專利名稱：一種從油茶枯中綜合提取多糖、多酚和皂素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及油茶枯中綜合提取多糖、多酚和皂素的方法，屬于油茶枯活性成分的提取和深加工領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
=M^iCamellia oleifera Abel.)屬于山茶科山茶屬植物,主要分布于我國廣西、 湖南、江西等南方地區(qū)，是與橄欖、油棕、椰子齊名的四大傳統(tǒng)木本油料植物之一。油茶枯是油茶果榨油后剩下的殘渣部分，又稱為茶籽餅、茶麩等名稱。油茶枯作為茶油制取的副產(chǎn)物，其產(chǎn)量近是茶油的3倍，其中富含皂素、多糖、多酚等生物活性物質(zhì)，在食品、醫(yī)藥、日化等領(lǐng)域具有良好的開發(fā)利用價值。目前，油茶枯除主要用于提取皂素外，往往廢棄作燃料， 未能得到有效的綜合利用。
皂素是從油茶中提取得到的皂苷類化合物的總稱，因其水溶液具有發(fā)泡性而得名。 油茶籽中皂素的含量約為10%，因產(chǎn)地不同而有較大差異。皂素除了具有乳化、去污、發(fā)泡等多種表面活性外，還具有顯著的消炎、鎮(zhèn)痛、殺菌、殺蟲及促進植物生長等作用，廣泛應(yīng)用于日化、醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域。皂素的提取方法主要有水提法、醇或其它有機溶劑提取法。水提法具有成本低、生產(chǎn)設(shè)備簡單、見效快等優(yōu)點，但濃縮能耗大，而且浸提液中的糖類、蛋白和果膠等成分影響皂素純化。醇提法解決了提取液濃縮困難，并具有產(chǎn)品得率高的優(yōu)點，但存在著溶劑的消耗量大、成本相對高等缺陷。皂素雖然已成為工業(yè)化產(chǎn)品，但國內(nèi)的皂素生產(chǎn)依舊是“粗放型”的，其提取的純度、提取率、純化成本等依舊是人們所關(guān)注的問題，目前市場上的皂素大多色澤差，呈棕黃色，純度只有30 60%，不能完全滿足各行各業(yè)的要求。
多糖是指植物中由單糖脫水形成，非淀粉、非纖維素的一類具有生理活性的高分子聚合物的總稱。據(jù)報道，油茶籽中多糖的含量較高，因產(chǎn)地不同而異，具有抗腫瘤、降血糖、修復(fù)糖代謝紊亂、延長血栓形成時間等重要生理功能，并無毒副作用，具有良好的開發(fā)潛力。
多酚是植物中含多個酚羥基的一類天然活性物質(zhì)，主要包括黃酮醇、黃烷醇、酚酸類等化合物。植物多酚是良好的天然·抗氧化劑，具有抗衰老、降血脂、降血糖、降血壓、抗癌防癌、防止冠狀動脈粥樣硬化等多種功效，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥保健、日化等領(lǐng)域。研究表明油茶枯中多酚的含量在1%左右，具有多種功能和用途，例如可以作為天然的抗氧化劑應(yīng)用到食品行業(yè)中，提高油脂的穩(wěn)定性，延長油脂的保質(zhì)期。雖然油茶多酚的含量遠低于茶葉多酚(茶葉多酚在茶葉中含量約為20%)，但它來源于量大、廉價的油茶枯，是一類具有良好開發(fā)前途的天然產(chǎn)物。
皂素傳統(tǒng)的直接水提法中多糖、酚類等物質(zhì)影響皂素的純化過程，造成皂素的純度不高，同時又無法分離獲得多糖、酚類等活性物質(zhì)。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從油茶枯中綜合提取獲得油茶多糖、多酚、皂素的方法。
本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。
一種從油茶枯中提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，包括如下步驟(1)油茶枯中加入石油醚，油茶枯與石油醚質(zhì)量體積比為1:(5 12)kg/L，在40 90 °C浸提，固液分離得脫脂油茶枯；(2)脫脂油茶枯加水提取，脫脂油茶枯和水的質(zhì)量體積比為1:(10 25)kg/L，提取溫度為40 90 V，固液分離得水提液；(3)將步驟(2)所得水提液濃縮至原體積的1/4 1/2，再以I 10%的鹽酸或硫酸調(diào)節(jié)溶液PH為I 6，使蛋白沉淀，分離出蛋白得到上清液；(4)向步驟(3)中上清液中加入乙醇，使乙醇的終濃度為70 90%，產(chǎn)生絮狀沉淀，固液分離，干燥沉淀得到油茶多糖；(5)將步驟(4)中分離油茶多糖后的上清液濃縮至原來體積的1/5 1/4，加入NaCl 或KCl使得鹽終濃度為2 5%，優(yōu)選4 %，加入乙酸乙酯進行萃取，使?jié)饪s液和乙酸乙酯的體積比為1: (I 3)，優(yōu)選1:1.2;(6)將步驟(5)所得的乙酸乙酯相濃縮并回收乙酸乙酯得到油茶多酚；(7)將步驟(5)乙酸乙酯萃取后的水相用AB-8大孔樹脂吸附I 5小時，然后依次用水、O.1 O. 3%的NaOH或KOH溶液、10 30%乙醇溶液洗脫，最后用70 90%乙醇溶液解析，收集解析液，濃縮、干燥得皂素。
