專(zhuān)利名稱(chēng)：一種乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥化學(xué)對(duì)照品的制備方法，屬中藥現(xiàn)代化技術(shù)領(lǐng)域，具體而言， 本發(fā)明涉及一種從中藥材筋骨草中快速分離乙酰哈巴苷對(duì)照品的方法。
背景技術(shù)：
筋骨草(Ajugae Herba),為唇形科(Labiatae)筋骨草屬(Ajuga L.)植物筋骨草 (Ajuga decumbens Thunb.)的干燥全草，又名金瘡小草、青魚(yú)膽草、苦地膽草、散血草。性味苦，寒，歸肺經(jīng)。具有清熱解毒，涼血消腫的功效。用于咽喉腫痛，肺熱咯血，跌打腫痛。為 《中國(guó)藥典》2010年版新增收載品種。乙酰哈巴苷(8-0-Acetylharpagide)，分子式為C17H26O11,結(jié)構(gòu)式如下脂柱進(jìn)行吸附，然后分別用2、倍量柱體積的水和廣3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用廣3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)為60%乙醇溶液洗脫目標(biāo)物質(zhì)，收集洗脫液，濃縮至原體積的1/10 ；
C.高效制備液相分離將步驟B所得濃縮溶液用微孔濾膜過(guò)濾后，上高效制備液相色譜柱分離，在線監(jiān)測(cè)，針對(duì)性收集目標(biāo)化合物色譜峰段制備溶液；
所述高效制備液相色譜柱填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)，柱規(guī)格為 50cmX 10cm、50cmX8cm 或 50cmX5cm 等。所述高效制備液相的色譜條件為流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)20-30%的甲醇溶液，檢測(cè)波長(zhǎng) 210nm。D.產(chǎn)品回收將步驟C所得制備溶液減壓回收甲醇，水溶液以2-5BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行富集，然后用1-3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)95%乙醇洗脫，濃縮洗脫液至干，固體于50 70°C溫度下干燥6 8小時(shí)，得乙酰哈巴苷對(duì)照品。所述大孔吸附樹(shù)脂選自DlOl或AB-8型。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于
1、步驟少，耗時(shí)短，得率高，操作簡(jiǎn)便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。2、溶劑消耗少，制備液相色譜分離步驟中的溶劑都可回收再利用。3、溶劑毒性小，所用的有機(jī)溶劑甲醇、乙醇等，環(huán)境污染小。4、具有較高的學(xué)術(shù)價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于乙酰哈巴苷分離純化的文獻(xiàn)報(bào)道很少，高效制備液相色譜用于乙酰哈巴苷對(duì)照品的分離純化屬首次。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例1 C步驟所述高效制備液相分離在線監(jiān)測(cè)圖譜圖2為本發(fā)明實(shí)施例1所得乙酰哈巴苷產(chǎn)品的HPLC檢測(cè)圖譜。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
一種乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，其特征在于按如下工藝步驟進(jìn)行
A.原料提取將筋骨草藥材^cg粉碎成粗粉，加入20L體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液，回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，冷卻至室溫；
B.大孔樹(shù)脂富集稱(chēng)取IkgDlOl大孔吸附樹(shù)脂，用直徑IOcm玻璃柱填裝成樹(shù)脂柱，樹(shù)脂床體積約3L ；將冷卻后的提取液以3BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附， 然后分別用9L水和6L體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用6L體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液洗脫目標(biāo)物質(zhì)，收集洗脫液，濃縮至約0. 6L ；
C.高效制備液相分離將步驟B所得濃縮溶液用微孔濾膜過(guò)濾，上高效制備液相色譜柱分離，色譜柱填料為C18，流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)25%的甲醇溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，在線監(jiān)測(cè)， 針對(duì)性收集目標(biāo)化合物色譜峰段制備溶液；
D.產(chǎn)品回收稱(chēng)取500gDlOl大孔吸附樹(shù)脂，用直徑IOcm玻璃柱填裝成樹(shù)脂柱，樹(shù)脂床體積約1. 5L ；將步驟C所得制備溶液減壓回收甲醇，水溶液以:3BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行富集，然后用3L體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇洗脫，濃縮洗脫液至干，固體50°C干燥8小時(shí)，得乙酰哈巴苷對(duì)照品。 實(shí)施例2
一種乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，其特征在于按如下工藝步驟進(jìn)行
