醫(yī)學(xué)用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，所述的分子用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥。優(yōu)選地，所述的分子包括以下結(jié)構(gòu)或者由以下的結(jié)構(gòu)所組成：Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp，或者Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp，或者其衍生物或者片段，其中B是第一化學(xué)部分，j是0或1，n是從1-10的整數(shù)，X是任意的氨基酸，r是從0到2的整數(shù)，m是從1到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，p是0或者1，并且[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]是[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]的逆反(retro-inverso)肽。
【專(zhuān)利說(shuō)明】醫(yī)學(xué)用途
[0001]本發(fā)明涉及分子的醫(yī)學(xué)用途，并且尤其涉及分子在治療病癥中的用途，在所述的病癥中，雄激素受體(AR)和/或雌二醇受體(ER)的活性是影響因素。
[0002]在本說(shuō)明書(shū)中列舉或者討論了明顯在先出版的文件，這不應(yīng)該必然地被當(dāng)作是承認(rèn)該文件是本領(lǐng)域現(xiàn)狀的一部分或者是公知常識(shí)。
[0003]子宮內(nèi)膜異位癥是育齡婦女的常見(jiàn)病，其中來(lái)自子宮內(nèi)膜的細(xì)胞出現(xiàn)在子宮腔夕卜，最常見(jiàn)地在卵巢上并旺盛生長(zhǎng)。在治療之后有發(fā)生慢性和復(fù)發(fā)過(guò)程的傾向，這導(dǎo)致令人衰弱的慢性盆腔痛和不育癥。其是由于腹痛和不育癥入院的主要原因，并且認(rèn)為在5-10%的婦女中發(fā)生。
[0004]目前用于治療子宮內(nèi)膜異位癥的方法有多個(gè)缺點(diǎn)。
[0005]非甾體抗炎藥(NSAID)如布洛芬和萘普生治療由子宮內(nèi)膜異位癥所導(dǎo)致的炎癥以及緩解疼痛和不適感；然而其可能導(dǎo)致惡心、嘔吐和腹瀉。長(zhǎng)期使用還可能導(dǎo)致腸胃刺激、腎臟損傷和心臟病發(fā)作和中風(fēng)的風(fēng)險(xiǎn)提高，并且其可能降低阿司匹林在減少不利的心血管事件中的功效。當(dāng)NSAID與基于喹諾酮的抗生素一起服用時(shí)，其可能引起癲癇。
[0006]撲熱息痛和可待因(單獨(dú)的或者與撲熱息痛一起)可以通過(guò)處方用于子宮內(nèi)膜異位癥的患者，但是經(jīng)常可能導(dǎo)致便秘，這可能加重癥狀。
[0007]從二十世紀(jì)五十年代末期以來(lái)，子宮內(nèi)膜異位癥癥狀的主要控制方式是復(fù)合口服避孕藥丸。盡管不能治愈，但是此藥丸一般被較好地耐受并且確實(shí)通過(guò)抑制月經(jīng)周期緩解了主要的疼痛癥狀。治療方案是多樣的，從通常用于避孕的三周服藥/ 一周停藥的周期到嚴(yán)重疾病情況下的四個(gè)月服藥/一周停藥的周期。常見(jiàn)的副作用包括不規(guī)律的陰道出血、液體潴留、腹脹、體重增加、貪食、惡心、頭痛、乳房觸痛和抑郁癥。顯著的缺點(diǎn)是避孕效果，并且因此避孕藥丸不適合希望保持生育能力的婦女。
[0008]合成黃體酮(progesterone)(例如孕酮(progestin)/孕激素)阻礙排卵，并且自從二十世紀(jì)五十年代中期以來(lái)已經(jīng)成功地用于治療子宮內(nèi)膜異位癥，例如，作為子宮內(nèi)避孕器(例如Mirena IUD)。然而，在具有顯著的避孕效果的同時(shí)，其他的副作用包括情緒改變、胃氣脹、不規(guī)則出血和體重增加。
[0009]已經(jīng)使用抗孕激素如合成的睪酮衍生物(例如Danzol和孕三烯酮)來(lái)通過(guò)降低天然的雌激素和黃體酮水平誘導(dǎo)類(lèi)似絕經(jīng)期的狀態(tài)；然而其可能誘導(dǎo)體重增加、痤瘡、毛發(fā)生長(zhǎng)和嗓音低沉。
[0010]促性腺素釋放激素(GnRH)類(lèi)似物(例如戈舍瑞林、那法瑞林、亮丙瑞林/柳普林(Ieupron)和曲普瑞林)也通過(guò)阻斷雌激素產(chǎn)生來(lái)誘導(dǎo)人工的絕經(jīng)狀態(tài)。然而，常見(jiàn)的副作用包括潮熱、陰道干燥和性欲低下。長(zhǎng)期使用，例如長(zhǎng)于六個(gè)月，與導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的骨質(zhì)流失相關(guān)聯(lián)。
[0011]最近，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了阻斷睪酮向雌激素轉(zhuǎn)化的芳香化酶(aramatase)抑制劑(例如來(lái)曲唑和阿那曲唑)與GnRH拮抗劑的聯(lián)合用途，所述的GnRH拮抗劑是預(yù)防卵巢過(guò)度刺激和預(yù)防絕經(jīng)前婦女的卵巢囊腫的發(fā)展所必須的。然而，需要鈣、維生素D和磷酸氫鹽來(lái)緩解與延長(zhǎng)的治療相關(guān)的骨質(zhì)流失。
[0012]可以采用三大類(lèi)的外科手術(shù)來(lái)治療子宮內(nèi)膜異位癥。首先，可以使用微創(chuàng)腹腔鏡法，其中熱、激光或者電清除將損傷去除，這經(jīng)常在診斷過(guò)程中進(jìn)行。腹腔鏡檢查的一般時(shí)間可以超過(guò)八年，并且由于損傷去除不完全和/或無(wú)法確定隱藏的損傷，癥狀頻繁地復(fù)發(fā)。其次，可以進(jìn)行開(kāi)腹手術(shù)來(lái)進(jìn)入腹腔；然而這是一種具有關(guān)聯(lián)風(fēng)險(xiǎn)和長(zhǎng)住院時(shí)間的大手術(shù)。第三也就是最終的選擇是子宮切除，但是即使如此這也無(wú)法治愈并且損傷可能復(fù)發(fā)，尤其是在如果留下卵巢的情況下。
[0013]Ng0等人(J Pathol2010 ；222:148-157)討論了在體外和體內(nèi)控制子宮內(nèi)膜異位癥的進(jìn)展，并且將ERK途徑確定為治療子宮內(nèi)膜異位癥的新靶點(diǎn)的潛在可能。然而，該作者強(qiáng)調(diào)，需要進(jìn)一步的臨床研究來(lái)評(píng)估在人類(lèi)中的效果和耐受性，并且沒(méi)有提到保持生育能力有關(guān)的內(nèi)容。
[0014]因此，仍然需要按照保持生育能力的方式，優(yōu)選地比前文所述受更少的缺點(diǎn)影響的方式來(lái)治療其中AR和/或ER的活性作為影響因素的子宮內(nèi)膜異位癥和/或其他病癥。
[0015]意外地以及出人意料地，本發(fā)明人目前證明了降低酪氨酸激酶Src和AR或者ER之間的相互作用能夠使子宮內(nèi)膜異位癥患者癥狀減輕并且同時(shí)沒(méi)有避孕效果。
[0016]AR和ER兩者都已知和酪氨酸激酶Src以及可能的其他Src家族激酶相互作用。AR 受體結(jié)合到 Src 的 SH3 結(jié)構(gòu)域(Migliacc1 等人(0ncogene2007, 26:6619))。SH3結(jié)構(gòu)域有50-70個(gè)氨基酸長(zhǎng)，并且經(jīng)常在真核細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架蛋白中起到重要作用。該結(jié)構(gòu)域結(jié)合富含脯氨酸的肽，從而在激酶活性調(diào)節(jié)以及定位和底物識(shí)別中扮演主要的角色。ER受體結(jié)合到Src的SH2結(jié)構(gòu)域(Migliacc1等人(CancerResearch2005, 65 (22): 10585-93))。SH2結(jié)構(gòu)域一般是約100個(gè)氨基酸長(zhǎng)，并且一般地結(jié)合到靶蛋白中的更長(zhǎng)肽基序環(huán)境下的磷酸化的酪氨酸殘基。
[0017]不希望被任何理論所約束，本發(fā)明人相信通過(guò)降低Src家族激酶和AR或ER之間的相互作用，由留類(lèi)激素進(jìn)行的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的非基因組調(diào)節(jié)可以被選擇性的抑制(例如，Src家族激酶的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活化、細(xì)胞周期蛋白Dl的表達(dá)和DNA的合成)，然而與此同時(shí)由甾類(lèi)激素進(jìn)行的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因組調(diào)節(jié)被保留。以這種方式，避免了與傳統(tǒng)留類(lèi)激素的阻斷或者消除(其消除基因組和非基因組影響兩者)相關(guān)聯(lián)的許多副作用，并且治療可以更好地保持。此外，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，降低Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用出人意料地沒(méi)有避孕的效果。這和現(xiàn)有的治療有鮮明的對(duì)比。生育能力的保留代表了子宮內(nèi)膜異位癥治療中的顯著進(jìn)步，這是由于現(xiàn)在必須暫停使用抗雄激素和/或抗雌激素的治療才使得能夠懷孕，而所述的暫?？梢詫?dǎo)致疾病的復(fù)發(fā)。因此，本發(fā)明人相信以此相互作用為靶向在對(duì)抗子宮內(nèi)膜異位癥和/或其他的病癥是有用的，在子宮內(nèi)膜異位癥和/或其他的病癥中AR和/或ER的活性起作用。
[0018]因此，本發(fā)明的第一方面提供了抑制或者防止Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用的分子，所述的分子用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥。
[0019]類(lèi)似地，本發(fā)明提供了抑制或者防止Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用的分子在制造藥物中的用途，所述的藥物用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥。
[0020]類(lèi)似地，本發(fā)明提供了方法，所述的方法用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥；所述的方法包括向需要其的受試者給予有效量的抑制或者防止Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用的分子。
[0021]對(duì)于“預(yù)防或者治療”其中AR和/或ER的活性是影響因素的病癥，我們包括的意思是本發(fā)明可以用于緩解失調(diào)的癥狀(即緩和用途)或者治療失調(diào)(例如通過(guò)抑制或者消除致病物)，或者預(yù)防失調(diào)(即預(yù)防用途一預(yù)防癥狀?lèi)夯蛘哌M(jìn)展，或者減少失調(diào)的進(jìn)展)。
[0022]優(yōu)選地，預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是哺乳動(dòng)物受試者如人中的影響因素的病癥。供選擇地，所述的受試者可以是動(dòng)物，例如為飼養(yǎng)的動(dòng)物(例如狗或者貓)、實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物(例如實(shí)驗(yàn)室嚙齒動(dòng)物、小鼠、大鼠或者兔子)或者在農(nóng)業(yè)中重要的動(dòng)物(即家畜)，例如牛、綿羊、馬或者山羊。所述的受試者可以是雌性的或者雄性的。
[0023]我們認(rèn)為Src家族激酶包括Src家族的任意激酶。例如，所述的激酶可以是選自以下的任意非酪氨酸激酶:Src、Yes、Fyn和Fgr (即SrcA亞家族的激酶)、Lck、Hck、Blk和Lyn (即 SrcB 亞家族的激酶)和 Frk (Amanchy 等人,Proteome Res2008, 7 (8): 3447)。最優(yōu)選地，所述的Src家族激酶是Src激酶。
[0024]我們認(rèn)為Src家族激酶包括人Src家族激酶如人Src激酶的含義，我們認(rèn)為雄激素受體(AR)包括人AR的含義，我們認(rèn)為雌二醇受體(ER)包括人ER的含義，在以下的文獻(xiàn)中提供以上所有的序列:Migliacc1等人(CancerResearch2005, 65 (22): 10585-93), Migliacc1 等人(0ncogene2007, 26:6619)，Venter 等人(Science2001, 291(5507):1304-51)和 W02008/113770。應(yīng)當(dāng)理解的是，基因和 mRNA 序列有天然的可變性，并且該可變性包括在本文描述的各Src家族激酶(例如Src激酶)、AR和ER的含義中。
[0025]人Src家族激酶(例如Src激酶)、AR和/或ER的變體也包括在內(nèi)，只要其具有親本Src家族激酶(例如Src激酶)、AR或ER的一種或多種活性。換言之，所述的變體是功能性變體。例如，所述的變體可以與對(duì)應(yīng)的人的序列具有至少60%的序列同源性，例如至少65 %、70 %、75 %、80 %和85 %的序列同源性和更優(yōu)選地90 %、95 %或者99 %的序列同源性。變體包括插入、刪除和取代，其可以是保守的或者非保守的?！氨Ｊ厝〈币鈭D表示組合如 Gly、Ala ;Val、lie、Leu ;Asp、Glu ;Asn、Gln ;Ser、Thr ；Lys> Arg ;和 Phe、Tyr。