上述步驟(I)中，使用的石油醚沸程為60 90 °C，在40 90 °C條件下連續(xù)浸提I 5小時，浸提I 3次。
上述步驟(2)中，提取時間為1. 5 4小時，提取I 3次。
上述步驟(4)中，采用離心分離得到油茶多糖沉淀，離心轉(zhuǎn)速大于2000 rpm，油茶多糖用真空干燥或冷凍干燥。
本發(fā)明的優(yōu)點與積極效果(I)本發(fā)明先提取多糖、多酚后再分離皂素，有利于消除前兩種物質(zhì)對皂素純化的影響，提高皂素的純度，依據(jù)本發(fā)明方法提取的皂素純度在95% 以上；(2)本發(fā)明依次提取可獲得油茶多糖、多酚、皂素3種成分；(3)采用乙酸乙酯萃取分離多酚和皂素，操作簡單，乙酸乙酯無毒、沸點低，易于回收，在水相中加入適量的鹽能有效地降低多酚在水相中的溶解度而更有利于乙酸乙酯的萃取，同時也防止了萃取過程中的乳化現(xiàn)象。(4)本發(fā)明原料來源廣泛，生產(chǎn)成本低，工藝簡單，條件溫和，對環(huán)境污染小。


圖1為本發(fā)明的工藝流程示意圖。
具體實施方式
以下通過實施例對本發(fā)明作進一步說明。
如圖1所示，本發(fā)明以水為溶劑先將油茶枯中的皂素、多糖、多酚等成分提取出來，接著用醇沉法獲得油茶多糖，沉淀油茶多糖后的上清液濃縮后，利用乙酸乙酯對多酚的選擇性將其從水溶液中萃取出來，從而達到富集多酚的目的，萃取過多酚的水相用大孔樹脂吸附分離獲得皂素。
實施例1將50 g的油茶枯粉末加入450 ml的石油醚(沸程60 90°C)，47°C加熱2. 5 h脫除脂肪和殘油后，回收石油醚，干燥得到脫脂油茶枯粉末。向所得脫脂油茶枯粉末中加入水， 使油茶枯粉末和水的質(zhì)量體積比為1:20 g/ml，在70 °C的下連續(xù)浸提3. 5 h，冷卻，離心分離。將水提液濃縮至原來體積的1/4，加入5 %鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH為4. 0，于4500 rpm的轉(zhuǎn)速下離心分離10 min，保留上清液，然后向其中加入95%的乙醇，使乙醇的終濃度為75%，攪拌，靜置，離心分離所得的沉淀經(jīng)過冷凍干燥后得油茶多糖。沉淀多糖后的上清液濃縮至原來體積的1/4，并回收乙醇，向濃縮液中加入NaCl固體使其質(zhì)量分數(shù)達到2%，室溫下用1. 2 倍體積的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相，減壓濃縮回收乙酸乙酯并得到油茶多酚。乙酸乙酯萃取剩下的水相用AB-8大孔吸附樹脂吸附2小時，依次用水、O. 2 %NaOH溶液、20 % 的乙醇溶液洗脫以除雜，最后用80 %乙醇溶液洗脫，將80%乙醇洗脫液濃縮、干燥后得皂素。
經(jīng)分析檢測，所得皂素中皂苷的含量為97. 76 %，得率3. 59 % ;所得油茶多糖相對葡萄糖的純度42. 83 %，得率O. 88 % ;油茶多酚的沒食子酸當(dāng)量為O. 0995，得率O. 64%。
實施例2向100 g的油茶枯粉末中加入800 ml石油醚(沸程60 90°C)，50 °C加熱2 h脫除脂肪和殘油后，回收石油醚，干燥得到脫脂油茶枯粉末。向所得脫脂油茶枯粉末加入水，使油茶枯粉末和水的質(zhì)量體積比為1:15，在75 °C的下連續(xù)浸提3 h，冷卻，離心分離。將水提液濃縮至原來體積的1/3,加入8 %鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH為3. 5,于3500 rpm的轉(zhuǎn)速下離心分離15 min，保留上清液，然后向其中加入95 %乙醇，使乙醇的終濃度為80 %，攪拌，靜置， 離心分離所得的沉淀經(jīng)過冷凍干燥后得油茶多糖。沉淀多糖后的上清液濃縮至原來體積的 1/5，向濃縮液中加入KCl固體使其質(zhì)量分數(shù)達到3. 5 %，室溫下用1. 5倍體積的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相，減壓濃縮回收乙酸乙酯并得到油茶多酚。乙酸乙酯萃取剩下的水相用AB-8大孔吸附樹脂吸附2. 5小時，依次用水、O. 2%Na0H溶液、20%的乙醇溶液洗脫以除雜，最后用80%乙醇溶液洗脫，將80%乙醇洗脫液濃縮、干燥后得皂素。
經(jīng)分析檢測，所得皂素中皂苷的含量為97. 53 %，得率4. 01 % ;所得油茶多糖相對葡萄糖的純度39. 61 %，得率1. 94 % ;油茶多酚的沒食子酸當(dāng)量為O. 1198，得率O. 77 %。
