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      一種水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMyb1及其應(yīng)用的制作方法

      文檔序號(hào):3590206閱讀:919來(lái)源:國(guó)知局
      專(zhuān)利名稱(chēng):一種水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMyb1及其應(yīng)用的制作方法
      —種水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybI及其應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明屬于基因工程領(lǐng)域,涉及一種水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl及其應(yīng)用。
      背景技術(shù)
      MYB類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子家族是指含有MYB結(jié)構(gòu)域的一類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子。MYB結(jié)構(gòu)域是一個(gè)含有 52個(gè)氨基酸的DNA結(jié)合域。植物中的MYB類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子以在其N(xiāo)端含有一段約52個(gè)氨基酸組成的MYB結(jié)構(gòu)域?yàn)楣餐卣?。玉米的Clorless I (C I)是植物中第一個(gè)被分離鑒定的MYB轉(zhuǎn)錄因子(Paz-Areset et al.,1987Paz_Ares J,Ghosal Dj Wienand U (1987) The regulatory cl locus of Zea mays encodes a protein with homology to myb proto-oncogene products and with structural similarities to transcriptional activators. EMBO J. 6 (12) : 3553-3558),隨后,擬南芥(Romero et al.,1998 Romero I,F(xiàn)uertes A,Benito MJ,Malpica JMj Leyva A,Paz-Ares J. More than 80 R2R3-MYB regulatory genes in the genome of Arabidopsis thaliana. The Plant Journal,1998,14 (3) : 273-284)、金魚(yú)草(Waites et al. ,1998 Waites Rj Selvadurai HR,Oliver IR(1998)The PHANTASTICA gene encodes a MYB transcription factor involved in growth and dorsoventrality of lateral organs in antirrhinum. Cell,93 (5) : 779-789)、棉花(Loguerico et al. , I 999Loguerico LL,Zhang JQ,Wilkins TA(1999)Differential regulation of six novel MYB—domain genes defines two distinct expression patterns in allotetrapIoid cotton(Gossypium hirsutum L.). Mol Gen Genet. 261:660-67 1),蘋(píng)果(Takos et al.,2006 Takos AM,JaffeFWj Jacob SR,Bogs J,Robinson SPj Walker AR (2006) Light-1nduced expression of a MYB gene regulates anthocyanin biosynthesis in red apples. Plant Physiol. 142:1216-1232)等植物中也分離鑒定出功能各異的MYB蛋白。對(duì)MYB類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子的功能研究結(jié)果表明,MYB蛋白主要作用有參與植物次級(jí)代謝過(guò)程,調(diào)節(jié)細(xì)胞形態(tài),參與植物對(duì)生物和非生物脅迫的應(yīng)答,在植物對(duì)激素反應(yīng)中起作用, 調(diào)節(jié)植物的生物鐘,在細(xì)胞循環(huán)和增殖中起作用等(劉蕾,2008劉蕾,杜海,唐曉鳳,吳燕民,黃玉碧,唐益雄(2008)MYB轉(zhuǎn)錄因子在植物抗逆脅迫中的作用及其分子機(jī)理.遺傳,30 (10): 1265-1271)。Vailleau 等(2002 Vailleau Fj Daniel X,Tronchet M(2002) A R2R3-MYB gene,AtMYB30, acts as a positive regulator of the hypersensitive cell death program in plants in response to pathogen attack. PNAS 99 (15):10179-10184) 發(fā)現(xiàn)在AtMYB30過(guò)量表達(dá)的擬南芥與病原細(xì)菌互作過(guò)程中表現(xiàn)出抗病反應(yīng),抑制表達(dá) AtMYB30的擬南芥對(duì)幾種病原細(xì)菌的抗性下降;Van等(2008 Van SC, Van S (2008)Plant immune responses triggered by beneficial microbes[J]. Current Opinion in Plant Biology, 11:443-448)通過(guò)基因敲除的方法構(gòu)建MYB72缺陷型擬南芥,對(duì)假單胞菌、寄生霜霉、鏈格孢菌、灰霉菌的抵抗能力降低,說(shuō)明擬南芥MYB72在植物抗病方面起作用;Fekete 等(2009 Fekete C,F(xiàn)ung RWj Szabo Z (2009)Up-regulated transcripts in a compatiblepowdery mildew-grapevine interaction. Plant Physiol Biochem. 