Vip3Ab和Cry1Ab用于管理抗性昆蟲的組合用途
【專利摘要】本發(fā)明包括用于控制鱗翅目昆蟲的方法和植物，所述植物包含與Cry1Ab蛋白組合的Vip3Ab殺蟲蛋白以延遲或防止昆蟲，特別是棉鈴蟲形成抗性。
【專利說明】Vip3Ab和CryIAb用于管理抗性昆蟲的組合用途
[0001]發(fā)明背景
[0002]人類種植玉米(corn)以供食物和能量應用。人類還種植許多其它作物，包括大豆和棉花。昆蟲食用并損害植物，并且由此削弱這些人類努力。每年花費數(shù)十億美元來控制昆蟲有害物，并且它們造成的損害損失額外的數(shù)十億。合成的有機化學殺蟲劑已經(jīng)是用于控制昆蟲有害物的主要工具，但是生物學殺蟲劑，諸如自蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis, Bt)衍生的殺蟲蛋白(insecticidal protein)已經(jīng)在一些領域中發(fā)揮重要作用。經(jīng)由用Bt殺蟲蛋白基因轉(zhuǎn)化生成昆蟲抗性植物的能力已經(jīng)使現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)生革命，而且提高殺蟲蛋白及其基因的重要性和價值。
[0003]已經(jīng)使用幾種Bt蛋白來創(chuàng)建至今已經(jīng)成功登記并商業(yè)化的昆蟲抗性轉(zhuǎn)基因植物。這些包括玉米中的CryIAb、CryIAc、CryIF和Cry3Bb、棉花中的CrylAc和Cry2Ab、和馬鈴薯中的Cry3A。
[0004]除了在2種蛋白質(zhì)的組合殺蟲譜是期望的(例如，玉米中的CrylAb和Cry3Bb組合以分別提供對鱗翅目害蟲和根蟲的抗性)或蛋白質(zhì)的獨立作用使它們可用作用于延遲易感昆蟲群中抗性形成的工具(例如，棉花中的CrylAc和Cry2Ab組合以提供煙草蚜蟲的抗性管理)的情況中外，表達這些蛋白質(zhì)的商業(yè)產(chǎn)品表達單一蛋白質(zhì)。還可見US2009 0313717,其涉及用于控制谷實夜蛾(Helicoverpa zea)或棉鈴蟲(Helicoverpaarmigera)的 Cry2 蛋白及 Vip3Aa、CrylF、或 CrylA。WO 2009 132850 涉及用于控制草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)的 CrylF 或 CrylA 和 Vip3Aa。US 2008 0311096 部分涉及用于控制CrylF抗性ECB的Cry IAb。
[0005]也就是說，已經(jīng)導致此技術的快速且普遍采用的昆蟲抗性轉(zhuǎn)基因植物的一些質(zhì)量(quality)還引起如下的憂慮，即害蟲(pest)群體會形成對由這些植物生成的殺蟲蛋白的抗性。已經(jīng)提示了保留基于Bt的昆蟲抗性性狀的效用的幾種策略，其包括與避難所(refuge)組合以及與不同毒素交替、或在不同毒素共部署中部署(deploy)高劑量的蛋白質(zhì)(McGaughey 等(1998)，“B.t.Resistance Management, ”NatureBiotechnol.16:144-146)。
[0006]為了在IRM疊加中使用而選定的蛋白質(zhì)需要獨立地施加其殺蟲效果，使得對一種蛋白質(zhì)形成的抗性未賦予對第二種蛋白質(zhì)的抗性(即，沒有對蛋白質(zhì)的交叉抗性)。如果例如在對“蛋白質(zhì)A”的抗性方面選定的害蟲群對“蛋白質(zhì)B”敏感，那么會推斷沒有交叉抗性，并且蛋白質(zhì)A和蛋白質(zhì)B的組合會有效延遲對單獨的蛋白質(zhì)A的抗性。
[0007]在沒有抗性昆蟲群的情況中，可以基于假設與作用機制和交叉抗性潛力相關的其它特征做出評估。已經(jīng)提示了受體介導的結合在鑒定有可能不展現(xiàn)出交叉抗性的殺蟲蛋白中的效用(van Mellaert等1999)。缺乏此方法中固有的交叉抗性的關鍵預測物(predictor)是殺蟲蛋白在敏感的昆蟲物種中不競爭受體。