實施例3向500 g的油茶枯粉末中加入3000 ml石油醚(沸程60 90°C)，60 °C加熱2 h脫除脂肪和殘油后，回收石油醚，干燥得到脫脂油茶枯粉末。向所得脫脂油茶枯粉末加入水，使油茶枯粉末和水的質(zhì)量體積比為1:10，在80 °C的下連續(xù)浸提2 h，冷卻，離心分離。將水提液濃縮至原來體積的1/2,加入10 %硫酸調(diào)節(jié)溶液pH為3. O,于3000rpm的轉(zhuǎn)速下離心分離15min，保留上清液，然后向其中加入95 %乙醇，使乙醇的終濃度為75 %，攪拌，靜置， 離心分離所得的沉淀經(jīng)過冷凍干燥后得油茶多糖。沉淀多糖后的上清液濃縮至原來體積的 1/5，向濃縮液中加入NaCl固體使其質(zhì)量分數(shù)達到4 %，室溫下用1. 6倍體積的乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯相，減壓濃縮回收乙酸乙酯并得到油茶多酚。乙酸乙酯萃取剩下的水相用AB-8大孔吸附樹脂吸附3小時，依次用水、O. 2% KOH溶液、20%的乙醇溶液洗脫以除雜， 最后用80%乙醇溶液洗脫，將80%乙醇洗脫液濃縮、干燥后得皂素。
經(jīng)分析檢測，所得皂素中皂苷的含量為97. 21%，得率4. 92 % ;所得油茶多糖相對葡萄糖的純度41. 03%， 得率2. 23% ;油茶多酚的沒食子酸當(dāng)量為O. 128，得率O. 93 %。
權(quán)利要求
1.一種從油茶枯中提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，其特征在于包括如下步驟(1)油茶枯中加入石油醚，油茶枯與石油醚質(zhì)量體積比為1:(5 12)kg/L，在40 90 °C浸提，固液分離得脫脂油茶枯；(2)脫脂油茶枯加水提取，脫脂油茶枯和水的質(zhì)量體積比為1:(10 25)kg/L，提取溫度為40 90 V，固液分離得水提液；(3)將步驟(2)所得水提液濃縮至原體積的1/4 1/2，調(diào)節(jié)溶液pH為I 6，使蛋白沉淀，分離出蛋白得到上清液；(4)向步驟(3)中上清液中加入乙醇，使乙醇的終濃度為70 90%，產(chǎn)生絮狀沉淀，固液分離，干燥沉淀得到油茶多糖；(5)將步驟(4)中分離油茶多糖后的上清液濃縮至原來體積的1/5 1/4，加入NaCl或 KCl使得鹽終濃度為2 5%，加入乙酸乙酯進行萃取，使?jié)饪s液和乙酸乙酯的體積比為1: (I 3);(6)將步驟(5)所得的乙酸乙酯相濃縮并回收乙酸乙酯得到油茶多酚；(7)將步驟(5)乙酸乙酯萃取后的水相用AB-8大孔樹脂吸附I 5小時，然后依次用水、O.1 O. 3%的NaOH或KOH溶液、10 30%乙醇溶液洗脫，最后用70 90%乙醇溶液解析，收集解析液，濃縮、干燥得皂素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述油茶枯中提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，其特征在于步驟(1)中，使用的石油醚沸程為60 90°C，在40 90 1條件下連續(xù)浸提I 5小時，浸提 I 3次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述油茶枯中提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，其特征在于步驟(2)中，提取時間為1.5 4小時，提取I 3次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述油茶枯中提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，其特征在于步驟(3)中，用I 10%的鹽酸或硫酸調(diào)節(jié)溶液pH為I 6。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述油茶枯中提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，其特征在于步驟(4)中，采用離心分離得到油茶多糖沉淀，離心轉(zhuǎn)速大于2000rpm，油茶多糖用真空干燥或冷凍干燥。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從油茶枯中綜合提取油茶多糖、多酚和皂素的方法，該方法包括如下步驟(1)油茶枯脫脂后，經(jīng)水提、濃縮、除蛋白、醇沉獲得油茶多糖；(2)醇沉油茶多糖后的上清液，濃縮、加鹽，用乙酸乙酯萃取獲得油茶多酚；(3)萃取油茶多酚后的水相，用樹脂吸附、解析后得皂素。本發(fā)明克服了皂素提取過程中多糖、多酚等物質(zhì)的影響，提高了皂素的純度；本發(fā)明獲得了油茶多糖、多酚、皂素等3種產(chǎn)品，克服傳統(tǒng)方法油茶枯利用率不高的不足。
文檔編號C07H15/256GK102993328SQ20121059003
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月31日
發(fā)明者覃江克, 高石花, 李怡杰, 萬廣朋, 明娜, 陳珊 申請人:廣西師范大學(xué)