專利名稱：環(huán)狀核心序列與生物素或穿膜肽相連而成的促黑激素類似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種環(huán)狀核心序列與生物素或穿膜肽相連而成的促黑激素類似物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著生活節(jié)奏的加快，工作壓力的加大，遺傳因素的影響，男女性功能障礙、肥胖癥、色素沉著不足癥都日益凸顯出來，嚴(yán)重影響人們的生活質(zhì)量。其中，肥胖癥是眾所周知的導(dǎo)致動(dòng)脈硬化、高血壓、心臟病、糖尿病等常見疾病的因素之一，而男女性功能障礙和色素沉著不足癥導(dǎo)致的性生活不和諧和皮膚癌等疾病也嚴(yán)重影響到患者的身心健康和家庭幸 H。
目前，治療男性性功能障礙的一線藥物為西地那非等磷酸二脂酶抑制劑，但此類藥物對(duì)女性患者無效，而且部分患者報(bào)道響應(yīng)逐漸消失。治療肥胖癥的藥物也只有少數(shù)幾個(gè),如西布曲明和奧利司他。治療色素沉著不足癥的多肽藥物也少之又少。PT-141和MT-II是兩種目前正在研發(fā)中的對(duì)男女性功能障礙、肥胖癥、色素沉著不足癥有一定療效的多肽類藥物。由于生物細(xì)胞膜的阻擋性，多肽等大分子藥物很難由細(xì)胞膜直接進(jìn)入體內(nèi)，故目前使用的多肽類藥物大多采用注射給藥的給藥方式，而男女性功能障礙、肥胖癥、色素沉著不足癥的治療是長(zhǎng)期的，如能研發(fā)出能經(jīng)粘膜或皮膚給藥的多肽類藥物則可免除患者長(zhǎng)期注射給藥的不便和痛苦。因此，研發(fā)出一種能經(jīng)粘膜或皮膚給藥的用于治療男女性功能障礙、肥胖癥、色素沉著不足癥的多肽類藥物是必須和當(dāng)務(wù)之急的，其具有廣闊的市場(chǎng)前景。a -MSH是一種源于前阿黑皮素(POMC)的線性十三肽。早在20世紀(jì)50年代，人們就發(fā)現(xiàn)對(duì)狗、猴、貓以及兔子等中樞給予a-MSH后能引起其性興奮和食欲抑制，其作用機(jī)理是通過作用于促黑激素受體亞型MC-Rs中MC-3、MC-4受體而產(chǎn)生性行為和食欲抑制調(diào)節(jié)效應(yīng)。后來，人們還發(fā)現(xiàn)對(duì)牛蛙等動(dòng)物給予a-MSH后，其皮膚顏色會(huì)加深，其機(jī)制是通過作用于促黑激素受體亞型MC-Rs中的MC-I受體而產(chǎn)生皮膚色素調(diào)節(jié)效應(yīng)。研究表明，MC-Rs激動(dòng)劑在治療男女性功能障礙、肥胖癥、色素沉著不足癥等方面有潛在的應(yīng)用價(jià)值。a -MSH是一個(gè)線性十三肽，C端含有酰胺結(jié)構(gòu)，N端乙酰化，其一級(jí)結(jié)構(gòu)如下 Ac-Ser-Tyr-Ser-Met-Glu-HiS-Phe-Arg-Trp-Gly-LyS-Pro-Val-NH2 o人們后來研究發(fā)現(xiàn)a -MSH的最小活性序列是His-Phe-Arg-Trp，圍繞著此核心序列，人們?cè)O(shè)計(jì)合成了一系列此類化合物，包括線性肽和環(huán)肽，在治療男女性功能障礙、月巴胖癥、色素沉著不足癥等方面有一定的療效。其中，PT-141、MT-II便是其中的兩種。由于生物細(xì)胞膜的屏障，多肽等大分子不能直接進(jìn)入細(xì)胞，這給許多疾病的治療帶來了困難。細(xì)胞穿膜肽(CPP)是一類能攜帶大分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的短肽，其穿膜能力不依賴經(jīng)典的胞吞作用，也有研究者稱這類短肽為蛋白傳導(dǎo)域(PTD)或特洛伊木馬肽。人們發(fā)現(xiàn)和證實(shí)，人免疫缺損病毒HIV-I的反式激活蛋白TAT能跨膜轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜和細(xì)胞核內(nèi)。人們還發(fā)現(xiàn)HIV-I的TAT蛋白中的一個(gè)富含堿性氨基酸片段，此帶正電荷的多肽片段與蛋白傳導(dǎo)功能密切相關(guān)，稱之為蛋白傳導(dǎo)域。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，全長(zhǎng)86個(gè)氨基酸殘基的TAT蛋白中的第49 - 57殘基組成的序列即可完全行使蛋白傳導(dǎo)的功能，并且無細(xì)胞毒性。這些發(fā)現(xiàn)為研制一種高效、安全的載體，主動(dòng)介導(dǎo)多肽類大分子跨越生物膜屏障提供了廣闊的前景。生物素又稱維生素H，是人體必需維生素之一，有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用，對(duì)白發(fā)、禿發(fā)有一定療效。白發(fā)癥是色素沉著不足癥之一，促黑激素對(duì)其有很強(qiáng)治療作用，將促黑激素環(huán)狀核心序列與生物素創(chuàng)造性的結(jié)合在一起，在使毛發(fā)變黑的同時(shí)又能促進(jìn)其生長(zhǎng)，這是本發(fā)明在醫(yī)藥或化妝品領(lǐng)域的一種創(chuàng)新。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種促黑激素類似物及其制備方法和應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取了如下技術(shù)方案
