專利名稱：一種工業(yè)制備擬人參皂苷f11的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種工業(yè)制備擬人參皂苷Fll的新方法，該方法采用了大孔吸附樹脂、溶劑萃取法、硅膠減壓柱色譜法和氧化堿解法，簡化了制備工藝，提高了產(chǎn)品產(chǎn)率(1%以上) 和純度(90%以上)，適合工業(yè)化生產(chǎn)。屬于中藥提取分離工藝和水解技術(shù)的改進(jìn)。
背景技術(shù)：
擬人參皂苷Fll及其苷元的結(jié)構(gòu)式如下
OHOH
3a :稱取西洋參莖葉藥材，將其粉碎后過篩，用疒10倍體積的水浸泡，于98-103°C下加熱提取2飛次，每次廣2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng)DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)109Γ30%的乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫5-30個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)50°/Γ85%的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 08 I. 10的濃縮液。b :將步驟a得到的濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取f 3次，靜置，分層，棄去乙酸乙酯層。水層再用等體積的正丁醇萃取廣3次，棄去水層。合并正丁醇層，減壓濃縮，干燥后得到正丁醇層浸膏。c :正丁醇層浸膏用乙醇溶解后用2倍量硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取2 倍量硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為85 15^75 25的二氯甲烷乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫5 10個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。d :將濃縮好的樣品溶液直接進(jìn)行重結(jié)晶，待結(jié)晶析出，抽濾，得粗結(jié)晶。將粗結(jié)晶粉碎后用乙醇熱溶后再重結(jié)晶。粗結(jié)晶母液可以繼續(xù)利用硅膠柱純化后再重結(jié)晶，最后得到擬人參皂苷F11。產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210°C (MeOH), 1H-NMR (300M, C5D5N) 3. 46 (1H
dd,
--12.0, 4. 5Hz, H-3), 1.41 (3H, s, 26-H)，I. 32 (3H, s, 27-H)，2.09(3H,
28-H)，I. 33 (3H,
29-H), 0. 93 (3H,
30-H), 5. 24(1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l，-H)
6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l，，)。13C-匪R(75MHz, C5D5N) :39. 4 (C_l)，27. I (C_2)
78.3 (C-3), 40. 0 (C-4), 60.9(C-5)，74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49. 5 (C_9) 39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-ll), 70.7(012)，49.2(013)，51.6(014)，31.3(C_15) 25.5(C-16), 49.4(C-17), 17. 8 (C—18)，17.2(019)，86.7(020)，27.0(C_21) 32.8(C-22), 28.8 (C-23), 85.6 (024)，70.3(025)，26.6(026)，26.9(C_27) 32.1(C-28), 17. 6 (C-29), 16.9(030)，101.8 (C-6-glc-T ), 78.5(C-2，)
79.4 (C-3，)，72. 6 (C-4，)，78.4(C-5，)，63. 1(C_6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，) 72.4(C-2，，)，72.2(C-3，，)，74.1(C_4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。本發(fā)明的優(yōu)選條件
a步驟西洋參莖葉藥材加熱提取優(yōu)選溫度為98-100°C，大孔樹脂洗脫條件優(yōu)選為 20%-25%乙醇洗脫20-25個(gè)保留體積進(jìn)行除雜，65%_70%乙醇洗脫10-15個(gè)保留體積收集洗脫液。b步驟萃取次數(shù)優(yōu)選條件為乙酸乙酯萃取2次，正丁醇萃取2次。c步驟減壓柱色譜洗脫梯度優(yōu)選條件為82 18^78 :22。本發(fā)明新引入了溶劑分步萃取法，其第一步利用乙酸乙酯萃取，可以除去總皂苷中的極性較小的單糖皂苷，因此等梯度洗脫即可將擬人參皂苷Fll洗脫下來，此步驟可以將有機(jī)試劑的使用量減少一半，同時(shí)優(yōu)化了分離效果，使獲得的擬人參皂苷Fll的收率從
O.3%提高到1%以上，第二步利用正丁醇萃取，可以將總皂苷中極性較大的部分除去，萃取后正丁醇層浸膏僅為原總皂苷重量的一半，可以使下一步硅膠減壓柱色譜的硅膠用量減少一半。新引入了硅膠減壓柱色譜法，可以減少柱硅膠和洗脫溶劑的使用量，普通開放硅膠柱色譜法柱硅膠的用量是樣品量的5 10倍以上，而減壓柱柱硅膠用量僅為樣品量的2倍，且操作簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。同時(shí)采用二氯甲烷-乙醇系統(tǒng)，其毒性較原有的氯仿-甲醇系統(tǒng)有所降低。新方法降低了成本，簡化了操作步驟，后期通過重結(jié)晶，產(chǎn)品純度可以達(dá)到90%以上，收率能達(dá)到1%以上，適應(yīng)于工業(yè)化生產(chǎn)的要求。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的任意組合。實(shí)施例I :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材10kg，將其粉碎后過篩，用7倍體積的水浸泡，加熱于95°C條件下，提取2次，每次I小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng) DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)10%的乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫5個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)50% 的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 08的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取I次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用等體積的正丁醇萃取I次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏510g。將浸膏用乙醇溶解后用Ikg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取Ikg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為85 :15的二氯甲烷乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫5個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶，12 小時(shí)后結(jié)晶析出，抽濾，得粗結(jié)晶(122g)。擬人參皂苷Fll含量約70%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(108g)，其含量可達(dá)到92%(HPLC檢測)。擬人參皂苷Fll 產(chǎn)率為 I. 08%ο 產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210。。(MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H, dd, /=12. O, 4.5Hz, H-3), I. 41 (3H, s, 26-H)，I. 32 (3H, s, 27-H)，2. 09 (3H, s, 28-H)，