[0008]在兩種Bt毒素競爭相同受體的情況中，則若所述受體在所述昆蟲中突變，使得毒素之一不再結合所述受體，并且如此針對昆蟲不再是殺蟲性的，則情況可能是昆蟲也會對第二種毒素(其競爭性結合相同受體)有抗性。也就是說，昆蟲被說成與這兩種Bt毒素有交叉抗性。然而，若兩種毒素結合兩種不同受體，則這可以是如下的指示，即昆蟲不會對那兩種毒素同時有抗性。
[0009]CrylFa可用于控制許多鱗翅目害蟲物種，包括歐洲玉米螟(European cornborer) (ECB ;玉米螟(Ostrinia nubilalis) (Hiibner))和秋粘蟲(fall army worm) (FAff ；草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)),并且針對甘鹿螟(sugarcane borer) (SCB ;小鹿螟(Diatraea saccharalis))是有活性的。CrylFa蛋白(如在含有事件TC1507的玉米植物中生成的)負責供FAW控制用的行業(yè)領先的昆蟲抗性性狀。CrylFa在Herculex ?、SmartStax?、和WideStrike?產(chǎn)品中進一步部署。
[0010]其它Cry毒素列于官方B.t.命名委員會的站點(Crickmore等；lifesc1.sussex.ac.uk/home/Neil_Crickmore/Bt/)。目前有幾乎 60 個“Cry”毒素大類(Cryl_Cry59)，及其它Cyt毒素和VIP毒素等。許多數(shù)字組各自具有大寫字母亞組，而大寫字母亞組具有小寫字母亞-亞組。(例如，Cryl具有A-L,而CrylA具有a_i)。
[0011]發(fā)明概述
[0012]本發(fā)明部分涉及如下的發(fā)現(xiàn)，即Vip3Ab和CrylAb彼此不競爭對來自谷實夜蛾(棉鈴蟲(corn earworm) ；CEff)的腸受體的結合。本發(fā)明還部分涉及如下的令人1驚訝的發(fā)現(xiàn)，即Vip3Ab針對對CrylAb有抗性的菱紋背蛾(diamondback moth, DBM)是有活性的。
[0013]憑借本公開內(nèi)容的益處,本領域技術人員會認可，表達Vip3Ab和CrylAb,或其殺蟲部分的植物會可用于延遲或防止形成針對任一單獨的這些殺蟲蛋白的抗性。
[0014]如此,本發(fā)明部 分涉及與CrylAb蛋白組合使用Vip3Ab蛋白。本發(fā)明的范圍內(nèi)包括生成Vip3Ab加CrylAb的植物(及種植有此類植物的土地面積)。
[0015]本發(fā)明還部分涉及三種(或更多種)毒素的三重疊加(triple stack)或“金字塔(pyramid) ”,其中Vip3Ab和CrylAb是基礎對。此類三重疊加可以提供三種蛋白質(zhì)，其提供針對CEW的非競爭性作用。這可以有助于進一步降低或消除對避難所土地面積的需要。
[0016]附圖簡述
[0017]圖1:在將純化的毒素表面應用于人工昆蟲飲食時全長Vip3Abl針對小菜蛾(Linnaeus) (DBM)、和 CrylA 抗性小菜蛾(rDBM)、美洲棉鈴蟲(Heliothis zea) (CEW)、草地夜蛾(Spodoptera frugiperda) (J.E.Smith) (FAff)和玉米螟(Ostrinia nubilalis)(Hubner), (ECB)幼蟲的死亡率劑量響應。百分比死亡率基于每劑在8個昆蟲上對毒素暴露后5天采集的讀數(shù)。
[0018]圖2:在將純化的毒素表面(topically)應用于人工昆蟲飲食時全長Vip3Abl針對小菜蛾(Linnaeus) (DBM)、和CrylA抗性小菜蛾(rDBM)、美洲棉鈴蟲(CEW)、草地夜蛾(J.E.Smith) (FAff)和玉米螟(HUbner)，(ECB)幼蟲的生長抑制劑量響應。百分比生長抑制基于僅用緩沖液處理的8個幼蟲的平均重量與暴露于毒素5天的幼蟲的重量的比較。