一種促黑激素類似物，其多肽結(jié)構(gòu)(包括所有的對(duì)映體、非對(duì)映體、立體異構(gòu)體等)如下X-Z_Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-Y 和其無生理毒性的鹽，其中，
X=生物素?；驘o，
Z=Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg 或 Arg-Arg-Arg 或無，
Y=NH2 或 0H,
C=環(huán)肽，
當(dāng)X=生物素酰基時(shí)，Z=無；
當(dāng) Z=Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg 或 Arg-Arg-Arg 時(shí)，X=無；
X、Z不能同時(shí)為無；
無生理毒性的鹽是指可保留母體化合物預(yù)期生理活性而不會(huì)產(chǎn)生任何意料之外毒副作用的鹽，具體可以為鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、蘋果酸鹽、苯甲酸鹽、海藻酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋰鹽、鋅鹽、銅鹽、鋇鹽或鈣鹽。所述的促黑激素類似物，其多肽結(jié)構(gòu)為下述六種時(shí)，療效尤其好
Biotin-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -NH2 和其無生理毒性的鹽、 Biotin-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -OH 和其無生理毒性的鹽、 Arg-Arg-Arg-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -NH2 和其無生理毒性的鹽、 Arg-Arg-Arg-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -OH 和其無生理毒性的鹽、 Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Arg-c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-
NH2和其無生理毒性的鹽或
Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Arg-c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-OH和其無生理毒性的鹽；其中，Biotin=D-(+)生物素?；?，Dab= (L) 2，4 二氨基丁酸殘基，D-Phe=右旋苯丙氨酸殘基(結(jié)構(gòu)式如下)。
權(quán)利要求
1.一種促黑激素類似物，其特征在于，其多肽結(jié)構(gòu)如下X-Z-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-Y 和其無生理毒性的鹽，其中， X=生物素酰基或無，Z=Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg 現(xiàn) Arg-Arg-Arg 或元，Y=NH2 或 OH, C=環(huán)肽， 當(dāng)X=生物素酰基吋，Z=無；當(dāng) Z=Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg 或 Arg-Arg-Arg 時(shí)，X=無； X、Z不能同時(shí)為無； 無生理毒性的鹽為鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、こ酸鹽、三氟こ酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、蘋果酸鹽、苯甲酸鹽、海藻酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋰鹽、鋅鹽、銅鹽、鋇鹽或鈣鹽。
2.如權(quán)利要求I所述的促黑激素類似物，其特征在于，其多肽結(jié)構(gòu)為 Biotin-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -NH2 和其無生通韋性的鹽、 Biotin-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -OH 和其無生通韋性的鹽、 Arg-Arg-Arg-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) - NH2 和其無生通韋性的鹽、 Arg-Arg-Arg-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys) -OH 和其無生通韋性的鹽、Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Ar g-GIn-Arg-Ar g-Arg-Arg-c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)_NH2和其無生理毒性的鹽或Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Ar g-GIn-Arg-Arg-Arg-Arg-c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)_OH和其無生理毒性的鹽；其中， Biotin=D-(+)生物素酰基， Dab= (L) 2，4 ニ氨基丁酸殘基， D-Phe=右旋苯丙氨酸殘基。