47:732-738)通過(guò)構(gòu)建白粉病菌誘導(dǎo)葡萄藤的SSH文庫(kù),發(fā)現(xiàn)MYB轉(zhuǎn)錄因子及一些抗病相關(guān)基因的表達(dá),這說(shuō)明 MYB可能參與葡萄藤對(duì)白粉病的防御過(guò)程。目前,越來(lái)越多的研究結(jié)果表明植物中MYB類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子在抗病性方面的功能。發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的在于公開(kāi)水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的抗病性基因工程應(yīng)用,該基因來(lái)自水稻,可作為目的基因?qū)胫参?,提高植物抗病性,進(jìn)行植物品種改良。
      本發(fā)明的目的可通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)
      水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl,該基因的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。
      本發(fā)明所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl編碼的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白, 其氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示。
      含有本發(fā)明所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的表達(dá)載體。
      所述的表達(dá)載體優(yōu)選將所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl插入雙元表達(dá)載體pCAMBIA1300S的Kpn I酶切位點(diǎn)所得。
      水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的基因工程應(yīng)用。
      優(yōu)選本發(fā)明所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl在通過(guò)基因工程手段培育稻瘟病抗性品種中的應(yīng)用。
      水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的基因工程應(yīng)用,優(yōu)選包括如下步驟
      I)總RNA的提取選用水稻抗稻瘟病菌品種“黑殼子粳”(太湖流域粳稻地方品種), 待水稻幼苗長(zhǎng)至3-4葉期,用稻瘟病菌孢子(5X IO4Hir1)接種處理,24小時(shí)后立即取葉片液氮冷凍,保存于_80°C冰箱。取部分葉片,用研缽研碎,轉(zhuǎn)移入盛有Trizol裂解液的1. 5mL EP管,充分振蕩后,抽提總RNA,電泳鑒定總RNA質(zhì)量;
      2)水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的克隆分析黑殼子粳接種稻瘟病前后的基因芯片表達(dá)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)芯片探針OsAffx. 21972.1. Sl_at受到稻瘟病的誘導(dǎo)(未發(fā)表的數(shù)據(jù))。 以該探針序列搜索水稻基因組序列和EST序列數(shù)據(jù)庫(kù),拼接得到858bp水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的全長(zhǎng)序列,并設(shè)計(jì)兩端引物
      Pl:5-ATGGAGATGGTGCTG-3 (SEQ ID NO. 3),
      P2:5-TTATTGCATCTTCCATATG-3 (SEQ ID NO. 4)。
      將步驟I)獲得的總RNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈,以此為模板用高保真Pfu酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR程序如下94°C預(yù)變性5分鐘,94°C變性45s,56°C復(fù)性lmin,72°C延伸1.5min, 35個(gè)循環(huán)后,72°C延伸5min,最后Tag酶72°C保溫IOmin末端加A后克隆至pGEM_T 載體,委托上海英駿公司測(cè)序獲得水稻Myb轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的cDNA序列SEQ ID NO.1 ;
      3)植物表達(dá)載體的構(gòu)建根據(jù)水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的cDNA序列SEQ ID NO. 1,設(shè)計(jì)擴(kuò)增出完整編碼閱讀框的引物,并在上游引物P3和下游引物P4上均引入限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Kpn I,P3和P4引物序列為
      P3 5-GGTACCATGGAGATGGTGCTG-3 (SEQ ID NO. 5),
