專利名稱：包含poh衍生物的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及POH衍生物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及使用POH衍生物如POH氨基甲酸酯治療癌癥的方法。
背景技術(shù)：
惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)癌癥的最常見形式，當(dāng)前被認(rèn)為是基本上不能治愈的。在各種惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤之中，間變性星形細(xì)胞瘤(III期)和多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM;IV期)具有特別差的預(yù)后，這是由于它們的侵襲性生長和對當(dāng)前可用治療的抗性。惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)化治療由外科手術(shù)、電離射療法和化療法組成。盡管醫(yī)學(xué)上有最新的進(jìn)展，但過去的50年在惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的預(yù)后上并未看到任何明顯改善。Wen等，Malignant gliomas in adults.New England T Med.359:492-507,2008.Stupp 等,Radiotherapy plus concomitant and adj uvant temozolomide for glioblastoma.NewEngland J Med.352:987_996，2005。腫瘤(包括惡性神 經(jīng)膠質(zhì)瘤)對各種類型化療劑的較差反應(yīng)通常是由于內(nèi)在的抗藥性。另外，初始反應(yīng)良好的腫瘤的獲得性抗性和不希望的副作用是經(jīng)常阻礙使用化療劑的長期治療的其它問題。因此，已經(jīng)制備了各種化療劑的類似物企圖克服這些問題。所述類似物包括作為至少兩種現(xiàn)有治療劑的雜合分子(hybrid molecules)的新型治療劑。例如，順鉬與帶有細(xì)胞毒性共藥(codrug)的Pt-(II)復(fù)合物偶聯(lián)，或與生物活性穿梭組分如卟啉、膽汁酸、激素或加快跨膜輸送或細(xì)胞內(nèi)藥物積聚的調(diào)節(jié)劑偶聯(lián)。在人腫瘤細(xì)胞系的小組上測試了用萜烯醇酯化的(6-氨基甲基煙酸酯)二氯化鉬(II)((6-Aminomethylnicotinate) dichloridoplatinum)復(fù)合物。這些復(fù)合物中的職烯基部分似乎實現(xiàn)了跨膜穿梭功能，并且增加了這些偶聯(lián)物攝取進(jìn)入各種腫瘤細(xì)胞系中的速率和程度° Schobert 等，Monoterpenes as Drug Shuttles:Cytotoxic (6-minomethylnicotinate)dichloridoplatinum(II)Complexes with Potential To Overcome CisplatinResistance.1.Med.Chem1 2007, 50,1288-1293。紫蘇醇(POH)，一種天然存在的單萜，已經(jīng)被認(rèn)為是抗多種癌癥的有效藥劑，包括CNS癌癥、乳腺癌、胰腺癌、肺癌、黑素瘤和結(jié)腸癌。Gould, M.Cancer chemopreventionand therapy by monoterpenes.Environ Health Perspect.1997 June ； 105 (Suppl 4):977-979。已經(jīng)制備了含紫蘇醇和類視黃醇的雜合分子以增加誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的活性。Das等，Design and synthesis of potential new apoptosis agents:hybrid compoundscontaining perillyl alcohol and new constrained retinoids.Tetrahedron Letters2010，51，1462-1466。仍然需要制備包括與其它治療劑偶聯(lián)的紫蘇醇的紫蘇醇衍生物，并在癌癥如惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤和其它腦疾病如帕金森病和阿爾茨海默病的治療中使用該物質(zhì)。紫蘇醇衍生物可以單獨施用，或與包括放射療法、標(biāo)準(zhǔn)化療和外科手術(shù)的其它治療方法聯(lián)合施用。所述施用還可以通過包括鼻內(nèi)、經(jīng)口、用于肺部遞送的口腔氣管和經(jīng)皮的各種途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供包含紫蘇醇氨基甲酸酯的藥物組合物。所述紫蘇醇氨基甲酸酯可以是與治療劑如化療劑偶聯(lián)的紫蘇醇。可用于本發(fā)明的化療劑包括DNA烷化劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑、鉬化合物、抗代謝物、酶抑制劑和受體拮抗劑。在某些實施方式中，所述治療劑是二甲基塞來昔布(DMC)、替莫唑胺(TMZ)或咯利普蘭。所述紫蘇醇氨基甲酸酯可以是4-(雙-N，N' -4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲氧基羰基[5-(2，5_ 二甲基苯基)-3-三氟甲基吡唑-1-基]苯磺酰胺、4- (3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-2-氧代-吡咯烷-1-甲酸4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲基酯和(3-甲基4-氧代-3，4-二氫咪唑并[5，1-d] [1,2, 3，5]四嗪-8-羰基)-氨基甲酸-4-異丙烯基環(huán)己_1_烯基甲基酯。