[0026]我們還認(rèn)為Src家族激酶(例如Src激酶)、AR和ER各自還包括人Src家族激酶(例如Src激酶)、AR和ER的直系同源物。Src家族激酶、AR和ER的適合的同源物的例子包括來(lái)自小鼠和大鼠的那些。其他的直系同源物包括來(lái)自圖3所列出的物種的那些。應(yīng)當(dāng)理解的是，編碼各個(gè)人Src家族激酶、AR和ER的直系同源物的基因和mRNA序列有天然的可變性，并且該可變性包括在本文定義的同源Src家族激酶、AR和ER的含義中。
[0027]在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的分子是抑制或者防止Src家族激酶(如Src激酶)的SH3結(jié)構(gòu)域和雄激素受體之間的相互作用的分子。Migliacc1等人(0ncogene2007, 26:6619)中提供了此相互作用的細(xì)節(jié)。
[0028]我們認(rèn)為Src家族激酶的“SH3結(jié)構(gòu)域”包括了 Src家族激酶(如Src激酶)的N末端Src同源物-3結(jié)構(gòu)域。SH3結(jié)構(gòu)域一般為50-70個(gè)氨基酸長(zhǎng)并且結(jié)合富含脯氨酸的肽。Migliacc1等人(EMBO J2000, 19:5406-5417)的工作證實(shí)了 Src激酶的SH3結(jié)構(gòu)域在Src激酶與AR之間的相互作用中的重要性。
[0029]在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的分子是抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)的SH2結(jié)構(gòu)域和雌二醇受體之間的相互作用的分子。在Migliacc1等人(CancerResearch2005, 65 (22): 10585-93)中提供了此相互作用的細(xì)節(jié)。
[0030]我們認(rèn)為Src家族激酶的“SH2結(jié)構(gòu)域”包括了 Src家族激酶(例如Src激酶)的Src同源物-2結(jié)構(gòu)域的含義。SH2結(jié)構(gòu)域一般地為約100個(gè)氨基酸長(zhǎng)，并且一般地結(jié)合到磷酸化的酪氨酸殘基。
[0031]關(guān)于所治療的哺乳動(dòng)物受試者，應(yīng)當(dāng)理解的是所述的分子是能夠抑制或者防止該哺乳動(dòng)物物種的Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素或者雌二醇受體之間的相互作用的分子。例如，當(dāng)所述的哺乳動(dòng)物受試者是人類(lèi)時(shí)，所述的分子能夠抑制或者防止人Src家族激酶(例如Src激酶)和人AR或者人ER之間的相互作用，等等。
[0032]我們認(rèn)為防止或者抑制Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用的分子首先包括阻止相互作用的形成，以及當(dāng)相互作用已經(jīng)形成后使其減少的含義。優(yōu)選地，所述的分子阻止相互作用或者將其減少到不可檢測(cè)的水平。
[0033]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的分子選擇性地防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或ER之間的相互作用。例如，優(yōu)選地，所述的分子對(duì)Src家族激酶和AR或ER之間的相互作用的防止或者抑制與對(duì)Src家族激酶和任意其他分子之間的相互作用的防止相比達(dá)到更大的程度(例如至少5倍、10倍、20倍、50倍、100倍或者1000倍)。類(lèi)似地，優(yōu)選地，所述的分子對(duì)AR或ER和Src家族激酶之間的相互作用的防止或者抑制與對(duì)AR或ER和任意其他分子之間的相互作用的防止相比達(dá)到更大的程度(例如至少5倍、10倍、20倍、50倍、100倍或者1000倍)。
[0034]在具體的分子的存在或者不存在下，通過(guò)評(píng)價(jià)Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用來(lái)方便地確定所述的分子是否防止或者抑制Src家族激酶和AR或ER之間的相互作用。如前文所提到的，相信Src激酶的SH3結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)Src激酶和AR之間的相互作用，因此Src家族激酶(例如Src激酶)的SH3結(jié)構(gòu)域和AR之間的相互作用可以在具體分子的存在或者不存在下進(jìn)行評(píng)價(jià)。類(lèi)似地，相信Src激酶的SH2結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)Src激酶和ER之間的相互作用，因此Src家族激酶(例如Src激酶)的SH2結(jié)構(gòu)域和ER之間的相互作用可以在具體分子的存在或者不存在下進(jìn)行評(píng)價(jià)。用于評(píng)估兩種蛋白質(zhì)之間的相互作用的方法在本領(lǐng)域是熟知的，并且任意的適合方法都可以使用。實(shí)例包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，表面等離子體共振分析、競(jìng)爭(zhēng)分析、基于芯片的分析、免疫細(xì)胞熒光染色、酵母雙雜交技術(shù)和噬菌體展示，其全部都是在本領(lǐng)域中常用的操作，并且描述在，例如Plant等人(1995) AnalytB1chem, 226(2)，342-348 和 Sambrook 等人(2001)Molecular Cloning A LaboratoryManual.Third Edit1n.Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork中。評(píng)估蛋白質(zhì)相互作用的其他方法包括具有離子噴霧質(zhì)譜/HPLC方法的超濾或者其他的物理和分析方法。可以使用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)方法，例如，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，其中可以通過(guò)測(cè)量熒光標(biāo)記彼此接近時(shí)的相互作用來(lái)測(cè)量?jī)蓚€(gè)熒光標(biāo)記的實(shí)體的結(jié)合。在尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用了免疫沉淀檢測(cè)如描述在Migliacc1等人(0ncogene2007, 26:6619)中的來(lái)評(píng)估Src家族激酶(例如Src激酶)的SH3結(jié)構(gòu)域和AR之間的相互作用和/或Src家族激酶(例如Src激酶)的SH2結(jié)構(gòu)域和ER之間的相互作用。
[0035]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的分子是包括以下結(jié)構(gòu)或者由以下結(jié)構(gòu)所組成的分子:Bj- [ (Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys] m-Rp,或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) n] m-Rp,或者其衍生物或者片段，
[0036]其中B是第一化學(xué)部分，j是O或1，η是從1_10的整數(shù)，X是任意的氨基酸，r是從O到2的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P是O或者1，并且[lys-1le-arg-ala-hi s-pro-hi s-xr-(pro) n]是[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys]的逆反月太(retro-1nverso peptide)。
[0037]應(yīng)當(dāng)理解的是,包括結(jié)構(gòu)B」-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m-Rp或者Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm-Rp,或者由所述的結(jié)構(gòu)所組成的分子一般具有妝部分[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m 或者[lys-1le-arg-ala-his-pr0-his-\-(pix))n]m，并且任選地在一個(gè)或者兩個(gè)末端(即1和&)具有另外的化學(xué)部分。換言之，j = O并且P = O ;或者j = I并且P = O ;或者j = O并且P = I ;或者j = I并且P = 1在一個(gè)實(shí)施方案中，j = O并且P = O,使得所述的分子是具有結(jié)構(gòu)[(Pro)n-X1^-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lyslm 或者[lys-1Ie-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro)n]m 的月太。
[0038]B和R可以獨(dú)立地是任意的化學(xué)部分，例如脂質(zhì)(例如糖脂、磷脂、鞘脂)、脂肪酸、甘油三酸酯、甘油、異戊二烯基或者異平基部分(例如法呢基或者香葉基香葉基部分)、碳水化合物(例如單糖或者多糖)、氨基酸、肽、多肽或者核酸、或者其組合中的任一種。因此，所述的部分可以是糖肽或者脂肽。所述的部分可以是低分子量或者高分子量的聚乙二醇，如具有200-70000的分子量。技術(shù)人員可以確定任何的其他適合的部分。
[0039]在一個(gè)實(shí)施方案中，B是H，或者乙酰基基團(tuán)，或者具有游離的或者乙?；苌腘H2基團(tuán)的一個(gè)氨基酸或者氨基酸序列中的任一個(gè)。
[0040]在另外的實(shí)施方案中，R是OH基團(tuán)，或者NH2基團(tuán)，或者具有C-末端的羧基-酰胺基基團(tuán)的一個(gè)氨基酸或者氨基酸序列中的任一個(gè)。
[0041]化學(xué)部分B和R可以任選地連接到分子的肽部分，使得當(dāng)所述的分子給予到受試者時(shí)其可以從所述的肽部分切除。例如，部分B和R中任一個(gè)可以包括切割位點(diǎn)，所述切割位點(diǎn)當(dāng)分子被給予到身體時(shí)可以被切割。一般地，所述切割位點(diǎn)是蛋白酶切割位點(diǎn)，其可以被受試者中存在的蛋白酶切割。
[0042]化學(xué)部分B和/或R可以按照本領(lǐng)域已知的任何適合方法連接到肽部分。例如，部分B和/或R可以按照任意的交聯(lián)多肽的傳統(tǒng)方式來(lái)連接到肽部分，例如一般地描述于O’ Sullivan等人Anal.B1chem.(1979) 100, 100-108中的那些。例如，第一部分可以富含巰基基團(tuán)并且第二部分與能與那些巰基基團(tuán)反應(yīng)的雙官能試劑反應(yīng)，所述的雙官能試劑例如為碘乙酸的N-羥基琥珀酰亞胺酯(NHIA)或者N-琥珀酰亞胺基-3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯(STOP)，其是在共軛部分之間插入二硫鍵橋的異源雙功能交聯(lián)試劑。酰胺鍵和硫醚鍵，例如從間-馬來(lái)酰亞胺苯甲酰-N-羥基琥珀酰亞胺酯形成的，在體內(nèi)一般地比二硫鍵更為穩(wěn)定。
[0043]其他有用的交聯(lián)試劑包括S-乙?；鶐€基乙酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(SATA)、辛二亞氨酸二甲酯二鹽酸鹽和N，N’-鄰亞苯基二馬來(lái)酰亞胺，所述的S-乙?；鶐€基乙酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(SATA)是用于伯胺的巰基化試劑，能夠在溫和的條件下使巰基脫保護(hù)(Julian 等人(1983) Anal.B1chem.132, 68)。
[0044]將化學(xué)部分B和/或R連接到肽部分的另外方法包括化學(xué)連接方案，使用點(diǎn)擊化學(xué)偶聯(lián)的方案，或者通過(guò)使用Staudinger連接偶聯(lián)的方案，這是本領(lǐng)域內(nèi)所熟知的。其他適用的方法可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)確定。
[0045]當(dāng)化學(xué)部分B和/或R是肽或者多肽時(shí)，認(rèn)識(shí)到的是，所述的分子的肽部分和化學(xué)部分B和/或R可以是融合多肽的部分，所述的融合多肽可以由核酸分子編碼。例如，可以使用本領(lǐng)域內(nèi)成熟的基因工程技術(shù)對(duì)化學(xué)部分B和/或R進(jìn)行基因工程改造來(lái)包含所述分子的肽部分。
[0046]便利地，所述的分子的肽部分[(PrcOn-X^His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lysilm或者[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) Jm的長(zhǎng)度少于57個(gè)氨基酸殘基,例如長(zhǎng)度少于55、50、45、40、35、30、25、20或者15個(gè)氨基酸。因此，所述的肽部分可以具有8到60個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者10到15個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者15到20個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者20到25個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者25到30個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者30到35個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者35到40個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者40到45個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者45到50個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度，或者50到55個(gè)氨基酸殘基的長(zhǎng)度。優(yōu)選地，所述的肽部分的長(zhǎng)度為 8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24 或者 25 個(gè)氨基酸，以及最優(yōu)選地，長(zhǎng)度為10個(gè)氨基酸。
