專利名稱：治療與gpr35和/或gpr35-herg復(fù)合物有關(guān)的病理病癥的組合物和方法
治療與GPR35和/或GPR35-HERG復(fù)合物有關(guān)的病理病癥的
組合物和方法相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考本申請(qǐng)根據(jù)35U.S.C.§ 119要求2010年7月20日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)第61/365，861號(hào)的優(yōu)先權(quán)，本文以該申請(qǐng)的內(nèi)容為基礎(chǔ)并通過(guò)引用全文納入。序列表本申請(qǐng)包含通過(guò)EFS網(wǎng)站以電子方式提交給美國(guó)專利商標(biāo)局的序列表，提交文本名為“20110712_SP10_204_ST25.txt”，具有37，594字節(jié)大小且在2011年7月13日創(chuàng)建。由于序列表的電子提交，電子提交的序列表作為37CFR §1.821 (c)需要的紙質(zhì)拷貝和§ 1.821(e)需要的CRF。序列表所含信息在此通過(guò)引用納入本文，并且在提交的國(guó)際申請(qǐng)中不超出本公開(kāi)。
背景技術(shù)：
G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)已經(jīng)并且繼續(xù)是最豐富的藥物靶標(biāo)家族之一。對(duì)此至少有兩個(gè)關(guān)鍵的驅(qū)動(dòng)因素(driver)。第一個(gè)驅(qū)動(dòng)因素是數(shù)量持續(xù)增加的孤獨(dú)受體被破解(deorphanize),其中一些與·人類疾病有關(guān)。示例是用于阿爾茨海默病的GPR3和用于糖尿病的GPR40。第二驅(qū)動(dòng)個(gè)因素與這一近期認(rèn)識(shí)有關(guān):GPCR能引起豐富的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路(如多效信號(hào)傳導(dǎo))，以及配體可產(chǎn)生活化受體的操作性偏好(operational bias)。這些通路偏好配體可以開(kāi)啟藥物開(kāi)發(fā)的新途徑。GPR35 是在 1998 年首先鑒定的視紫質(zhì)樣 GPCR [B.F.0，Dowd, T.Nguyen, A.Marchese, R.Cheng, K.R.Lynch, H.H.Heng, L.F.Kolakowski Jr, S.R.George (1998)Discovery of three novel G-prote in-coup led receptor genes (發(fā)現(xiàn)三種新型 G 蛋白偶聯(lián)受體基因)，Genomics47:310-313]。人GPR35基因編碼309個(gè)氨基酸的蛋白。GPR35在多種哺乳動(dòng)物組織中表達(dá)，例如胃腸組織、淋巴組織與中樞神經(jīng)和周圍神經(jīng)組織。數(shù)個(gè)研究員報(bào)道了 GPR35參與胃癌的發(fā)展[S.0kumura, H.Baba, T.Kumada, K.Nanmoku, H.Nakaj ima, Y.Nakane, K.Hioki, K.1kenaka (2004) Cloning of aG-protein-coupled receptor that shows an activity to transform NIH3T3cellsand is expressed in gastric cancer cells (顯不轉(zhuǎn)化 NIH3T3 細(xì)胞活性且在胃癌細(xì)胞中表達(dá)的G蛋白偶聯(lián)受體的克隆)，Cancer Sc1.95:131 - 135]，神經(jīng)元興奮性和突觸釋放的調(diào)節(jié)[J.Guo, D.J.Williams, H.L.Puhl III, S.R.1keda(2008) Inhibition of N-typecalcium channels by activation of GPR35, an orphan receptor,heterologouslyexpressed in rat sympathetic neurons (通過(guò)活化大鼠交感神經(jīng)元中異源表達(dá)的孤獨(dú)受體GPR35來(lái)抑制N型鈣通道)，J.Pharmacol.Exp.Ther.324:342 _ 351]，傷害感受[H.0hshiro, H.Tona1-Kachi, K.1chikawa (2008)GPR35is a functional receptorin rat dorsal root ganglion neurons (GPR35是大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元中的功能受體),Biochem.Biophys.Res.Commun.365:344 - 348.],短指智力低下綜合征的發(fā)病機(jī)制[A.E.Shrimpton, B.R.Braddock, L.L.Thomson, C.K.Stein, J.J.Hoo (2004) Moleculardelineation of deletions on2q37.3in three cases with an Albright hereditaryosteodystrophy-like phenotype (奧爾布賴特遺傳性骨營(yíng)養(yǎng)不良樣表型的三個(gè)病例中2q37.3刪除的分子描繪)，Cl in.Genet.66:537 - 544]，和血壓的調(diào)節(jié)[K.D.Min, M.Asakura, Y.Liao, K.Nakamaru, H.0kazaki, T.Takahashi, K.Fujimoto, S.1to, A.Takahashi, H.Asanuma, S.Yamazaki, T.Minamino, S.Sanada, 0.Seguchi, A.Nakano, Y.Ando, T.0tsuka, H.Furukawa, T.1somura, S.Takashima, N.Mochizuki, M.Kitakaze (2010)Identification of genes related to heart failure using global gene expressionprofiling of human failing myocardium (使用人衰竭心肌膜的全基因表達(dá)表征鑒定與心力衰竭有關(guān)的基因),Biochem.Biophys.Res.Commun.393:55 - 60.]。