I.33 (3H, s, 29-H), O. 93 (3H, s, 30-H)，5. 24 (1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l’-H)，6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l”)。13C-NMR(75MHz, C5D5N) 39.4(C-1), 27.1(C-2)，78.3(C-3)， 40. 0 (C-4), 60. 9 (C-5), 74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49.5(C-9)，39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-ll), 70.7(C-12), 49.2(013)，51.6(014)，31.3(015)，25.5(016)， 49.4(C-17)，17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(021)，32.8(022)， 28.8(C-23), 85.6 (C-24), 70.3(025)，26.6(026)，26.9(027)，32.1(028)， 17. 6 (C-29), 16. 9(C-30), 101.8 (C-6-glc-l，)，78. 5(C_2，)，79.4(C-3，)， 72.6(C-4，)，78.4(C-5，)，63. 1(C_6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，)，72.4(C_2，，)， 72.2(C-3，，)，74.1(C-4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。實(shí)施例2 :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材10kg，將其粉碎后過篩，用7倍體積的水浸泡，加熱于95°C條件下，提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng) DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)30%的乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫30個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)85% 的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 10的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取3次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用等體積的正丁醇萃取3次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏516g。將浸膏用乙醇溶解后用Ikg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取Ikg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為75 :25的二氯甲烷乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫10個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶，12小時(shí)后結(jié)晶析出，抽濾，得粗結(jié)晶(120g)。擬人參皂苷Fll含量約71%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(102g)，其含量可達(dá)到93%(HPLC檢測)。擬人參皂苷Fll 產(chǎn)率為 I. 02%。產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210。。(MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H, dd, /=12. O, 4.5Hz, H-3), I. 41 (3H, s, 26-H)，I. 32 (3H, s, 27-H)，2. 09 (3H, s, 28-H)， I. 33 (3H, s, 29-H), O. 93 (3H, s, 30-H)，5. 24 (1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l’-H)，6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l”)。13C-NMR(75MHz, C5D5N) 39.4(C-1), 27.1(C-2)，78.3(C-3)， 40. 0 (C-4), 60. 9 (C-5), 74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49.5(C-9)，39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-Il)，70.7(C-12), 49.2(013)，51.6(014)，31.3(015)，25.5(016)， 49.4(C-17)，17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(021)，32.8(022)， 28.8(C-23), 85.6 (C-24), 70.3(025)，26.6(026)，26.9(027)，32.1(028)， 17. 6 (C-29), 16. 9(C-30), 101.8 (C-6-glc-l，)，78. 5(C_2，)，79.4(C-3，)， 72.6(C-4，)，78.4(C-5，)，63. 1(C_6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，)，72.4(C_2，，)， 72.2(C-3，，)，74.1(C-4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。實(shí)施例3 :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材10kg，將其粉碎后過篩，用8倍體積的水浸泡，加熱于95°C條件下，提取4次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為l.Ofl. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng) DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)20%的乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫20個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)60% 的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 09的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取2次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用等體積的正丁醇萃取2次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏511g。將浸膏用乙醇溶解后用Ikg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取Ikg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為80 :20的二氯甲烷乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫10個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶，12 小時(shí)后結(jié)晶析出，抽濾，得粗結(jié)晶(123g)。擬人參皂苷Fll含量約70%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(10(^)，其含量可達(dá)到91%(即^檢測)。擬人參皂苷？11 產(chǎn)率為 I. 00%ο 產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210。。(MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H, dd, /=12. O, 4.5Hz, H-3), I. 41 (3H, s, 26-H)，I. 32 (3H, s, 27-H)，2. 09 (3H, s, 28-H)， I. 33 (3H, s, 29-H), O. 93 (3H, s, 30-H)，5. 24 (1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l’-H)，6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l”)。13C-NMR(75MHz, C5D5N) 39.4(C-1), 27.1(C-2)，78.3(C-3)， 40. 0 (C-4), 60. 9 (C-5), 74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49.5(C-9)，39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-Il)，70.7(C-12), 49.2(013)，51.6(014)，31.3(015)，25.5(016)， 49.4(C-17)，17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(021)，32.8(022)， 28.8(C-23), 85.6 (C-24), 70.3(025)，26.6(026)，26.9(027)，32.1(028)， 17. 6 (C-29), 16. 9(C-30), 101.8 (C-6-glc-l，)，78. 5(C_2，)，79.4(C-3，)， 72. 6 (C-4，)，78. 4(C-5，)，63. 1(C_6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，)，72.4(C_2，，)， 72.2(C-3，，)，74.1(C-4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。實(shí)施例4 :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材10kg，將其粉碎后過篩，用10倍體積的水浸泡，加熱于95°C條件下，提取5次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng)DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)20%的乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫25個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)60% 的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 09的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取2次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用等體積的正丁醇萃取2次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏550g。將浸膏用乙醇溶解后用Ikg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取Ikg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為82 :78的二氯甲烷乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫15個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶，12 小時(shí)后結(jié)晶析出，抽濾，得粗結(jié)晶(135g)。擬人參皂苷Fll含量約70%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(11(^)，其純度可達(dá)到91%(即^檢測)。擬人參皂苷？11 產(chǎn)率為 I. 1%。產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210°C (MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H, dd, /=12.0, 4. 5Hz, H-3), 1.41 (3H, s, 26-H), I. 32 (3H, s, 27-H), 2.09(3H, s, 28-H), I. 33 (3H, s, 29-H), 0. 93 (3H, s, 30-H), 5. 24 (1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l’-H)，6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l”)。13C-NMR(75MHz, C5D5N) 39.4(C-1), 27.1(C-2)，78.3(C-3)， 40. 0 (C-4), 60. 9 (C-5), 74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49.5(C-9)，39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-Il)，70.7(C-12), 49.2(013)，51.6(014)，31.3(015)，25.5(016)， 49.4(C-17)，17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(021)，32.8(022)， 28.8(C-23), 85.6 (C-24), 70.3(025)，26.6(026)，26.9(027)，32.1(028)， 17. 6 (C-29), 16. 9 (C-30), 101.8 (C-6-glc-l，)，78. 5(C_2，)，79.4(C-3，)， 72. 6 (C-4，)，78. 4 (C-5，)，63. 1(C_6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，)，72.4(C_2，，)， 72.2(C-3，，)，74.1(C-4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。