[0047]理解的是,包括結(jié)構(gòu)Β」-[ (Pro) n-Xr_Hi s-Pro-Hi s-Ala-Arg-1 I e-Lys] m_Rp 或者 Bj-[lys-1 I e-arg-ala-hi s-pro-hi s-xr- (pro) Jm-Rp 或者由結(jié)構(gòu) Bj-[ (Pro)n-Xr-His-Pro-His-AIa-Arg-1le-Lys]m-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) Jm-Rp 所組成的分子片段可以使用，只要其能夠防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)與AR和/或ER之間的相互作用。因此，可能的是，所述的分子可以包含少于8個(gè)前文所述的氨基酸。一般地，所述的片段是分子的肽部分[(Pro)n-X廠His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m或者[lys_ile-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm的片段,并且其一般的長(zhǎng)度是至少3個(gè)氨基酸,例如長(zhǎng)度為至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或者15個(gè)氨基酸。因此，所述的分子可以包括月太[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys] m 5--- [lys-1 I e-arg-ala-hi s-pro-hi s-xr-(Pro)Jm 的片段或者由肽[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m或者[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-Xr_(pro)n]m的片段所組成,只要其能夠防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)與AR和/或ER之間的相互作用。
[0048]可以使用下文進(jìn)一步描述的片段的衍生物或者鹽。例如，可以在片段的一個(gè)或者兩個(gè)末端添加封端部分來(lái)提高穩(wěn)定性。
[0049]適合的片段的實(shí)例可以選自:HPHARIK、HPHAR、PHPHAR、HPH、PHPH、PPHPH、PPPHPH、PHP、PPHP、PPPHP、PPPH、PPH和PPP。所述的片段的具體衍生物或者鹽可以選自:Ac-HPHARIK-NH2、Ac_HPHAR-NH2、Ac_PHPHAR-NH2、Ac-HPH_NH2、Ac-PHPH_NH2、Ac-PPHPH-NH2、Ac-PPPHPH-NH2、Ac-PHP—NH2、Ac-PPHP-NH2、Ac-PPPHP-NH2P、Ac-PPPH_NH2、Ac-PPH-NH2 和 Ac-PPP-NH2。
[0050]認(rèn)識(shí)到的是，當(dāng)部分B和/或R是肽時(shí)，整個(gè)的分子可以是肽，并且該肽的長(zhǎng)度可以多于57個(gè)氨基酸。然而，如果整個(gè)的分子是肽，優(yōu)選地，其長(zhǎng)度少于150個(gè)氨基酸，例如長(zhǎng)度少于 140、130、120、110、100、90、80、70 或者 60 個(gè)氨基酸。
[0051]一般地說(shuō)，所述的分子的分子量少于50kDa，例如少于40、30、20、10或者5kDa。一般地，所述的分子的分子量在1000到5000Da。因此，所述的分子的分子量可以是約4500、4000,3500,3000 或者 2500Da，或者分子量為 1000 到 2500Da。
[0052]在一個(gè)實(shí)施方案中，η是1、2、3、4、5、6、7、8、9或者10中任一個(gè)，并且最優(yōu)選地，η
=3。在另一個(gè)實(shí)施方案中是1、2或者3中任一個(gè)，以及最優(yōu)選地，m = I。因此,在尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，η是3以及m是I。
[0053]&代表了 I或2個(gè)氨基酸殘基的一段(stretch)，所述的氨基酸殘基可以獨(dú)立地是或者兩者都是任意的氨基酸殘基。因此，I所代表的氨基酸殘基可以是任意的由DNA編碼的天然存在的氨基酸殘基，其選自丙氨酸(Ala，A)、精氨酸(Arg，R)、天冬酰胺(Asn，N)、天冬氨酸(Asp，D)、半胱氨酸(Cys，C)、谷氨酰胺(Gln，Q)、谷氨酸(Glu，E)、甘氨酸(Gly，G)、組氨酸(His, H)、異亮氨酸(He, I)、亮氨酸(Leu, L)、賴(lài)氨酸(Lys, K)、甲硫氨酸(Met, Μ)、苯丙氨酸(Phe, F)、脯氨酸(Pro, P)、絲氨酸(Ser, S)、蘇氨酸(Thr, T)、色氨酸(Trp, W)、酪氨酸(Tyr，Y)和纈氨酸(Val，V)。然而，與肽部分由多核苷酸表達(dá)來(lái)形成不同，\所代表的氨基酸殘基可以包括一個(gè)或多個(gè)不由DNA編碼的氨基酸殘基，包括下文中所描述的那些。在一個(gè)實(shí)施方案中，r是O并且在供選擇的實(shí)施方案中r是I并且X是蘇氨酸殘基。
[0054]為了避免疑義,所述的分子不是AR或者ER。
[0055]不愿意受到任何理論的約束，本發(fā)明人相信肽PPPHPHARIK是人AR的部分，其介導(dǎo)與Src家族激酶的SH3結(jié)構(gòu)域的相互作用。因此，在尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的分子的月太部分[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys] m 或者[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) n] m 是 PPPHPHARIK,或者其逆反肽 kirahphppp。
[0056]肽PPPHPHARIK與人AR的氨基酸殘基377-386等價(jià)，并且不愿意受到任何理論的約束，本發(fā)明人相信其他物種的AR的相應(yīng)部分具有同樣的活性。我們認(rèn)為“相應(yīng)部分”包括了另一種AR的氨基酸殘基序列的含義，當(dāng)將人的AR和其他的AR進(jìn)行比較時(shí)，例如使用比對(duì)工具如MacVector或者CLUSTALW進(jìn)行比較時(shí)，所述的氨基酸殘基序列與給定的人AR的氨基酸序列一致。因此，在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，肽部分是對(duì)應(yīng)于人AR的位置377-386的氨基酸序列(PPPHPHARIK)的肽。例如，在小鼠和大鼠AR中的對(duì)應(yīng)肽是PPTHPHARIK，因此所述的肽部分可以是PPTHPHARIK或者其逆反肽kirahphtpp。在圖3中提供了一系列其他物種的對(duì)應(yīng)肽，因此所述的肽部分可以是圖3中列出的任意肽或者其逆反肽。優(yōu)選地，將肽PPPHPHARIK給予到人類(lèi)受試者，并且將肽PPTHPHARIK給予小鼠或者大鼠受試者，等等。
[0057]可以使用Clustal W程序(Thompson等人，1994)來(lái)比對(duì)兩種蛋白質(zhì)。所使用的參數(shù)可以是如下的:快速雙序列比對(duì)參數(shù):K-元組(字符)大?。?，窗口大??；5，空位罰分；3，頂部對(duì)角線的數(shù)量；5.得分方法:Χ百分比。多比對(duì)參數(shù):空位開(kāi)放罰分；10，空位拓展罰分；0.05。得分矩陣=BLOSUM0
[0058]在尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的分子包括肽PPPHPHARIK或者PPTHPHARIK，或者由所述肽組成。
[0059]前文中定義的分子的肽部分[(Pro)n-X廠His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m或者[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm或者其片段一般地使用蛋白質(zhì)化學(xué)技術(shù)來(lái)進(jìn)行制備，例如使用部分蛋白水解(外切水解或者內(nèi)切水解)或者通過(guò)從頭合成。供選擇地，肽可以通過(guò)重組DNA技術(shù)來(lái)制備。用于克隆、操作、修飾和表達(dá)核酸和純化所表達(dá)的蛋白的技術(shù)在本領(lǐng)域中是熟知的，并且例如描述在:Sambrook等人(2001) “Molecular Cloning, aLaboratory Manual，，, 3rd edit1n, Sambrook等人(eds)，Cold Spring Harbor LaboratoryPress, Cold Spring Harbor, NY, USA。
[0060]前文中所定義的分子的肽部分[(Pro)n-X廠His-Pro-His-Ala-Arg-1le_Lys]m或者[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m或者其片段也可以是化學(xué)合成的,例如通過(guò)Merrifield等人(1964)的固相肽合成。供選擇地，所述的肽部分可以使用標(biāo)準(zhǔn)溶液方法(參見(jiàn)，例如，Bodanszky, 1984和Dugas等人，1981)來(lái)合成。新合成的肽可以進(jìn)行純化,例如通過(guò)高效液相色譜(HPLC)進(jìn)行純化，以及可以例如使用質(zhì)譜或者氨基酸序列分析來(lái)進(jìn)行表征。
[0061]應(yīng)當(dāng)意識(shí)到的是，其他的適合的分子可以包括任意的抗體，所述的抗體是針對(duì)Src家族激酶(例如Src激酶)或者AR和ER的，所述抗體能夠防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用。如前文所提到的，本發(fā)明人相信Src激酶的SH3結(jié)構(gòu)域和AR的377-386氨基酸殘基介導(dǎo)了 Src激酶和AR之間的相互作用。因此，將理解的是抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用的適合的分子包括了針對(duì)Src家族激酶(例如Src激酶)的SH3結(jié)構(gòu)域的抗體，或者在對(duì)應(yīng)于人AR的377-386氨基酸的位置結(jié)合到AR的抗體(例如針對(duì)具有結(jié)構(gòu)(Pro)n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys的肽的抗體,其中η是I到10的整數(shù)，X是任意的氨基酸以及r是O到2的整數(shù)，例如針對(duì)PPPHPHARIK或者PPTHPHARIK的抗體)。類(lèi)似地，相信Src激酶的SH2結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)Src激酶和ER之間的相互作用。因此，將理解的是抑制或防止Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用的適合的分子包括了針對(duì)Src家族激酶(例如Src激酶)的SH2結(jié)構(gòu)域的抗體。優(yōu)選地，所述的抗體如前文所討論地防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用。
[0062]如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“抗體”包括但不限于多克隆、單克隆、嵌合、單鏈、Fab片段和由Fab表達(dá)文庫(kù)所產(chǎn)生的片段。該片段可以包括保持了其對(duì)靶物質(zhì)的結(jié)合活性的完整抗體的片段、Fv、F(ab’)和F(ab’)2片段，以及單鏈抗體(ScFV)、融合蛋白和包含了抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)的其他合成蛋白。還包括的是結(jié)構(gòu)域抗體(dAb)、雙抗體、駱駝抗體和改造的駱駝抗體。除此之外，為了給予到人類(lèi)，所述的抗體或者其片段可以是人源化的抗體，其現(xiàn)在在本領(lǐng)域是熟知的(Janeway 等人(2001) Immunob1logy., 5th ed., Garland Publishing)。