至今報(bào)道了 GPR35的四種激動(dòng)劑，包含犬尿喹啉酸、NPPB、托普司特(zaprinast)和溶血磷脂酸(LPA)。推測(cè)犬尿喹啉酸和LPA是GPR35的內(nèi)源配體[J.Wang, N.Simonavicius, X.ffu, G.Swaminath, J.Reagan, H.Tian, L.Ling, (2006) Kynurenic acid asa ligand for orphan G protein-coupled receptor GPR35 (犬尿喹啉酸作為孤獨(dú) G 蛋白偶聯(lián)受體 GPR35 的配體)，J.Biol.Chem.281:22021 - 22028; S.0ka, R.0ta, M.Shima, A.Yamashita, T.Sugiura(2010)GPR35is a novel lysophosphatidic acid receptor (GPR35是新型溶血憐脂酸受體).Biochem.Biophys.Res.Comm.395:232-237]。犬尿喹啉酸和LPA在表達(dá)GPR35的HEK293細(xì)胞和/或CHO細(xì)胞中引起數(shù)種細(xì)胞反應(yīng)。例如，在表達(dá)GPR35的HEK-293細(xì)胞中，2-?；鵏PA在表達(dá)GPR35的細(xì)胞中顯著增強(qiáng)Ca2+反應(yīng)，RhoA活化和ERK磷酸化。2-?；鵏PA也誘導(dǎo)所述受體分子的內(nèi)化。然而，犬尿喹啉酸或LPA是否是GPR35的天然激動(dòng)劑仍然不清楚。hERG基因編碼電壓門控性鉀通道(Kvll.1)的成孔α亞基。HERG通道在數(shù)種組織中表達(dá)，包含心肌細(xì)胞、神經(jīng)元、胰腺β細(xì)胞、平滑肌和一些癌細(xì)胞。目前，hERG最廣為人知是作為對(duì)動(dòng)作電位復(fù)極重要的心臟中延時(shí)整流電流Ikr的主要成分。已知hERG通道的遺傳突變?cè)斐蛇z傳性長(zhǎng)QT綜合征(LQT)，這是一種可以造成患者突然死亡的疾病。能阻斷hERG電流或抑制hERG通道蛋白運(yùn)輸?shù)乃幬锟梢砸皤@得性LQT。相反，報(bào)道了 hERG通道蛋白的突變?cè)斐啥蘍T綜合征。除了在心肌細(xì)胞中起重要作用，越來(lái)越多的證據(jù)顯示hERG通路表達(dá)水平在數(shù)種癌細(xì)胞中提高，包含白血病、結(jié)腸癌、胃癌、乳腺癌和肺癌細(xì)胞。不清楚為什么hERG通道在癌細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)，但是提示了 hERG通道可能在癌細(xì)胞增殖中起作用。HERG通道有能在結(jié)構(gòu)上適合多種通道阻斷劑的獨(dú)特孔區(qū)域(pore region)。比較大的內(nèi)部空腔和通道的內(nèi)部(S6)螺旋上存在特定芳族氨基酸殘基(Y652和F656)是使hERG適合和結(jié)合不同藥物的重要特征。除了多種hERG通道阻斷劑，鑒定了 7種hERG通道激活劑，包含 RPR260243、NS1643、NS3623、PD-118057、PD-307243、卡馬拉素和 A_935142(見(jiàn)Su, Z.等Biochem Pharm77:1383，2009)。這些hERG激活劑有多種化學(xué)結(jié)構(gòu)并且通過(guò)不同機(jī)制增強(qiáng)hERG通道活性。這其中，卡馬拉素(MTX)和A-935142能將電壓依賴性通道活化變換成較少去極化電壓。電生理研究顯示10 μ MMTX能將半最大活化電壓(V1/2)變換成大于25mV的超極化方向。hERG通道顯示了在某些細(xì)胞類型中與一些其他受體形成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物，所述其他受體包含β I整聯(lián)蛋白受體和VEGFR-l(FLT-l)(如Pillozzi，S.等，(2007)Blood.110:1238 - 1250)。然而，文獻(xiàn)中沒(méi)有報(bào)道提示包含GPR35的hERG和GPCR能在物理
上相互作用形成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物。強(qiáng)烈需要新的藥物治療以治療有或易患與GPR35、hERG或GPR35-hERG復(fù)合物有關(guān)的病理病癥或疾病的對(duì)象。特別地，相對(duì)于那些現(xiàn)有可用的藥物，仍需要有一種或多種改善屬性(如安全表征、功效或物理屬性)的新藥物。

發(fā)明內(nèi)容
公開(kāi)了組合物和方法以預(yù)防和/或治療與GPR35和/或GPR35_hERG復(fù)合物病理生理學(xué)相關(guān)的疾病。例如，公開(kāi)了一類具有式(I)、(II)或(III)所示結(jié)構(gòu)的化合物，包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽:
權(quán)利要求
1.一種具有式(I)、(II)或(III)所示結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
