專利名稱：熱淋清顆粒原料提取短葉蘇木酚的方法和制劑質(zhì)控方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及從熱淋清顆粒的原料中提取短葉蘇木酚的方法，例如從頭花寥水提物中提取短葉蘇木酚的方法，還涉及從熱淋清顆粒的原料或頭花寥水提物中提取短葉蘇木酚和槲皮苷的方法。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及使用短葉蘇木酚對熱淋清顆粒制劑進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控的方法。
背景技術(shù)：
頭花寥為寥科植物頭花寥Polygonum capitatum Buch. -Ham. ex D. Don的干燥全草或地上部分，收載于《貴州省中藥材民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版，具清熱利濕、抗菌消炎、利尿通淋等功效(貴州省食品藥品監(jiān)督管理局.貴州省中藥材民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[M].貴陽貴州科技出版社，2003 :147)。頭花寥是貴州常用苗藥，是貴州省中藥現(xiàn)代化重點(diǎn)發(fā)展的“六大苗藥”和重點(diǎn)培育發(fā)展的“七大中藥產(chǎn)業(yè)鏈”的品種之一。以頭花寥為主要原料的熱淋清顆粒在臨床上用于治療泌尿系統(tǒng)感染，被《中國藥典》2010年版一部收載，但國內(nèi)外至今對頭花寥的研究報道較少，已有的文獻(xiàn)初步認(rèn)為黃酮類、酚酸類為頭花寥的有效成分[卜4]。目前《中國藥典》2010年版僅以沒食子酸作為熱淋清顆粒的定量監(jiān)控指標(biāo)，仍然期待有更有效的可靠的評價指標(biāo)。本發(fā)明人致力于對熱淋清顆粒的原料藥(即頭花寥水提物，為粉末狀物)進(jìn)行系統(tǒng)的全成分分析，期待尋找可用于定量監(jiān)控?zé)崃芮逯苿├鐭崃芮孱w粒制劑的新方法。眾所周知，監(jiān)控成分復(fù)雜的物質(zhì)例如中藥提取物需要有明確的監(jiān)控指標(biāo)，例如需要有該中藥中含有的、可得到、易得到的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并且對于某一中藥提取物，如果能夠以多種化學(xué)物質(zhì)同時監(jiān)控其質(zhì)量，則對于藥品的質(zhì)量把控將會比單一組分控制更加合理。因此，從熱淋清顆粒的原料藥(即頭花寥水提物，為粉末狀物)中發(fā)現(xiàn)新的化學(xué)物質(zhì)仍是本領(lǐng)域技術(shù)人員期待的，以便為藥品質(zhì)量控制提供新的途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于為頭花寥制劑例如熱淋清顆粒提供藥品質(zhì)量控制的新途徑。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用獨(dú)特的方法處理熱淋清顆粒制劑的原料藥即頭花寥水提物，尋找到一種未曾在頭花寥藥材中報道的新物質(zhì)即短葉蘇木酹(brevifolin),該方法在獲得該新物質(zhì)以及其它化學(xué)單體方面的收率具有有益的工業(yè)價值的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明基于此發(fā)現(xiàn)而得以完成。為此，本發(fā)明第一方面提供了從熱淋清顆粒的原料(例如頭花寥水提物)中提取短葉蘇木酚(和/或槲皮苷)的方法，該方法包括以下步驟 (I)取頭花寥水提物，用60 95%乙醇浸泡5 24小時，超聲處理10 120min，過濾，濾液蒸發(fā)干燥，殘余物用水溶解，過濾，濾液用乙酸乙酯萃取至上層無色，將乙酸乙酯層合并，蒸發(fā)干燥，得到乙酸乙酯粗提物；(2)將步驟⑴所得乙酸乙酯粗提物加載到高速逆流色譜儀(HSCCC)中，用正己烷乙酸乙酯甲醇水(I 4 6 0. 8 I. 2 4 6)的混合物作為HSCCC溶劑系統(tǒng)進(jìn)行分離，收集40 90min的流分；必要時重復(fù)此分離和收集的操作；將所述流分蒸除溶劑，得到頭花寥二次分離原料物；(3)在分液漏斗中，按乙酸乙酯正丁醇0. 008 0. 012mol/L的磷酸氫二鉀溶液=3. 36 5. 04 0. 64 0. 96 5的比例(體積比)配置約1500mL的兩相溶劑系統(tǒng)，靜置分層成上相(固定相)和下相(流動相)，超聲脫氣；(4)采用單線圈、頭接尾的洗脫方式，首先使管路充滿固定相(上相)，主機(jī)正轉(zhuǎn)，然后泵入流動相，待流動相流出，兩相溶劑在柱中達(dá)到平衡狀態(tài)時，取步驟(2)所得頭花寥二次分離原料物，溶于等體積的上下相中，用注射器進(jìn)樣；(5)用紫外檢測器對流分進(jìn)行檢測，檢測波長為250 290nm，同時記錄色譜圖，根據(jù)色譜圖用流分收集器自動收集流分，每3min收集一管；分離時間在270min以上；(6)收集30 40min之間出峰的流分作為流分I, 200 260min之間出峰的流分作為流分II ； (7)分別除去流分I和流分II的溶劑，流分I和流分II分別相應(yīng)地得到組分I和組分II，任選地分別對組分I和組分I進(jìn)一步精制，組分I為短葉蘇木酚，組分II為槲皮苷。