[0063]前文所描述的結(jié)合到Src家族激酶(例如Src激酶)或AR和ER的特定區(qū)域的適合的抗體可以使用本領(lǐng)域內(nèi)長(zhǎng)期以來(lái)建立的技術(shù)由本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)行制備。制備單克隆抗體和抗體片段的方法在本領(lǐng)域是熟知的，并且包括雜交瘤技術(shù)(K0hler&MilStein(1975)“Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity.Nature256:495 - 497);抗體卩遼菌體展不(Winter 等人(1994) “Making antibodies byphage display technology.^Annu.Rev.Tmmunol.12:433 - 455);核糖體展不(Schaffitzel等人(1999) “Ribosome display:an in vitro method for select1n and evolut1nof antibodies from libraries.，，J.1mmunol.Methods231:119 - 135)和重復(fù)菌落過(guò)濾篩選(Iterative Colony Filter Screening) (G1vannoni 等人(2001) “Isolat1n ofanti—ang1genesis antibodies from a large combinatorial repertoire by colonyfilter screening.”Nucleic Acids Res.29:E27)。除此之外，適合用于本發(fā)明的抗體和抗體片段描述在例如以下的出版物中:“Monoclonal Hybridoma Antibodies:Techniquesand Applicat1n，，，Hurrell(CRC Press, 1982) ;“Monoclonal Antibodies: A Manual ofTechniques”，H.Zola, CRC Press, 1987, ISBN:0-84936-476-0 ;“Antibodies:A LaboratoryManual，，1st Edit1n, Harlow&Lane, Eds, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NewYork, 1988.1SBN0-87969-314-2 ;“Using Antibodies: A Laboratory Manual2ndEdit1n, Harlow&Lane, Eds, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York,1999.1SBN0-87969-543-9 和“Handbook of Therapeutic Antibodies” Stefan Diibel, Ed., IstEdit1n, -ffiley-VCH, ffeinheim, 2007.1SBN:3-527-31453-9。
[0064]認(rèn)識(shí)到的是，本發(fā)明的分子可以包括促進(jìn)進(jìn)入細(xì)胞的細(xì)胞滲透肽的序列(也稱(chēng)作蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域)。如本領(lǐng)域所公知的，細(xì)胞滲透肽一般地是最多30個(gè)殘基的短肽，所述的細(xì)胞滲透肽具有凈正電荷并且按照不依賴(lài)于受體和不依賴(lài)于能量的方式起作用(Lindgren 等人，2000 ；Deshayes 等人，2005a and2005b ；Takeuchi 等人，2006,其與細(xì)胞滲透肽相關(guān)的全部公開(kāi)內(nèi)容結(jié)合于本文作為參考)。因此，前文所提到的化學(xué)部分B和R可以是細(xì)胞滲透肽。如果是這樣的話，所述的細(xì)胞滲透肽優(yōu)選地是可以從負(fù)責(zé)抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用的分子部分切割的。例如，其可以是在細(xì)胞內(nèi)可切割的。
[0065]所述的分子還可以進(jìn)行修飾，從而它可以更容易地被檢測(cè)，所述的修飾例如通過(guò)將其生物素化或者通過(guò)摻入任意的本領(lǐng)域已知的可檢測(cè)標(biāo)記，例如放射性標(biāo)記、熒光標(biāo)記或者酶標(biāo)記。
[0066]這里所述的分子的氨基酸殘基可以是“L”的異構(gòu)形式。然而，“D”異構(gòu)形式的殘基可以取代任意的L-氨基酸殘基，只要該分子仍然能夠抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用。除非另有具體指示，該定義包括化學(xué)修飾的氨基酸，包括氨基酸類(lèi)似物(如青霉胺、3-巰基-D-纈氨酸)，天然存在的非成蛋白氨基酸(non-proteogenic amino acids)(例如正亮氨酸)和具有本領(lǐng)域內(nèi)已知的特性從而具有氨基酸的特征的化學(xué)合成的化合物。術(shù)語(yǔ)“成蛋白”表明該氨基酸可以通過(guò)熟知的代謝途徑摻入到細(xì)胞中的蛋白質(zhì)中。
[0067]因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，前文所述的分子的肽部分是肽[(Pro)n-X^His-Pro-His-Ala-Arg-1le-LyS]m或者其片段(其優(yōu)選包括前文所定義的那些)的逆反肽。我們認(rèn)為逆反肽(也稱(chēng)作全D-逆或者逆對(duì)映肽)包括肽中所有的L-氨基酸都被D-氨基酸所替代并且肽鍵被反轉(zhuǎn)的肽的含義。因此，所述的肽由按照母體肽L-序列相反的順序組裝的D-氨基酸所組成。[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys] m 的逆反妝是[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xrbro)n]m(其中小寫(xiě)的字母表明是相對(duì)應(yīng)的D-氨基酸)?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域內(nèi)已知的方法來(lái)合成逆反肽，所述的方法例如為Meziere等人(1997) J.1mmunol.1593230-3237中所描述的那些。該方法涉及到制備包含涉及骨架而非側(cè)鏈的取向的變化的假肽，所述假肽保持與母體肽非常相似。逆反肽對(duì)蛋白質(zhì)水解更具抗性。
[0068]為了避免出現(xiàn)疑問(wèn)，前文中所標(biāo)明的所有對(duì)\的優(yōu)選對(duì)其對(duì)應(yīng)的D-氨基酸&也適用。
[0069]前文所描述的分子的肽部分可以是肽“模擬物”，即模擬肽，其模擬了包含前文所描述的氨基酸序列或者由前文所描述的氨基酸序列所組成的肽的結(jié)構(gòu)特征。
[0070]可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的有機(jī)化學(xué)方法來(lái)設(shè)計(jì)和合成在本質(zhì)上不是肽的模擬肽。本質(zhì)上不是肽的模擬肽甚至可以是在治療用途中、在對(duì)降解的抗性中，在滲透性中和在可能的口服給藥中更有優(yōu)勢(shì)的。
[0071]模擬肽是可以通過(guò)模擬肽和蛋白質(zhì)的某些結(jié)構(gòu)特征而結(jié)合到蛋白質(zhì)的小分子。其在科學(xué)和醫(yī)藥中被廣泛地用作細(xì)胞和其他受體的蛋白質(zhì)和肽配體的激動(dòng)劑和拮抗劑，以及用作酶的底物和底物類(lèi)似物。一些實(shí)例是嗎啡生物堿(天然存在的內(nèi)啡肽類(lèi)似物)、盤(pán)尼西林(半合成的)和HIV蛋白酶抑制劑(合成的)。該化合物具有模擬肽或者蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征，并且因此被其他的蛋白質(zhì)所識(shí)別和結(jié)合。與模擬肽結(jié)合會(huì)誘導(dǎo)結(jié)合的蛋白發(fā)揮由該結(jié)合所引起的正常功能(激動(dòng)劑)或者擾亂該功能(拮抗劑，抑制劑)。
[0072]設(shè)計(jì)肽模擬物的主要目標(biāo)在于減少模擬物易被肽酶所切割或者滅活的性質(zhì)。在一個(gè)方法中，例如由Sherman等人(1990)所公開(kāi)的，將一個(gè)或多個(gè)的酰胺鍵按照基本上等排的方式替代為多種化學(xué)官能團(tuán)。這一按步驟的方法在獲得活性類(lèi)似物方面取得了一些成功。在一些情況下，這些類(lèi)似物顯示出比其天然存在的對(duì)應(yīng)物具有更長(zhǎng)的生物半衰期。在另一種方法中，已經(jīng)使用了多種非編碼的或者修飾的氨基酸如D-氨基酸和N-甲基氨基酸來(lái)修飾哺乳動(dòng)物肽。供選擇地，已用共價(jià)修飾來(lái)穩(wěn)定假定具有生物活性的構(gòu)型，例如環(huán)化或者通過(guò)摻入Y -內(nèi)酰胺或者其他類(lèi)型的橋聯(lián)(Veber等人，1978)和(Thorsett等人，1983)。由Rich(1986)公開(kāi)的另一種方法是通過(guò)使用酶抑制劑設(shè)計(jì)中的過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物原理來(lái)設(shè)計(jì)肽模擬物。例如，已知的是抑胃酶氨酸的仲醇模擬了胃蛋白酶底物的固著酰胺鍵(sessileamide bond)的四面體過(guò)渡態(tài)。
[0073]在US5552534中，公開(kāi)了非肽化合物，所述的非肽化合物模擬或者抑制多種肽的化學(xué)和/或生物活性?？梢酝ㄟ^(guò)在某些核物質(zhì)上添加化學(xué)官能基團(tuán)來(lái)產(chǎn)生該化合物，所述的核物質(zhì)例如為四氫吡喃環(huán)，所述的化學(xué)官能基團(tuán)使得化合物至少部分地與肽交叉反應(yīng)。用于制備模擬肽的其他技術(shù)公開(kāi)在US5550251和US5288707中。
[0074]可以使用市售軟件包來(lái)設(shè)計(jì)小肽和/或模擬肽，優(yōu)選地不可水解的類(lèi)似物，如特異性的拮抗劑/抑制劑。適用的市售的用于分析晶體結(jié)構(gòu)、設(shè)計(jì)和優(yōu)化小肽和模擬肽的軟件包括但不限于:Macromolecular X-ray Crystallography QUANTA Environment (MolecularSimulat1ns, Inc.) ;TeXsan、B1teX 和 SQUASH(Molecular Structure Corporat1n);和Crystallographica(Oxford Cryostsystems)。
[0075]認(rèn)識(shí)到的是，本文所描述的分子的鹽或者衍生物可以用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER是影響因素的病癥，只要所述的鹽或者衍生物能夠防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用。我們認(rèn)為“衍生物”包括了具有一個(gè)或多個(gè)通過(guò)官能側(cè)基團(tuán)的反應(yīng)來(lái)化學(xué)衍生的殘基的肽(如肽部分[(Pr0)n-XfHis-Pr0-His-Ala-Arg-1le-Lys]m 是前文中的分子[lys_ile-arg-ala-his-pro-his_xr_ (pro)n]m)的含義。該衍生化的分子包括，例如，其中游離的氨基基團(tuán)已被衍生化來(lái)形成胺鹽酸鹽、對(duì)甲苯磺酸基基團(tuán)、芐氧羰基基團(tuán)、叔丁氧羰基基團(tuán)、氯乙酰基基團(tuán)或甲?；鶊F(tuán)的那些分子?？梢詫⒂坞x的羧基衍生化來(lái)形成鹽、甲酯和乙酯或者其他類(lèi)型的酯或者酰肼?？梢詫⒂坞x的羥基衍生化，來(lái)形成O-?；蛘逴-烷基衍生物。還包括的衍生物是包含了一個(gè)或多個(gè)天然存在的二十個(gè)標(biāo)準(zhǔn)氨基酸的氨基酸衍生物的肽部分。例如，可以將脯氨酸取代成4-羥基脯氨酸；將賴(lài)氨酸取代成5-羥基賴(lài)氨酸；將組氨酸取代成3-甲基組氨酸；將絲氨酸取代成高絲氨酸；將賴(lài)氨酸取代成鳥(niǎo)氨酸。衍生不包括官能團(tuán)中的變化，所述的變化將一個(gè)氨基酸變化成另一個(gè)。
[0076]一些有用的修飾被設(shè)計(jì)用于通過(guò)在血液中阻斷蛋白水解活性來(lái)提高穩(wěn)定性從而提高溶液中的分子(例如肽)的半衰期，所述的溶液具體地為生物流體，例如血、血漿或者血清。因此，肽可以在一個(gè)或兩個(gè)末端具有穩(wěn)定化基團(tuán)。一般的穩(wěn)定化基團(tuán)包括酰胺基、乙?；?、芐基、苯基、甲苯磺?；?、烷氧基羰基、烷基羰基、芐氧羰基等等末端基團(tuán)修飾。另外的修飾包括在末端使用“D”氨基酸來(lái)代替“L”氨基酸，以及使用酰胺而不用氨基或者羧基末端，從而抑制外肽酶活性。因此，認(rèn)識(shí)到的是，肽部分[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys] m 是前文限定的分子[lys-1 le-arg-ala-hi s-pro-hi s-xr- (pro) n] m,其可以在一個(gè)或兩個(gè)末端具有封端部分，所述的部分優(yōu)選地是分子量小于200Da的部分。另外的封端部分包括萘基(naftyl)基團(tuán)或者聚乙二醇基團(tuán)。認(rèn)識(shí)到的是，逆反肽已經(jīng)是相對(duì)穩(wěn)定的，并且因此可以不需要另外的封端部分。
[0077]因此，在尤其優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的分子包括以下的結(jié)構(gòu)或者由以下的結(jié)構(gòu)所組成=Ac-Pro-Pro-Pro-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys-NH2 或者 Ac-Pro-Pro-Thr-Hi s_Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys_NH2,其中 Ac 是乙酸基基團(tuán)。
[0078]本發(fā)明的分子不降低或者阻礙受試者的生育能力。如實(shí)例中所描述的，本發(fā)明人證明了將妝 Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys-NH2 給予到小鼠不影響其生育能力，并且預(yù)期其他的防止或者抑制Src家族激酶(例如Src激酶)和AR或者ER之間的相互作用的分子具有相同的活性。用于評(píng)估受試者生育能力的方法在本領(lǐng)域內(nèi)是公知的，并且包括了檢測(cè)，例如實(shí)例中描述的那些。
[0079]在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的分子作為疫苗給予從而產(chǎn)生抗體。例如，具有前文限定的結(jié)構(gòu)的分子可以用于制備特異性結(jié)合到AR的抗體，并且可以制備為疫苗。
