專利名稱：一種全能花堿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種全能花堿的制備方法，特別是涉及一種閃式提取全能花堿的方 法。
背景技術(shù)：
全能花堿(Pancratistatin),分子式C14H15NO8,分子量325. 27。全能花堿是從石蒜科全能花屬植物濱生全能花littorale Jacq.的鱗莖中提取分離的一種生物堿類化合物。實(shí)驗(yàn)研究表明，全能花堿具有1.細(xì)胞毒活性。對鼠P388非常有效，其ED5tl (體夕卜)為O. 01 μ g/ml ;體內(nèi)在O. 75-12. 5mg/kg時(shí)，延命率38%_106%，對鼠卵巢肉瘤M-5076也有效。2.抗RNA病毒活性。對感染乙腦小鼠注射本品后，存活率增加100%，對黃熱病病毒和本雅病毒(bunyaviruses)也有效。3.植物生長抑制劑。抑制種子發(fā)芽和植物根的生長。4.抗腫瘤活性。最敏感為黑素瘤株，其次為腦、結(jié)腸、肺、腎腫瘤。目前，國內(nèi)尚未見全能花堿的提取純化方法方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種全能花堿的制備方法，該方法工藝簡單、快速、重現(xiàn)性好。易于產(chǎn)業(yè)化放大。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
一種全能花堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟
(1)取濱生全能花干燥鱗莖，用1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入閃式提取器中，以85-95%乙醇溶液為提取溶劑，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液；
(2)上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮；
(3)將上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集全能花堿組分，將洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得產(chǎn)品。所述步驟(I)中閃式提取電壓為140-160V，提取時(shí)間為90s-120S。所述步驟(2)中氧化鋁為80-100目，氯仿-丙酮體積比為1:1，用量為柱體積的4-8 倍。所述步驟(3)中制備型液相色譜的流動(dòng)相為乙腈-O. 2%乙二胺水溶液，體積比為45 :55，紫外檢測波長為278nm。本發(fā)明的特點(diǎn)是采用閃式提取、柱層析與制備型液相色譜法相結(jié)合技術(shù)制備全能花堿，高效節(jié)能，生產(chǎn)周期短，易于產(chǎn)業(yè)化。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。實(shí)施例I :取濱生全能花干燥鱗莖200g，用1%氨水浸泡4h，晾干，加入閃式提取器中，以90%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為140V，提取時(shí)間為90s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁(100目)拌勻、干燥后裝柱，用7倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進(jìn)樣，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液為流動(dòng)相，體積比為45 55,色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m,柱長為15cm、直徑為4cm,六通閥進(jìn)樣,進(jìn)樣體積為25ml,控制流速為50ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為278nm，收集目標(biāo)成分，減壓回收試劑得全能花堿42mg，經(jīng)HPLC檢測，純度76. 5%。實(shí)施例2:
取濱生全能花干燥鱗莖500g，用1%氨水浸泡5h，晾干，加入閃式提取器中，以90%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為150V，提取時(shí)間為100s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁(100目)拌勻、干燥后裝柱，用8倍柱體積 的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進(jìn)樣，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液為流動(dòng)相，體積比為45 :55，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m,柱長為15cm、直徑為4cm,六通閥進(jìn)樣,進(jìn)樣體積為25ml,控制流速為50ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為278nm，收集目標(biāo)成分，減壓回收試劑得全能花堿97mg，經(jīng)HPLC檢測，純度79. 4%。實(shí)施例3:
取濱生全能花干燥鱗莖500g，用1%氨水浸泡2h，晾干，加入閃式提取器中，以85%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為140V，提取時(shí)間為120s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁(80目)拌勻、干燥后裝柱，用6倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進(jìn)樣，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液為流動(dòng)相，體積比為45 :55，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m,柱長為25cm、直徑為4cm,六通閥進(jìn)樣,進(jìn)樣體積為20ml,控制流速為20ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為278nm，收集目標(biāo)成分，減壓回收試劑得全能花堿88mg，經(jīng)HPLC檢測，純度78. 7%。實(shí)施例4:
取濱生全能花干燥鱗莖500g，用1%氨水浸泡6h，晾干，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為160V，提取時(shí)間為90s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁(100目)拌勻、干燥后裝柱，用4倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經(jīng)O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進(jìn)樣，以乙腈-O. 2%乙二胺水溶液為流動(dòng)相，體積比為45 :55，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m,柱長為50cm、直徑為5cm,六通閥進(jìn)樣,進(jìn)樣體積為50ml,控制流速為150ml/min,紫外在線檢測，檢測波長為278nm，收集目標(biāo)成分，減壓回收試劑得全能花堿96mg，經(jīng)HPLC檢測，純度83. 2%。
權(quán)利要求
1.一種全能花堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟 (1)取濱生全能花干燥鱗莖，用1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入閃式提取器中，以85-95%乙醇溶液為提取溶劑，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液； (2)上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮； (3)將上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集全能花堿組分，將洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，干燥即得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求I所述一種全能花堿的制備方法，其特征在于所述步驟(I)中閃式提取電壓為140-160V，提取時(shí)間為90s-120s。
3.如權(quán)利要求I所述一種全能花堿的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中氧化鋁為 80-100目，氯仿-丙酮體積比為I: I，用量為柱體積的4-8倍。
4.如權(quán)利要求I所述一種全能花堿的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中制備型液相色譜的流動(dòng)相為乙腈-O. 2%乙二胺水溶液，體積比為45 :55，紫外檢測波長為278nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及了一種全能花堿的制備方法，方法步驟是(1)取濱生全能花干燥鱗莖，用飽和1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入閃式提取器中，以85-95%乙醇溶液為提取溶劑，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液；(2)將提取液濃縮，經(jīng)氧化鋁柱層析；(3)制備型液相色譜分離得到全能花堿。該方法具有快速安全高效節(jié)能、不破壞有效成分等特點(diǎn)，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D491/056GK102850362SQ20121036897
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月27日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司