修飾肽及其用于治療自體免疫疾病的用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種肽或其鹽，其包括氨基酸序列IH-MVYSKRSGKPRGYAFIEY，或由其組成，該肽包括一個(gè)或多個(gè)翻譯后修飾。
【專(zhuān)利說(shuō)明】修飾肽及其用于治療自體免疫疾病的用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種修飾肽及其用于治療自體免疫疾病的用途。
[0002] 通過(guò)引用合并
[0003] -包含序列號(hào)為1-6的序列表與此一同提交，通過(guò)引用將其整體并入本文。

【背景技術(shù)】
[0004] 自體免疫疾病起因于免疫系統(tǒng)對(duì)存在于多細(xì)胞生物中的正常物質(zhì)和組織的過(guò)度 活躍的免疫反應(yīng)，即免疫系統(tǒng)攻擊自身組件。這可能限于某些器官或涉及不同地方的特定 組織。治療自體免疫疾病一般使用免疫抑制藥物，其降低整個(gè)免疫反應(yīng)。
[0005] 紅斑狼瘡是一種自體免疫疾病，估計(jì)影響到近140萬(wàn)美國(guó)人，主要是年齡在20-40 歲的婦女。紅斑狼瘡涉及攻擊結(jié)締組織的抗體。紅斑狼瘡的主要形式是系統(tǒng)性的（系 統(tǒng)性紅斑狼瘡；SLE)。SLE是一種慢性自體免疫疾病，具有很強(qiáng)的遺傳因素和環(huán)境因素。 (例如，見(jiàn) Hochberg M C，Dubois，Lupus Erythematosus. 5th ed·，Wallace D J，Hahn B H, eds. Baltimore:Williams and Wilkins(1997) ；ffake land E K, et al. , Immunity 2001 ； 15(3):397-408 ；Nath S K, et al.,Curr. Opin. Immunol. 2004 ； 16(6):794-800 ；D'Cruz et al.，Lancet (2007)，369:587-596)。各種其它形式的紅斑紅斑狼瘡，包括，但不限于，皮膚紅 斑狼瘡（CLE)、狼瘡性腎炎（LN)、神經(jīng)紅斑狼瘡（NPLE)和新生兒紅斑狼瘡。
[0006] 不治療紅斑狼瘡可致命，因?yàn)槠鋸墓羝つw和關(guān)節(jié)發(fā)展到攻擊內(nèi)部器官，包括肺、 心臟和腎（主要考慮腎臟疾?。蚨鴮?duì)發(fā)展紅斑狼瘡進(jìn)行早期的和準(zhǔn)確的診斷和/或風(fēng)險(xiǎn) 的評(píng)估是至關(guān)重要的。紅斑狼瘡主要表現(xiàn)為一系列突然爆發(fā)的，干預(yù)時(shí)間很少或沒(méi)有疾病 表現(xiàn)。通過(guò)測(cè)量尿液中的蛋白含量（尿蛋白）測(cè)定的腎臟損害是與SLE中病原性相關(guān)的最 嚴(yán)重?fù)p害區(qū)域之一，不治療會(huì)導(dǎo)致至少50%的疾病死亡率和發(fā)病率。
[0007] 在臨床上，SLE是一種異質(zhì)性紊亂，其特點(diǎn)是高親和性自身抗體（autoabs)。 AutoAbs在SLE發(fā)病機(jī)理中發(fā)揮重要作用，并且疾病的不同的臨床表現(xiàn)是由于包含抗體的 免疫復(fù)合物在血管中的沉積導(dǎo)致腎、腦和皮膚的炎癥。AutoAbs對(duì)溶血性貧血和血小板減少 也有直接的致病效應(yīng)。SLE與抗核抗體、循環(huán)免疫復(fù)合體和補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷的產(chǎn)生有關(guān)。在 20-60歲的黑人婦女中SLE的發(fā)生率約為1/700。SLE可影響任何器官系統(tǒng)，并能導(dǎo)致嚴(yán)重 的組織損傷。SLE中存在許多不同特異性的autoAbs。SLE患者常產(chǎn)生具有抗DNA、抗Ro和 抗血小板特異性的autoAbs，其能夠引發(fā)疾病的臨床特征，例如腎小球性腎炎、關(guān)節(jié)炎、漿膜 炎、新生兒完全性心臟傳導(dǎo)阻滯和血液異常。這些autoAbs也可能與中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂有 關(guān)。Arbuckle等人描述了 SLE臨床發(fā)作前的autoAbs的發(fā)展（Arbuckle et al.N.Engl. J. Med. 349 (16) : 1526-1533 (2003))。
[0008] 識(shí)別RNA-結(jié)合蛋白（RBPs，也指可提取的核抗原）的AutoAbs在SLE中第一次表 征是在 40 年前（Holman, Ann N Y Acad. Sci. 124 (2) :800-6 (1965))。這種 RBPs 包括一組 在RNA加工和生化過(guò)程中起作用的蛋白-SSA(Ro52/TRM21和R〇60/TROVE2)、SSB(La)、U1 小核核糖核蛋白（RNP)和Smith(Sm)蛋白。抗SSA和抗SSB IgG autoAbs不單止在SLE 中發(fā)現(xiàn)，還存在于SjOgren綜合癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎?？筍SA autoAbs與亞急性皮膚型紅斑 狼瘡有關(guān)，以及與抗SSA陽(yáng)性婦女的小孩中的先天性心臟傳導(dǎo)阻滯和新生兒狼瘡有關(guān)。抗 SSB autoAbs幾乎總是與抗SSA autoAbs-起被發(fā)現(xiàn)，而兩種自身抗原與細(xì)胞質(zhì)hYRNA有 關(guān)（Lerner et al.，Science 211(4480):400_2(1981))?？?Sm autoAbs 對(duì) SLE 是高度特 異性的，通常與抗RNP autoAbs-起被發(fā)現(xiàn)。Sm和RNP蛋白都與細(xì)胞核RNA剪接體中的特 異性 snRNA 有關(guān)（Lerner et al.，Proc Natl Acad Sci USA 76 (11) :5495-9 (1979))?？?RNP autoAbs還發(fā)現(xiàn)在患有混合結(jié)締組織病的患者中。暗示了抗RBP autoAbs的存在可鑒 定SLE的發(fā)生，該SLE在B細(xì)胞清除治療后顯示出較少的持久反應(yīng)（Cambridge et al.，Ann Rheum Dis 67:1011-16(2008))。
