專利名稱：一種蒲包花苷b的分離制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是一種通過膜分離和制備型高效液相色譜技術(shù)分離制備蒲包花苷B的方法。
背景技術(shù)：
蒲包花苷B為苯丙素苷類化合物，呈無定形粉末狀，分子式為C23H26O11,分子量為478.45。分子結(jié)構(gòu)式為
O
J I_iCfl I°
CHrW"0H
1 、_蒲包花苷B主要存在于苦苣苔科、茶茱萸科、木犀科、車前科、薔薇科及玄參科等多種植物中。現(xiàn)代藥理研究表明，蒲包花苷B具有抗脂質(zhì)過氧化作用，動物實(shí)驗(yàn)表明，蒲包花苷對于大鼠肝微粒體中，由ADP+NADPH誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化的IC5tl為O. 40 μ Μ。目前尚未見蒲包花苷B工業(yè)分離制備方法的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種環(huán)保無污染、產(chǎn)品純度高，可以大規(guī)模生產(chǎn)的蒲包花苷B的分離制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用技術(shù)方案為
一種蒲包花苷B的分離制備方法，其特征在于
(O提取取富含蒲包花苷B的藥材，加入藥材重量6-15倍的沸水浸提3次，每次1.5-2. 5h，合并浸提液；
(2)大孔樹脂柱層析將浸提液上樣于非極性大孔吸附樹脂柱，依次用蒸餾水和30-70%乙醇洗脫，收集洗脫液；
(3)膜分離將洗脫液濃縮回收乙醇，經(jīng)高速離心機(jī)離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統(tǒng)過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；
(4)制備型高效液相色譜分離以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以甲醇一7jC為流動相，梯度洗脫，紫外在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B。步驟(I)中所述富含蒲包花苷B的藥材可以是苦苣苔科植物喜蔭花全植物、木犀科植物水蠟樹的根或車前地上部分。步驟(4)中所述甲醇一水流動相中甲醇的體積百分比為30-80%。其特征在于步驟(4)中所述紫外在線監(jiān)測波長為215nm。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明采用膜分離技術(shù)，提高了產(chǎn)品含量，且能耗低，采用制備液相色譜法分離純化，分離度高，產(chǎn)品純度高，能夠?qū)崿F(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例I:
將喜蔭花全株粉碎，稱取3kg，加入30kg沸水浸提3次，每次I. 5h，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于HPD100型大孔樹脂柱，依次用蒸餾水和70%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮回收乙醇，經(jīng)高速離心機(jī)離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統(tǒng)過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以30-80%甲醇一水為流動相，梯度洗脫，取O. 5g膜分離組分用IOml無水甲醇溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測，波長為215nm，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B，含量95. 3% (高效液相檢測)，提率為70. 8%。實(shí)施例2: 將水蠟樹的根粉碎，稱取5kg，加入30kg沸水浸提3次，每次2h，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于HPD100型大孔樹脂柱，依次用蒸餾水和50%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮回收乙醇，經(jīng)高速離心機(jī)離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統(tǒng)過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以30-80%甲醇一水為流動相，梯度洗脫，取Ig膜分離組分用20ml無水甲醇溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測，波長為215nm，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B，含量97. 8% (高效液相檢測)，提率為72. 6%。實(shí)施例3:
將車前草地上部分粉碎，稱取5kg，加入75kg沸水浸提3次，每次2. 5h，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于HPD100型大孔樹脂柱，依次用蒸餾水和30%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮回收乙醇，經(jīng)高速離心機(jī)離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統(tǒng)過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以30-80%甲醇一水為流動相，梯度洗脫，將O. 5g膜分離組分用20ml無水甲醇溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測，波長為215nm，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B，含量95. 3% (高效液相檢測)，提率為76. 4%。
權(quán)利要求
1.一種蒲包花苷B的分離制備方法，其特征在于 (O提取取富含蒲包花苷B的藥材，加入藥材重量6-15倍的沸水浸提3次，每次1.5-2. 5h，合并浸提液； (2)大孔樹脂柱層析將浸提液上樣于非極性大孔吸附樹脂柱，依次用蒸餾水和30-70%乙醇洗脫，收集洗脫液； (3)膜分離將洗脫液濃縮回收乙醇，經(jīng)高速離心機(jī)離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統(tǒng)過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分； (4)制備型高效液相色譜分離以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以甲醇一7jC為流動相，梯度洗脫，紫外在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B。
2..根據(jù)權(quán)利要求I所述蒲包花苷B的分離制備方法，其特征在于步驟(I)中所述富含 蒲包花苷B的藥材可以是苦苣苔科植物喜蔭花全植物、木犀科植物水蠟樹的根或車前地上部分。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述蒲包花苷B的分離制備方法，其特征在于步驟(4)中所述甲醇一水流動相中甲醇的體積百分比為30-80%。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述蒲包花苷B的分離制備方法，其特征在于步驟(4)中所述紫外在線監(jiān)測波長為215nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蒲包花苷B的分離制備方法，將富含蒲包花苷B的藥材粉碎后，加沸水浸提3次，每次1.5-2.5h，合并浸提液，通過大孔樹脂柱層析，乙醇水溶液洗脫，收集液濃縮回收乙醇，濃縮液進(jìn)過高速離心機(jī)過濾，濾液通過膜分離機(jī)分離，得到的組分再經(jīng)制備液相色譜分離制備，以醇水體系梯度洗脫，合并富含蒲包花苷B的洗脫液，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B。本發(fā)明工藝穩(wěn)定，產(chǎn)品含量高，適用于分離制備高純度的蒲包花苷B。
文檔編號C07H1/08GK102863482SQ20121036004
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月25日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司