專利名稱：一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從植物中提取天然物質(zhì)的方法，特別涉及一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法。
背景技術(shù)：
桑葉為?？?Moraceae)桑屬植物(Morus L.)的葉，是國家衛(wèi)生部公布的藥食兩用植物，全國大部分地區(qū)均有栽培生產(chǎn)，以南方蠶桑生產(chǎn)地區(qū)產(chǎn)量最多，如江蘇、廣西、浙江、安徽、四川等。桑葉味苦、甘，性寒，歸肺、肝經(jīng)，具有疏散風(fēng)熱，清肺潤燥，平肝明目，涼血止血之功效。歷代中醫(yī)藥書籍中記載桑葉能夠治療消渴癥?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)在研究桑葉化學(xué)成分和動物實驗基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)桑葉具有降血壓、降血糖、降低膽固醇、抗腫瘤、抗過敏及利尿等功倉泛。在桑葉、桑枝中起 到主要藥理作用的成分是1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)是一種哌唳類多輕基生物堿，英文名稱1-Deoxynojirmycin,簡稱1-DNJ,化學(xué)名稱是3,4,5-三輕基-2-羥甲基四氫吡啶，分子式為C6H13NO4，分子量為163，具有降血糖、抗病毒、抗腫瘤轉(zhuǎn)移等多種生物活性。到目前為止的研究成果中，自然界以桑葉中天然含量最高。1-DNJ作為一種糖苷酶抑制劑具有良好的開發(fā)前景和用價值因而由桑葉中提取1-DNJ已成為國內(nèi)外學(xué)者研究的焦點。在我國，1-脫氧野尻霉素產(chǎn)品尚未進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。國內(nèi)雖然有大學(xué)院校、科研院所進(jìn)行小試的報道，但主要集中于對粗產(chǎn)品的研制和應(yīng)用的研究，極少有對高純度1-脫氧野尻霉素提取工藝的研究報道，高純度1-脫氧野尻霉素的工業(yè)化生產(chǎn)進(jìn)展緩慢。中國專利200910192542.2公開了一種1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)的提取方法，主要步驟為:(I)將桑葉和40% -80%乙醇按照料液比1: 6-40投料，混合于50_70°C攪拌1_3小時，離心過濾得到濾液A ;(2)濾渣按料液比1: 6-40投料，混合于50_70°C攪拌1-3小時，離心過濾得到濾液B，合并濾液A和B，在50-70°C下減壓濃縮得濃縮液，同時回收乙醇；(3)濃縮液按絮凝劑的使用方法加入絮凝劑進(jìn)行絮凝沉淀；(4)壓濾除去沉淀，濾液加入連通的多個陽離子交換樹脂柱，并流經(jīng)與該樹脂柱串連在一起的大孔吸附樹脂柱；(5)濾液加入結(jié)束后用純凈水洗，待大孔樹脂流出液無色時，將其斷開，再用
0.1-0.5mol/L的氨水或含氨0.1-0.5mol/L的5% -50%乙醇溶液從陽離子樹脂柱上洗脫1-脫氧野尻霉素(DNJ)，將洗脫液用酸調(diào)節(jié)至PH3-5，再上陽離子樹脂柱，待洗脫液上完后，用純凈水洗至流出液無色，再用10% -70%的乙醇溶液洗；(6)乙醇洗漆后，用純凈水洗至流出液無乙醇味，再用0.1-0.5mol/L的氨水洗脫，收集洗脫液，用納濾膜濃縮并濾除氨等小分子雜質(zhì)，濃縮液噴霧干燥，得到黃棕色粉末1-脫氧野尻霉素。該專利方法通過乙醇水溶液提取，經(jīng)絮凝劑沉淀，再經(jīng)由連續(xù)陽離子交換樹脂和大孔吸附樹脂方法除雜，濃縮，干燥得黃棕色粉末1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)。該方法最大的缺陷在于，對桑葉中所含的主要功效成分1-脫氧野尻霉素的提取率不高，而且僅能制取純度低的含1-脫氧野尻霉素的生物總堿，無法提取含量高達(dá)98%以上的高純度1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)。中國專利200910167602.5中公開了一種提取高純度1-DNJ的方法，其主要步驟為:(I)桑葉經(jīng)洗滌烘干后粉碎，過40目篩。稱取桑葉粉50Kg，加入400L65%乙醇，600C 800Hz超聲提取30分鐘，過濾，濾渣加入200L65%乙醇，60°C 800Hz超聲提取30分鐘，過濾，合并的濾液A，濾渣待用；(2)濾液A加入2mol/L鹽酸，調(diào)節(jié)pH = 2，減壓濃縮至20L，抽濾，濾渣待用；將濾液加入100Kg717陰離子交換樹脂，攪拌15分鐘，悶置6小時后將放出液體，流出液加入原陰離子樹脂，重復(fù)3次，加入300L水洗脫，收集流出液和洗水，濃縮至20L，得到濃縮液B;(3)將濃縮液B以300Kg732樹脂柱層析純化上樣后，純化水洗至洗水無色，以
