專利名稱：一種梫木毒素iv的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥有效部位的提取分離技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種從木藜蘆葉中提取制備稷 木毒素IV的方法。
背景技術(shù)：
稷木毒素IV (Grayanotoxin IV)是ー種ニ職類化合物，分子式為C22H34O6,分子量為394. 51，為白色針晶，mp. 167-168°C，CAS號(hào)30272-17-4。主要存在于杜鵑花科多種植物中，如卡羅利納狹葉山月桂fahia angustifolia var. caroliniana的葉、木藜蘆Leucothoe grayana Maxim. Rf >Rhododendron capi ta turn Maxim.和大坂山杜匿 $Rhododendron dabanshanense Fang et Wang葉。其中以木藜蘆葉的收率最高，達(dá)到0· 09%。現(xiàn)代藥理研究表明，稷木毒素IV具有降壓作用。目前對(duì)稷木毒素IV的研究較少，因此提供ー種簡(jiǎn)便且易于エ業(yè)化生產(chǎn)稷木毒素IV的方法具有重要的意義，為稷木毒素IV的開發(fā)研究奠定了基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種稷木毒素IV的制備方法，該方法快速、簡(jiǎn)
便、產(chǎn)品含量高。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案如下
一種稷木毒素IV的制備方法，其特征在于包括以下步驟
Α.超臨界萃取取木藜蘆葉，經(jīng)粉碎處理，加入超臨界萃取釜中，用丙酮作為夾帶劑，進(jìn)行萃取，得到萃取液；
B.溶劑萃取將萃取液濃縮，回收丙酮，用こ醚萃取多次，合并こ醚萃取液，濃縮得こ
醚浸膏；
C.氧化鎂柱層析將こ醚浸膏與氧化鎂混合烘干，上氧化鎂短程柱層析，正己烷-ニ氯甲烷梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，得粗晶；
D.重結(jié)晶用こ酸こ酷-丙酮混合溶劑重結(jié)晶，得到純度達(dá)95%以上的稷木毒素IV產(chǎn)
品O步驟A所述超臨界CO2萃取條件為萃取釜壓カ為18_35MPa，萃取釜溫度為33-55°C，萃取時(shí)間為2-5h，采用上述參數(shù)進(jìn)行萃取，再經(jīng)解析得到萃取液。步驟C所述氧化鎂短程柱柱徑高比為1:3-5，所述梯度洗脫順序?yàn)榘凑和?ニ氯甲烷體積比2:1、1:1、1:3、1:5進(jìn)行梯度洗脫。本發(fā)明的積極效果在于
1、采用超臨界CO2萃取，環(huán)保無污染，效率高，能耗較低；
2、柱層析前采用溶劑萃取，降低了非目標(biāo)物質(zhì)的濃度和含量，從而減少了后續(xù)柱層析的分離純化的負(fù)擔(dān)，降低了生產(chǎn)成本；
3、氧化鎂短程柱處理量大，再通過重結(jié)晶從而獲得95%以上純度的稷木毒素IV。
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)ー步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
取木藜蘆葉2kg粉碎處理 ，加入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為38°C，萃取壓カ為19MPa，CO2流量為4ml/g生藥/min，保持釜壓、溫度不變，通入200ml丙酮作為夾帶劑，萃取時(shí)間為4h，分離釜溫度為35°C，壓カ為6MPa，收集解析萃取物，減壓回收丙酮，用相當(dāng)于丙酮浸膏2倍量的こ醚萃取4次，收集合并こ醚萃取液，減壓濃縮得こ醚浸膏；將こ醚浸膏與氧化鎂按質(zhì)量比1:1. 5混合烘干，再取新氧化鎂裝柱，將拌樣氧化鎂裝于其上，用正己烷-ニ氯甲烷混合溶劑依次按體積比2:1、I: I、1: 3、1:5進(jìn)行洗脫，收集稷木毒素IV洗脫液，回收試劑，濃縮至小體積，靜置析晶，濾出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶劑重結(jié)晶5次，得產(chǎn)品I. 32g，含量97. 4%。實(shí)施例2:
