專利名稱：一種酶法制備滸苔葉綠素的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種葉綠素的制備工藝，具體涉及一種酶法制備滸苔葉綠素的工藝。
背景技術(shù)：
市場上的葉綠素包括天然色素和合成色素。合成色素主要來自于化工原料，發(fā)色物質(zhì)多含有苯環(huán)、萘環(huán)等基團，攝入一定量會對人體產(chǎn)生危害，甚至?xí)露?、致癌和致畸；天然色素是從動物、植物或微生物的組織中提取得到的有色物質(zhì)，色澤自然，更重要的是無毒副作用，因而倍受消費者的歡迎。 受工業(yè)廢水以及生活污水排放的影響，海水的富營養(yǎng)化日趨加重，因此滸苔暴發(fā)也越來越頻繁，越來越嚴(yán)重。而目前滸苔資源缺乏有效利用的方法，資源浪費嚴(yán)重，且打撈出來的滸苔一旦得不到及時的處理，會造成嚴(yán)重的環(huán)境污染，因此如何快速將滸苔處理掉，減輕污染，已成為環(huán)境保護(hù)的重大課題。而目前國內(nèi)外并無從滸苔中提取葉綠素的報道，因此，如果能研究一種從滸苔中提取葉綠素的方法，不僅可以減輕環(huán)境污染，還可以降低目前葉綠素生產(chǎn)的成本。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對目前滸苔資源缺乏有效利用的方法，資源浪費嚴(yán)重，且打撈出來的滸苔一旦得不到及時的處理，會造成嚴(yán)重的環(huán)境污染的現(xiàn)狀，本發(fā)明提供一種酶法制備滸苔葉綠素的工藝。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)一種酶法制備滸苔葉綠素的工藝，包括以下步驟
(1)將滸苔浙干、加入10倍滸苔重量的質(zhì)量濃度為0.04% 0. 06%的硫酸銅溶液浸泡穩(wěn)定葉綠素，4 6小時后用清水洗去滸苔上的硫酸銅，然后烘干、絞碎細(xì)化；
(2)取滸苔細(xì)粉，加入I倍重量的蒸餾水混勻，加入1/20重量的纖維素酶和幾丁質(zhì)酶酶解；
(3)酶解結(jié)束后，100°C加熱滅酶活，加入2倍體積、質(zhì)量濃度為90%的乙醇容易反復(fù)浸泡提取兩次，浸泡時間為24 36小時，把2次浸取提取液合并在一起；
(4)向提取液中加入硫酸銨，沉淀滸苔葉綠素，離心，取沉淀干燥后即成滸苔葉綠素成品。上述步驟⑵所述的酶解溫度為50°C 70°C，酶解時間為4 6小時，纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的質(zhì)量比為2 1:1。上述步驟(4)所述硫酸銨為硫酸銨晶體，所述滸苔細(xì)粉與硫酸銨晶體的重量比為1:0.1 0. 4。上述步驟(4)所述的離心轉(zhuǎn)速為8000rpm，離心時間為20分鐘。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明的成本低，工藝流程簡單，提取的葉綠素穩(wěn)定性好，適宜大規(guī)模生產(chǎn)，可廣泛應(yīng)用于藥品、保健品、食品領(lǐng)域的產(chǎn)品著色。
具體實施例方式以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述，但不作為對本發(fā)明的限定。實施例1
將滸苔浙干、加入10倍滸苔重量的質(zhì)量濃度為0. 04%的硫酸銅溶液浸泡穩(wěn)定葉綠素，6小時后用清水洗去滸苔上的硫酸銅，然后烘干、絞碎細(xì)化。取IKg滸苔細(xì)粉，加入I倍重量的蒸餾水混勻，加入1/20重量的纖維素酶和幾丁質(zhì)酶酶解，纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的質(zhì)量比為2 :1，酶解溫度為50°C，酶解時間為6小時；酶解結(jié)束后，100°C加熱滅酶活，加入2倍體積、質(zhì)量濃度為90%的乙醇反復(fù)浸泡提取兩次，浸泡時間為24 36小時，把2次浸取提取液合并在一起，向提取液中加入硫酸銨晶體，將苔細(xì)粉與硫酸銨晶體的重量比為1:0.1,將提取液離心，離心轉(zhuǎn)速為SOOOrpm，離心時間為20分鐘，取沉淀干燥后即成滸苔葉綠素成品。 實施例2
