專利名稱：生物酶法制備低聚原花青素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物酶法制備低聚原花青素的方法。
背景技術(shù)：
葡萄籽中的低聚原花青素是天然的消除活性氧自由基的抗氧化類功能因子，可應(yīng)用于保健食品、藥品、化妝品中等領(lǐng)域。低聚原花青素擁有強有力的抗氧化、清除自由基能カ和對人體微循環(huán)特殊改善的雙重功效，以高效、低毒、高生物利用率而著稱。據(jù)資料報道，在體內(nèi)其抗氧化能力是VE的50倍，VC的20倍。近10年來在北美保健食品業(yè)和化妝品業(yè)得到了廣泛應(yīng)用。常用的原花青素提取方法有索氏提取，溶劑浸提等。索氏提取，提取時間長，而且很難放大；溶劑浸提存在提取時間長、溫度高、嚴重影響制品原花青素的組成。中國專利ZL03137933. 8公開了葡萄籽低聚原花青素的提取方法，它采用有機溶劑提取石油醚精制得到含量為60%以上的低聚原花青素。生物酶法提取作為ー種優(yōu)良的提取方法，具有操作簡便快捷、緑色無污染等特點，目前已廣泛應(yīng)用在生物活性物質(zhì)的提取方面，目前尚未有用生物酶法提取原花青素的報道，

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供ー種生物酶法制備低聚原花青素的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟(I)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過80-100目篩，篩下物加6-22質(zhì)量倍的用酸調(diào)節(jié)pH=3-6的凈化軟化水,得混合液；(2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0.2-1%，在35_50°C酶解30-120min ;所述酶為質(zhì)量比I :0_0. 8的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶；(3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5X103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分尚液；(4)將步驟(3)獲得的分離液濃縮和干燥，得到質(zhì)量含量為95%以上的低聚原花青素。所述步驟(I)優(yōu)選的是以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過90目篩，篩下物加10-15質(zhì)量倍的用酸調(diào)節(jié)pH=4-5的凈化軟化水，得混合液。所述步驟(2)優(yōu)選的是向混合液中加入酶,使混合液中酶的質(zhì)量含量為0. 5%,在40-45°C酶解60-80min ;所述酶為質(zhì)量比I :0. 3-0. 5的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶。所述酸為醋酸、磷酸、鹽酸或硫酸。本發(fā)明的優(yōu)點是I.本發(fā)明的方法操作簡便快捷、綠色無污染、易于エ業(yè)化。、
2.使用采用膜震動過濾系統(tǒng)制備低聚原花青素，解決了靜態(tài)膜過濾法易堵塞、清洗困難的缺陷，延長了膜的使用壽命。3.本發(fā)明的方法提取的低聚原花青素含量高。
具體實施例方式本發(fā)明涉及的脫脂后餅柏是指葡萄籽提取葡萄油脂后的物質(zhì)。下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進ー步的說明
實施例I生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟(I)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過90目篩，篩下物加13質(zhì)量倍的用醋酸調(diào)節(jié)pH=4的凈化軟化水，得混合液；(2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0. 5%，在43°C酶解70min ;所述酶為質(zhì)量比I :0. 5的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶；(3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5X103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分尚液；(4)將步驟(3)獲得的分離液經(jīng)蒸發(fā)器濃縮和噴霧干燥，得到質(zhì)量含量為95. 3%的低聚原花青素。實施例2生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟(I)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過90目篩，篩下物加10質(zhì)量倍的用磷酸調(diào)節(jié)pH=4的凈化軟化水，得混合液；(2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0. 3%，在45°C酶解80min ;所述酶為組織蛋白酶；(3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5X103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分尚液；(4)將步驟(3)獲得的分離液經(jīng)蒸發(fā)器濃縮和噴霧干燥，得到質(zhì)量含量為96. 1%的低聚原花青素。實施例3生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟(I)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過90目篩，篩下物加15質(zhì)量倍的用鹽酸調(diào)節(jié)pH=5的凈化軟化水，得混合液；(2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0. 7%，在40°C酶解60min ;所述酶為質(zhì)量比I :0. 8的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶；(3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5X103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分尚液；(4)將步驟(3)獲得的分離液經(jīng)蒸發(fā)器濃縮和噴霧干燥，得到質(zhì)量含量為95. 9%的低聚原花青素。實施例4生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟
(I)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過80目篩，篩下物加6質(zhì)量倍的用硫酸調(diào)節(jié)pH=3的凈化軟化水，得混合液；(2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0. 2%，在50°C酶解120min ;所述酶為質(zhì)量比I :0. 3的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶；(3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5X103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分尚液；(4)將步驟(3)獲得的分離液經(jīng)蒸發(fā)器濃縮和噴霧干燥，得到質(zhì)量含量為97. 2%的低聚原花青素。實施例5生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟(I)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過100目篩，篩下物加22質(zhì)量倍的用醋酸調(diào)節(jié)pH=6的凈化軟化水，得混合液；(2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為1%，在35°C酶解30min ;所述酶為質(zhì)量比I :0. 6的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶；(3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5X103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分尚液；(4)將步驟(3)獲得的分離液經(jīng)濃縮和干燥，得到質(zhì)量含量為97. 5%的低聚原花青
素。權(quán)利要求
1.生物酶法制備低聚原花青素的方法，其特征包括如下步驟 (1)以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過80-100目篩，篩下物加6-22質(zhì)量倍的用酸調(diào)節(jié)pH=3-6的凈化軟化水，得混合液； (2)向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0.2-1%，在35-50°C酶解30-120min ;所述酶為質(zhì)量比I :0_0. 8的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶； (3)采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5XIO3的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分離液； (4)將步驟(3)獲得的分離液濃縮和干燥，得到質(zhì)量含量為95%以上的低聚原花青素。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種生物酶法制備低聚原花青素的方法，其特征是所述步驟(1)為以葡萄籽脫脂后餅柏為原料，過90目篩，篩下物加10-15質(zhì)量倍的用酸調(diào)節(jié)pH=4-5的凈化軟化水，得混合液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種生物酶法制備低聚原花青素的方法，其特征是所述步驟(2)為向混合液中加入酶，使混合液中酶的質(zhì)量含量為0.5%，在40-45°C酶解60-80min ;所述酶為質(zhì)量比I :0. 3-0. 5的組織蛋白酶和木瓜蛋白酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的ー種生物酶法制備低聚原花青素的方法，其特征是所述酸為醋酸、磷酸、鹽酸或硫酸。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種生物酶法制備低聚原花青素的方法，包括如下步驟以葡萄籽脫脂后餅粕為原料，過篩，篩下物加用酸調(diào)節(jié)pH的凈化軟化水，得混合液；向混合液中加入酶，酶解；采用膜震動過濾系統(tǒng)，收集能通過截留分子量為5×103的微濾膜但不能通過分子量為300的納濾膜的分離液；將分離液濃縮和干燥，得到質(zhì)量含量為95%以上的低聚原花青素。本發(fā)明的方法操作簡便快捷、綠色無污染、易于工業(yè)化。使用采用膜震動過濾系統(tǒng)制備低聚原花青素，解決了靜態(tài)膜過濾法易堵塞、清洗困難的缺陷，延長了膜的使用壽命。本發(fā)明的方法提取的低聚原花青素含量高。
文檔編號C07D311/62GK102746267SQ20121025901
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月24日
發(fā)明者張衛(wèi)軍, 王如 申請人:晨光生物科技集團天津有限公司