3.如權(quán)利要求2所述的促黑激素類似物，其特征在于，所述無生理毒性的鹽為こ酸鹽。
4.權(quán)利要求I或2所述促黑激素類似物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟先在固相樹脂上制備出未與固相樹脂裂解的、未脫側(cè)鏈保護(hù)基的功能單位氨基酸序列，然后在固相樹脂上將功能單位氨基酸序列的N末端進(jìn)行生物素?；?、或者繼續(xù)將負(fù)載單位氨基酸序列中的氨基酸殘基依次從C端到N端分別與功能單位氨基酸序列的N末端連接，在脫除最后ー個(gè)氨基酸殘基的N端保護(hù)基后經(jīng)裂解、純化、干燥成肽；N端生物素?；陌δ軉挝话被嵝蛄械墓滔鄻渲惨?jīng)裂解、純化、干燥成肽的步驟；其中， 功能單位氨基酸序列為Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)； 負(fù)載單位氨基酸序列為Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln_Arg-Arg-Arg 或Arg-Arg-Arg0
5.權(quán)利要求I或2所述促黑激素類似物在制備用于治療男性勃起功能障礙、女性性欲低下、肥胖癥或色素沉著不足癥藥物中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求5所述促黑激素類似物在制備用于治療男性勃起功能障礙、女性性欲低下、肥胖癥或色素沉著不足癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于，促黑激素類似物的給藥方式為粘膜給藥、皮膚給藥或注射給藥。
7.權(quán)利要求5所述促黑激素類似物在制備用于治療男性勃起功能障礙、女性性欲低下、肥胖癥或色素沉著不足癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物中含有具有下述結(jié)構(gòu)的多肽成分中的至少ー種以及可藥用載體或賦形劑Biotin-Arg-c (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-NH2ΛBiotin-Arg-c (Asp-Dab-D-Pne-Arg-Trp-Lys) -OH、Arg-Arg-Arg-Arg-c(Asp-DaD-D-Phe-Arg-Trp-Lys) _NH。、Arg-Arg-Arg-Arg-c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)-OH、Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Arg-C (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)_NH2或Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg-Arg-C (Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)_OH0
8.權(quán)利要求I或2所述促黑激素類似物在制備促黑激素MC-Rs激動(dòng)劑中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求8所述促黑激素類似物在制備促黑激素MC-Rs激動(dòng)劑中的應(yīng)用，其特征在于，所述MC-Rs指MC-I受體、MC-3受體、MC-4受體或MC-5受體。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種環(huán)狀核心序列與生物素或穿膜肽相連而成的促黑激素類似物及其制備方法和應(yīng)用，所述促黑激素類似物由功能單位與生物素或負(fù)載單位相連而成；其功能單位是由環(huán)狀核心序列c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)與連接單位Arg連接構(gòu)成的七肽結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)為Arg-c(Asp-Dab-D-Phe-Arg-Trp-Lys)，其負(fù)載單位是HIV-1TAT蛋白的第47-60片段中的第48-57多肽片段Gly-Arg-Lys-Lys-Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Arg或第55-57多肽片段Arg-Arg-Arg。本發(fā)明的促黑激素類似物可透過粘膜或皮膚吸入，可用于男女性功能障礙、肥胖癥、色素沉著不足癥等疾病的治療。
文檔編號(hào)C07K7/64GK102702330SQ20121021801
公開日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月1日
發(fā)明者張嘎 申請(qǐng)人:張嘎