專利名稱：一種金花茶黃酮苷及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于對(duì)天然植物中具有藥用活性的新成分的制備及應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種金花茶黃酮苷A、其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
金花茶(Camelliachrysantha(Hu)Tuyama)系山茶科(Theaceae)山茶屬 (Camellia Linn.)金花茶組(Section chrysantha Chang)植物,主要分布于廣西邑寧縣。 金花茶不僅有較高的觀賞價(jià)值，而且具有一定的藥用價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，是傳統(tǒng)的壯族民間用藥。金花茶茶葉主要用于咽喉炎、痢疾、腎炎、水腫、尿路感染、黃疸性肝炎、肝硬化腹水、 高血壓、預(yù)防腫瘤等；花主要用于便血、月經(jīng)不調(diào)等。早期對(duì)金花茶的研究主要集中在植物形態(tài)學(xué)、植物分類學(xué)方面，近年來(lái)對(duì)金花茶的抗氧化、降血脂、抗肝癌前病變等活性的研究已見(jiàn)報(bào)道，另外對(duì)金花茶葉化學(xué)成分的研究也有報(bào)道。發(fā)明人在對(duì)山茶屬植物抗腫瘤活性成分的系列研究中發(fā)現(xiàn)，金花茶不同植物部位 (花、葉、種子)均具有較強(qiáng)的抑制人白血病細(xì)胞株U937細(xì)胞增殖的活性。為了闡明金花茶花抗腫瘤活性的物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)理，本發(fā)明對(duì)金花茶花的化學(xué)成分及其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性進(jìn)行了研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明對(duì)金花茶花的化學(xué)成分進(jìn)行了分離，從金花茶花95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分離得到的單體化合物和餾分經(jīng)定性、定量測(cè)定表明主要為黃酮類成分。由此推測(cè)，金花茶花中的黃酮類成分可能是其抗腫瘤活性的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。因此，本發(fā)明通過(guò)對(duì)金花茶花中黃酮類成分進(jìn)行分離鑒定，并以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡為活性指標(biāo)，從中尋找和篩選新型抗腫瘤藥物。因此，本發(fā)明從金花茶花中尋找具有抗腫瘤活性的單體成分——金花茶黃酮苷A,其具有如下結(jié)構(gòu)式
權(quán)利要求
1.一種金花茶黃酮苷A,其特征在于具有如下結(jié)構(gòu)式
2.如權(quán)利要求I所述的金花茶黃酮苷A的制備方法，其特征在于包括如下步驟， A.制備金花茶花95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物的方法 將金花茶花以95%工業(yè)乙醇加熱回流提取，料液比Ig 2 5ml，溫度75 85°C，乙醇提取物濃縮成浸膏后，向浸膏中加入水混懸，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯萃取物； B.以硅膠柱色譜分離步驟A所得的乙酸乙酯萃取物，分別以氯仿-甲醇的體積比為100 1,50 1,30 1,20 1、15 UlO I和5 1，進(jìn)行梯度洗脫，將洗脫下來(lái)的流分，經(jīng)硅膠薄層板檢識(shí)后合并相同流分，收集由氯仿甲醇的體積比10 I洗脫下的流分備用; C.步驟B所得的流分，經(jīng)ODS反相硅膠柱色譜分離，洗脫液為甲醇乙腈水的體積比為I : I : 2，將收集到的各流分經(jīng)薄層層析鋁箔反相硅膠板展開(kāi)，展開(kāi)劑是甲醇乙腈水的體積比為I : I : 2，流分展開(kāi)后以顯黃色的斑點(diǎn)為主斑點(diǎn)，主斑點(diǎn)Rf值為O. 67的流分合并、備用； D.步驟C所獲得的流分經(jīng)SephadexLH-20柱色譜分離，以甲醇洗脫，將收集到的各流分經(jīng)薄層層析鋁箔反相硅膠板展開(kāi)，展開(kāi)劑是甲醇乙腈水的體積比為I : I : 2，流分展開(kāi)后以斑點(diǎn)Rf值為O. 67的單一流分為終產(chǎn)品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于步驟A中，向浸膏中加入2 5倍質(zhì)量的水混懸,并用2倍量乙酸乙酯萃取。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于步驟A中，所述料液比為Ig 3ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于步驟A中，所述所述溫度為80°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求2 5所述的任一方法，其特征在于步驟A中，所述加熱回流提取的次數(shù)為3次，每次2小時(shí)。
7.如權(quán)利要求I所述的金花茶黃酮苷A在制備抗腫瘤藥物上的用途。
8.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于將有效劑量的金花茶黃酮苷A作為有效成分與藥用輔料混合并制成適當(dāng)劑型的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從金花茶花中分離的抗癌化合物金花茶黃酮苷A及其制備方法和用途。本發(fā)明從金花茶花95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分離得到的單體化合物和餾分經(jīng)定性、定量測(cè)定表明主要為黃酮類成分，并經(jīng)現(xiàn)代光譜技術(shù)分析確定了該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，化學(xué)名為槲皮素-7-O-(6″-O-E-咖啡酰基)-β-D-葡萄糖苷。經(jīng)體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明，該化合物能明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖，并具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性。該發(fā)明產(chǎn)物具備抗腫瘤藥物的開(kāi)發(fā)潛力。
文檔編號(hào)C07H17/07GK102617672SQ20121004503
公開(kāi)日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年2月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月24日
發(fā)明者于大永, 馮寶民, 史麗穎, 王永奇 申請(qǐng)人:大連大學(xué)