度達(dá)95%以上。以上所述現(xiàn)有公開的芒果苷生產(chǎn)工藝存在的主要問題1.普遍采用芒果葉、扁桃葉、知母等芒果苷含量低、雜質(zhì)種類多的原料，單位重量原料得率低、成本高、利潤(rùn)低；2.普遍采用芒果葉為原料，因該樹易長(zhǎng)蟲，農(nóng)藥使用常常超標(biāo)，導(dǎo)致制備出的芒果苷含有有機(jī)農(nóng)殘；3.普遍采用芒果葉為原料，因該原料含有大量的有機(jī)酸過敏原，使其提取的芒果苷產(chǎn)品的在醫(yī)藥、保健品、化妝品行業(yè)的應(yīng)用受到很大的限制；4.提取工藝普遍采用有毒有機(jī)溶劑如丁醇、石油醚等，污染環(huán)境，制備出的芒果苷產(chǎn)品殘留有機(jī)溶劑，影響安全性；5.普遍得到的芒果苷產(chǎn)品純度較低，僅一項(xiàng)專利達(dá)到了 98%，但該專利所用工藝流程復(fù)雜、成本較高。綜上所述，現(xiàn)尚未見利用白木香葉或嫩枝提取芒果苷的報(bào)道?，F(xiàn)有芒果苷工藝流程均較復(fù)雜，操作難度大；多種有機(jī)溶劑及大孔樹脂等的使用顯著增加了生產(chǎn)成本，并影響了安全性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)以上所述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種以作為廢物的白木香葉和嫩枝做為原料的從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷。
本發(fā)明的另一目的是提供一種從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法以及給出整個(gè)工藝控制和純度檢測(cè)手段、功能與用途。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明主要采用下列技術(shù)方案從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷，是以白木香葉和/或嫩枝作為原料提取的。從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其步驟包括以白木香葉和/或嫩枝為原料，用乙醇溶液或者甲醇溶液進(jìn)行提取，然后回收乙醇或甲醇。從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其步驟包括以白木香葉和/或嫩枝為原料，加入體積比濃度為40% -90%的乙醇溶液或者甲醇溶液，溫度在40-90°C，得到含芒果苷的提取液；將提取液第一次減壓回收乙醇或甲醇后靜置，去除沉淀以除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)；繼續(xù)第二次減壓回收至小體積，然后加入適量無水乙醇或甲醇，靜置，去除沉淀以除去多糖等水溶性雜質(zhì)，得到含芒果苷的上清液；上清液減壓回收乙醇或甲醇至晶體析出為止，靜置，抽濾，依次用無水乙醇或甲醇、蒸餾水洗滌沉淀，干燥即得芒果苷粗
P
ΡΠ O所述芒果苷粗品用體積比濃度為40% -90%的乙醇溶液或者甲醇溶液溶解，調(diào)節(jié) PH值至1-5，重結(jié)晶，既得有效含量在98%以上芒果苷純品。所述白木香葉和/或嫩枝，可以是其中一種也可以是兩種的混合體，可以是干品也可以是濕品，優(yōu)選干品，切細(xì)或打碎備用。所述乙醇溶液或者甲醇溶液作為溶媒對(duì)原料進(jìn)行提取和對(duì)粗品進(jìn)行重結(jié)晶，乙醇溶液或者甲醇溶液濃度范圍優(yōu)選60% -70%。提取方法為熱回流、熱浸漬、滲漉中的一種， 提取時(shí)溫度為40-90°C，優(yōu)選熱回流和滲漉。所述提取時(shí)乙醇溶液或者甲醇溶液用量范圍在所述白木香葉和/或嫩枝重量的10-30倍投藥量之間，優(yōu)選15-20倍。所述第一次減壓回收到乙醇或甲醇的體積比濃度在15%以下，優(yōu)選0-5%。第二次減壓回收后剩余濃縮液量控制在所述白木香葉和/或嫩枝重量的0. 5-2倍投藥量之間，投加的無水乙醇或甲醇的量為第二次回收后濃縮液體積的4-8倍，優(yōu)選5倍。第一次減壓回收乙醇或甲醇后靜置時(shí)間為2-Mh，第二次減壓回收，然后加入無水乙醇或甲醇，靜置2-6h，上清液減壓回收乙醇或甲醇，靜置12-24h。分別用無水乙醇或甲醇、蒸餾水依次洗滌沉淀，以流出液無色為止。調(diào)節(jié)PH值用鹽酸、硫酸、磷酸中的一種，PH值范圍為1-5。優(yōu)選鹽酸，所述PH值優(yōu)選3。