本發(fā)明的藥物組合物可以在放射療法之前、期間或之后施用。所述藥物組合物可以在施用化療劑之前、期間或之后施用。所述藥物組合物的施用途徑包括吸入、鼻內(nèi)、口服、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)施用。本發(fā)明進(jìn)一步提供治療哺乳動物的疾病的方法，其包括向所述哺乳動物遞送治療有效量的紫蘇醇氨基甲酸酯的步驟。所述方法可進(jìn)一步包括用放射療法治療所述哺乳動物的步驟，和/或進(jìn)一步包括向所述哺乳動物遞送化療劑的步驟。所治療的疾病可以是癌癥，包括神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤如惡性膠質(zhì)瘤。所述紫蘇醇氨基甲酸酯的施用途徑包括吸入、鼻內(nèi)、口月艮、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)施用。本發(fā)明還提供制備POH氨基甲酸酯的方法，其包括使第一反應(yīng)物紫蘇基氯甲酸酯與第二反應(yīng)物反應(yīng)的步驟，所述第二反應(yīng)物可以是二甲基塞來昔布(DMC)、替莫唑胺(TMZ)或咯利普蘭。當(dāng)所述第二反應(yīng)物是二甲基塞來昔布時，該反應(yīng)可以在丙酮和碳酸鉀催化劑的存在下進(jìn)行。當(dāng)所述第二反應(yīng)物是咯利普蘭時，該反應(yīng)可以在四氫呋喃和正丁基鋰催化劑的存在下進(jìn)行。還可以通過使紫蘇醇與光氣反應(yīng)制備所述紫蘇基氯甲酸酯。


圖1顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明二甲基塞來昔布(DMC)殺死U87、A172和U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖2顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明根據(jù)本發(fā)明的POH-DMC偶聯(lián)物殺死U87、A172和U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖3顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明替莫唑胺(TMZ)殺死U87、A172和U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖4顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明根據(jù)本發(fā)明的POH-TMZ偶聯(lián)物殺死U87、A172和U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖5顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH-咯利普蘭偶聯(lián)物和咯利普蘭殺死A172人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖6顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH-咯利普蘭偶聯(lián)物和咯利普蘭殺死U87人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖7顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH-咯利普蘭偶聯(lián)物和咯利普蘭殺死U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖8顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH-咯利普蘭偶聯(lián)物和咯利普蘭殺死L229人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的效力。圖9顯示在小鼠模型中丁?；鵓OH對腫瘤生長的抑制。圖9A顯示用丁?；?Η、純度大于 98.5%的純化(S)-紫蘇醇(“純化 Ρ0Η”)、購自 Sigma chemicals 的 P0H(“Sigma”)或磷酸鹽緩沖鹽水(“PBS”，陰性對照)處理的裸小鼠中皮下U-87神經(jīng)膠質(zhì)瘤的圖像。圖9B顯示隨時間(60天的總時間段)的平均腫瘤生長。圖10顯示集落形成試驗(CFA)的結(jié)果，其表明TMZ和TMZ-POH對TMZ敏感的U251細(xì)胞(U251)和TMZ抗性的U251細(xì)胞(U251TR)的細(xì)胞毒性效果。圖11顯示集落形成試驗(CFA)的結(jié)果，其表明POH對TMZ敏感的U251細(xì)胞(U251)和TMZ抗性的U251細(xì)胞(U251TR)的細(xì)胞毒性效果。圖12顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH-TMZ偶聯(lián)物殺死U251細(xì)胞、U251TR細(xì)胞和正常星形細(xì)胞的效力。圖13顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH-TMZ偶聯(lián)物殺死正常星形細(xì)胞、腦內(nèi)皮細(xì)胞(BEC ;融合的和亞融合的)和腫瘤腦內(nèi)皮細(xì)胞(TuBEC)的效力。