專利名稱：天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離エ藝技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及ー種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法。
背景技術(shù)：
紅景天屬于薔薇目景天科(Crassulaceae)紅景天屬植物，為多年生草本或亞灌木，分布于我國(guó)西藏、云貴、東北、甘肅、新疆、四川等地區(qū)，含有紅景天苷、黃酮、氨基酸、酪醇、微量元素、香豆素等40余種化合物，在抗缺氧、抗疲勞、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗衰老、抗輻射、雙向調(diào)節(jié)機(jī)體功能等方面具有顯著功效。其中紅景天甙是紅景天植物的主要藥理活性成分，在藥品、化妝品和保健食品等行業(yè)具有廣泛的需求和應(yīng)用價(jià)值。天然紅景天中紅景天甙的提取和分離方法主要有層析法、超濾純化法、醇沉純化法、大孔樹(shù)脂吸附法等。柱層析法可得到較高純度的紅景天甙，但有效成分損失嚴(yán)重，收率 太低，只適用于微量標(biāo)準(zhǔn)品的制備；超濾純化法超濾膜使用過(guò)程中，膜污染易造成膜通量銳減，膜清洗過(guò)程要用到大量的堿和酸，而且分離選擇性較差，產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定；こ醇沉淀法在去除雜質(zhì)的同時(shí)，所得干浸膏粘度較大，易吸潮，給后期エ藝操作帶來(lái)不便，此法耗醇量大，成本高，處理時(shí)間較長(zhǎng)；大孔樹(shù)脂吸附法對(duì)待處理液前處理要求較嚴(yán)格，エ藝技術(shù)條件要求較高，吸附和解吸過(guò)程操作較復(fù)雜，產(chǎn)品濃度較低等。因而需要探索エ藝簡(jiǎn)單、收率高、成本低、操作方便適合于エ業(yè)化生產(chǎn)的分離純化方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足之處，從而提供ー種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法，以天然紅景天為原料，以高級(jí)醇溶劑剝離和中性磷氧萃取劑萃取為關(guān)鍵技木，制備高純度的紅景天甙產(chǎn)品，分離純化工藝具有有收率高、過(guò)程簡(jiǎn)單、操作方便，處理量大適于規(guī)?；a(chǎn)等特點(diǎn)。本發(fā)明的目的是采用下述技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，ー種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法，是采用下述エ藝步驟。(I)紅景天有效成分的水溶液制備。a)取天然紅景天為原料進(jìn)行切片，其厚度為0. 2 0. 5厘米(cm);將紅景天切片在溫度為65 75°C水溶液中用超聲波提取30 60分鐘(min)，過(guò)濾得到水浸提液。b)水浸提液降至室溫后將pH調(diào)節(jié)至9 11，加入95%的こ醇溶液，水提液與95%的こ醇體積比為1:3 1:5,然后在5 10°C條件下靜止24小時(shí)，分離沉淀物和上清液。c)上清液在真空度為0.06 0.1MPa，溫度為45 65°C條件下減壓濃縮去除こ醇后得到富含紅景天有效成分的水提液。(2)溶劑剝離除雜階段。富含紅景天有效成分的水提液與高級(jí)脂肪醇溶劑快速混合，其中水提液與溶劑體積比為1:1 4:1，離心分相后，得到?jīng)坊募t景天水提液和富含酪醇的有機(jī)富集液，水溶液供進(jìn)ー步萃取純化，有機(jī)相可作下一循環(huán)套用液使用。(3)溶劑萃取和反萃取階段。取浄化的紅景天水提液將pH調(diào)節(jié)至8 10，加入中性磷氧萃取劑使兩相充分混合接觸，其中水相和有機(jī)相體積比為3:1 1:1。靜止分相，分離下相萃余液。在有機(jī)上相中加入0. 5 I倍體積的0.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液，充分混合接觸30分鐘后，得到高純度的紅景天甙水溶液，有機(jī)上相得到再生，可以循環(huán)使用。(4)結(jié)晶分離純化。高純度的紅景天甙水溶液在真空條件下減壓濃縮后，加入10 20倍體積的無(wú)水 こ醇在低溫下進(jìn)行常規(guī)溶析結(jié)晶，晶體分離后真空干燥得到紅景天甙產(chǎn)品。所述的溶劑剝離除雜階段中高級(jí)脂肪醇溶劑是正己醇、正庚醇、正辛醇、異辛醇、正壬醇。所述的溶劑萃取階段中中性磷氧萃取劑是磷酸三丁酷、ニ丁基膦酸丁酷、三辛基氧化膦和三己基氧化膦或其混合物。