專(zhuān)利名稱(chēng)：制造酰肼的改良方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及自胼及酰基氯制備酰胼的改良合成方法。所述酰胼產(chǎn)物具有可用于將卡奇霉素連接至單克隆抗體的經(jīng)保護(hù)硫醇基團(tuán)。
背景技術(shù)：
麥羅塔(MYLOTARG) (吉妥單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin))也稱(chēng)為CMA-676或僅CMA，其由通過(guò)酸可水解連接體與卡奇霉素結(jié)合的抗⑶33的單克隆抗體組成。當(dāng)經(jīng)衍生化的卡奇霉素與DNA小溝結(jié)合時(shí)，其干擾DNA進(jìn)展并最終造成癌細(xì)胞死亡。所述市售產(chǎn)品以麥羅塔 名稱(chēng)作為靶向第一抗體的化學(xué)治療劑出售，且當(dāng)前已批準(zhǔn)用于治療老年患者的急性髓性白血病(AML)。統(tǒng)稱(chēng)為卡奇霉素或LL-E33288復(fù)合物的抗菌及抗腫瘤劑強(qiáng)效家族成員闡述于美國(guó)專(zhuān)利第4，970，198號(hào)；第4，939，244號(hào)及第5，079，233號(hào)中。所述家族成員可用于與作為載體的單克隆抗體形成治療有用的免疫偶聯(lián)物?？贵w可為抗-CD33抗體(例如，hp67.6)、 抗-CD22 抗體(例如，G544)、抗-路易斯 Y 抗體(anti-Lewis Y antibody)(例如，G193)、 抗-5T4抗體(例如，H8)或抗-CD20抗體(例如，利妥昔單抗(rituximab))。卡奇霉素家族成員優(yōu)選為N-?；ㄆ婷顾兀鼉?yōu)選為N-乙?；每ㄆ婷顾??？ㄆ婷顾丶易宄蓡T含有甲基三硫醚，其可與合適硫醇反應(yīng)形成二硫醚，同時(shí)引入可用于將卡奇霉素衍生物連接至載體的酰胼官能團(tuán)。所述與卡奇霉素的反應(yīng)的實(shí)例在美國(guó)專(zhuān)利第5，053，394號(hào)中給出。所述卡奇霉素酰胼衍生物經(jīng)由形成腙而連接至單克隆抗體。例如，將藥物的酰胼衍生物連接至氧化抗體的一般方法闡述于麥克恩(T. J. McKearn)等人，美國(guó)專(zhuān)利第4，671，958號(hào)中。美國(guó)專(zhuān)利第5，770，701號(hào)涉及制備目標(biāo)形式的LL-E33288復(fù)合物的二硫醚化合物的方法。使連接體4- -乙酰基-苯氧基)丁酸與卡奇霉素酰胼衍生物(優(yōu)選為卡奇霉素N-乙?；?Y 二甲基酰胼)縮合以提供羧酸腙，所述羧酸腙用N-羥基琥珀酰亞胺進(jìn)一步處理，得到準(zhǔn)備用以與所選生物大分子偶聯(lián)的OSu酯(N-琥珀酰亞胺基氧基)?？ㄆ婷顾睾型ㄟ^(guò)造成雙鏈DNA斷裂的-S-S-鍵結(jié)還原而激活的烯二炔彈頭。因此，其中?；袔€基官能團(tuán)的經(jīng)單?；碾菘捎糜趯⒖ㄆ婷顾剡B接至單克隆抗體。3-甲基-3-巰基丁酸酰胼(也稱(chēng)為DMH連接體或CL-332258)是用于將卡奇霉素連接至單克隆抗體以制造(例如)吉妥單抗奧佐米星或伊妥單抗奧佐米星(inotuzumab ozogamicin)的優(yōu)選含巰基N-酰胼。隨后將經(jīng)衍生化的卡奇霉素激活以與經(jīng)人源化的單克隆抗體偶聯(lián)得到CMA-676。當(dāng)前，DMH連接體可通過(guò)5步反應(yīng)方法經(jīng)由中間體對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰胼5制備。(化學(xué)方程式I-V)。 在于USA實(shí)施的本制造過(guò)程中，對(duì)-甲氧基-芐基硫醇與3，3- 二甲基丙烯酸的邁克爾加成 (Michael addition)是經(jīng)哌啶輔助(化學(xué)方程式I)?；瘜W(xué)方程式I
權(quán)利要求
1.一種自胼及對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯制備3-甲基-3巰基丁酸酰胼的方法，其包含以下步驟(a)制備包含胼及惰性溶劑的實(shí)質(zhì)上已攪拌均勻的漿液；及(b)向所述漿液中連續(xù)添加對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中進(jìn)一步包括(c)移除對(duì)-甲氧基芐基保護(hù)基團(tuán)，以得到3-甲基-3巰基丁酸酰胼。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯實(shí)質(zhì)上逐滴添加至所述漿液中。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯以溶液的形式添加，所述溶液包括對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯和所述惰性溶劑。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述惰性溶劑是二氯甲烷。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述3-甲基-3巰基丁酸酰胼含有小于5%的具有以下結(jié)構(gòu)的雙酰胼副產(chǎn)物
