專利名稱：一種斯氏木堿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，具體是涉及一種應(yīng)用高速逆流色譜技術(shù)從威廉斯氏木中純化斯氏木堿的方法。
背景技術(shù)：
斯氏木堿(Sickingine)是從菌草科植物染料斯氏木tinctoria (HBK)Schum.及威廉斯氏木williamsii Standi.植物中分離得到的一種卩引哚類生物堿，呈淡黃色無定形粉末轉(zhuǎn)，mp. 136-138 。現(xiàn)代藥理研究表明，斯氏木堿具有抑制回腸收縮作用，可抑制膝鼠尚體回腸由點(diǎn)刺激引起的收縮，ED5tl為100 μ M。現(xiàn)有提取斯氏木堿的報(bào)道并不多見，市場上也尚未有斯氏木堿對照品的出售，因此提供一種斯氏木堿的制備方法則很有必要，可以為其后續(xù)研究提供支持。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種斯氏木堿的制備方法，該方法制得的斯氏木堿質(zhì)量好，
純度高。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟
(1)提取將威廉斯氏木藥材粉碎，加入5 12倍量的乙醇水溶液液回流或滲漉提取廣2次，每次O. 5^5h,合并得提取液；
(2)除雜將上述提取液濃縮至小體積，加入2飛倍量質(zhì)量百分比濃度為1%的鹽酸水溶液溶解，過濾，再加入堿液將稀釋液調(diào)至pHfll，加等體積量的二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑得威廉斯氏木總生物堿；
(3 )純化將上述威廉斯氏木總生物堿采用高速逆流色譜法分離純化，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為80(T900r/min，流速為I. 5 5. Oml/min，收集流出液，回收試劑，真空干燥得產(chǎn)品。步驟(I)所述乙醇液為體積百分比濃度為6(Γ80%的乙醇水溶液。步驟(2)所述提取液濃縮至密度I. 2^1. 6g/ml。步驟(2)所述堿性溶液為2 5mol/L的氨水溶液。步驟(3)所述高速逆流色譜法采用的溶劑系統(tǒng)是二氯甲烷-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液(5-9:15-17:5-8)。步驟(3)所述溶劑系統(tǒng)制備方法為將氯仿-甲醇-PH3. 3磷酸鹽緩沖液按上述比例量取，混合均勻后靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總生物堿用下相溶解。本發(fā)明的有益效果是采用高速逆流色譜法純化，樣品損失少，得率高。
具體實(shí)施例方式
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
實(shí)施例I :
取威廉斯氏木全植物10kg，粉碎，加入50L60%乙醇回流提取2次，每次O. 5h，合并提取液，濃縮至密度I. 5g/ml，加入2倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入2mol/L氨水調(diào)至pH9. 2，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液按(5:13:6)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以I. 5ml/min流速泵入流動相，并通過進(jìn)樣閥連續(xù)進(jìn)樣，控制轉(zhuǎn)速為800r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿I. 45g，檢測含量
94.4%ο實(shí)施例2: 取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入240L70%乙醇滲漉提取2次，每次5h，合并提取液，濃縮至密度I. 6g/ml，加入3倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入4mol/L氨水調(diào)至PHlI. 0，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液按(6:17:5)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以3. 5ml/min流速泵入流動相，并通過進(jìn)樣閥連續(xù)進(jìn)樣，控制轉(zhuǎn)速為920r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿2. 81g，檢測含量96. 2%ο實(shí)施例3:
取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入160L80%乙醇回流提取I次，提取3h，合并提取液，濃縮至密度I. 2g/ml，加入5倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入5mol/L氨水調(diào)至ρΗΙΟ. 3，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3. 3磷酸鹽緩沖液按(9:16:8)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以5ml/min流速泵入流動相，并通過進(jìn)樣閥連續(xù)進(jìn)樣，控制轉(zhuǎn)速為1000r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿3. 46g，檢測含量93. 7%。實(shí)施例4:
取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入138L65%乙醇回流提取2次，提取2. 5h，合并提取液，濃縮至密度I. 4g/ml，加入3倍量1%鹽酸溶液稀釋，濾除沉淀后，加入2mol/L氨水調(diào)至ρΗΙΟ. 6，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑，得威廉斯氏木總堿。取氯仿-甲醇-pH3.3磷酸鹽緩沖液按(8:15:7)體積比置于分液漏斗中，混勻后，靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總堿用下相溶解，開啟制備型高速逆流色譜儀，先將固定相泵入色譜柱中，再以2. 2ml/min流速泵入流動相，并通過進(jìn)樣閥連續(xù)進(jìn)樣，控制轉(zhuǎn)速為850r/min，收集流出液，濃縮，干燥得斯氏木堿3. 43g，檢測含量
95.3%。
權(quán)利要求
1.一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟 (1)提取將威廉斯氏木藥材粉碎，加入5 12倍量的乙醇水溶液液回流或滲漉提取廣2次，每次O. 5^5h,合并得提取液； (2)除雜將上述提取液濃縮至小體積，加入2飛倍量質(zhì)量百分比濃度為1%的鹽酸水溶液溶解，過濾，再加入堿液將稀釋液調(diào)至pHfll，加等體積量的二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑得威廉斯氏木總生物堿； (3 )純化將上述威廉斯氏木總生物堿采用高速逆流色譜法分離純化，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為80(T900r/min，流速為I. 5^5. Oml/min，收集流出液，回收試劑，真空干燥得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(I)所述乙醇液為體積百分比濃度為6(Γ80%的乙醇水溶液。
3.如權(quán)利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(2)所述提取液濃 縮至密度1.2 L6g/ml。
4.如權(quán)利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(2)所述堿性溶液為2飛mol/L的氨水溶液。
5.如權(quán)利要求I所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(3)所述高速逆流色譜法采用的溶劑系統(tǒng)是二氯甲烷-甲醇_pH3. 3磷酸鹽緩沖液(5-9:15-17:5-8)。
6.如權(quán)利要求5所述的一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于步驟(3)所述溶劑系統(tǒng)制備方法為將氯仿-甲醇-PH3. 3磷酸鹽緩沖液按上述比例量取，混合均勻后靜置，放出上層作為固定相，下層作為流動相，將威廉斯氏木總生物堿用下相溶解。
全文摘要
本發(fā)明提供一種斯氏木堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟(1)將威廉斯氏木藥材粉碎，用乙醇水溶液采用回流或滲漉法提取，提取液濃縮至小體積，加鹽酸溶解，濾除不溶物，再將酸液調(diào)至堿性，用二氯甲烷萃取，萃取液回收試劑得總生物堿；(2)將上述總生物堿采用高速逆流色譜法分離純化得斯氏木堿。本方法具有所得產(chǎn)品含量高，操作簡單，提率高等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號C07H1/08GK102875616SQ20121035991
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月25日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司