專利名稱：一種蘋果中黃酮類化合物的提取純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然植物化學(xué)提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種蘋果中黃酮類化合物的提取方法。
背景技術(shù)：
黃酮化合物是廣泛存在水果和蔬菜中的一類次生代謝類物質(zhì)，是蘋果中的重要抗氧化物質(zhì)來源。研究發(fā)現(xiàn)蘋果內(nèi)含有多種黃酮類化合物，而黃酮類化合物具有多種生物活性，如免疫激活、抗氧化、降血脂、降膽固醇及雌激素樣作用，在抗病毒、逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥性、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等研究中表現(xiàn)出顯著活性，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域。目前，黃酮類化合物的提取主要采用溫浸法、溶劑提取法、微波處理法、超聲波處 理法、超臨界流體萃取法等。水提取法，工藝簡單、設(shè)備投資省、但提取率低、分離困難；溶劑提取法，大多數(shù)有機(jī)溶劑易燃易爆且具有毒性或具刺激性；微波提取法提取率高，對被提取物具有高選擇性、速度快，但該法需專用微波爐；co2超臨界萃取法，提取效率高、有效成分損失少、但設(shè)備投資大、成本高。但對蘋果中黃酮類化合物的提取及研究還很欠缺，蘋果這一豐富的資源有待于深入研究和開發(fā)利用。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種從蘋果中提取黃酮類化合物的方法。本發(fā)明是通過下述的技術(shù)方案來實現(xiàn)的
1.粉碎用粉碎機(jī)將蘋果粉碎，所得蘋果渣于65°C的烘箱中烘干，搗碎制成粉末，然后過40-60目篩；
2.浸提將步驟I中所得蘋果渣粉末按料液質(zhì)量體積比1kg:1-2L浸泡于80%-90%乙醇水溶液中，于60-70°C浸泡O. 5-lh，輔以微波作用3-5min，微波功率為400W，繼續(xù)浸提lh，結(jié)束后離心去除濾渣得濾液；
3.濃縮將步驟2中所得濾液用Iμ m濾膜進(jìn)行過濾，濾液先回收乙醇，然后55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/6，得濃縮液；
4.純化向濃縮液中加4-6倍于濃縮液的水溶解，轉(zhuǎn)入大孔吸附樹脂柱，濃縮液與樹脂體積之比為1:1. 5-3，先用水洗脫，待洗脫液在450-550nm波長范圍內(nèi)掃描出現(xiàn)吸收峰后改用60-80%乙醇洗脫，接收洗脫液，待洗脫液無色時停止接收，將接收到的洗脫液于80-90 0C的水浴上蒸除溶劑析出晶體，得蘋果黃酮類化合物。蘋果渣粉末與浸提溶劑乙醇之比為lkg:l-2L。浸提溶劑乙醇優(yōu)選濃度為80%_90%。浸提溫度為60-70°C。微波作用時間為3-5min，功率為400W。濃縮液與樹脂體積之比為1:1. 5-3。洗脫液乙醇體積分?jǐn)?shù)為60_80%。本發(fā)明的有益效果在于，通過采用乙醇浸提，微波輔助的方法從蘋果中提取黃酮類化合物，達(dá)到提取效率高、節(jié)能的效果，而且較好的保持其生物活性，更適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式
為了更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，以下通過具體的實施例進(jìn)一步作詳細(xì)描述。實施例I
I.粉碎用粉碎機(jī)將蘋果粉碎，所得蘋果渣于65°C的烘箱中烘干，搗碎制成粉末，然后過40目篩。2.浸提稱取Ikg步驟I中所得蘋果渣粉末，加入2L 90%乙醇，于70°C浸泡O. 5h，輔以微波作用3min，微波功率為400W，(繼續(xù)浸提lh，結(jié)束后離心去除濾渣得濾液。3.濃縮將步驟2中所得濾液用I μ m濾膜進(jìn)行過濾，濾液先回收乙醇，然后55°C 下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/6，得濃縮液。4.純化向濃縮液中加4倍于濃縮液的水溶解，轉(zhuǎn)入大孔吸附樹脂柱，濃縮液與樹脂體積之比為I: I. 5，先用水洗脫，待洗脫液在450-550nm波長范圍內(nèi)掃描出現(xiàn)吸收峰后改用70%乙醇洗脫，接收洗脫液，待檢測洗脫液無吸收峰時停止接收，將接收到的洗脫液于80-90 0C的水浴上蒸除溶劑析出晶體，得蘋果黃酮類化合物。實施例2