實(shí)施例5 :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材100kg，將其粉碎后過篩，用7倍體積水浸泡，加熱于100°C條件下，提取2次，每次I. 5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng)DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)20%乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫15個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)70% 乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 08的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取I次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用同體積的正丁醇萃取2次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏5400g。將浸膏用乙醇溶解后用IOkg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取IOkg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為78 22的二氯甲烷 乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫8個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶。 12小時(shí)后結(jié)晶析出。抽濾，得粗結(jié)晶(1426g)。擬人參皂苷Fll含量約65%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(1032g)，其含量可達(dá)到94%(HPLC檢測)。擬人參皂苷 Fll 產(chǎn)率為 1.03%。產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210°C (MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H, dd, /=12.0, 4. 5Hz, H-3), 1.41 (3H, s, 26-H), I. 32 (3H, s, 27-H), 2.09(3H, s, 28-H), I. 33 (3H, s, 29-H), 0. 93 (3H, s, 30-H), 5. 24 (1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l’-H)， 6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l，，)。13C-匪R(75MHz, C5D5N) :39. 4 (C_l)，27.1(C-2)，
78.3 (C-3), 40. 0 (C-4), 60. 9 (C-5), 74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49.5(C-9)， 39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-ll), 70.7(012)，49.2(013)，51.6(014)，31.3(015)， 25.5(C-16), 49.4(C-17), 17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(021)，32.8(022)，28.8(023)，85.6(024)，70.3(025)，26.6(026)，26.9(027)， 32.1(028)，17.6(029)，16.9(030)，101.8 (C-6-glc-l，)，78.5(C-2，)， 79.4(C-3，)，72.6(C-4，)，78.4(05，)，63.1(06，)，101.9 (C_2，-rham-l，，)， 72.4(C-2，，)，72.2(C-3，，)，74.1(C_4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。實(shí)施例6 :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材100kg，將其粉碎后過篩，用9倍體積水浸泡，加熱于95°C條件下， 提取4次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng)DlOl 大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)25%乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫25個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)65%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 08的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取2次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用同體積的正丁醇萃取I次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏5300g。將浸膏用乙醇溶解后用IOkg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取IOkg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為82 18的二氯甲烷: 乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫6個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶。 12小時(shí)后結(jié)晶析出。抽濾，得粗結(jié)晶(1406g)。擬人參皂苷Fll含量約70%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(1052g)，其含量可達(dá)到94%(HPLC檢測)。擬人參皂苷 Fll 產(chǎn)率為 1.05%。產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210°C (MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H dd, /=12.0, 4. 5Hz, H-3), 1.41 (3H, s, 26-H), I. 32 (3H, s, 27-H), 2.09(3H, s 28-H), I. 33 (3H, s, 29-H), 0. 93 (3H, s, 30-H), 5. 24 (1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l’-H)
6. 46 (1H, br. s, 2，-rham-l，，)。13C-匪R(75MHz, C5D5N) :39. 4 (C_l)，27. I (C_2)
78.3 (C-3), 40. 0 (C-4), 60. 9 (C-5), 74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49. 5 (C_9) 39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-ll), 70.7(012)，49.2(013)，51.6(014)，31.3(C_15) 25.5(C-16), 49.4(C-17), 17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(C_21) 32.8(C-22), 28.8 (C-23), 85.6 (024)，70.3(025)，26.6(026)，26.9(C_27) 32.1(C-28), 17. 6 (C-29), 16. 9 (C-30), 101.8 (C-6-glc-T ), 78.5(C-2，)