2.如權(quán)利要求I所述的式(I)、(II)和(III)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其特征在于，所述式(I)化合物是選自下組的化合物
3.一種篩選hERG特異性調(diào)節(jié)劑的方法，所述方法包含步驟(a)單個(gè)化合物與表達(dá)hERG的細(xì)胞和不表達(dá)hERG的細(xì)胞組成的兩種不同類型細(xì)胞一起孵育； (b)用無(wú)標(biāo)記生物傳感器細(xì)胞試驗(yàn)監(jiān)測(cè)各細(xì)胞類型上所述化合物誘導(dǎo)的細(xì)胞反應(yīng)； (c)在所述化合物存在下，孵育無(wú)標(biāo)記生物傳感器hERG激活劑與表達(dá)hERG的細(xì)胞； (d)在所述化合物存在下，監(jiān)測(cè)表達(dá)hERG的細(xì)胞上無(wú)標(biāo)記生物傳感器hERG激活劑誘導(dǎo)的細(xì)胞反應(yīng)；和 (e)生成指示所述化合物是否為hERG調(diào)節(jié)劑的所述化合物的生物傳感器指數(shù)。
4.一種鑒定GPR35-hERG復(fù)合物干擾分子的方法，所述方法包含 a)使包含GPR35-hERG復(fù)合物的組合物接觸檢測(cè)試劑；和 b)測(cè)試GPR35-hERG相互作用。
5.一種篩選GPR35特異性調(diào)節(jié)劑的方法，所述方法包含步驟 (a)提供表達(dá)GPR35的細(xì)胞； (b)使所述細(xì)胞接觸化合物；和 (C)使用無(wú)標(biāo)記生物傳感器細(xì)胞試驗(yàn)來(lái)表征所述化合物。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述化合物是有選自下組化學(xué)結(jié)構(gòu)的GPR35調(diào)節(jié)劑
7.如權(quán)利要求I所述的式⑴、(II)或(III)化合物或有如權(quán)利要求6中任一化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在生產(chǎn)防止或治療對(duì)象的藥物或者用在防止或治療對(duì)象的藥物中的應(yīng)用，其中所述對(duì)象有與GPR35病理生理學(xué)相關(guān)的疾病。
8.一種篩選GPR35-hERG信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物調(diào)節(jié)劑的方法，所述方法包含步驟 (a)測(cè)定化合物是否是GPR35特異性調(diào)節(jié)劑或hERG特異性調(diào)節(jié)劑或兩者都不是；和 (b)測(cè)定所述化合物是否是GPR35-hERG信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物調(diào)節(jié)劑， 其中步驟(b)可以包含 (i)提供包含GPR35-hERG復(fù)合物的細(xì)胞； ( )使所述細(xì)胞接觸所述化合物；和 (iii)通過(guò)使用一種或多種合適的試驗(yàn)表征所述化合物。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述化合物是具有選自下組化學(xué)結(jié)構(gòu)的GPR35-hEGR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物調(diào)節(jié)劑
10.如權(quán)利要求I所述的式(I)、(II)或(III)化合物或有如權(quán)利要求6中任一化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在生產(chǎn)防止或治療對(duì)象的藥物或者用在防止或治療對(duì)象的藥物中的應(yīng)用，其中所述對(duì)象有與GPR35-hEGR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物病理生理學(xué)相關(guān)的疾病。
11.一種包含一種或多種GPCR和hERG的經(jīng)分離G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)-hERG復(fù)合物。
12.一種鑒定GPR35-hERG復(fù)合物結(jié)合分子的方法，所述方法包含 a)使如權(quán)利要求11所述的化合物接觸測(cè)試分子；和 b)測(cè)定所述測(cè)試分子是否結(jié)合所述GPR35-hERG復(fù)合物。
13.—種如權(quán)利要求11所述鑒定的分子在生產(chǎn)治療對(duì)象的藥物中的應(yīng)用，其中所述對(duì)象有與GPR35-hERG復(fù)合物病理生理學(xué)相關(guān)的疾病。
14.一種試劑盒，所述試劑盒包含表達(dá)GPR35-hERG的工程改造細(xì)胞系和操作細(xì)胞系的說(shuō)明書。
15.一種工程改造細(xì)胞，所述細(xì)胞包含外源GPR35基因和外源hERG基因。
全文摘要
公開(kāi)了組合物和方法以預(yù)防和/或治療與GPR35和/或GPR35-hERG信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物病理生理學(xué)相關(guān)的疾病。例如，公開(kāi)了防止和/或治療對(duì)象中與GPR35病理生理學(xué)相關(guān)疾病的化合物。
文檔編號(hào)C07D207/34GK103237791SQ201180045246
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2011年7月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月20日
發(fā)明者鄧華云, 方曄, 賀明謙, H·胡, 鈕渭鈞, 孫海燕 申請(qǐng)人:康寧股份有限公司