[0080]可以希望將所述的分子連接到載體分子，如促免疫原(pro-1mmunogenic)分子。適合的實(shí)例包括牛血清白蛋白(BSA)或者鑰孔戚血藍(lán)蛋白(KLH)。另外地或者供選擇地，所述的分子可以包含在脂質(zhì)組合物中，所述的脂質(zhì)組合物例如為脂質(zhì)顆粒、納米囊、脂質(zhì)體或者脂質(zhì)囊泡。如下文所進(jìn)一步描述的，所述的分子還可以摻入到包衣膠囊中用于緩釋。
[0081]我們認(rèn)為其中AR和/或ER的活性是影響因素的病癥包括了任意的生物或者醫(yī)學(xué)病癥或者障礙，其中病理的至少部分是由AR和/或ER的活性所介導(dǎo)的。所述的病理可以是源于AR和/或ER的活性升高或者降低。所述的病癥可以是由AR和/或ER的活性所引起或者可以是簡(jiǎn)單地以AR和/或ER的活性為特征。AR和/或ER的活性可以直接影響病癥，或者可以間接影響病癥。一般來(lái)說(shuō)，其中AR和/或ER的活性是影響因素的病癥是發(fā)病涉及通過(guò)AR和/或ER的異常信號(hào)傳導(dǎo)的病癥(例如，細(xì)胞的增殖被AR和/或ER調(diào)控的病癥)。例如，所述的病癥可以涉及通過(guò)Src家族激酶途徑進(jìn)行的異常信號(hào)傳導(dǎo)。該病癥可以使用本領(lǐng)域內(nèi)可得的傳統(tǒng)方法容易地進(jìn)行診斷。
[0082]所述的病癥可以是非癌的(包括非癌的增殖紊亂)或者其可以是癌的(例如良性的或者惡性的癌癥)。所述的病癥可以是生殖病癥，我們認(rèn)為這包括了影響生殖系統(tǒng)的一些或者全部器官或者組織的病癥的含義。生殖病癥可以是婦科病癥，即影響雌性生殖系統(tǒng)的病癥。
[0083]在第一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥是非癌的病癥，所述的病癥包括了其中AR和/或ER是影響因素的任意的增殖紊亂。實(shí)例包括子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫、子宮肌瘤息肉增生、瘤形成、無(wú)排卵的出血、子宮內(nèi)膜在陰囊、膀胱或前列腺生長(zhǎng)和乳腺組織中的非癌性增殖性病癥。優(yōu)選地，所述的病癥是子宮內(nèi)膜異位癥。
[0084]在第二個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥是癌癥病癥并且所述的受試者是希望保持生育能力的受試者。我們認(rèn)為“希望保持生育能力”包括了受試者不希望生育能力降低的含義。例如，受試者可以希望懷孕。該受試者因此代表了一個(gè)亞類(lèi)的癌癥患者，他們?cè)诨加邪┌Y的同時(shí)還另外地希望保持生育能力。該癌病癥的實(shí)例包括了子宮肌瘤、子宮肌瘤息肉增生、卵巢癌、膀胱癌、宮頸癌、子宮癌、睪丸癌和前列腺癌。
[0085]在第三個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的病癥(例如非癌的或者癌的)是婦科病癥。優(yōu)選地，所述的病癥是子宮內(nèi)膜異位癥。
[0086]將理解的是，在第一和第三優(yōu)選的實(shí)施方案中，尤其希望在希望保持生育能力的受試者中使用該分子。因此，在這些實(shí)施方案中同樣地優(yōu)選的是受試者希望保持生育能力。最優(yōu)選地，所述的病癥是子宮內(nèi)膜異位癥并且所述的受試者希望保持生育能力。
[0087]認(rèn)識(shí)到的是，在本文中描述的分子或者其衍生物或者片段可以與藥學(xué)上可接受的賦形劑、溶劑、稀釋劑或者載體(包括其組合)進(jìn)行配制。所述的載體、稀釋劑、溶劑或者賦形劑必須是在與分子或者衍生物相容以及對(duì)接受者無(wú)毒的意義上“可接受”的。一般地說(shuō)，所述的載體是無(wú)菌的和無(wú)熱原的水或者鹽水(例如生理鹽水)。適用的賦形劑包括甘露醇和葡萄糖。用于治療用途的可接受的載體、溶劑、稀釋劑和賦形劑在制藥領(lǐng)域中是公知的，并且描述在，例如 Remington’ s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing C0.(A.R.Gennaro ed.1985)中。藥學(xué)上的載體、溶劑、賦形劑和稀釋劑的選擇可以根據(jù)預(yù)期的給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)實(shí)踐進(jìn)行選擇。藥物組合物可以包括或者額外包括載體、賦形劑、溶劑或者稀釋劑、任意適用的粘合劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、包衣劑或者助溶劑?？梢栽谠撍幬锝M合物中加入防腐劑、穩(wěn)定劑、染料以及甚至香味劑。
[0088]制劑可以便利地以單位劑型的形式存在，并且可以按照藥學(xué)領(lǐng)域中熟知的任意方法進(jìn)行制備。該方法包括將分子和載體進(jìn)行結(jié)合的步驟，所述的載體包含一種或多種的助齊U。一般地說(shuō)，所述的制劑是通過(guò)均勻和緊密地將活性成分和液體載體或者研細(xì)的固體載體或者兩者結(jié)合來(lái)進(jìn)行制備，并且如果有必要的話將產(chǎn)品成型。
[0089]適用于口服給藥的根據(jù)本發(fā)明的制劑可以作為離散的單位如膠囊、扁囊劑或者片劑來(lái)提供，其各自包含預(yù)定量的活性成分；作為粉末或者顆粒提供；作為溶液，或水性液體或非水性液體中的混懸劑提供；或者作為水包油的液體乳劑或者油包水的液體乳劑提供。所述的活性成分還可以作為大丸劑、沖劑或糊劑來(lái)提供。
[0090]片劑可以通過(guò)壓制或者模制來(lái)制備，任選地與一種或多種的助劑一同制備。壓制片可以通過(guò)將自由流動(dòng)的形式的活性成分在適合的機(jī)器中壓制來(lái)制備，所述的自由流動(dòng)的形式例如為粉末或者顆粒，所述的活性成分任選地與粘合劑(例如聚維酮、明膠、羥丙基甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如羥基乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或者分散劑混合。模制片可以通過(guò)將使用惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉狀化合物的混合物在適合的機(jī)器中模制來(lái)進(jìn)行制備。所述的片劑可以任選地進(jìn)行包衣或者刻痕，并且可以使用例如多種比例的羥丙基甲基纖維素配制從而實(shí)現(xiàn)其中的活性成分的緩釋或控釋?zhuān)蕴峁┫Ｍ尼尫盘卣鳌?br> [0091]適用于口腔中局部給予的制劑包括錠劑，所述的錠劑在調(diào)味的基料中包括活性成分，所述的調(diào)味的基料通常是蔗糖和阿拉伯樹(shù)膠或者黃蓍膠；在惰性基料中包含活性成分的糖果錠劑，所述的惰性基料例如為明膠和甘油，或者蔗糖和阿拉伯樹(shù)膠；以及包含在適合的液體載體中的活性成分的漱口水。
[0092]適合用于腸胃外給藥的制劑包括了水性和非水性無(wú)菌注射液，其可以包含抗氧化齊U、緩沖劑、抑菌劑和使得制劑與預(yù)定接受者的血液處于等滲的溶質(zhì)；和水性以及非水性無(wú)菌混懸劑，所述的混懸劑可以包括助懸劑和增稠劑。所述的制劑可以存在于單位劑量或者多劑量容器中，例如密封的安瓿瓶和小瓶，并且可以在冷凍干燥(凍干)條件下儲(chǔ)存，在即將使用之前只需要加入無(wú)菌液體載體例如注射用水。臨時(shí)制成的注射液和混懸劑可以從前文所述類(lèi)型的無(wú)菌粉末、顆粒和片劑進(jìn)行制備。
[0093]除了前文中具體提到的組分之外，所述的制劑還可以包括與所討論的制劑類(lèi)型有關(guān)的本領(lǐng)域內(nèi)常規(guī)的其他試劑，例如適合用于口服給予的制劑可以包括調(diào)味劑。
[0094]可以通過(guò)任意的傳統(tǒng)方法給予分子或者其衍生物或片段或者其制劑，所述的方法包括經(jīng)口服、經(jīng)鼻內(nèi)和經(jīng)腸胃外(例如經(jīng)皮下或者經(jīng)肌肉內(nèi))注射。優(yōu)選的途徑包括了經(jīng)口服、經(jīng)靜脈內(nèi)或者經(jīng)皮下注射。治療可以由單次給藥或者一段時(shí)間內(nèi)多次給藥組成。分子或者其衍生物可以配制到緩釋制劑中，從而在延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)提供緩釋?zhuān)龅难娱L(zhǎng)的時(shí)間例如為至少2或4或6或8周。優(yōu)選地，在至少4周時(shí)間內(nèi)提供緩釋。
[0095]在具體的實(shí)施方案中，分子或者其衍生物或者其片段的制劑形式使得能夠直接給予到生殖系統(tǒng)。因此，分子或者其衍生物或者其片段可以配制成陰道或者直腸栓劑、陰道內(nèi)衛(wèi)生棉條、陰道內(nèi)環(huán)、陰道內(nèi)子宮帽、陰道內(nèi)海綿或者含藥的子宮內(nèi)避孕器(IUD)。
[0096]應(yīng)理解的是，本發(fā)明包括抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，例如包括前文限定的結(jié)構(gòu)Bf[ (Pro)n-X^His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lyslm-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his_xr-(pro) Jm-Rp 的分子，或者由前文限定的結(jié)構(gòu) Β」-[ (Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m-Rp 或者 Β」-[1ys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm-Rp所組成的分子,所述的分子的制劑形式使得能夠直接給予到生殖系統(tǒng)或者緩釋。因此，本發(fā)明包括了抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素或者雌二醇受體之間的相互作用的分子’例如包括結(jié)構(gòu)^^⑴^^^Xr-Hi s-Pro-Hi s-Ala-Arg-1 le-Ly s]m-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his_xr- (pro)Jm-Rp或其衍生物或片段的分子，或者由結(jié)構(gòu)Β」-[ (Pr0)n-Xr-His-Pr0-His-Ala-Arg-1le-LysIm-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) Jm-Rp 或其衍生物或片段所組成的分子，其配制成陰道或者直腸栓劑、陰道內(nèi)衛(wèi)生棉條、陰道內(nèi)環(huán)、陰道內(nèi)子宮帽、陰道內(nèi)海綿或者含藥的子宮內(nèi)避孕器(IUD)或者緩釋制劑中任意一種。換言之，本發(fā)明提供了藥物組合物，所述的藥物組合物包含抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，并且所述的分子適合于配制成陰道或者直腸栓劑、陰道內(nèi)衛(wèi)生棉條、陰道內(nèi)環(huán)、陰道內(nèi)子宮帽、陰道內(nèi)海綿或者含藥的子宮內(nèi)避孕器(IUD)或者緩釋制劑中任意一種，并且所述的組合物任選地包括藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。
[0097]給予受試者的分子或者其衍生物或者其片段的量是有效地對(duì)抗特定受試者的病癥的量。所述的量可以由醫(yī)師來(lái)決定。
[0098]在實(shí)施方案中，所述分子，例如包括前文限定的結(jié)構(gòu)Bj- [ (Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s_Ala-Arg-1le-Lys]m-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his_xr-(pro) Jm-Rp 的分子或者由前文限定的結(jié)構(gòu) B」-[(Pro) n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1 Ie-Lys] m-Rp 或者 Bj- [Iys_i Ie-arg-ala-his-pro-his-Xr-(pro) Jm-Rp所組成的分子使用1-lOOOng之間的每日劑量,例如l_900ng、l_800ng、l_700ng、l_600ng、l_500ng、l_400ng、l_300ng、l_200ng 或者 1-lOOng 的每日劑量給予受試者。因此，所述的分子，例如包含前文限定的結(jié)構(gòu)h-[(Pix))n-X「HiS-Pix)-His-Ala-Arg-1le-Lyslm-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his_xr-(pro) Jm-Rp 的分子或者由前文限定的結(jié)構(gòu) B」-[ (Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]m-Rp 或者 B」-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) Jm-Rp 所組成的分子可以使用至少 lng、10ng、20ng、30ng、40ng、50ng、60ng、70ng、80ng、90ng 或 lOOng、或至少 150ng 或 200ng 的每日劑量來(lái)給予到受試者。