從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷，具有平喘止咳化痰，解熱、鎮(zhèn)靜、消炎、 止痛，抗氧化、抗高血脂、保肝利膽，免疫調(diào)節(jié)、抗細(xì)菌、抗病毒，抗腫瘤、抗結(jié)核、抗糖尿病， 抗肥胖、抗輻射、抗抑郁、抗神經(jīng)衰弱，防治高尿酸血癥、痛風(fēng)，抑制骨吸收等作用，可以廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥、化妝品、保健品行業(yè)。與現(xiàn)有的技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明采用白木香葉和嫩枝為原料，含有豐富的芒果苷，且其它雜質(zhì)成分的種類和數(shù)量均較少，該原料不含有過敏成分，原料生產(chǎn)過程中不使用農(nóng)藥，制備出的產(chǎn)品為無過敏原、無有機(jī)農(nóng)殘的高品質(zhì)高純度芒果苷，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、化妝品行業(yè)；2.本發(fā)明整個(gè)工藝流程可以均以乙醇水為溶劑，對(duì)環(huán)境無污染，制備出的產(chǎn)品無有害有機(jī)殘留，安全性更高；
3.本發(fā)明整個(gè)工藝流程采用溶劑法分離技術(shù)，工藝步驟簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、可行，生產(chǎn)周期短、人力耗費(fèi)少、成本低廉；4.本發(fā)明工藝流程最終獲得的芒果苷產(chǎn)品純度達(dá)到98%，且得率大、產(chǎn)能高，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，該工藝簡(jiǎn)單可行，適合大生產(chǎn)，易形成產(chǎn)業(yè)化。


圖1為本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法的工藝流程圖；圖2為本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的紫外吸收光譜圖；圖3為本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的HPLC-DAD 3D圖；圖4為本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的1H-NMR譜圖；圖5為本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的13C-NMR譜圖；圖6為白木香葉的HPLC色譜圖；圖7為本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的HPLC色譜圖。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，從白木香葉和嫩枝中含有豐富的芒果苷，如圖6所示。本發(fā)明從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷，是以白木香葉和/或嫩枝作為原料提取的。其中，白木香葉和/或嫩枝，可以是其中一種也可以是兩種的混合體，可以是干品也可以是濕品，優(yōu)選干品，切細(xì)或打碎后經(jīng)乙醇溶液或甲醇溶液提取而得到的。從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，如圖1所示，其步驟包括以白木香葉和/或嫩枝為原料，加入體積比濃度為40% -90%的乙醇溶液或者甲醇溶液，得到含芒果苷的提取液；將提取液第一次減壓回收乙醇或甲醇后靜置2-Mh，去除沉淀以除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)；繼續(xù)第二次減壓回收至小體積，然后加入適量無水乙醇或甲醇，靜置 2_6h，去除沉淀以除去多糖等水溶性雜質(zhì)，得到含芒果苷的上清液；上清液減壓回收乙醇或甲醇至晶體析出為止，靜置12-24h，抽濾，依次用無水乙醇或甲醇、蒸餾水洗滌沉淀，60°C干燥即得芒果苷粗品。所述芒果苷粗品用體積比濃度為40% -90%的乙醇溶液或者甲醇溶液溶解，調(diào)節(jié)PH值至1-5，重結(jié)晶，既得有效含量在98%以上芒果苷純品。所述乙醇溶液或者甲醇溶液作為溶媒對(duì)原料進(jìn)行提取和對(duì)粗品進(jìn)行重結(jié)晶，乙醇溶液或者甲醇溶液的濃度范圍優(yōu)選60% _70%。提取方法為熱回流、熱浸漬、滲漉中的一種，優(yōu)選熱回流和滲漉。所述提取時(shí)乙醇溶液或者甲醇溶液用量范圍在所述白木香葉和/或嫩枝重量的10-30倍投藥量之間，優(yōu)選15-20倍。所述第一次減壓回收乙醇或甲醇到體積比含量在15%以下，優(yōu)選0-5%。 所述第一次減壓回收乙醇或甲醇的溫度60-80°C，優(yōu)選70°C。第二次減壓回收后剩余濃縮液量控制在所述白木香葉和/或嫩枝重量的0. 5-2倍投藥量之間，投加的無水乙醇或甲醇為第二次減壓回收后所剩體積的5-8倍，優(yōu)選6倍。用無水乙醇或甲醇和蒸餾水依次洗滌沉淀，以流出液無色為止。調(diào)節(jié)PH值用鹽酸、硫酸、磷酸中的一種，PH值范圍為1-5。優(yōu)選鹽酸，所述PH值優(yōu)選3。從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷的整個(gè)工藝流程控制和純度檢測(cè)采用 RP-HPLC色譜技術(shù)日立D2000型高效液相色譜儀(LM55檢測(cè)器、L2130泵、L-2200自動(dòng)進(jìn)