所述的天然紅景天是西藏紅景天、大花紅景天、玫瑰紅景天、高山紅景天。本發(fā)明與已有的分離技術(shù)相比具有的下述優(yōu)點(diǎn)。I)本發(fā)明提供的分離純化工藝分離效率高，分離效果好。高級(jí)醇溶劑凈化紅景天有效成分的水提液，分離選擇性好，操作方便、過(guò)程快速且凈化效果好，產(chǎn)品損失少；中性磷氧萃取劑萃取率可高達(dá)90%以上，反萃取具有濃縮和純化作用，提取的紅景天甙純度可達(dá)97%以上；新エ藝階段收率大幅提高，由溶劑剝離、萃取純化階段總收率可達(dá)70%以上，提高了原料利用率。2)本發(fā)明萃取純化階段中使用的高級(jí)醇溶劑和有機(jī)萃取劑揮發(fā)性低、水溶性小，污染性小。3)本發(fā)明溶劑剝離除雜階段可得到附加值較高的產(chǎn)品為酪醇富集液，可以進(jìn)一歩對(duì)天然紅景天資源進(jìn)行綜合利用。4)此分離純化方法步驟簡(jiǎn)單，操作方便，便于實(shí)現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明中紅景天有效成分的水溶液制備。取適量西藏紅景天原料進(jìn)行切片，其厚度約為0. 2 cm ;然后將切片在溫度為65°C水溶液中用超聲波提取60min，過(guò)濾去除固體切片和顆粒得到紅棕色的浸提液；降溫至20°C，用0.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液pH調(diào)節(jié)至9. 5后，加入3倍浸提液體積的95%こ醇溶液即水提液與95%こ醇體積比為1:3，降溫至5°C后靜止24小時(shí)；分離絮狀沉淀物后，將上清液在真空度約為0. 08MPa，溫度為50°C條件下減壓濃縮到無(wú)こ醇餾出為止，得到棕紅色的富含紅景天有效成分的水溶液(水提液I)。實(shí)施例2本發(fā)明中天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法。取適量玫瑰紅景天原料進(jìn)行切片，其厚度約為0. 5 cm ;然后將切片在溫度為70°C水溶液中用超聲波提取40min，過(guò)濾去除固體切片和顆粒得到紅棕色的浸提液；降溫至20°C，用0.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液pH調(diào)節(jié)至10. 5后，加入5倍浸提液體積的95%こ醇溶液即水提液與95%こ醇體積比為1:5，降溫至10°C后靜止24小吋；分離絮狀沉淀物后，將上清液在真空度約為0. 08MPa，溫度為60°C條件下減壓濃縮到無(wú)こ醇餾出為止，得到富含紅景天有效成分的水溶液(水提液2 )。取紅景天水提液2約200毫升，與100毫升的正辛醇溶劑攪拌混合5分鐘，離心分相。上相為剝離酪醇的辛醇溶液，可用作下一循環(huán)的溶劑套用液，而分離的下相水溶液用稀醋酸將PH調(diào)節(jié)至8. 5，加入70毫升的磷酸三丁酯萃取劑使兩相充分混合接觸30分鐘。靜止15分鐘后分相，分離下相萃余液。將35毫升的0.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液加入萃取有機(jī)相中，充分混合接觸60分鐘后，離心分相。分離下相得到液相色譜純度為96%的紅景天甙水溶液約32毫升，有機(jī)相得到再生可以循環(huán)使用，溶劑剝離、萃取和反萃階段總收率·為75. 5% ;然后在真空條件下減壓濃縮至約10毫升后加入150毫升的無(wú)水こ醇在7°C下結(jié)·晶沉淀，分離沉淀后在50°C真空條件下干燥得到純度為98. 2%紅景天甙產(chǎn)品。實(shí)施例3本發(fā)明中天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法。取適量西藏紅景天原料進(jìn)行切片，其厚度約為0. 4 cm ;然后將切片在溫度為75°C水溶液中用超聲波提取30分鐘，過(guò)濾得到浸提液；降至室溫后用0.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液PH調(diào)節(jié)至11后，加入4倍浸提液體積的95%こ醇溶液即水提液與95%こ醇體積比為1:4，降溫至5°C后靜止24小時(shí)；分離后將上清液在真空度約為0. 08MPa，溫度為55°C條件下減壓濃縮到無(wú)こ醇餾出為止，得到水提液3。取紅景天水提液3與正己醇溶劑以體積比為4:1混合攪拌5分鐘，離心分相。將分離的下相水溶液PH調(diào)節(jié)至8. 0，加入三混合烷基氧磷萃取劑即CyaneX923，水相和有機(jī)相體積比為3:1，兩相緩慢攪拌接觸30分鐘。靜止60分鐘后分相，分離下相萃余液。等體積的0.