圖14顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明TMZ和POH-TMZ偶聯(lián)物殺死USC-04神經(jīng)膠質(zhì)瘤癌干細(xì)胞的效力。 圖15顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH殺死USC-04神經(jīng)膠質(zhì)瘤癌干細(xì)胞的效力。圖16顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明TMZ和POH-TMZ偶聯(lián)物殺死USC-02神經(jīng)膠質(zhì)瘤癌干細(xì)胞的效力。圖17顯示MTT細(xì)胞毒性試驗的結(jié)果，其表明POH殺死USC-02神經(jīng)膠質(zhì)瘤癌干細(xì)胞的效力。圖18顯示蛋白質(zhì)印跡，其表明TMZ-POH在TMZ敏感的U251神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(“U251-TMZs”)和TMZ抗性的U251神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(“U251_TMZr”)中誘導(dǎo)ER應(yīng)激(ERS)。發(fā)明詳述本發(fā)明提供單萜或倍半萜的衍生物，如紫蘇醇衍生物。本發(fā)明還提供包含單萜或倍半萜的衍生物如紫蘇醇衍生物的藥物組合物。例如，所述紫蘇醇衍生物可以是紫蘇醇氨基甲酸酯。所述紫蘇醇衍生物可以是與治療劑如化療劑偶聯(lián)的紫蘇醇。所述單萜(或倍半萜)衍生物可以配制成藥物組合物，其中所述單萜(或倍半萜)衍生物以約0.01% (w/w)至約 100% (w/w),約 0.1 % (w/w)至約 80% (w/w),約 I % (w/w)至約 70% (w/w),約 10%(w/w)至約60% (w/w)或約0.1% (w/w)至約20% (w/w)的量存在。本發(fā)明組合物可以單獨施用，或與放射療法或另一試劑(例如化療劑)一起施用，以治療疾病如癌癥。治療可以是相繼的，使得在施用其它試劑之前或之后施用所述單萜(或倍半萜)衍生物。例如，紫蘇醇氨基甲酸酯可用來使癌癥患者對放療或化療敏感?；蛘?，可以同時施用多種試劑。施用途徑可以變化，并可包括吸入、鼻內(nèi)、口服、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)注射。本發(fā)明還提供一種治療疾病如癌癥的方法，其包括向患者遞送治療有效量的單萜(或倍半萜)衍生物的步驟。本發(fā)明的組合物可含有一種或多種類型的單萜(或倍半萜)衍生物。單萜包括由兩個異戊二烯單元組成的萜烯。單萜可以是線性的(非環(huán)狀的)或包含環(huán)。類單萜的衍生物也包括在本發(fā)明中?？梢酝ㄟ^單萜的生物化學(xué)改性如氧化或重排來制備類單萜。單萜和類單萜的例子包括紫蘇醇(S(-))和(R(+))、羅勒烯、月桂烯、香葉醇、檸檬醛、香茅醇、香茅醒、芳樟醇、菔烯、職品醇、職品烯、朽1檬烯、松油烯(terpinenes)、水療烯、職品油烯、松油烯-4-醇(或茶樹油)、菔烯、萜品醇、萜品烯；諸如對傘花烴的類萜，其源于單環(huán)萜烯諸如薄荷醇、百里酚和香芹酚；雙環(huán)類單萜諸如樟腦、冰片和桉樹腦。單萜可以通過碳骨架結(jié)構(gòu)來區(qū)分，且可以被分組為非環(huán)狀的單萜(例如月桂烯、(Z)-和(E)-羅勒烯、芳樟醇、香葉醇、橙花醇、香茅醇、月桂烯醇、香葉醛、檸檬醛a、橙花醛、檸檬醛b、香茅醛等)、單環(huán)單萜(例如檸檬烯、松油烯、水芹烯、萜品油烯、薄荷醇、香芹醇等)、雙環(huán)單萜(例如菔烯、桃金娘烯醇、桃金娘烯醛、馬鞭草烷醇、馬鞭烷酮、松香療醇、蒈烯、檜烯、茨烯、側(cè)柏烯等)和三環(huán)單職(例如三環(huán)職)。參見Encyclopedia ofChemical Techno logy,第四版,第 23 卷,834-835 頁。本發(fā)明的倍半萜包括由三個異戊二烯單元組成的萜烯。倍半萜可以是線性的(非環(huán)狀的)或包含環(huán)。類倍半萜的衍生物也包括在本發(fā)明中?？梢酝ㄟ^倍半萜的生物化學(xué)改性如氧化或重排來制備類倍半萜。倍半萜的例子包括法尼醇、法尼醛、法尼酸(farnesylicacid)和橙花叔醇。單萜(或倍半萜)的衍生物包括，但不限于，單萜(或倍半萜)的氨基甲酸酯、酯、醚、醇和醛。單萜(或倍半萜)醇可以衍生化成氨基甲酸酯、酯、醚、醛或酸。氨基甲酸酯是指共有基于通過氧和氮側(cè)接的羰基的官能團(tuán)的一類化合物。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其包含紫蘇醇氨基甲酸酯。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯是與治療劑偶聯(lián)的紫蘇醇。
3.權(quán)利要求2的藥物組合物，其中所述治療劑是化療劑。
4.權(quán)利要求3的藥物組合物，其中所述化療劑選自DNA烷化劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑、鉬化合物、抗代謝物、酶抑制劑和受體拮抗劑。
5.權(quán)利要求2的藥物組合物，其中所述治療劑選自二甲基塞來昔布(DMC)、替莫唑胺(TMZ)和咯利普蘭。
6.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述藥物組合物在放射療法之前、期間或之后施用。
7.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述藥物組合物在施用化療劑之前、期間或之后施用。