6樣器、D2000 Elite HPLC 管理系統(tǒng))，Cromasil C-18 (5 μ m，250mmX 4. 6mm)，乙腈-0. 4%磷酸水梯度洗脫，柱溫25°C，檢測(cè)波長(zhǎng)258nm，流速lmL/min，梯度條件如下
權(quán)利要求
1.從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷，其特征在于，是以白木香葉和/或嫩枝作為原料提取的。
2.從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于，其步驟包括以白木香葉和/或嫩枝為原料，用乙醇溶液或者甲醇溶液進(jìn)行提取，然后回收乙醇或甲醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于， 其步驟包括以白木香葉和/或嫩枝為原料，加入體積比濃度為40% -90%的乙醇溶液或者甲醇溶液，提取得到含芒果苷的提取液；將提取液第一次減壓回收乙醇或甲醇后，靜置，去除沉淀；繼續(xù)第二次減壓回收，然后加入無水乙醇或甲醇，靜置，去除沉淀，得到含芒果苷的上清液；所述上清液繼續(xù)減壓回收乙醇或甲醇至晶體析出為止，靜置，抽濾，用無水乙醇或甲醇和蒸餾水洗滌沉淀，干燥即得芒果苷粗品。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于， 所述芒果苷粗品用體積比濃度為40% -90%的乙醇溶液或者甲醇溶液溶解，調(diào)節(jié)PH值至 1-5。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于， 所述乙醇溶液或者甲醇溶液用量范圍為所述白木香葉和/或嫩枝重量的10-30倍投藥量之間。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于， 所述第一次減壓回收到乙醇或甲醇的體積比濃度在15%以下。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷的方法，其特征在于，所述第一次減壓回收乙醇或甲醇的溫度為60-80°C。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于， 第二次減壓回收后剩余濃縮液量控制在所述白木香葉和/或嫩枝重量的0. 5-2倍投藥量之間，投無水乙醇或甲醇的量為第二次減壓回收后所剩濃縮液體積的5-8倍。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述從白木香葉和嫩枝中制備高純度芒果苷的方法，其特征在于， 第一次減壓回收乙醇或者甲醇后靜置時(shí)間為2-Mh，第二次減壓回收，然后加入無水乙醇或甲醇，靜置2-6h，上清液減壓回收乙醇或甲醇后，靜置12-24h。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從白木香葉和嫩枝中制備的高純度芒果苷及其方法，主要包括以白木香葉和/或嫩枝作為原料，醇溶液提取，減壓回收醇后，經(jīng)水沉、醇沉、析晶等步驟，得到芒果苷粗品，再經(jīng)重結(jié)晶，制備出高純度芒果苷。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是采用白木香葉和嫩枝為原料，其芒果苷含量大，雜質(zhì)成分種類和數(shù)量均較少，且不含有過敏成分，最終產(chǎn)品品質(zhì)高，可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、化妝品行業(yè)；制備工藝步驟簡(jiǎn)單、穩(wěn)定、可行，生產(chǎn)周期短、人力耗費(fèi)少、成本低廉。
文檔編號(hào)C07D407/04GK102424678SQ201110411308
公開日2012年4月25日 申請(qǐng)日期2011年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月9日
發(fā)明者帥歐, 林勵(lì), 肖鳳霞, 鄧超明, 陳地靈 申請(qǐng)人:林勵(lì)