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(I)中，所用乙醇是70 90%乙醇，優(yōu)選80%乙醇。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(I)中，乙醇浸泡的時間是8-15小時，例如10-12小時。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(I)中，超聲處理的時間是15-60min，優(yōu)選20_45min,例如約 30min。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(2)中，所述HSCCC溶劑系統(tǒng)是正己烷乙酸乙酯甲醇水(I 4. 5 5. 5 0. 9 I. I 4. 5 5. 5)的混合物，在一個實(shí)施方案中，所述HSCCC溶劑系統(tǒng)是正己烷乙酸乙酯甲醇水(I : 5 : I : 5)的混合物。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(2)中，收集45 80min的流分，優(yōu)選收集53 74min的流分。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(2)中，所述分離和收集的操作重復(fù)2 6次，優(yōu)選重復(fù)3 5次，優(yōu)選重復(fù)4次；并合并所收集的流分。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(3)中，所述兩相溶劑系統(tǒng)的比例為3. 78 4. 62 0.72 0.88 5，優(yōu)選所述兩相溶劑系統(tǒng)的比例為4. 2 : 0. 8 : 5。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(3)中，所述磷酸氫二鉀溶液的濃度為0. 009 0. 011mol/L，優(yōu)選為 0. 01mol/L。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(4)中，主機(jī)正轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速為700 lOOOrpm，優(yōu)選 800 900rpm,優(yōu)選 860rpm。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(4)中，向管路泵入流動相的流速為I 3mL/min,優(yōu)選 L 5 2. 5mL/min,優(yōu)選約 2mL/min。根據(jù)本發(fā)明第一方面的方法，其中步驟(5)中，所述檢測波長為260 280nm，優(yōu)選270 275nm，優(yōu)選 272nm。本發(fā)明第二方面提供了一種監(jiān)測頭花寥制劑(例如熱淋清顆粒制劑)質(zhì)量的方法，該方法包括使用短葉蘇木酚作為對照品，使用高效液相色譜法進(jìn)行檢測，測定該制劑中短葉蘇木酚的含量、或者不同批次制劑中短葉蘇木酚含量的變異、或者每批產(chǎn)品的測定值與均值之間差異。根據(jù)本發(fā)明第二方面的方法，其中所述的高效液相色譜法的色譜條件是使用C18色譜柱，流動相為甲醇和0.2%的磷酸水溶液，梯度洗脫，其中有機(jī)相(甲醇)的梯度比例如下5*% (Omin) 30% (5min) 65% (20min) 65% (24min) 5% (25min) 5%(30min)，檢測波長為272nm。根據(jù)本發(fā)明第二方面的方法，其中所述的高效液相色譜法的色譜條件是使用固定相為 Venusil MP C18 色譜柱(4. 6mmX 250mm, 5 u m, Agela Technologie 公司)，流動相為甲醇和0. 2%的磷酸水溶液，梯度洗脫，其中有機(jī)相的梯度比例如下5% (Omin) 30%(5min) ~ 65% (20min) ~ 65% (24min) ~ 5% (25min) ~ 5% (30min);檢測波長為 272nm， 流速為I. OmL/min,柱溫為室溫，進(jìn)樣量為20 y L。下面對本發(fā)明的各個方面和特點(diǎn)作進(jìn)一步的描述。本發(fā)明所引述的所有文獻(xiàn)，它們的全部內(nèi)容通過引用并入本文，并且如果這些文獻(xiàn)所表達(dá)的含義與本發(fā)明不一致時，以本發(fā)明的表述為準(zhǔn)。