I.粉碎用粉碎機(jī)將蘋果粉碎，所得蘋果渣于65°C的烘箱中烘干，搗碎制成粉末，然后過50目篩。2.浸提稱取Ikg步驟I中所得蘋果渣粉末，加入I. 5L 85%乙醇，于70°C浸泡lh，輔以微波作用4min，微波功率為400W，(繼續(xù)浸提lh，結(jié)束后離心去除濾渣得濾液。3.濃縮將步驟2中所得濾液用I μ m濾膜進(jìn)行過濾，濾液先回收乙醇，然后55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/6，得濃縮液。4.純化向濃縮液中加5倍于濃縮液的水溶解，轉(zhuǎn)入大孔吸附樹脂柱，濃縮液與樹脂體積之比為1: 2，先用水洗脫，待洗脫液在450-550nm波長范圍內(nèi)掃描出現(xiàn)吸收峰后改用80%乙醇洗脫，接收洗脫液，待檢測洗脫液無吸收峰時停止接收，將接收到的洗脫液于80-90 0C的水浴上蒸除溶劑析出晶體，得蘋果黃酮類化合物。實施例3
I.粉碎用粉碎機(jī)將蘋果粉碎，所得蘋果渣于65°C的烘箱中烘干，搗碎制成粉末，然后過60目篩。2.浸提稱取Ikg步驟I中所得蘋果渣粉末，加入I. 5L 80%乙醇，于60°C浸泡lh，輔以微波作用5min，微波功率為400W，(繼續(xù)浸提lh，結(jié)束后離心去除濾渣得濾液。3.濃縮將步驟2中所得濾液用I μ m濾膜進(jìn)行過濾，濾液先回收乙醇，然后55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/6，得濃縮液。4.純化向濃縮液中加6倍于濃縮液的水溶解，轉(zhuǎn)入大孔吸附樹脂柱，濃縮液與樹脂體積之比為1: 2，先用水洗脫，待洗脫液在450-550nm波長范圍內(nèi)掃描出現(xiàn)吸收峰后改用70%乙醇洗脫，接收洗脫液，待檢測洗脫液無吸收峰時停止接收，將接收到的洗脫液于80-90 0C的水浴上蒸除溶劑析出晶體，得蘋果黃酮類化合物。實施例4
I.粉碎用粉碎機(jī)將蘋果粉碎，所得蘋果渣于65°C的烘箱中烘干，搗碎制成粉末，然后過50目篩。
2.浸提稱取Ikg步驟I中所得蘋果渣粉末，加入IL 80%乙醇，于65°C浸泡O. 5h，輔以微波作用4min，微波功率為400W，繼續(xù)浸提lh，結(jié)束后離心去除濾渣得濾液。3.濃縮將步驟2中所得濾液用I μ m濾膜進(jìn)行過濾，濾液先回收乙醇，然后55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/6，得濃縮液。
4.純化向濃縮液中加5倍于濃縮液的水溶解，轉(zhuǎn)入大孔吸附樹脂柱，濃縮液與樹脂體積之比為1: 2，先用水洗脫，待洗脫液在450-550nm波長范圍內(nèi)掃描出現(xiàn)吸收峰后改用80%乙醇洗脫，接收洗脫液，待檢測洗脫液無吸收峰時停止接收，將接收到的洗脫液于80-90 0C的水浴上蒸除溶劑析出晶體，得蘋果黃酮類化合物。測試實施例
稱取Ikg蘋果渣粉末分別按實施例1-4提供的方法提取黃酮類化合物，利用氯化鋁比色法測定黃酮類化合物含量，計算提取率，結(jié)果見表I。表I
權(quán)利要求
1.一種蘋果中黃酮類化合物的提取純化方法，其特征在于具體步驟為粉碎用粉碎機(jī)將蘋果粉碎，所得蘋果渣于65°c的烘箱中烘干，搗碎制成粉末，然后過40-60目篩； 浸提將步驟I中所得蘋果渣粉末按料液質(zhì)量體積比1kg: 1-2L浸泡于80%-90%乙醇中，于60-80°C浸泡O. 5-lh，輔以微波作用3-5min，微波功率為400W，繼續(xù)浸提lh，結(jié)束后離心去除濾渣得濾液； 濃縮將步驟2中所得濾液用Iym濾膜進(jìn)行過濾，濾液先回收乙醇，然后55°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/6，得濃縮液； 純化向濃縮液中加4-6倍于濃縮液的水溶解，轉(zhuǎn)入大孔吸附樹脂柱，濃縮液與樹脂體積之比為I: I. 5-3，先用水洗脫，待洗脫液在450-550nm波長范圍內(nèi)掃描出現(xiàn)吸收峰后改用60-80%乙醇水溶液洗脫，接收洗脫液，待洗脫液無色時停止接收，將接收到的洗脫液于80-90 0C的水浴上蒸除溶劑析出晶體，得蘋果黃酮類化合物。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然植物化學(xué)提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種蘋果中黃酮類化合物的提取方法。本發(fā)明是通過下述的技術(shù)方案來實現(xiàn)的粉碎、浸提、濃縮、純化。通過采用乙醇浸提，微波輔助的方法從蘋果中提取黃酮類化合物，達(dá)到提取效率高、節(jié)能的效果，而且較好的保持其生物活性，更適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07C311/30GK102976982SQ20121052236
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月7日
發(fā)明者張成如 申請人:山東大學(xué)