取木藜蘆葉2kg粉碎處理，加入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為53°C，萃取壓カ為27MPa，CO2流量為3ml/g生藥/min，保持釜壓、溫度不變，通入150ml丙酮作為夾帶劑，萃取時(shí)間為2h，分離釜溫度為42°C，壓カ為4MPa，收集解析萃取物，減壓回收丙酮，用相當(dāng)于丙酮浸膏3倍量的こ醚萃取2次，收集合并こ醚萃取液，減壓濃縮得こ醚浸膏；將こ醚浸膏與氧化鎂按質(zhì)量比1:2混合烘干，再取新氧化鎂裝柱，將拌樣氧化鎂裝于其上，用正己烷- ニ氯甲烷混合溶劑依次按體積比2:1、I: I、1: 3、1:5進(jìn)行洗脫，收集稷木毒素IV洗脫液，回收試劑，濃縮至小體積，靜置析晶，濾出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶劑重結(jié)晶3次，得產(chǎn)品 I. 36g，含量 96. 1%。實(shí)施例3:
取木藜蘆葉2kg粉碎處理，加入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為46°C，萃取壓カ為32MPa，CO2流量為4ml/g生藥/min，保持釜壓、溫度不變，通入160ml丙酮作為夾帶劑，萃取時(shí)間為5h，分離釜溫度為40°C，壓カ為7MPa，收集解析萃取物，減壓回收丙酮，用相當(dāng)于丙酮浸膏4倍量的こ醚萃取3次，收集合并こ醚萃取液，減壓濃縮得こ醚浸膏；將こ醚浸膏與氧化鎂按質(zhì)量比1:1. 5混合烘干，再取新氧化鎂裝柱，將拌樣氧化鎂裝于其上，用正己烷-ニ氯甲烷混合溶劑依次按體積比2:1、I: I、1: 3、1:5進(jìn)行洗脫，收集稷木毒素IV洗脫液，回收試劑，濃縮至小體積，靜置析晶，濾出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶劑重結(jié)晶4次，得產(chǎn)品I. 38g，含量96. 8%。實(shí)施例4:
取木藜蘆葉2kg粉碎處理，加入超臨界CO2萃取釜中，萃取溫度為33°C，萃取壓カ為24MPa，CO2流量為2ml/g生藥/min，保持釜壓、溫度不變，通入180ml丙酮作為夾帶劑，萃取時(shí)間為3h，分離釜溫度為30°C，壓カ為5MPa，收集解析萃取物，減壓回收丙酮，用相當(dāng)于丙酮浸膏3倍量的こ醚萃取4次，收集合并こ醚萃取液，減壓濃縮得こ醚浸膏；將こ醚浸膏與氧化鎂按質(zhì)量比1:1混合烘干，再取新氧化鎂裝柱，將拌樣氧化鎂裝于其上，用正己烷-ニ氯甲烷混合溶劑依次按體積比2:1、I: I、1: 3、1:5進(jìn)行洗脫，收集稷木毒素IV洗脫液，回收試劑，濃縮至小體積，靜置析晶，濾出粗晶，再用こ酸こ酯-丙酮混合溶劑重結(jié)晶2次，得產(chǎn)品 1.40g，含量 95. 7% 。
權(quán)利要求
1.一種稷木毒素IV的制備方法，其特征在于包括以下步驟 A.超臨界萃取取木藜蘆葉，經(jīng)粉碎處理，加入超臨界萃取釜中，用丙酮作為夾帶劑，進(jìn)行萃取，得到萃取液； B.溶劑萃取將萃取液濃縮，回收丙酮，用乙醚萃取多次，合并乙醚萃取液，濃縮得乙醚浸膏； C.氧化鎂柱層析將乙醚浸膏與氧化鎂混合烘干，上氧化鎂短程柱層析，正己烷-二氯甲烷梯度洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，得粗晶； D.重結(jié)晶用乙酸乙酯-丙酮混合溶劑重結(jié)晶，得到純度達(dá)95%以上的稷木毒素IV產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求I所述的一種稷木毒素IV的制備方法，其特征在于步驟A所述超臨界CO2萃取條件為萃取釜壓力為18-35MPa，萃取釜溫度為33_55°C，萃取時(shí)間為2_5h，采用上述參數(shù)進(jìn)行萃取，再經(jīng)解析得到萃取液。
3.如權(quán)利要求I所述的一種稷木毒素IV的制備方法，其特征在于步驟C所述氧化鎂短程柱柱徑高比為1:3-5，所述梯度洗脫順序?yàn)榘凑和?二氯甲烷體積比2:1、I: I、1: 3、1:5進(jìn)行梯度洗脫。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種梫木毒素IV的制備方法，具體是涉及一種采用超臨界CO2萃取技術(shù)對(duì)梫木毒素IV進(jìn)行提取、純化的方法，步驟包括取木藜蘆葉原料粉碎，采用超臨界CO2萃取，丙酮為夾帶劑，收集萃取液，回收丙酮后用乙醚萃取，將乙醚萃取液濃縮所得乙醚浸膏進(jìn)行氧化鎂短程柱層析，正己烷-二氯甲烷梯度洗脫，結(jié)晶。本發(fā)明方法條件溫和，避免了傳統(tǒng)方法局部高溫對(duì)產(chǎn)品活性的不利影響，工藝合理，可實(shí)現(xiàn)快速提取、分離純化，易于工業(yè)化。
文檔編號(hào)C07C69/21GK102659582SQ20121011896
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月23日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司