[0099]在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述的分子，例如包括前文限定的結(jié)構(gòu)Bj- [ (Pro) n-Xr-Hi s-Pro-His-Ala-Arg-1Ie_Lys]m-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm-Rp的分子或者由前文限定的結(jié)構(gòu)B」-[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Ala-Arg-1 I e-Lys] m-Rp或者Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm-Rp 所組成的分子在至少 5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55或者60天的療程內(nèi)，或者甚至在至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或者18個(gè)月的療程內(nèi)，或者在至少2、3、4或者5年的療程按照間隔(例如每天、兩天或者每周)給予。如果分子或者衍生物按照間隔給予，將理解的是可以希望在不同的間隔下使用不同的給予途徑。例如，所述的分子或者衍生物可以首先通過(guò)注射進(jìn)行給予，以及隨后的給藥通過(guò)皮下植入來(lái)給予。最佳的給予間隔和治療的持續(xù)時(shí)間一般地取決于病癥的嚴(yán)重程度。
[0100]在一個(gè)實(shí)施方案中，給予所述的受試者除了本文所描述的分子或者衍生物之外的治療劑。例如，當(dāng)給予所述的分子或者其衍生物來(lái)預(yù)防或者治療特定的病癥時(shí)，可以給予已知對(duì)于預(yù)防或者治療該病癥有用的另外的治療劑。因此，當(dāng)預(yù)防或者治療子宮內(nèi)膜異位癥時(shí)，所述的另外的治療劑可以是已知預(yù)防或者治療子宮內(nèi)膜異位癥的藥劑，當(dāng)預(yù)防或治療子宮肌瘤時(shí)，所述的另外的治療劑可以是已知預(yù)防或者治療子宮肌瘤的藥劑，等等。
[0101]一般地，其中AR和/或ER的活性是影響因素的病癥是增生性紊亂，并且因此所述的另外的治療劑可以是任意的減少增殖的藥劑，例如任意的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑或者殺細(xì)胞劑或者抗癌劑。
[0102]認(rèn)識(shí)到的是，所述的另外的治療劑可以與本文所描述的分子或者其衍生物同時(shí)給予(即同時(shí)給予，任選地以復(fù)合制劑給予)或者在與本文中所述分子或者其衍生物不同的時(shí)間給予(即貫序給予，其中所述的另外的治療劑在給予所述的分子或者其衍生物之前或者之后進(jìn)行給予)。所述的另外的治療劑可以按照與本文描述的本發(fā)明的分子相同的方式進(jìn)行給予，或者可以使用所述另外的治療劑通常的給予途徑進(jìn)行給予。
[0103]本發(fā)明的第二個(gè)方面提供了組合物，所述的組合物包括(i)抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素受體(AR)或者雌二醇受體(ER)之間的相互作用的分子，和(ii)適用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的治療劑，以及藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。所述的組合物可以是藥物組合物，其還含有藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。
[0104]所述的分子、衍生物、另外的治療劑、病癥以及所治療的受試者的優(yōu)選包括了前文中針對(duì)本發(fā)明第一方面所提到的那些。例如，所述的分子可以包括結(jié)構(gòu)B」-[(P1)n-X^His-Pro-Hi s-Ala-Arg-1 Ie_Lys]m-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) Jm-Rp或者其衍生物或者片段，或者由結(jié)構(gòu)Bj-[ (Pro) n-X「Hi s-Pro-Hi s-Ala-Arg-1 le-Lys] m-Rp或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) Jm-Rp 或者其衍生物或者片段組成,其中 B是第一化學(xué)部分，j是O或l，n是從1-10的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P 是 O 或者 I,并且[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) J 是[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1 le-Lys]的逆反肽。最優(yōu)選地，所述的分子具有結(jié)構(gòu)Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys-NH2 或者 Ac-Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-1Ie-LyS-NH2,其中Ac是乙?；鶊F(tuán)。優(yōu)選地，所述的受試者是人。優(yōu)選地，所述的另外的治療劑是適合用于預(yù)防或者治療子宮內(nèi)膜異位癥的治療劑。
[0105]因此,本發(fā)明包括組合物,所述的組合物包括(i)抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，和(ii)適用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的治療劑，以及藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑，所述的組合物用于預(yù)防或治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥。所述的組合物可以是藥物組合物，其還含有藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。
[0106]類(lèi)似地，本發(fā)明包括組合物在制備用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的藥物中的用途，所述的組合物包括(i)抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，和(ii)適用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的治療劑，以及藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。所述的組合物可以是藥物組合物，其還含有藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。
[0107]將認(rèn)識(shí)到的是，本發(fā)明包括抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，其用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥，其中還給予所述的受試者適用于預(yù)防或者治療所述病癥的治療劑。
[0108]類(lèi)似地，將理解的是，本發(fā)明包括抑制或者防止Src家族激酶(例如Src激酶)和雄激素或者雌二醇受體之間的相互作用的分子在制造藥物中的用途，所述的藥物用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥，其中還給予所述的受試者適用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的治療劑。
[0109]優(yōu)選地,所述的分子可以包括結(jié)構(gòu)Β」-[ (Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-LysIm-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro) Jm-Rp 或者其衍生物或者片段,或者由 Bj.-[ (Pro) n-Xr_Hi s—Pro—Hi s-Ala-Arg-1 Ie_Lys]m-Rp 或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]ffl-Rp或者其衍生物或者片段所組成，其中B是第一化學(xué)部分，j是O或1，η是從1-10的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P是O或者1，并且[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]是[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]的逆反妝。最優(yōu)選地，所述的分子具有 Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys_NH2 或者Ac-Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-1Ie-LyS-NH2 的結(jié)構(gòu)，其中 Ac 是乙酸基團(tuán)。
[0110]本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了抑制或者防止Src家族激酶和AR和/或ER之間的相互作用的分子可以用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥。因此，認(rèn)識(shí)到的是，通過(guò)評(píng)估試驗(yàn)試劑對(duì)此相互作用的效力，可以確定預(yù)防或者治療非癌病癥的試劑。
[0111]因此，本發(fā)明另外的方面提供了選擇試劑來(lái)預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的方法，所述的方法包括確定試驗(yàn)試劑是否降低以下物質(zhì)之間的相互作用:(a) AR或者ER或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到Src家族激酶和(b) Src家族激酶或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到AR或者ER。
[0112]AR、ER和Src家族激酶，以及非癌病癥的優(yōu)選包括了前文所限定的針對(duì)本發(fā)明第一方面的那些。
[0113]將理解的是，出于篩選方法的目的提供完整的AR或者ER，或者Src家族激酶并不是必須的?？梢允褂媚軌蚪Y(jié)合到Src家族激酶(例如Src激酶)的AR或者ER的部分，以及可以使用能夠結(jié)合到AR或者ER的Src家族激酶(例如Src激酶)的部分。例如，如前文所描述的，相信Src家族激酶(例如Src激酶)的SH3和SH2結(jié)構(gòu)域分別地介導(dǎo)Src家族激酶和AR與ER中每一個(gè)的相互作用。因此，可以使用對(duì)應(yīng)于能夠結(jié)合至AR的SH3結(jié)構(gòu)域或者其部分的Src家族激酶(例如Src激酶)部分，或?qū)?yīng)于能夠結(jié)合至AR的SH2結(jié)構(gòu)域或者其部分的Src家族激酶(例如Src激酶)部分。類(lèi)似地，可以使用對(duì)應(yīng)于AR的377-386氨基酸殘基的AR部分，據(jù)相信其介導(dǎo)AR和Src家族激酶(例如Src激酶)的SH3結(jié)構(gòu)域之間的相互作用。其他適合的部分可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)確定，并且描述在例如Migliacc1等人(0ncogene2007, 26:6619)和 Migliacc1 等人(Cancer Research2005, 65 (22): 10585-93)中。
[0114]試驗(yàn)試劑可以是任意適合的包括了多肽、抗體、小分子、天然產(chǎn)物、模擬肽或者核酸的試驗(yàn)試劑。認(rèn)識(shí)到的是，可以將試驗(yàn)試劑的文庫(kù)作為高通量篩選的部分來(lái)進(jìn)行篩選。
[0115]可以使用多種技術(shù)來(lái)測(cè)定試驗(yàn)試劑對(duì)AR或ER和Src家族激酶(例如Src激酶)或者其部分之間的相互作用，例如在前文所描述的那樣，并且所述的技術(shù)在本領(lǐng)域是熟知的(例如來(lái)自 Migliacc1 等人(0ncogene2007, 26:6619)和 Migliacc1 等人(CancerResearch2005, 65(22):10585-93)。
[0116]在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括分離試驗(yàn)試劑的步驟，所述的試驗(yàn)試劑減少以下兩者之間的相互作用:(a)AR或者ER或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到Src家族激酶和(b) Src家族激酶或者其部分,所述的部分能夠結(jié)合到AR或者ER。
[0117]優(yōu)選地，所選擇的試驗(yàn)試劑是使下述兩者之間相互作用降低的試驗(yàn)試劑:(a)AR或者ER或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到Src家族激酶和(b) Src家族激酶或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到AR或者ER，所述的降低系數(shù)為沒(méi)有試驗(yàn)試劑時(shí)原始的結(jié)合的至少10%、20%、30%、40%或者50%，以及更優(yōu)選地，所述的降低系數(shù)為至少60%、70%、80%、90%或者 95%。
[0118]在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的方法還包括確定試驗(yàn)試劑作為預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的試劑。例如，所述的方法可以另外地包括在適合的檢測(cè)中針對(duì)具體的討論中的病癥(例如病癥的動(dòng)物模型)來(lái)評(píng)估試驗(yàn)試劑的效力。例如，所述的方法可以用于選擇試劑來(lái)預(yù)防或者治療子宮內(nèi)膜異位癥，以使其涉及到評(píng)估子宮內(nèi)膜異位癥模型中的試劑效果。該病癥的適合模型在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的。