A.原料提取將筋骨草藥材^g粉碎成粗粉，加入40L體積分?jǐn)?shù)為45%的乙醇溶液，回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，冷卻至室溫；
B.大孔樹(shù)脂富集稱(chēng)取^gAB-8大孔吸附樹(shù)脂，用直徑IOcm玻璃柱填裝成樹(shù)脂柱，樹(shù)脂床體積約6L ；將冷卻后的提取液以4BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附， 然后分別用18L水和12L體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用12L體積分?jǐn)?shù)為60% 的乙醇溶液洗脫目標(biāo)物質(zhì)，收集洗脫液，濃縮至約1. 2L ；
C.高效制備液相分離將步驟B所得濃縮溶液用微孔濾膜過(guò)濾，上高效制備液相色譜柱分離，色譜柱填料為C18，流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)30%的甲醇溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，在線監(jiān)測(cè)， 針對(duì)性收集目標(biāo)化合物色譜峰段制備溶液；
D.產(chǎn)品回收稱(chēng)取IkgAB-8大孔吸附樹(shù)脂，用直徑IOcm玻璃柱填裝成樹(shù)脂柱，樹(shù)脂床體積約3L ；將步驟C所得制備溶液減壓回收甲醇，水溶液以4BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行富集，然后用7L體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇洗脫，濃縮洗脫液至干，固體70°C干燥 6小時(shí)，得乙酰哈巴苷對(duì)照品。 所得乙酰哈巴苷對(duì)照品重11. 3g，HPLC純度分析為99.覬。
權(quán)利要求
1.一種乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，其特征在于按如下工藝步驟進(jìn)行A.原料提取將筋骨草藥材粉碎成粗粉，按照質(zhì)量體積比kg/L加入8-10倍量的體積分?jǐn)?shù)為40-60%的乙醇溶液，回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，冷卻至室溫；B.大孔樹(shù)脂富集將步驟A冷卻后的提取液以2 5BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行吸附，然后分別用2、倍量柱體積的水和廣3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再用廣3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)為60%乙醇溶液洗脫目標(biāo)物質(zhì)，收集洗脫液，濃縮至原體積的1/10 ；C.高效制備液相分離將步驟B所得濃縮溶液用微孔濾膜過(guò)濾后，上高效制備液相色譜柱分離，在線監(jiān)測(cè)，針對(duì)性收集目標(biāo)化合物色譜峰段制備溶液；D.產(chǎn)品回收將步驟C所得制備溶液減壓回收甲醇，水溶液以2-5BV的速度通過(guò)活化好的大孔吸附樹(shù)脂柱進(jìn)行富集，然后用1-3倍量柱體積的體積分?jǐn)?shù)95%乙醇洗脫，濃縮洗脫液至干，固體于50 70°C溫度下干燥6 8小時(shí)，得乙酰哈巴苷對(duì)照品。
2.如權(quán)利要求1所述乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，其特征在于所述高效制備液相色譜柱填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，柱規(guī)格為50cmX10cm、50cmX8cm或50cmX5cm。
3.如權(quán)利要求1所述乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，其特征在于所述高效制備液相的色譜條件為流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)20-30%的甲醇溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm。
4.如權(quán)利要求1所述乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，其特征在于所述大孔吸附樹(shù)脂選自DlOl或AB-8型。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種乙酰哈巴苷對(duì)照品的高效制備方法，屬中藥現(xiàn)代化技術(shù)領(lǐng)域。該方法按如下工藝步驟進(jìn)行A.原料提取采用40-60%乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)；B.大孔樹(shù)脂富集以水、乙醇除雜后，再以乙醇洗脫目標(biāo)物質(zhì)；C.高效制備液相分離流動(dòng)相為20-30%的甲醇溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm；D.產(chǎn)品回收以乙醇洗脫，濃縮干燥得純度99%以上乙酰哈巴苷對(duì)照品。本發(fā)明方法簡(jiǎn)易快速，溶劑消耗少，得率高，經(jīng)濟(jì)環(huán)保，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和學(xué)術(shù)價(jià)值。
文檔編號(hào)C07H17/04GK102399250SQ20111042010
公開(kāi)日2012年4月4日 申請(qǐng)日期2011年12月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月15日
發(fā)明者劉丁, 夏柯, 文煥松, 郭建華 申請(qǐng)人:成都普思生物科技有限公司