此外，本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義，即便如此，本發(fā)明仍然希望在此對這些術(shù)語和短語作更詳盡的說明和解釋，提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。在本發(fā)明中，熱淋清顆粒的原料可以是指以任何方法由中藥材頭花寥提取獲得提取物，該提取物可用于制備熱淋清顆粒劑。在一個實(shí)施方案中，熱淋清顆粒的原料是指頭花寥水提物。在一個實(shí)施方案中，頭花寥水提物由如下制法得到的取頭花寥加水煎煮二次，每次I. 5小時，煎液濾過，濾液合并，濃縮至適量，濾過，噴霧干燥，即得。本發(fā)明的目的在于探索熱淋清顆粒質(zhì)量控制的新方法。本發(fā)明人從熱淋清顆粒的原料頭花寥水提物粉末中，提取、分離并鑒定到一種新成分-短葉蘇木酹(brevifolin),從而為熱淋清顆粒的質(zhì)量控制提供了新方案。在本發(fā)明的一個有益的方法中，應(yīng)用高速逆流色譜法(high-speed counter-current chromatography, HSCCC)對頭花寥水提粉末的乙酸乙酯粗提物進(jìn)行第一步分離(溶劑系統(tǒng)為正己烷乙酸乙酯甲醇水=I : 5 : I : 5)，對所得的流分進(jìn)行二次分離，(溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯正丁醇O.Olmol/L的磷酸氫二鉀溶液4. 2 0.8 5)，上相為固定相，主機(jī)轉(zhuǎn)速為860rpm，流速為2. OmL/min，檢測波長為272nm，進(jìn)樣量為0. 25g。本發(fā)明某些實(shí)施方案可以得到純度為96. 2%和98. 4%的兩種產(chǎn)物，經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定分別為短葉蘇木酹和槲皮苷(quercitrin)。其中短葉蘇木酹為首次從該屬植物中分離得到。本發(fā)明從頭花寥水提粉末中提取分離到短葉蘇木酚；使用的高速逆流色譜法簡便、快速，適合于中藥有效成分的研究和單體的提取制備。


圖I描繪了頭花寥二次分離原料物、HSCCC所得流分I和流分II進(jìn)行HPLC檢測的色譜圖，三種物料所得圖譜分別是圖中的A、B、C。圖2描繪了頭花寥二次分離原料物的高速逆流色譜圖
具體實(shí)施方式
通過下面的實(shí)施例可以對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的描述，然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以對本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。A、試驗(yàn)中使用到的一些儀器知材料Mk5Qui IkPr印500高速逆流色譜儀(英國AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)離柱(管直徑2. 16mm,分離體積120mL, P值為0. 5 0. 8), SeriesII恒流泵(ScientificSystem公司)，STO-lOAvp紫外可見檢測器(蘇州島津儀器公司)，N2000色譜數(shù)據(jù)工作站(浙江大學(xué)智達(dá)信息工程有限公司)。Watersl525高效液相色譜儀，Waters717型自動進(jìn)樣器，2996型二極管陣列檢測器，Empower色譜工作站(美國waters公司)。TSQ型三重四極桿液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國San Jose公司)，F(xiàn)inniganSurveyor MS 泵、Finnigan Surveyor 自動進(jìn)樣器、Xcaliburl. 3 工作站、LC Quan 數(shù)據(jù)處理軟件(美國Thermo Finnigan公司)。電恒溫水浴鍋(廣東省汕頭市醫(yī)用設(shè)備廠)，SY-1000E多用途恒溫超聲提取機(jī)(北京弘祥隆生物技術(shù)開發(fā)有限公司)，DZF-6051SH型真空干燥箱(益恒實(shí)驗(yàn)儀器有限公司),AL204 型電子天平(瑞士 Metter Toledo 公司)，Dragon-med 移液槍(Toppette 公司)，RE-3000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)，Anke TGL-16B離心機(jī)(海安亭科學(xué)儀器廠)。 TENS0R37 紅外光譜儀(德國 Bruker 公司),Bruker AvanceI 11400MHz 核磁共振儀(德國Bruker公司)，LCMS-IT-T0F高分辨質(zhì)譜儀(日本島津公司)。