[0119]將認(rèn)識(shí)到的是，所選擇的試驗(yàn)試劑是本發(fā)明的第一方面的含義中的抑制或者防止Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用的試劑，因此可以如此的使用。
[0120]認(rèn)識(shí)到的是，在本文所描述的方法中，所述的方法可以是藥物篩選方法，所述藥物篩選方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的術(shù)語(yǔ)，試驗(yàn)試劑可以是類(lèi)藥化合物或者用于開(kāi)發(fā)類(lèi)藥化合物的先導(dǎo)化合物。
[0121 ] 術(shù)語(yǔ)“類(lèi)藥化合物”對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是熟知的，并且可以包括具有以下特性的化合物的含義，所述特性是指可以使其適用于藥物的化合物，例如用作藥物中的活性成分。因此，例如，類(lèi)藥化合物可以是能通過(guò)有機(jī)化學(xué)技術(shù)合成的分子，較不優(yōu)選地可以是能通過(guò)分子生物學(xué)或者生物化學(xué)合成的分子，并且優(yōu)選地是小分子，所述的小分子可以低于5000道爾頓并且可以是水溶性的。類(lèi)藥化合物可以另外地顯示出與特定的蛋白質(zhì)或者多個(gè)蛋白質(zhì)的選擇性相互作用的特征并且可生物利用和/或能夠滲透靶細(xì)胞膜或者血腦屏障，但是將認(rèn)識(shí)到的是這些特征不是必需的。
[0122]類(lèi)似地，術(shù)語(yǔ)“先導(dǎo)化合物”對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是熟知的，并且可以包括這樣的化合物的含義，該化合物盡管自身不適于用作藥物(例如由于其針對(duì)預(yù)期的靶標(biāo)的效力弱，在其作用中是非選擇性的，不穩(wěn)定，難溶，難以合成或者生物利用度低)，但可以提供用于設(shè)計(jì)具有更多想要的特性的其他化合物的起點(diǎn)。
[0123]在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的方法在體外實(shí)施。對(duì)于體外我們包括了無(wú)細(xì)胞的檢測(cè)和基于細(xì)胞的檢測(cè)。例如，所述的方法可以在分離的人細(xì)胞系中實(shí)施或者在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)容易地操作的細(xì)胞系中實(shí)施(例如大腸桿菌(Escherichia coli)或者釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae))。
[0124]在供選擇的實(shí)施方案中，所述的方法在體內(nèi)實(shí)施，例如在具有特定病癥(如子宮內(nèi)膜異位癥)的動(dòng)物模型中實(shí)施。
[0125]本發(fā)明提供了大體上如本文所述的任意分子、用途、方法或者組合物。
[0126]現(xiàn)在將借助以下的附圖和實(shí)施例來(lái)描述本發(fā)明。
[0127]圖1:劑量范圍研究中的小鼠體重(g)。
[0128]圖2:在劑量范圍研究中治療之后的損傷生長(zhǎng)(mm2)
[0129]圖3:—系列物種中PPPHPHARIK的同系物。
[0130]實(shí)施例1:狀A(yù)C-PPPHPHARIK-NH2顯示,屮,針對(duì)子宮內(nèi)臘異位癥的療效而不影響牛育能力
[0131]概要
[0132]已經(jīng)進(jìn)行了兩個(gè)研究，其證實(shí)了肽Ac-PPPHPHARIK_NH2(也在表1_4中定義為ValiRxl)針對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的療效，其不降低生育能力。
[0133]結(jié)果
[0134]在第一個(gè)研究中，以新型子宮內(nèi)膜異位癥體內(nèi)模型(ResearchHorizons, University of Cambridge, 2009Issue8, GB0715635.9)產(chǎn)生了總共4只治療動(dòng)物和5只對(duì)照動(dòng)物。將K-rasV12/Ah-Cre轉(zhuǎn)基因小鼠與Rosa26R小鼠雜交產(chǎn)生KrasV12+/-/Ah-Cre+/-/R0SA26R-LacZ+/-轉(zhuǎn)基因小鼠。Fl 后代同系交配產(chǎn)生 F2K_rasV12+/_/Ah-Cre+/+/R0SA26R-LacZ+/+轉(zhuǎn)基因小鼠。轉(zhuǎn)基因的存在由使用針對(duì)K_ras、Cre和Rosa26R-LacZ的基因特異性引物的PCR來(lái)確定。從此前使用荷爾蒙等進(jìn)行治療的供體動(dòng)物收集組織，并且基于注射了藥物或者溶媒21天的野生型動(dòng)物對(duì)其進(jìn)行劃分。
[0135]在總共四只治療的動(dòng)物中，三個(gè)在使用一種非應(yīng)答劑治療后顯示出完全沒(méi)有損傷。在對(duì)照組中的總共五只動(dòng)物中，一只未產(chǎn)生損傷。
[0136]第二個(gè)研究被設(shè)計(jì)用于評(píng)估肽對(duì)健康小鼠的繁殖的影響，以及對(duì)由相同動(dòng)物的一個(gè)再植入的子宮產(chǎn)生的自體移植損傷的效力(Becker等人，AM J Pathol 178 (4): 1782-91)
[0137]發(fā)情周期
[0138]使8-10周齡的雌性未育C57BL6小鼠適應(yīng)I周。將一組的10只動(dòng)物在試驗(yàn)之前3天皮下注射1ng的肽治療，并且有10只作為對(duì)照組只給予溶媒。每天進(jìn)行陰道涂片，為期10天。在所有的試驗(yàn)例中都得到了正常的涂片。
[0139]奪配(雌件治療鉬)
[0140]使8-10周齡的雌性未育C57BL6小鼠適應(yīng)I周。將一組的10只動(dòng)物在試驗(yàn)之前3天皮下注射給予1ng的肽，并且有10只動(dòng)物作為對(duì)照組只以溶媒處理。
[0141]引入5只雄性C57BL6動(dòng)物，并且對(duì)雌性每日進(jìn)行黏液栓的檢查(上午9點(diǎn)之前)。記錄黏液栓的時(shí)候，評(píng)估雌性的:
[0142]a)可能的懷孕時(shí)長(zhǎng)(天)
[0143]b)后代數(shù)量
[0144]c)后代的異?，F(xiàn)象
[0145]所有的動(dòng)物都產(chǎn)下正常幼崽(除了給藥的組中的一只之外)。
[0146]奪配(雄件治療鉬)
[0147]使8-10周齡的未育C57BL6小鼠適應(yīng)I周。將一組的5只雄性動(dòng)物在試驗(yàn)之前3天皮下注射給予1ng的肽，并且有5只動(dòng)物作為對(duì)照組只給予溶媒(1ng每天SC)。
[0148]向各個(gè)組中引入10只未經(jīng)治療的雌性C57BL6動(dòng)物，并且每天檢查雌性的黏液栓(上午9點(diǎn)之前)。記錄黏液栓的時(shí)候，評(píng)估雌性的:
[0149]a)可能的懷孕時(shí)長(zhǎng)(天)
[0150]b)后代數(shù)量
[0151]c)后代的異常現(xiàn)象
[0152]所有的動(dòng)物都產(chǎn)下正常幼崽。
[0153]交配(來(lái)自治療的雌性的第2代)
[0154]將來(lái)自給藥的雌性的后代交配并且檢查生育能力，來(lái)確定可能的可遺傳的效果。在填塞后按照前文所述評(píng)估動(dòng)物并且沒(méi)有注意到異常。
[0155]劑暈范圍預(yù)防研究
[0156]在一周的適應(yīng)之后，將每只8-10周齡的雌性未育C57BL6小鼠移植了 6個(gè)來(lái)自供體動(dòng)物的子宮組織植入體(plug)。三組的5只動(dòng)物立即開(kāi)始每天給予lng、1ng或者10ng的肽，與ARP肽一起皮下注射，并且對(duì)照組的5只動(dòng)物僅使用溶媒進(jìn)行處理。與對(duì)照組相比，在給藥組中治療后的損傷生長(zhǎng)明顯地減少(參見(jiàn)圖2)。
[0157]該模型得到了優(yōu)良的損傷建立(97.67%-100%，表4)。損傷負(fù)擔(dān)(6.02mm2、
5.53mm2 和 4.52mm2 對(duì)比 7.18mm2，表 2)和生長(zhǎng)(6.23mm2,5.72mm2 和 4.52 對(duì)比 7.18mm2，表3)減少。
[0158]針對(duì)劑量，可選擇通過(guò)在外科手術(shù)前2-3天單次注射雌激素來(lái)同步發(fā)情周期。
[0159]得自前文的試驗(yàn)的數(shù)據(jù)在圖1和2及表1-4中示出。
[0160]
【權(quán)利要求】
1.一種抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體(AR)或者雌二醇受體(ER)之間的相互作用的分子，所述的分子用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥。
2.抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體(AR)或者雌二醇受體(ER)之間的相互作用的分子在制造藥物中的用途，所述的藥物用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥。
3.一種方法，所述的方法用于預(yù)防或者治療其中雄激素受體(AR)和/或雌二醇受體(ER)的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥；所述的方法包括向需要其的受試者給予有效量的抑制或者防止Src家族激酶和AR或者ER之間的相互作用的分子。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分子、根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途或者根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述的Src家族激酶是Src、Yes、Fyn、Fgr> Lck、Hck、Blk、Lyn和Frk中的任一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的分子、根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法，其中所述的分子包括結(jié)構(gòu):
Bj-[ (Pro) n-Xr_His-Pro-His-Ala-Arg-1 Ie_Lys]m-Rp,或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) n] m-Rp,或者其衍生物或者片段， 其中B是第一化學(xué)部分，j是O或1，η是從1-10的整數(shù)，X是任意的氨基酸，r是從O到2的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P是O或者1，并且[lys-1le-arg-ala-his-pro-his_xr-(pro)n]是[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys]的逆反月太。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的分子、根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的方法，其中所述的分子是針對(duì)Src家族激酶的SH3或者SH2結(jié)構(gòu)域的抗體或者其中所述的分子是針對(duì)肽(Pro)n-X11-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys的抗體,其中η是從1-10的整數(shù)，X是任意氨基酸并且r是從O到2的整數(shù)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1和4-6中任一項(xiàng)所述的分子、根據(jù)權(quán)利要求2和4-6中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的分子不減少或妨礙受試者的生育能力。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或者7所述的分子、用途或者方法，其中η是3并且m是I。
9.根據(jù)權(quán)利要求1和4-8中任一項(xiàng)所述的分子、根據(jù)權(quán)利要求2和4-8中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的分子是肽。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分子、用途或者方法，其中所述的肽的長(zhǎng)度為3至57個(gè)氨基酸。
11.根據(jù)權(quán)利要求5和7-10中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中B是H、或者乙?；鶊F(tuán)、或者具有游離的或者乙?；苌腘H2基團(tuán)的一個(gè)氨基酸或者氨基酸序列中的任一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求5和7-11中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中R是OH基團(tuán)、或者NH2基團(tuán)、或者具有C-末端的羧基-酰胺基基團(tuán)的一個(gè)氨基酸或者氨基酸序列中的任一種。
13.根據(jù)權(quán)利要求5和7-12中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中所述的第一和第二化學(xué)部分B和R獨(dú)立地包括或者二者都包括脂質(zhì)、脂肪酸、聚乙二醇、甘油三酸酯、甘油、異戊二烯基或者異平基部分、碳水化合物、氨基酸、肽、多肽或者核酸、或者其組合中的任一種。
14.根據(jù)權(quán)利要求5-13中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中！■是O。