[0009] 現(xiàn)有技術(shù)公開(kāi)了用于治療自體免疫疾病的藥物。例如，兩個(gè)國(guó)際申請(qǐng)W0 03/020747和W0 03/025014均公開(kāi)了 70kDa的snRNP片段，其通過(guò)磷酸化和/或乙酰化修 飾，用于治療這類(lèi)病癥，即自體免疫疾病。但是，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明，在W0 03/020747和TO 03/025014中披露的肽相對(duì)不穩(wěn)定，而且給藥到哺乳動(dòng)物時(shí)很快被清除掉。此外，所披露的 一些肽是沒(méi)有活性的。
[0010] 因此，有需要為自體免疫疾病提供更好的治療方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明提供組合物和使用組合物的方法，其基于意外的、非預(yù)期的發(fā)現(xiàn)，即序列2 的肽的某些修飾形式在給藥給哺乳動(dòng)物時(shí)更加穩(wěn)定。因此，本發(fā)明的一個(gè)方面是提供包含 該肽的修飾形式和一藥學(xué)上可接受的載體的組合物。
[0012] 另一方面，本發(fā)明提供了一藥物組合物或藥物，其有助于改善自體免疫疾病，對(duì)治 療紅斑狼瘡有利。
[0013] 在另外一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療自體免疫疾病的方法，包括給予本文描述的 一有效量的治療組合物。
[0014] 在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了分離肽（重組的或合成的）或其鹽，包括以下序 列的氨基酸或由其組成：
[0015] IHMVYSKRSGKPRGYAFIEY [序列號(hào)：2]，
[0016] 其中在位置9的絲氨酸（s)被磷酸化，在位置3的蛋氨酸（M)被氧化。
[0017] 在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了化合物I的肽，具有以下通式：

【權(quán)利要求】
1. 一種肽或其鹽，包含序列2的氨基酸序列IHMVYSKRSGKPRGYAFIEY(序列號(hào)：2)或由 其組成，其中包含位置9的磷酸化絲氨酸，以及位置3的氧化蛋氨酸。
2. -種肽或其鹽，包含序列1的氨基酸序列RIHMVYSKRSGKPRGYAFIEY(序列號(hào)：1)或由 其組成，其中包含位置10的磷酸化絲氨酸，以及位置4的氧化蛋氨酸。
3. -種組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1或2或二者中所述的肽，和一具有免疫抑制或免疫 調(diào)節(jié)作用的藥物。
4. 一種藥物組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或它們的組合中所述的肽，進(jìn)一步包括 一藥學(xué)上可接受的載體。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其中，所述藥物組合物是錠劑、片劑、膠制品、膠 囊、藥滴、藥丸、脂質(zhì)體、納米顆?；蛉芤盒问健?br> 6. -種治療自體免疫疾病的方法，其中所述方法包括將足以實(shí)現(xiàn)所述治療的量的根據(jù) 權(quán)利要求5或6所述的藥物組合物給予需要該類(lèi)治療的患者的步驟。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述自體免疫疾病選自：結(jié)締組織疾病家族自體 免疫疾?。ǚ翘禺愋匀砥鞴偌膊。?，例如全身性紅斑狼瘡（SLE)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、混合性結(jié) 蒂組織病、SjOgren綜合癥或慢性幼年期關(guān)節(jié)炎；和/或器官特異性自體免疫疾病，如多發(fā) 性硬化癥、胰島素依賴(lài)型糖尿病、克羅恩氏病或大皰性疾病。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其中所述自體免疫疾病是SLE。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6-8中的任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述藥物組合物的給藥劑量為約 100ng 至約 5mg。
【文檔編號(hào)】C07K7/08GK104114180SQ201180076376
【公開(kāi)日】2014年10月22日 申請(qǐng)日期:2011年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2011年12月13日
【發(fā)明者】S·米勒, J-P·白里安, R·齊默爾 申請(qǐng)人:法國(guó)國(guó)家科學(xué)研究中心, 安姆弗拉瑪法國(guó)股份公司