      P45-GGTACCTTATTGCATCTTCCATATG-3 (SEQ ID NO. 6),
      以步驟2)中獲得的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物為模板,經(jīng)PCR擴(kuò)增后,將OsMybl的cDNA克隆至中間載體pGEM-Τ,利用引入的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Kpn I進(jìn)一步將OsMybl克隆到雙元表達(dá)載體pCAMBIA1300S上,測(cè)序鑒定確保表達(dá)載體中編碼區(qū)閱讀框架正確;
      4)轉(zhuǎn)基因植株的獲得將步驟3)獲得的表達(dá)載體PCAMBIA1300S轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌,進(jìn)一步轉(zhuǎn)入水稻感稻瘟病菌品種“蘇御糯”,對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR,Southern雜交以及 RT-PCR驗(yàn)證后進(jìn)行水稻的抗病性評(píng)價(jià),將生長(zhǎng)至3-4葉期的轉(zhuǎn)基因T2代植株進(jìn)行稻瘟病菌孢子接種處理,7天后調(diào)查植株的病級(jí)數(shù)以及發(fā)病葉片病斑數(shù)目和病斑長(zhǎng)度,與對(duì)照相比具有明顯抗性的轉(zhuǎn)基因水稻植株即為獲得的抗稻瘟病菌轉(zhuǎn)基因植株。
      有益效果
      1、本發(fā)明公開(kāi)了水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl及其所編碼的蛋白質(zhì)。水稻 MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybI為水稻中首次報(bào)道,基因芯片和mRNA表達(dá)分析表明該基因受稻瘟病菌接種誘導(dǎo),轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)證明該基因的過(guò)量表達(dá)提高了水稻對(duì)稻瘟病菌的抗性。因此有望可作為目的基因?qū)胫参铮岣咧参锟共⌒?,以進(jìn)行植物品種改良。
      2、本發(fā)明的OsMybl基因來(lái)自水稻,具有適合于水稻等單子葉植物表達(dá)的優(yōu)化密碼子,其基因工程受體植物除了雙子葉植物,如大豆、棉花、煙草等之外更加適合于水稻、玉米、小麥等單子葉植物。
      3、對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR,Southern雜交以及RT-PCR驗(yàn)證后進(jìn)行水稻的抗病性評(píng)價(jià)。將生長(zhǎng)至3-4葉期的轉(zhuǎn)基因T2代植株進(jìn)行稻瘟病菌孢子接種處理,7天后調(diào)查植株的平均病級(jí)數(shù)為2. 8級(jí),發(fā)病葉片平均病斑數(shù)目為6. 2個(gè),而對(duì)照植株的平均病級(jí)數(shù)為 7級(jí)以及發(fā)病葉片平均病斑數(shù)目為21. 4個(gè),結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因植株與對(duì)照相比表現(xiàn)出對(duì)稻瘟病菌的明顯抗性。
      4、利用本發(fā)明OsMybl基因作為目的基因構(gòu)建植物表達(dá)載體,其中可用任何一種啟動(dòng)子例如花椰菜花葉病毒(CAMV) 35S啟動(dòng)子、Ubiquitin啟動(dòng)子或其它啟動(dòng)子,該表達(dá)載體中必要時(shí)可包括增強(qiáng)子,不論是轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子或翻譯增強(qiáng)子。為了簡(jiǎn)化轉(zhuǎn)化細(xì)胞的鑒定可使用選擇性標(biāo)記包括具·有抗生素抗性的酶,也可利用顏色變化(例如β -葡糖醛酸糖苷酶 GUS)或發(fā)光(例如熒光素酶)來(lái)識(shí)別的化合物的酶類(lèi),也可用無(wú)標(biāo)記選擇。所用的表達(dá)載體可使用Ti質(zhì)粒,Ri質(zhì)粒,植物病毒載體等。轉(zhuǎn)化方法可用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、花粉管通道法或其它方法轉(zhuǎn)化植物。
      具體實(shí)施方式
      實(shí)施例1
      選用水稻品種“黑殼子粳”(為太湖流域粳稻地方品種,為抗稻瘟病菌品種),待水稻幼苗長(zhǎng)至3-4葉期后,用稻瘟病菌孢子進(jìn)行接種處理,24小時(shí)后立即取葉片液氮冷凍, 保存于_80°C冰箱。取部分葉片,用研缽研碎,轉(zhuǎn)移入盛有Trizol裂解液的1. 5mL EP管 (TRIzol Reagents,購(gòu)自Invitrogen, USA),充分振蕩后,抽提總RNA,電泳鑒定總RNA質(zhì)量。
      分析“黑殼子粳”接種稻瘟病前后的基因芯片表達(dá)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)芯片探針 OsAffx. 21972.1. Sl_at受到稻瘟病的誘導(dǎo)。以該探針序列搜索水稻基因組序列和EST序列數(shù)據(jù)庫(kù),拼接得到858bp水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的全長(zhǎng)序列,并設(shè)計(jì)兩端引物
      Pl:5,-ATGGAGATGGTGCTG-3,(SEQ ID NO. 3),
      P2:5’-TTATTGCATCTTCCATATG-3’ (SEQ ID NO. 4)。