[0019]圖3 =125I CrylAb對從美洲棉鈴蟲制備的BBMV蛋白的結合的競爭性置換曲線。BBMV 濃度是 0.1Omg 蛋白質(zhì) /ml，且 125I CrylAb 是 0.25nM。125I CrylAb 的 100% 百分比特異性結合以缺乏非標記的CrylAb情況下的總體結合減去存在500nM CrylAb的情況下測量的非特異性結合測量。在高到1，OOOnM的濃度(比放射性標記的置換配體的濃度高4，000倍)測試Vip3Abl，并且其不置換125I CrylAb的結合。非放射性標記物在約2nM置換125ICrylAb 達 50%。[0020]序列簡述
[0021]SEQ ID NO:1是N端片段CrylAb殺蟲蛋白。
[0022]SEQ ID N0:2是全長Vip3Ab蛋白，其在結合研究中使用時經(jīng)胰蛋白酶加工成核心片段(殘基200-788)。
[0023]SEQ ID N0:3是全長CrylAb蛋白，其在結合研究中使用時經(jīng)胰蛋白酶加工成核心片段(殘基29-612) 。
[0024]發(fā)明詳述
[0025]本發(fā)明部分得到如下的發(fā)現(xiàn)支持，即Vip3Ab和CrylAb彼此不競爭對來自谷實夜蛾(棉鈴蟲；CEW)的腸受體的結合。
[0026]本發(fā)明包括使用Vip3Ab和CrylAb來保護玉米和其它經(jīng)濟上重要的植物物種免于由CEW進食引起的損傷和產(chǎn)量損失及防止CEW群體形成對任一種這些蛋白質(zhì)的抗性。
[0027]本發(fā)明提供了用于控制鱗翅目害蟲的組合物，其包含生成含有CrylAb核心毒素的蛋白質(zhì)和含有Vip3Ab核心毒素的蛋白質(zhì)的細胞。
[0028]本發(fā)明進一步包含經(jīng)轉(zhuǎn)化以生成CrylAb殺蟲蛋白和Vip3Ab殺蟲蛋白兩者的宿主，其中所述宿主是微生物或植物細胞。在一些實施方案中，植物細胞是非增殖/非全能細胞。優(yōu)選地，主題多核苷酸在遺傳構建體中在非蘇云金芽孢桿菌啟動子(與該啟動子可操作連接/包含該啟動子)的控制下。主題多核苷酸可以包含實現(xiàn)植物中表達增強的植物密碼子選擇。
[0029]另外，意圖本發(fā)明提供一種控制鱗翅目害蟲的方法，包括使所述害蟲或所述害蟲的環(huán)境與有效量的組合物接觸，所述組合物含有含CrylAb核心毒素的蛋白質(zhì)，并且進一步含有含Vip3Ab核心毒素的蛋白質(zhì)。
[0030]本發(fā)明的一個實施方案包括玉米植物及此類植物的種子，所述玉米包含編碼含Vip3Ab核心毒素的蛋白質(zhì)的植物表達型基因和編碼含CrylAb核心毒素的蛋白質(zhì)的植物表達型基因。
[0031]本發(fā)明的又一個實施方案包含玉米植物及此類植物的種子，其中編碼含Vip3Ab核心毒素的蛋白質(zhì)的植物表達型基因和編碼含CrylAb核心毒素的蛋白質(zhì)的植物表達型基因已經(jīng)漸滲入所述玉米植物中。
[0032]如實施例中描述的，使用經(jīng)放射性標記的CrylAb的競爭性受體結合研究顯示了CrylAb核心毒素蛋白不競爭與Vip3Ab結合的CEW昆蟲組織中的結合。這些結果還指示CrylAb和Vip3Ab蛋白的組合是一種減輕CEW群體中對CrylAb形成抗性(及同樣地，形成對Vip3Ab的抗性)的有效手段，并且可能會提高表達這兩種蛋白質(zhì)的玉米植物中對此害蟲的抗性水平。如此，部分基于本文中描述的數(shù)據(jù)，認為Vip3Ab和CrylAb蛋白的共生成(疊加)可以用于產(chǎn)生針對CEW的高劑量IRM疊加。
[0033]可以將其它蛋白質(zhì)添加到此對以擴充昆蟲控制譜。另一種部署選項會是與另一種第三毒素/基因組合使用CrylAb和Vip3Ab蛋白，以及使用此三重疊加來減輕CEW中對這些中任一種毒素形成抗性。如此，本發(fā)明的另一種部署選項會是在CEW能形成抗性群體的作物生長區(qū)中使用兩種、三種、或更多種蛋白質(zhì)。