15.根據(jù)權(quán)利要求5和7-13中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中所述的分子包括結(jié)構(gòu) Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-1le-Lys 或者 Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-1Ie-Lys-NH2，其中Ac是乙?；鶊F(tuán)。
16.根據(jù)權(quán)利要求5和7-13中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中X是蘇氨酸并且r是I。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的分子、用途或者方法，其中所述的分子包括結(jié)構(gòu)Pro-P1-Thr-Hi s-Pro-Hi s-AI a-Arg-1 I e-Lys,或者 Ac-Pro-Pro-Thr-Hi s-Pro-Hi s-A I a-Arg-1 I e-Lys-NH2,其中Ac是乙酰基基團(tuán)。
18.根據(jù)權(quán)利要求5和7-13中任一項(xiàng)所述的分子、用途或者方法，其中所述的分子包括選自以下的結(jié)構(gòu):HPHARIK、HPHAR、PHPHAR、HPH、PHPH、PPHPH、PPPHPH、PHP、PPHP, PPPHP,PPPH、PPH和PPP，例如為包括了選自以下的結(jié)構(gòu)的分子:Ac-HPHARIK-NH2、Ac_HPHAR-NH2、Ac-PHPHAR-NH2、Ac-HPH_NH2、Ac-PHPH_NH2、Ac-PPHPH_NH2、Ac-PPPHPH_NH2、Ac-PHP—NH2、Ac-PPHP-NH2、Ac-PPPHP-NH2P、Ac-PPPH-NH2、Ac-PPH-NH2 和 Ac-PPP_NH2，其中 Ac 是乙酰基基團(tuán)。
19.根據(jù)權(quán)利要求1和4-18中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-18中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-18中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的分子作為疫苗給予，從而產(chǎn)生抗體。
20.根據(jù)權(quán)利要求1和4-19中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-19中任一項(xiàng)所述的用途，或者根據(jù)權(quán)利要求3-19中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的分子連接到載體分子，所述的載體分子例如牛血清白蛋白(BSA)或者鑰孔戚血藍(lán)蛋白(KLH)。
21.根據(jù)權(quán)利要求1和4-20中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-20中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-20中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的分子包含在脂質(zhì)組合物中，所述的脂質(zhì)組合物如脂質(zhì)顆粒、納米囊、脂質(zhì)體或者脂質(zhì)囊泡。
22.根據(jù)權(quán)利要求1和4-21中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-21中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-21中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的非癌病癥是生殖病癥，如婦科病癥。
23.根據(jù)權(quán)利要求1和4-22中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-22中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-22中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的非癌病癥是子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫、子宮肌瘤息肉增生、瘤形成、無(wú)排卵性出血和陰囊、膀胱或者前列腺中的子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)中的任一種。
24.根據(jù)權(quán)利要求1和4-21中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-21中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-21中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的癌性病癥是生殖病癥，如婦科病癥。
25.根據(jù)權(quán)利要求1、4-21和24中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2、4_21和24中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-21和24中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的癌性病癥是子宮平滑肌瘤、子宮肌瘤息肉增生、卵巢癌、膀胱癌、宮頸癌、子宮癌、睪丸癌和前列腺癌中的任一種。
26.根據(jù)權(quán)利要求1和4-25中任一項(xiàng)所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求2和4-25中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求3-25中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的受試者還被給予另外的治療劑。
27.一種組合物，其包含(i)抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體(AR)或者雌二醇受體(ER)之間的相互作用的分子，和(ii)適用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的治療劑。
28.一種藥物組合物，其包含(i)抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體(AR)或者雌二醇受體(ER)之間的相互作用的分子，和(ii)適用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的治療劑，以及藥學(xué)上可接受的賦形劑、載體或者稀釋劑。
29.根據(jù)權(quán)利要求27或者28所述的組合物，其中所述的分子包括結(jié)構(gòu):
Bj-[ (Pro) n-Xr_His-Pro-His-Ala-Arg-1 Ie_Lys]m-Rp,或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) n] m-Rp,或者其衍生物或者片段， 其中B是第一化學(xué)部分，j是O或者1，η是從1-10的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P 是 O 或者 I,并且[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]是[(Pro)n-Xr-H i s-Pro-Hi s-Al a-Ar g-1le-Lys]的逆反妝。
30.根據(jù)權(quán)利要求27或者28所述的組合物，其中所述的分子是如權(quán)利要求1-18中的任一項(xiàng)所限定的。
31.根據(jù)權(quán)利要求27-30中任一項(xiàng)所述的組合物，其用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥。
32.根據(jù)權(quán)利要求27-30中任一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備藥物中的用途，所述的藥物用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥。
33.一種抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，所述的分子用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥，其中還給予所述的受試者適用于預(yù)防或者治療所述病癥的治療劑。
34.抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子在制造藥物中的用途，所述的藥物用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的非癌病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是希望保持生育能力的受試者中的影響因素的癌性病癥，或者用于預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是受試者中的影響因素的婦科病癥，其中還給予所述的受試者適用于預(yù)防或者治療所述病癥的治療劑。
35.根據(jù)權(quán)利要求33所述的分子或者根據(jù)權(quán)利要求34所述的用途，其中所述的分子包括結(jié)構(gòu):
Bj-[ (Pro) n-Xr_His-Pro-His-Ala-Arg-1 Ie_Lys]m-Rp,或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) n] m-Rp,或者其衍生物或者片段， 其中B是第一化學(xué)部分，j是O或者1，η是從1-10的整數(shù)，X是任意的氨基酸，r是從O到2的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P是O或者1，并且[lys-1le-arg-ala-his-pro-hi s-xr- (pro)n]是[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys]的逆反月太。
36.根據(jù)權(quán)利要求33所述的分子、或者根據(jù)權(quán)利要求34所述的用途，其中所述的分子是如權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所限定的。
37.根據(jù)權(quán)利要求26、33、35和36中任一項(xiàng)所述的分子、根據(jù)權(quán)利要求26和34-36中任一項(xiàng)所述的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述的另外的治療劑是抗增殖齊U，例如細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑、殺細(xì)胞劑(cytosidal agent)或者抗癌劑中的任一種。
38.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的分子、用途、方法或者組合物，其中所述的受試者是人。
39.抑制或者防止Src家族激酶和雄激素受體或者雌二醇受體之間的相互作用的分子，所述的分子被配制成陰道或者直腸栓劑、陰道內(nèi)衛(wèi)生棉條、陰道內(nèi)環(huán)、陰道內(nèi)子宮帽、陰道內(nèi)海綿、含藥的子宮內(nèi)避孕器(IUD)或者緩釋制劑中的任一種。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的分子，其中所述的分子具有結(jié)構(gòu):
B」-[(Pro) n-Xr_His-Pro-His-Ala-Arg-1 Ie_Lys]m-Rp,或者 Bj-[lys-1le-arg-ala-his-pro-his-xr- (pro) n] m-Rp,或者其衍生物或者片段， 其中B是第一化學(xué)部分，j是O或者1，η是從1-10的整數(shù)，X是任意的氨基酸，r是從O到2的整數(shù)，m是從I到3的整數(shù)，R是第二化學(xué)部分，P是O或者1，并且[lys-1le-arg-ala-his-pro-hi s-xr- (pro)n]是[(Pro) n-Xr-Hi s-Pro-Hi s-Al a-Arg-1 I e-Lys]的逆反月太。
41.根據(jù)權(quán)利要求39所述的分子，其中所述的分子是如權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所限定的。
42.選擇試劑來(lái)預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的方法，所述的方法包括確定試驗(yàn)試劑是否降低以下物質(zhì)之間的相互作用:(a) AR或者ER或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到Src家族激酶，和(b) Src家族激酶或者其部分，所述的部分能夠結(jié)合到AR或者ER。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的方法，其中所述的試驗(yàn)試劑是多肽、抗體、小分子、天然產(chǎn)物、模擬肽或者核酸中的任一種。
44.根據(jù)權(quán)利要求42或者43所述的方法，其還包括將試驗(yàn)試劑確定為能夠預(yù)防或者治療其中AR和/或ER的活性是影響因素的非癌病癥的試劑。
45.實(shí)質(zhì)上如本文中描述的任意分子、用途、方法或者組合物。
【文檔編號(hào)】C07K5/117GK104136082SQ201280065758
【公開(kāi)日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2012年11月1日 優(yōu)先權(quán)日:2011年11月1日
【發(fā)明者】M·?？巳R斯頓, S·瓦伊尼卡, G·S·莫里斯 申請(qǐng)人:瓦力雷克斯有限公司