      以總RNA反轉(zhuǎn)錄合成的cDNA第一鏈為模板用高保真Pfu酶(購(gòu)自Roche )進(jìn)行PCR 擴(kuò)增,PCR程序如下94°C預(yù)變性5分鐘,94°C變性45s,56°C復(fù)性lmin,72°C延伸1. 5min, 35個(gè)循環(huán)后,72°C延伸5min,最后Tag酶(購(gòu)自天根公司,北京)72°C保溫IOmin末端加A 后克隆至pGEM-Τ載體(購(gòu)自Promega),委托上海英駿公司測(cè)序獲得水稻轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因 OsMybl 的 cDNA 序列。
      分析上述獲得的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的cDNA序列SEQ ID NO.1及其編碼蛋白SEQ ID NO. 2,存在保守結(jié)構(gòu)域Myb結(jié)構(gòu)域。
      實(shí)施例2
      用實(shí)施例1中設(shè)計(jì)的引物P1、P2進(jìn)行半定量RT-PCR分析接種處理后水稻3_4葉期地上部幼苗的表達(dá),結(jié)果表明,接種稻瘟病菌孢子4小時(shí)后OsMybl的表達(dá)增強(qiáng),經(jīng)灰度掃描分析,其mRNA表達(dá)量為接種處理前的30倍,表明OsMybl基因的表達(dá)與稻瘟病菌處理有關(guān)。
      實(shí)驗(yàn)例3
      根據(jù)實(shí)施例1得到的OsMybl的cDNA全長(zhǎng)序列(見(jiàn)SEQ ID NO.1),設(shè)計(jì)擴(kuò)增出完整編碼閱讀框的引物,并在上游引物P3和下游引物P4上均引入限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Kpn I, P3和P4引物序列為
      P3 :5’ -GGTACCATGGAGATGGTGCTG-3’ (SEQ ID NO. 5),
      P4 :5’ -GGTACCTTATTGCATCTTCCATATG-3’ (SEQ ID NO. 6),
      以實(shí)施例1中獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物為模板,以P3和P4為引物,經(jīng)PCR擴(kuò)增后,將OsMybl 的cDNA克隆至中間載體pGEM-T,利用引入的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Kpn I進(jìn)一步將OsMybl克隆到雙元表達(dá)載體PCAMBIA1300S上,測(cè)序鑒定確保表達(dá)載體中編碼區(qū)閱讀框架正確,再將其轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌,進(jìn)一步轉(zhuǎn)入水稻感稻瘟病菌品種“蘇御糯”(太湖流域粳稻地方品種),轉(zhuǎn)基因植株經(jīng)PCR, Southern雜交以及RT-PCR驗(yàn)證為陽(yáng)性。
      將生長(zhǎng)至3-4葉期的轉(zhuǎn)基因T2代植株進(jìn)行稻瘟病菌孢子接種處理,按照Mackill and Bonman (1992Mackill D and Bonman J(1992)Inheritance of blast resistance in near-1sogenic lines of rice. Phytopathology 82:746-749)的方法進(jìn)行病害級(jí)別鑒定, 7天后調(diào)查植株的平均病級(jí)數(shù)為2. 8級(jí),發(fā)病葉片平均病斑數(shù)目為6. 2個(gè),而對(duì)照植株的平均病級(jí)數(shù)為7級(jí)以及發(fā)病葉片平均病斑數(shù)目為21. 4個(gè),結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因植株與對(duì)照相比表現(xiàn)出對(duì)稻瘟病菌的明顯抗性。
      綜上所述,本發(fā)明人提供的OsMybl基因是在水稻中分離的新基因,其功能與水稻抗病性相關(guān),可作為目的基因?qū)胫参?,提高植物抗病性,以進(jìn)行植物品種改良。可利用本發(fā)明OsMybl基因作為目的基因構(gòu)建植物表達(dá)載體,其中可用任何一種啟動(dòng)子例如花椰菜花葉病毒(CAMV) 35S啟動(dòng)子、Ubiquitin啟動(dòng)子或其它啟動(dòng)子,該表達(dá)載體中必要時(shí)可包括增強(qiáng)子,不論是轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子或翻譯增強(qiáng)子。為了簡(jiǎn)化轉(zhuǎn)化細(xì)胞的鑒定可使用選擇性標(biāo)記包括對(duì)抗生素抗性的酶,也可利用顏色變化(例如B-葡糖醛酸糖苷酶GUS)或發(fā)光(例如熒光素酶)來(lái)識(shí)別的化合物的酶類(lèi),也可用無(wú)標(biāo)記選擇。所用的表達(dá)載體可使用Ti質(zhì)粒,Ri質(zhì)粒,植物病毒載體等。轉(zhuǎn)化方法可用經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、花粉管通道法或其它方法轉(zhuǎn)化植 物。
      權(quán)利要求
      1.水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl,其特征在于該基因的cDNA序列如SEQID NO.1所示。
      2.權(quán)利要求1所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl編碼的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白,其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示。
      3.含有權(quán)利要求1所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的表達(dá)載體。