[0034]因而，本發(fā)明還部分涉及三種(或更多種)毒素的三重疊加或“金字塔(pyramid) ”,其中CrylAb和Vip3Ab毒素是基礎對。在一些優(yōu)選的金字塔實施方案中，選定的蛋白質(zhì)提供針對CEW的非競爭性作用。
[0035]本發(fā)明的范圍內(nèi)包括生成蛋白質(zhì)的任何主題組合的植物(和種植有此類植物的土地面積)。還可以添加其它毒素/基因，但是上文所討論的特定疊加有利地且令人驚訝地提供針對CEW的多種作用模式。這可以有助于降低或消除對避難所土地面積的需要。如此，本發(fā)明內(nèi)包括如此種植有超過10英畝的田地。
[0036]也可以使用GENBANK來獲得本文中公開的或提及的任何基因和蛋白質(zhì)的序列。
[0037]可以使用本發(fā)明中描述的蛋白質(zhì)組合來控制鱗翅目害蟲。成年鱗翅目，例如蝴蝶和蛾主要以花蜜為食，并且是傳粉的重要實現(xiàn)物(effector)。幾乎所有鱗翅目幼蟲，即毛蟲以植物為食，并且許多是嚴重的害蟲。毛蟲在葉上或內(nèi)部進食或者以植物的根或莖為食，對植物剝奪營養(yǎng)物，而且經(jīng)常破壞植物的物理支持結構。另外，毛蟲以果實、織物、和貯存的谷物和面粉為食，毀壞出售的這些產(chǎn)品或者嚴重降低其價值。如本文中所使用的，提及鱗翅目害蟲指害蟲的各個生命階段，包括幼蟲階段。
[0038]本發(fā)明的一些嵌合毒素包括Bt毒素的完整N端核心毒素部分，并且在超出核心毒素部分末端的某個點處，蛋白質(zhì)具有向異源原毒素(protoxin)序列的過渡。Bt毒素的N端殺蟲活性的毒素部分稱為“核心”毒素。自核心毒素區(qū)段至異源原毒素區(qū)段的過渡可以大致在毒素/原毒素連接處發(fā)生或者，在備選中，可以保留天然原毒素的部分(超出核心毒素部分延伸)，其中在下游發(fā)生向異源原毒素部分的過渡。
[0039]舉例而言，本發(fā)明的一個嵌合毒素是CrylAb的完整核心毒素部分(約前600個氨基酸)和異源原毒素(C端分子的剩余部分)。在一個優(yōu)選的實施方案中，嵌合毒素中包含原毒素的部分源自另一 CrylAb蛋白毒素。
[0040]本領域技術人員會領會，Bt毒素(即使在某個種類諸如CrylA內(nèi))在長度和核心毒素部分向原毒素部分過渡的精確位置上會以一定程度有所變化。通常，CrylAb毒素的長度是約1150至約1200個氨基酸。自核心毒素部分至原毒素部分的過渡通常會在全長毒素的約50%-約60%發(fā)生。本發(fā)明的嵌合毒素會包括整段(full expanse)的此N端核心毒素部分。如此,嵌合毒素會包含CrylAb Bt毒素蛋白的全長的至少約50%。這通常會是至少約590個氨基酸。關于原毒素部分，整段的CrylAb原毒素部分自核心毒素部分末端延伸至分子的C端。
[0041]基因和毒素。依照本發(fā)明有用的基因和毒素不僅包括公開的全長序列，而且還包括保留本文中明確例示的毒素的特征性殺蟲(pesticidal)活性的這些序列、變體、突變體、和融合蛋白的片段。如本文中所使用的，術語基因的“變體”或“變異”指編碼相同毒素或編碼具有殺蟲活性的等同毒素的核苷酸序列。如本文中所使用的，術語“等同毒素”指與要求保護的毒素具有相同或基本上相同的針對靶害蟲的生物學活性的毒素。