將滸苔浙干、加入10倍滸苔重量的質(zhì)量濃度為0. 05%的硫酸銅溶液浸泡穩(wěn)定葉綠素，5小時后用清水洗去滸苔上的硫酸銅，然后烘干、絞碎細(xì)化。取IKg滸苔細(xì)粉，加入I倍重量的蒸餾水混勻，加入1/20重量的纖維素酶和幾丁質(zhì)酶酶解，纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的質(zhì)量比為1. 5 :1，酶解溫度為60°C，酶解時間為5小時；酶解結(jié)束后，100°C加熱滅酶活，加入2倍體積、質(zhì)量濃度為90%的乙醇反復(fù)浸泡提取兩次，浸泡時間為24 36小時，把2次浸取提取液合并在一起，向提取液中加入硫酸銨晶體，將苔細(xì)粉與硫酸銨晶體的重量比為1:0. 3,將提取液離心，離心轉(zhuǎn)速為SOOOrpm，離心時間為20分鐘，取沉淀干燥后即成滸苔葉綠素成品。實施例3
將滸苔浙干、加入10倍滸苔重量的質(zhì)量濃度為0. 06%的硫酸銅溶液浸泡穩(wěn)定葉綠素，4小時后用清水洗去滸苔上的硫酸銅，然后烘干、絞碎細(xì)化。取IKg滸苔細(xì)粉，加入I倍重量的蒸餾水混勻，加入1/20重量的纖維素酶和幾丁質(zhì)酶酶解，纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的質(zhì)量比為1:1，酶解溫度為70°C，酶解時間為4小時；酶解結(jié)束后，100°C加熱滅酶活，加入2倍體積、質(zhì)量濃度為90%的乙醇反復(fù)浸泡提取兩次，浸泡時間為24 36小時，把2次浸取提取液合并在一起，向提取液中加入硫酸銨晶體，將苔細(xì)粉與硫酸銨晶體的重量比為1:0.4,將提取液離心，離心轉(zhuǎn)速為SOOOrpm，離心時間為20分鐘，取沉淀干燥后即成滸苔葉綠素成品。
權(quán)利要求
1.一種酶法制備滸苔葉綠素的工藝，其特征在于，包含以下步驟(1)將滸苔浙干、加入10倍滸苔重量的質(zhì)量濃度為O.04% O. 06%的硫酸銅溶液浸泡穩(wěn)定葉綠素，4 6小時后用清水洗去滸苔上的硫酸銅，然后烘干、絞碎細(xì)化；(2)取滸苔細(xì)粉，加入I倍重量的蒸餾水混勻，加入1/20重量的纖維素酶和幾丁質(zhì)酶酶解；(3)酶解結(jié)束后，100°C加熱滅酶活，加入2倍體積、質(zhì)量濃度為90%的乙醇容溶液反復(fù)浸泡提取兩次，浸泡時間為24 36小時，把2次浸取提取液合并在一起；(4)向提取液中加入硫酸銨，沉淀滸苔葉綠素，離心，取沉淀干燥后即成滸苔葉綠素成品O
2.按照權(quán)利要求1所述的酶法制備滸苔葉綠素的工藝，其特征在于步驟(2)所述的酶解溫度為50°C 70°C，酶解時間為4 6小時，纖維素酶和幾丁質(zhì)酶的質(zhì)量比為I 2 :1o
3.按照權(quán)利要求1所述的酶法制備滸苔葉綠素的工藝，其特征在于步驟(4)所述硫酸銨為硫酸銨晶體,所述將苔細(xì)粉與硫酸銨晶體的重量比為1:0.1 O. 4。
4.按照權(quán)利要求1所述的酶法制備滸苔葉綠素的工藝，其特征在于步驟(4)所述的離心轉(zhuǎn)速為8000rpm，離心時間為20分鐘。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種葉綠素的制備工藝，以滸苔為浸取原料，該方法主要包括對滸苔的酶解步驟。具體地說，本發(fā)明的滸苔葉綠素的制備方法包括先用硫酸銅穩(wěn)定葉綠素，再使用酶制劑對滸苔細(xì)胞進(jìn)行酶解，破碎滸苔細(xì)胞壁，然后采用90％的乙醇反復(fù)浸泡提取，提取液用硫酸銨沉淀，離心，取沉淀干燥后即成滸苔葉綠素成品。本發(fā)明工藝流程簡單，成本低廉，適宜大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號C07D487/22GK103012414SQ20121051100
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月4日
發(fā)明者荊曉麗 申請人:青島艾華隆生物科技有限公司