      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的表達(dá)載體,其特征在于所述的表達(dá)載體是將所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl插入雙元表達(dá)載體pCAMBIA1300S的Kpn I酶切位點(diǎn)所得。
      5.水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的基因工程應(yīng)用。
      6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于所述的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl在通過(guò)基因工程手段培育稻瘟病抗性品種中的應(yīng)用。
      7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于包括如下步驟 1)總RNA的提取 選用水稻抗稻瘟病品種“黑殼子粳”,待水稻幼苗長(zhǎng)至3-4葉期,用稻瘟病菌孢子5X IO4Hir1接種處理,24小時(shí)后立即取葉片液氮冷凍,保存于-80°C冰箱。取部分葉片,用研缽研碎,轉(zhuǎn)移入盛有Trizol裂解液的1. 5mL EP管,充分振蕩后,抽提總RNA,電泳鑒定總RNA質(zhì)量; 2)水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的克隆 以擬南芥基因OsMybl序列為探針,搜索水稻基因組序列和EST序列數(shù)據(jù)庫(kù),拼接得到858bp水稻Myb轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的全長(zhǎng)序列,并設(shè)計(jì)兩端引物P1:SEQ ID NO. 3,P2:SEQ ID NO. 4,將步驟I)獲得的總RNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈,以此為模板用高保真Pfu酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR程序如下94°C預(yù)變性5分鐘,94°C變性45s,56°C復(fù)性lmin,72°C延伸1.5min,35個(gè)循環(huán)后,72°C延伸5min,最后Tag酶72°C保溫IOmin末端加A后克隆至pGEM-Τ載體,測(cè)序獲得水稻Myb轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的cDNA序列SEQ ID NO.1 ; 3)植物表達(dá)載體的構(gòu)建 根據(jù)水稻Myb轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMybl的cDNA序列SEQ ID NO. 1,設(shè)計(jì)擴(kuò)增出完整編碼閱讀框的引物,并在上游引物P3和下游引物P4上都引入限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Kpn I,P3和P4引物序列分別為SEQ ID NO. 5和SEQ ID NO. 6 ; 以步驟2)中獲得的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物為模板,經(jīng)PCR擴(kuò)增后,將OsMybl的cDNA克隆至中間載體pGEM-T,利用引入的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)Kpn I進(jìn)一步將OsMybl克隆到雙元表達(dá)載體PCAMBIA1300S,測(cè)序鑒定確保表達(dá)載體中編碼區(qū)閱讀框架正確; 4)轉(zhuǎn)基因植株的獲得 將步驟3)獲得的表達(dá)載體pCAMBIA1300S轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌,進(jìn)一步轉(zhuǎn)入水稻感稻瘟病菌品種“蘇御糯”,轉(zhuǎn)基因植株經(jīng)PCR,Southern雜交以及RT-PCR驗(yàn)證為陽(yáng)性。將生長(zhǎng)至3_4葉期的轉(zhuǎn)基因T2代植株進(jìn)行稻瘟病菌孢子接種處理,7天后調(diào)查植株的病級(jí)數(shù)以及發(fā)病葉片病斑數(shù)目和病斑長(zhǎng)度,與對(duì)照相比具有明顯抗性的轉(zhuǎn)基因水稻植株即為獲得的抗稻瘟病菌轉(zhuǎn)基因植株。
      全文摘要
      本發(fā)明公開(kāi)了一種水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因OsMyb1及其應(yīng)用,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。該基因的cDNA序列及其編碼氨基酸序列見(jiàn)SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。本發(fā)明基因OsMyb1為水稻中抗稻瘟病相關(guān)的Myb類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子蛋白基因,基因芯片結(jié)果和mRNA表達(dá)分析表明該基因受稻瘟病菌接種誘導(dǎo)。轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)證明該基因的過(guò)量表達(dá)提高了水稻對(duì)稻瘟病的抗病性。因此,OsMyb1可作為目的基因?qū)胫参?,提高植物的抗病性?br> 文檔編號(hào)C07K14/415GK102994517SQ201210562428
      公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月21日
      發(fā)明者鮑永美, 張紅生, 黃驥, 儲(chǔ)瑞珍, 王建飛, 王州飛 申請(qǐng)人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
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