79.4 (C-3，)，72. 6 (C-4，)，78.4(C-5，)，63. 1(C_6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，) 72.4(C-2，，)，72.2(C-3，，)，74.1(C_4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。實(shí)施例7 :擬人參皂苷Fll制備
稱取西洋參莖葉藥材100kg，將其粉碎后過篩，用10倍體積水浸泡，加熱于95°C條件下，提取5次，每次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液。濃縮液經(jīng) DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)25%乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫20個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)65%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 10的濃縮液。濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取2次，靜置，分層。棄去乙酸乙酯層。水層再用同體積的正丁醇萃取I次，棄去水層。減壓濃縮正丁醇層，干燥后得到正丁醇層浸膏5125g。將浸膏用乙醇溶解后用IOkg硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎。取IOkg硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離。采用體積比為80 20的二氯甲烷: 乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫。洗脫6個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積。放置對其進(jìn)行重結(jié)晶。 12小時(shí)后結(jié)晶析出。抽濾，得粗結(jié)晶(1410g)。擬人參皂苷Fll含量約69%(HPLC檢測)。將粗結(jié)晶粉碎后乙酸乙酯熱溶后再重結(jié)晶(1050g)，其含量可達(dá)到92%(HPLC檢測)。擬人參皂苷Fll 產(chǎn)率為 1.05%。產(chǎn)品為白色晶體，mp. 208 210°C (MeOH), 1H-NMR(300M, C5D5N) 3. 46 (1H
dd,
--12.0, 4. 5Hz, H-3), 1.41 (3H, s, 26-H), I. 32 (3H, s, 27-H), 2.09(3H,
28-H)，I. 33 (3H, s, 29-H)，0. 93 (3H,
30-H), 5. 24(1H, d, /=6. 5Hz, 6-glc-l，-H)
6. 46 (1H, br. s, 2’ -rham-l’’)。13C-匪R(75MHz, C5D5N) :39. 4 (C-I)，27. I (C_2) 78. 3 (C-3), 40. 0 (C-4), 60.9(C-5)，74.3(C-6)，46.1(C-7)，41.2(08)，49. 5 (C_9) 39. 6 (C-IO), 31. 4 (C-ll), 70.7(012)，49.2(013)，51.6(014)，31.3(C_15) 25.5(C-16), 49.4(C-17), 17. 8 (C-18), 17.2(019)，86.7(020)，27.0(C_21)
32. 8(C-22), 32. I(C-28)， 79. 4 (C-3，)，
28. 8(C-23), 17. 6 (C-29)， 72. 6(C-4，)，
85.6(C-24), 70.3(C-25), 26.6(026)， 16. 9 (C-30), 101.8 (C-6-glc-l，)，
26. 9(C-27) 78.5 (C-2> )
78. 4 (C-5，)，63.1(C-6，)，101.9 (C_2，-rham-l，，)
72.4(C-2，，)，72.2(C-3，，)，74.1(C_4，，)，69.4(C_5，，)，18.7(C_6，，)。
權(quán)利要求
1.一種制備擬人參皂苷Fll的方法，其步驟如下a.稱取西洋參莖葉藥材，將其粉碎后過篩，用7 10倍體積的水浸泡，于98-103°C下加熱提取2飛次，每次f 2小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對密度為I. 08^1. 10的濃縮液；濃縮液經(jīng)DlOl大孔樹脂吸附，用體積分?jǐn)?shù)109^30%的乙醇洗脫雜質(zhì)，洗脫5-30個(gè)柱體積，再用體積分?jǐn)?shù)509^85%的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并濃縮至相對密度為I. 08 I. 10的濃縮液；b.將步驟a得到的濃縮液用等體積的乙酸乙酯萃取f3次，靜置，分層，棄去乙酸乙酯層，水層再用等體積的正丁醇萃取廣3次，棄去水層；合并正丁醇層，減壓濃縮，干燥后得到正丁醇層浸膏；c.正丁醇層浸膏用乙醇溶解后用2倍量硅膠(100-200目)拌樣，干燥，粉碎；取2倍量硅膠(200-300目)作為柱色譜硅膠，采用大型減壓硅膠柱色譜對其進(jìn)行分離；采用體積比為85 15^75 25的二氯甲烷乙醇系統(tǒng)進(jìn)行等梯度洗脫；洗脫5 10個(gè)柱體積，濃縮至十分之一體積；d.將濃縮好的樣品溶液直接進(jìn)行重結(jié)晶，待結(jié)晶析出，抽濾，得粗結(jié)晶，將粗結(jié)晶粉碎后用乙醇熱溶后再重結(jié)晶，粗結(jié)晶母液可以繼續(xù)利用硅膠柱純化后再重結(jié)晶，最后得到擬人參皂苷FlI。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于a步驟中西洋參莖葉藥材加熱提取溫度為 98-100。。。
3.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于a步驟中大孔樹脂洗脫條件為20%-25% 乙醇洗脫20-25個(gè)保留體積進(jìn)行除雜。
4.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于a步驟中用65%-70%乙醇洗脫10-15個(gè)保留體積，并收集洗脫液。
5.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于b步驟中萃取次數(shù)為乙酸乙酯萃取2次， 正丁醇萃取2次。
6.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于c步驟中減壓柱色譜洗脫梯度條件為采用體積比82 18 78 22 _■氣甲燒乙醇系統(tǒng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種工業(yè)制備擬人參皂苷F11的新方法，該方法采用了大孔吸附樹脂、溶劑萃取法、硅膠減壓柱色譜法和氧化堿解法，簡化了制備工藝，提高了產(chǎn)品產(chǎn)率和純度，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07J17/00GK102584925SQ201210012159
公開日2012年7月18日 申請日期2012年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月16日
發(fā)明者吳春福, 宋少江, 彭纓, 李玲芝, 楊靜玉, 高品一, 黃肖霄 申請人:沈陽藥科大學(xué)