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液加入萃取有機(jī)相中，緩慢攪拌接觸60分鐘后，離心分相。分離下相得到液相色譜純度為94%的紅景天甙水溶液，溶劑剝離、萃取和反萃階段總收率約為77% ;然后在真空條件下減壓濃縮至約三分之一體積后，加入20倍體積的無(wú)水こ醇在10°C下結(jié)晶沉淀，分離沉淀后在50°C真空條件下干燥得到紅景天甙產(chǎn)品。實(shí)施例4本發(fā)明中溶劑剝離除雜エ藝。取pH9. 3的紅景天水提液I分別與正己醇、正辛醇、異辛醇和正壬醇等溶劑以不同體積比(水相有機(jī)溶剤)混合5分鐘后，離心分相液相色譜分析兩相中紅景天有效成分的分離效果即紅景天甙在有機(jī)相中損失率和酪醇在水相中的去除率，其中紅景天甙在有機(jī)相中損失率以百分?jǐn)?shù)表示，是水提液經(jīng)溶劑剝離后紅景天甙在有機(jī)相中含量占原水提液中紅景天甙總量的百分?jǐn)?shù)；酪醇在水相中的去除率是水提液經(jīng)溶劑剝離后酪醇在有機(jī)相中含量占原水提液中酪醇總量的百分?jǐn)?shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表I。表I采用高級(jí)醇處理紅景天水提液的效果。
權(quán)利要求
1.一種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法，其特征在于采用以下工藝步驟(1)紅景天有效成分的水溶液制備a)、取天然紅景天為原料進(jìn)行切片，其厚度為O.2 O. 5cm ;將紅景天切片在溫度為65 75°C水溶液中用超聲波提取30 60min，過(guò)濾得到水浸提液；b)、水浸提液降至室溫后將pH調(diào)節(jié)至9 11，加入95%的乙醇溶液，水浸提液與95%的乙醇體積比為1:3 1:5，然后在5 10°C條件下靜止24小時(shí)，分離沉淀物和上清液；C)、上清液在真空度為0.06 O.1MPa，溫度為45 65°C條件下減壓濃縮去除乙醇后得到富含紅景天有效成分的水提液；(2)溶劑剝離除雜階段富含紅景天有效成分的水提液與高級(jí)脂肪醇溶劑快速混合，其中水提液與溶劑體積比為1:1 4:1，離心分相后，得到凈化的紅景天水提液和富含酪醇的有機(jī)富集液，水溶液可供進(jìn)一步萃取純化，有機(jī)相可作下一循環(huán)套用液使用；(3)溶劑萃取和反萃取階段取凈化的紅景天水提液將pH調(diào)節(jié)至8 10，加入中性磷氧萃取劑使兩相充分混合接觸，其中水相和有機(jī)相體積比為3:1 1:1 ;靜止分相，分離下相萃余液；在有機(jī)上相中加入O. 5 I倍體積的O.1摩爾/升氫氧化鈉水溶液，充分混合接觸30 分鐘后，得到高純度的紅景天甙水溶液，有機(jī)上相得到再生，有機(jī)相可循環(huán)使用；(4)結(jié)晶分離純化高純度的紅景天甙水溶液在真空條件下減壓濃縮后，加入10 20倍體積的無(wú)水乙醇在低溫下進(jìn)行常規(guī)溶析結(jié)晶，晶體分離后真空干燥得到紅景天甙產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法，其特征在于高級(jí)脂肪醇溶劑是正己醇、正庚醇、正辛醇、異辛醇、正壬醇。
3.如權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法，其特征在于中性磷氧萃取劑是磷酸三丁酯、二丁基膦酸丁酯、三辛基氧化膦和三己基氧化膦或其混合物。
4.如權(quán)利要求1所述的一種天然紅景天中紅景天式的分離純化方法，其特征在于天然紅景天是西藏紅景天、大花紅景天、玫瑰紅景天、高山紅景天。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種天然紅景天中紅景天甙的分離純化方法，其特征在于取天然紅景天為原料進(jìn)行切片，經(jīng)超聲波水浸取、低溫醇沉淀和減壓濃縮后得到水提液，然后經(jīng)溶劑剝離除雜、溶劑萃取和反萃取階段得到高純度的紅景天甙水溶液，最后經(jīng)減壓濃縮、無(wú)水乙醇結(jié)晶、分離和干燥得到紅景天甙產(chǎn)品。本發(fā)明提取的紅景天甙純度可達(dá)97%以上；新工藝純化階段收率大幅提高，紅景天甙萃取純化階段收率可達(dá)70%以上，提高了原料利用率；此工藝可得到附加產(chǎn)物酪醇富集液；此分離純化工藝過(guò)程簡(jiǎn)單，操作方便，適于工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07H15/18GK103012512SQ20131001494
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月16日
發(fā)明者申淑鋒 申請(qǐng)人:河北科技大學(xué)