[0042]如本文中所使用的，按照“Revision of the Nomenclature for the Bacillusthuringiensis Pesticidal Crystal Proteins, ^N.Crickmore, D.R.Zeigler, J.Feitelson, E.Schnepf, J.Van Rie, D.Lereclus, J.Baum 和 D.H.Dean.Microbiology andMolecular Biology Reviews (1998)第 62 卷:807-813,邊界代表約 95% (CryIAb 和 Vip3Ab)、78%(CrylF和Vip3A)、和45%(Cryl和Vip3)序列同一性。這些截留也可以僅僅應用于核心毒素(對于例如CrylAb)。例如，依照本發(fā)明使用的蛋白質(zhì)可以與本文中例示或明確提出的蛋白質(zhì)是至少75%，85%, 90%, 95%,或99% (及此范圍內(nèi)的任何整數(shù)增量)相同的(氨基酸同一性)。這包括由依照本發(fā)明使用的多核苷酸/DNA編碼的蛋白質(zhì)。
[0043]對于本領域技術人員應當顯而易見的是，可以經(jīng)由幾種手段鑒定并獲得編碼活性毒素的基因。可以自保藏于培養(yǎng)物保藏所的分離物獲得本文中例示的特定基因或基因部分。也可以例如通過使用基因合成儀以合成方式構建這些基因或其部分或變體。可以使用用于生成點突變的標準技術來容易地構建基因的變異。還有，可以使用商品化的外切核酸酶或內(nèi)切核酸酶依照標準的規(guī)程來生成這些基因的片段。例如，可以使用酶諸如Bal31或定點誘變自這些基因的末端系統(tǒng)性剪斷核苷酸。也可以使用多種限制酶來獲得編碼活性片段的基因。可以使用蛋白酶來直接獲得這些蛋白質(zhì)毒素的活性片段。
[0044]保留例示的毒素的殺蟲活性的片段和等同物會在本發(fā)明的范圍內(nèi)。還有，由于遺傳密碼的冗余，多種不同DNA序列可以編碼本文中公開的氨基酸序列。完全在本領域技術人員的技術內(nèi)的是創(chuàng)建編碼相同的，或基本上相同的毒素的這些備選DNA序列。這些變體DNA序列在本發(fā)明的范圍內(nèi)。如本文中所使用的，提及“基本上相同的”序列指具有沒有實質(zhì)性影響殺蟲活性的氨基酸取代、缺失、添加、或插入的序列。編碼保留殺蟲活性的蛋白質(zhì)的基因的片段也包括在此定義中。
[0045]用于鑒定依照本發(fā)明有用的編碼毒素的基因和基因部分的又一種方法是經(jīng)由使用寡核苷酸探針。這些探針是可檢測的核苷酸序列。這些序列憑借合適的標記物可以是可檢出的或者可以以固有熒光生成，如記載于國際申請N0.W093/16094的。如本領域中公知的，若探針分子和核酸樣品通過形成兩種分子間強烈的鍵來雜交，則可以合理地假設探針和樣品具有實質(zhì)的同源性。優(yōu)選地，通過本領域中公知的技術在嚴格條件下進行雜交，如記載于例如 Kel ler, G.H.，Μ.M.Manak (1987) DNA Probes, Stockton Press, New York, N.Y.,第169-170頁的。鹽濃度和溫度組合的一些例子如下(以嚴格性升高的次序):2X SSPE或SSC于室溫；IX SSPE 或 SSC 于 42 °C ;0.1X SSPE 或 SSC 于 42 °C C ;0.1X SSPE 或 SSC 于 65 °C。探針的檢測提供了一種用于以已知的方式測定雜交是否已經(jīng)發(fā)生的手段。此類探針分析提供一種用于鑒定本發(fā)明的毒素編碼基因的快速方法?？梢允褂肈NA合成儀和標準的規(guī)程來合成依照本發(fā)明作為探針 使用的核苷酸區(qū)段。也可以使用這些核苷酸序列作為PCR引物以擴增本發(fā)明的基因。
[0046]變體毒素。已經(jīng)在本文中明確例示本發(fā)明的某些毒素。因為這些毒素僅是本發(fā)明的毒素例示性的，所以應當容易顯而易見的是，本發(fā)明包括具有例示毒素的相同或相似殺蟲活性的變體或等同毒素(和編碼等同毒素的核苷酸序列)。等同毒素與例示的毒素會具有氨基酸同源性。此氨基酸同源性通常會大于75%,優(yōu)選大于90%,且最優(yōu)選大于95%。氨基酸同源性在毒素中負責生物學活性或者牽涉決定最終負責生物學活性的三維構型的至關重要的區(qū)域中會是最高的。在這點上，某些氨基酸取代是可接受的，并且若這些取代在對于活性不是至關重要的區(qū)域中或者是不影響分子的三維構型的保守氨基酸取代，則可以是預期的。例如，氨基酸可以放入以下種類:非極性、不帶電荷的極性、堿性、和酸性。其中的一類氨基酸用相同類型的另一種氨基酸替換的保守取代落入本發(fā)明的范圍內(nèi)，只要取代不實質(zhì)性改變化合物的生物學活性。下文是屬于每類的氨基酸的例子的列表。