8.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述藥物組合物通過吸入、鼻內(nèi)、口服、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)施用。
9.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯是4-(雙-N，N'-4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲氧基羰基[5-(2，5_ 二甲基苯基)-3-三氟甲基吡唑-1-基]苯磺酰胺。
10.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯是4-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)~2~氧代_卩比咯燒-1-羧酸4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲基酯。
11.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯是(3-甲基4-氧代-3，4-二氫咪唑并[5，l-d][l，2，3，5]四嗪-8-羰基)-氨基甲酸-4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲基酯。
12.—種治療哺乳動物的疾病的方法，其包括向所述哺乳動物遞送治療有效量的紫蘇醇氨基甲酸酯的步驟。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述疾病是癌癥。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述癌癥是神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述腫瘤是成膠質(zhì)細(xì)胞瘤。
16.權(quán)利要求12的方法，其進(jìn)一步包括用放射療法治療所述哺乳動物的步驟。
17.權(quán)利要求12的方法，其進(jìn)一步包括向所述哺乳動物遞送化療劑的步驟。
18.權(quán)利要求12的方法，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯通過吸入、鼻內(nèi)、口服、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)施用。
19.權(quán)利要求12的方法，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯是與治療劑偶聯(lián)的紫蘇醇。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述治療劑是化療劑。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述化療劑選自DNA烷化劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑、鉬化合物、抗代謝物、酶抑制劑和受體拮抗劑。
22.權(quán)利要求19的方法，其中所述治療劑選自二甲基塞來昔布(DMC)、替莫唑胺(TMZ)和咯利普蘭。
23.權(quán)利要求12的方法，其中所述紫蘇醇氨基甲酸酯選自:(a)4-(雙-N，N'-4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲氧基羰基[5-(2，5_二甲基苯基)-3-三氟甲基吡唑-1-基]苯磺酰胺；(b) 4- (3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-2-氧代-吡咯烷-1-甲酸4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲基酯；和(c) (3-甲基4-氧代-3，4-二氫咪唑并[5，l-d] [1,2,3,5]四嗪_8_羰基)-氨基甲酸-4-異丙烯基環(huán)己-1-烯基甲基酯。
24.一種制備POH氨基甲酸酯的方法，其包括使第一反應(yīng)物紫蘇基氯甲酸酯與選自二甲基塞來昔布(DMC)、替莫唑胺(TMZ)和咯利普蘭的第二反應(yīng)物反應(yīng)的步驟。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述第二反應(yīng)物是二甲基塞來昔布。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述反應(yīng)在丙酮和催化劑碳酸鉀的存在下進(jìn)行。
27.權(quán)利要求24的方法，其中所述第二反應(yīng)物是咯利普蘭。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述反應(yīng)在四氫呋喃和催化劑正丁基鋰的存在下進(jìn)行。
29.權(quán)利要求24的方法，其中通過使紫蘇醇與光氣反應(yīng)來制備所述紫蘇基氯甲酸酯。
全文摘要
本發(fā)明提供單萜或倍半萜的衍生物，如紫蘇醇衍生物。例如，所述紫蘇醇衍生物可以是紫蘇醇氨基甲酸酯。所述紫蘇醇衍生物可以是與治療劑如化療劑偶聯(lián)的紫蘇醇。本發(fā)明還提供一種治療疾病如癌癥的方法，其包括向患者遞送治療有效量的單萜(或倍半萜)的衍生物。施用途徑可以變化并可以包括吸入、鼻內(nèi)、口服、經(jīng)皮、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)注射。
文檔編號C07C35/18GK103168018SQ201180050187
公開日2013年6月19日 申請日期2011年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月27日
發(fā)明者T·陳, D·萊文, S·普帕利 申請人:尼昂克技術(shù)公司