甲醇(色譜純，TEDIA公司)，乙醇(分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)，乙酸乙酯(分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司)，正丁醇(分析純，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司)，醋酸(分析純，廣州化學(xué)試劑廠)，磷酸(分析純，廣州化學(xué)試劑廠)，超純水(PureLab Ultra超純水系統(tǒng),英國ELGA公司)。頭花寥水提物由貴州威門藥業(yè)股份有限公司提供，并且是參照2010年版中國藥典第992頁“熱淋清顆?！表?xiàng)中的制法得到的，即取頭花寥加水煎煮二次，每次I. 5小時，煎液濾過，濾液合并，濃縮至適量，濾過，噴霧干燥，即得，收率10. 07%。實(shí)施例I :頭花蓼水提粉末乙酸乙酯耜提物的制備取頭花寥水提粉末150g，用10倍量的80%乙醇浸泡過夜，超聲萃取30min，過濾，將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，加入150mL水溶解，過濾，濾液用乙酸乙酯萃取至上層無色。將乙酸乙酯層合并，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，得到頭花寥水提粉末乙酸乙酯粗提物(浸膏)12. 7g，密封于干燥器中備用。實(shí)施例2 :頭花蓼二次分離原料物的制備稱取實(shí)施例I所得乙酸乙酯浸膏I. 0g，利用HSCCC溶劑系統(tǒng)正己烷乙酸乙酯甲醇水(I : 5 : I : 5)進(jìn)行分離，收集53min至74min的流分，重復(fù)該操作四次，將所收集的流分合并，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，得到頭花寥二次分離原料物0. 25g。實(shí)施例3 :高效液相色譜法測定試驗(yàn)品的純度
高效液相色譜條件固定相為Venusil MP C18色譜柱(4. 6mmX 250mm, 5 ii m, AgelaTechnologie公司)，流動相為甲醇和0. 2%的磷酸水溶液，梯度洗脫，其中有機(jī)相的梯度比例如下5*% (Omin) 30% (5min) 65% (20min) 65% (24min) 5% (25min) 5%(30min)。檢測波長為272nm，流速為I. OmL/min,柱溫為室溫，進(jìn)樣量為20 u L。用干HPLC純度測定的頭花藜二次分離原料物供試液的制備取實(shí)施例I所得頭花寥水二次分離原料物0. 0150g，加50%甲醇水定容于IOmL容量瓶中，配成濃度為I. 50mg/mL的溶液，超聲30min,經(jīng)0. 45 y m的微孔濾膜濾過,濾液備用。對上述頭花寥二次分離原料物供試液，以及HSCCC所得各流分進(jìn)行檢測，其中產(chǎn)物的純度按面積歸一化法計算，分析的典型HPLC圖見圖I。圖I中的圖A顯示的是頭花寥二次分離原料物以上述HPLC法測試的HPLC圖，圖中顯示I和II兩個色譜峰，其分別對應(yīng)于組分I和組分II。圖I中的圖B顯示的是HSCCC中的流分I以上述HPLC法測試的HPLC圖，圖中基本上僅顯示了組分I的峰。圖I中的圖C顯示的是HSCCC中的流分II以上述HPLC法測試的HPLC圖，圖中基本上僅顯示了組分II的峰。實(shí)施例4 :高速逆流色譜分離條件的選擇根據(jù)高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)選擇的黃金規(guī)則和待分離物質(zhì)的性質(zhì)，本研究考察了多個溶劑系統(tǒng)，根據(jù)分配系數(shù)公式K = CU/CL(CU為上相中待分離物質(zhì)的濃度，CL為下相中 待分離物質(zhì)的濃度)計算其分配系數(shù)K，結(jié)果見表I。表I
權(quán)利要求
1.從熱淋清顆粒的原料例如頭花寥水提物中提取短葉蘇木酚和/或槲皮苷的方法，該方法包括以下步驟 (1)取頭花寥水提物，用60 95%乙醇浸泡5 24小時，超聲處理10 120min，過濾，濾液蒸發(fā)干燥，殘余物用水溶解，過濾，濾液用乙酸乙酯萃取至上層無色，將乙酸乙酯層合并，蒸發(fā)干燥，得到乙酸乙酯粗提物； (2)將步驟(I)所得乙酸乙酯粗提物加載到高速逆流色譜儀(HSCCC)中，用正己烷乙酸乙酯甲醇水(I 4 6 O. 8 I. 2 4 6)的混合物作為HSCCC溶劑系統(tǒng)進(jìn)行分離，收集40 90min的流分；必要時重復(fù)此分離和收集的操作；將所述流分蒸除溶劑，得到頭花寥二次分離原料物； (3)在分液漏斗中，按乙酸乙酯正丁醇O.008 O. 012mol/L的磷酸氫二鉀溶液=3.36 5. 