[0047]
【權利要求】
1.一種轉(zhuǎn)基因植物，其包含編碼Vip3Ab殺蟲蛋白的DNA和編碼CrylAb殺蟲蛋白的DNA。
2.權利要求1的植物的種子。
3.權利要求1的植物,其中所述DNA漸滲入所述植物中。
4.權利要求3的植物的種子。
5.包含非Bt避難所植物和權利要求1的多個植物的植物田地，其中所述避難所植物占所述田地中的所有作物植物的小于40%。
6.權利要求5的植物田地，其中所述避難所植物占所述田地中的所有作物植物的小于30%。
7.權利要求5的植物田地，其中所述避難所植物占所述田地中的所有作物植物的小于20%。
8.權利要求5的植物田地，其中所述避難所植物占所述田地中的所有作物植物的小于10%。
9.權利要求5的植物田地，其中所述避難所植物占所述田地中的所有作物植物的小于5% ο
10.權利要求5的植物田地，其中所述避難所植物在區(qū)組或條中(inblocksorstrips)。
11.種子混合物，其包含來自非Bt避難所植物的避難所種子和權利要求2的多個種子，其中所述避難所種子占所述混合物中的所有種子的小于40%。
12.權利要求11的種子混合物，其中所述避難所種子占所述混合物中的所有種子的小于 30%ο
13.權利要求11的種子混合物，其中所述避難所種子占所述混合物中的所有種子的小于 20%ο
14.權利要求11的種子混合物，其中所述避難所種子占所述混合物中的所有種子的小于 10% O
15.權利要求11的種子混合物，其中所述避難所種子占所述混合物中的所有種子的小于5% ο
16.一種管理谷實夜蛾昆蟲對源自蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)的殺蟲蛋白形成抗性的方法，所述方法包括種植種子以產(chǎn)生權利要求5的植物田地。
17.一種用于控制谷實夜蛾昆蟲的組合物，所述組合物包含表達有效量的CrylAb殺蟲蛋白和Vip3Ab殺蟲蛋白兩者的細胞。
18.權利要求17的組合物，其包含經(jīng)過轉(zhuǎn)化以表達CrylAb殺蟲蛋白和Vip3Ab殺蟲蛋白兩者的宿主，其中所述宿主是微生物或植物細胞。
19.一種控制谷實夜蛾昆蟲的方法，所述方法包括對所述昆蟲提供有效量的權利要求17的組合物。
20.權利要求5的田地，其中所述植物占用超過10英畝。
21.權利要求1的植物，其中所述植物選自下組:玉米、大豆、和棉花。
22.權利要求1的植物，其中所述植物是玉米植物。
23.權利要求1、3、21、和22中任一項的植物的植物細胞，其中所述植物細胞包含所述編碼所述CrylAb殺蟲蛋白的DNA和所述編碼所述Vip3Ab殺蟲蛋白的DNA,其中所述CrylAb殺蟲蛋白與SEQ ID N0:1和/或SEQ ID NO: 3是至少95%相同的，且所述Vip3Ab殺蟲蛋白與SEQ ID NO: 2是至少95%相同的。
24.權利要求1、3、21、和22中任一項的植物，其中所述CrylAb殺蟲蛋白包含SEQIDN0:1和/或SEQ ID N0:3，且所述Vip3Ab殺蟲蛋白包含SEQ ID NO:2。
25.一種植物細胞 ，其包含編碼Vip3Ab殺蟲蛋白的DNA和編碼CrylAb殺蟲蛋白的DNA。
【文檔編號】C07K14/325GK103533828SQ201180067814
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2011年12月16日 優(yōu)先權日:2010年12月16日
【發(fā)明者】K.E.納瓦, T.米德, A.T.伍斯利, S.伯頓, N.P.斯托勒, J.J.希茨 申請人:陶氏益農(nóng)公司