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中調(diào)節(jié)所述對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯的連續(xù)添加，以使反應(yīng)溫度保持在_68°C至-75 °C。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述胼漿液是在270rpm至400rpm速度下攪拌。
9.一種自胼及對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯制備3-甲基-3巰基丁酸酰胼的方法，其包含以下步驟(a)將包含經(jīng)攪拌惰性溶劑的反應(yīng)容器冷卻至期望低溫；(b)以連續(xù)方式向所述反應(yīng)容器中添加胼，由此制備包含所述胼及所述惰性溶劑的實(shí)質(zhì)上已攪拌均勻的漿液；(c)以連續(xù)方式向所述漿液中添加對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯，由此形成酰胼鍵結(jié)。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中進(jìn)一步包括(d)移除對(duì)-甲氧基芐基保護(hù)基團(tuán)，以得到3-甲基-3巰基丁酸酰胼。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯以溶液的形式添加， 所述溶液包括對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯和所述惰性溶劑。
12.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述惰性溶劑是二氯甲烷。
13.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述3-甲基-3巰基丁酸酰胼含有小于5%的具有以下結(jié)構(gòu)的雙酰胼副產(chǎn)物
14.如權(quán)利要求10所述的方法，其中調(diào)節(jié)所述對(duì)-甲氧基芐基硫醚酰氯的連續(xù)添加，以使反應(yīng)溫度保持在_68°C至-75 °C。
15.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述胼漿液是在270rpm至400rpm速度下攪拌。
16.權(quán)利要求1-15中任一權(quán)利要求所述的方法制備得到的3-甲基-3巰基丁酸酰胼。
17.一種制備卡奇霉素家族成員與作為載體的單克隆抗體的免疫偶聯(lián)物的方法，其包含按照如權(quán)利要求2或10所述的方法制備3-甲基-3巰基丁酸酰胼，并使用所述3-甲基-3 巰基丁酸酰胼來(lái)制備所述免疫偶聯(lián)物。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中3-甲基-3-巰基丁酸酰胼用作連接體來(lái)制造吉妥單抗奧佐米星或伊妥單抗奧佐米星。
19.一種制備卡奇霉素家族成員與作為載體的單克隆抗體的免疫偶聯(lián)物的方法，其包含制備酰胼，其包含如下步驟(a)制備包含胼及惰性溶劑的實(shí)質(zhì)上已攪拌均勻的漿液；及(b)持續(xù)往所述漿液中添加含有S經(jīng)保護(hù)的巰基官能團(tuán)； 移除所述S經(jīng)保護(hù)的巰基官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)；及將所得的酰胼用作連接體來(lái)制造吉妥單抗奧佐米星或伊妥單抗奧佐米星。
全文摘要
本發(fā)明揭示自肼及?；戎苽漉ｋ碌姆椒?，其包含以下步驟(a)在低溫下制備包含肼及惰性溶劑的實(shí)質(zhì)上已攪拌均勻的漿液；及(b)向所述漿液中連續(xù)添加?；取Ｋ龇椒杀苊饣蛳拗飘a(chǎn)生不期望的雙酰肼副產(chǎn)物。所述方法可用于制備用以將卡奇霉素(calicheamicin)連接至單克隆抗體的3-甲基-3-巰基丁酸酰肼分子。
文檔編號(hào)C07C323/60GK102558001SQ20111043457
公開(kāi)日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2008年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月22日
發(fā)明者喬治·A·基亞雷洛, 艾曼·薩赫利 申請(qǐng)人:惠氏有限責(zé)任公司