04 O. 64 O. 96 5的比例(體積比)配置約1500mL的兩相溶劑系統(tǒng)，靜置分層成上相(固定相)和下相(流動相)，超聲脫氣； (4)采用單線圈、頭接尾的洗脫方式，首先使管路充滿固定相(上相)，主機(jī)正轉(zhuǎn)，然后泵入流動相，待流動相流出，兩相溶劑在柱中達(dá)到平衡狀態(tài)時，取步驟(2)所得頭花寥二次分離原料物，溶于等體積的上下相中，用注射器進(jìn)樣； (5)用紫外檢測器對流分進(jìn)行檢測，檢測波長為250 290nm，同時記錄色譜圖，根據(jù)色譜圖用流分收集器自動收集流分，每3min收集一管；分離時間在270min以上； (6)收集30 40min之間出峰的流分作為流分I，200 260min之間出峰的流分作為流分II ; (7)分別除去流分I和流分II的溶劑，流分I和流分II分別相應(yīng)地得到組分I和組分II，任選地分別對組分I和組分I進(jìn)一步精制，組分I為短葉蘇木酚，組分II為槲皮苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(I)中，所用乙醇是70 90%乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟⑴中，乙醇浸泡的時間是8-15小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(I)中，超聲處理的時間是15-60min。
5.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(2)中，所述HSCCC溶劑系統(tǒng)是正己烷乙酸乙酉旨甲醇水(I 4. 5 5. 5 O. 9 I. I 4. 5 5. 5)的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(2)中，收集45 80min的流分。
7.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(3)中，所述兩相溶劑系統(tǒng)的比例為3.78 4.62 O. 72 O. 88 5。
8.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(3)中，所述磷酸氫二鉀溶液的濃度為O.009 O.011mol/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(4)中，主機(jī)正轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速為700 lOOOrpm。
10.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(4)中，向管路泵入流動相的流速為I 3mL/min0
11.根據(jù)權(quán)利要求I的方法，其中步驟(5)中，所述檢測波長為260 280nm。
12.監(jiān)測頭花寥制劑例如熱淋清顆粒制劑質(zhì)量的方法，該方法包括使用短葉蘇木酚作為對照品，使用高效液相色譜法進(jìn)行檢測，測定該制劑中短葉蘇木酚的含量、或者不同批次制劑中短葉蘇木酚含量的變異、或者每批產(chǎn)品的測定值與均值之間差異。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述的高效液相色譜法的色譜條件是使用C18色譜柱，流動相為甲醇和O. 2%的磷酸水溶液，梯度洗脫，其中有機(jī)相(甲醇)的梯度比例如下5% (Omin) 30% (5min) 65% (20min) 65% (24min) 5% (25min) 5% (30min),檢測波長為272nm。
14.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述的高效液相色譜法的色譜條件是使用固定相為 Venusil MP C18色譜柱(4. 6mmX 250mm, 5 μ m, AgelaTechnologie 公司)，流動相為甲醇和 .0.2%的磷酸水溶液，梯度洗脫，其中有機(jī)相的梯度比例如下5% (Omin) 30% (5min) .65% (20min) 65% (24min) 5% (25min) 5% (30min);檢測波長為 272nm，流速為.1.OmL/min,柱溫為室溫，進(jìn)樣量為20 μ L。
全文摘要
本發(fā)明涉及從熱淋清顆粒的原料例如頭花蓼水提物中提取短葉蘇木酚和/或槲皮苷的方法，還涉及使用短葉蘇木酚對熱淋清顆粒制劑進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控的方法。本發(fā)明提取短葉蘇木酚和/或槲皮苷的方法中使用高速逆流色譜儀(HSCCC)并且使用正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(1∶4～6∶0.8～1.2∶4～6)的混合物作為HSCCC溶劑系統(tǒng)進(jìn)行分離。本發(fā)明以高純度和高收率從熱淋清顆粒的原料中獲得短葉蘇木酚，并且該成分可作為監(jiān)控頭花蓼制劑例如熱淋清顆粒質(zhì)量的方法中使用的對照品。
文檔編號C07H17/07GK102659549SQ201210092489
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月1日
發(fā)明者萬金志, 劉培慶, 唐靖雯, 張麗艷, 李孟林, 梁斌, 謝宇, 陳欣霞, 黃民 申請人:中山大學(xué), 貴州威門藥業(yè)股份有限公司