0.5mol/L氨水洗脫，收集pH9-12段洗脫液，膜濃縮至10L。加入2mol/L鹽酸，調(diào)節(jié)pH = 7 ;分3次加入3L氯仿萃取，保留水相、減壓濃縮至6L，分6 = 5次加入IOL正丁醇液萃??；(4)將正丁醇萃取液濃縮至1L，抽濾，濾渣以無水乙醇結(jié)晶，析出物溶于IOOml純化水，通過S印Hdex LH-20凝膠柱層析，純化水洗脫，以99%純度1-脫氧野尻霉素標(biāo)準(zhǔn)品對照，收集薄層色譜Rf值和斑點顏色均一致部分，濃縮至干，得成品31.82，其中目標(biāo)產(chǎn)物1-脫氧野尻霉素(DNJ)含量98.68%。中國專利200910167602.5公開的上述方法通過超聲波提取，經(jīng)由酸化，陰離子樹脂柱交換，陽離子樹脂柱層析純化得洗脫液，由有機(jī)萃取劑多次萃取，結(jié)晶，濃縮干燥，得到較高純度的1-脫氧野尻霉 素(1-DNJ)。但該方法大量且多次的使用了氯仿以及正丁醇等有毒有機(jī)溶劑，而有毒溶劑難以去除，非常容易混入最終產(chǎn)品中，使該方法存在著加重環(huán)保負(fù)擔(dān)，終產(chǎn)品毒性不確定，產(chǎn)品安全性難以得到保證的缺陷；且提取率較低，僅約為0.06%。綜上，現(xiàn)有提取1-DNJ的方法，主要存在著產(chǎn)品提取率和純度低，產(chǎn)品毒性較大，不利于環(huán)保的缺點，并且現(xiàn)有提取方法對原料要求較高，主要選用1-脫氧野尻霉素含量較高的桑葉或桑皮部分，未能對桑樹的其它部位或蠶桑廢棄物加以利用；進(jìn)一步的，現(xiàn)有提取方法對原料的利用率極低，未能將附加值產(chǎn)品得到充分利用，對資源造成了較大浪費。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中所存在的產(chǎn)品提取率和純度低、產(chǎn)品毒性大的不足，提供一種提取率高、產(chǎn)品安全、利于環(huán)保的高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法。為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案:一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法，包括如下步驟:(I)原料預(yù)處理:取桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹和/或蠶桑廢棄物，經(jīng)由干燥后粉碎，得原料粉末；(2)酶解浸提:向原料粉末加入8-12倍重量水，升溫至45_60°C后，加入原料粉末重量0.5% -1 %的組合酶，保溫，酶解浸提8-12小時，過濾，得濾液；所述組合酶的成分及其重量比為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=3-5:2-4:1;
(3)調(diào)節(jié)浸提濾液pH值為4-5，得酸化濾液；(4)將酸化濾液上強(qiáng)酸性陽離子樹脂柱，用2-4倍樹脂體積量的純化水沖洗，收集得到水洗液，然后用2-4倍樹脂柱體積量的0.1-0.5mol/L氨水進(jìn)行洗脫，收集pH = 9-12的洗脫液，得到氨水洗脫液；(5)將氨水洗脫液經(jīng)過納濾膜(200D)進(jìn)行膜分離濾除大分子雜質(zhì)，經(jīng)由薄膜蒸發(fā)器濃縮器除氨后得到濃縮液；(6)將濃縮液經(jīng)過弱酸性陰離子樹脂柱進(jìn)行柱層析，使用濃度為0.1-0.5mol/L氨水洗脫，分段收集洗脫液，以標(biāo)準(zhǔn)品對照，收集斑點顏色均一致部分，濃縮結(jié)晶，真空干燥后，得成品。本發(fā)明所述蠶桑廢棄物可以是喂養(yǎng)蠶結(jié)束后的桑葉，或蠶的排泄物(蠶砂)等。為了提高上述提取方法 對目標(biāo)產(chǎn)物的提取率和提取效率，上述步驟(2)所述組合酶的成分及其重量比優(yōu)選為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=4: 3:1。為了進(jìn)一步提高上述提取方法對目標(biāo)產(chǎn)物的提取率和提取效率，上述步驟(2)中組合酶的用量優(yōu)選為0.6-0.8%，以0.7%為最佳。上述步驟(2)中水的用量優(yōu)選為10倍原料粉末重量。為了充分利用原料，并為了提高上述提取方法對目標(biāo)產(chǎn)物的提取率，上述步驟(2)優(yōu)選對原料粉末進(jìn)行兩次酶解浸提。為了在上述步驟(6)柱層析前對酸化濾液充分除雜，降低上述步驟(5)中納米濾膜負(fù)荷，利于上述步驟(6)中層析分離的進(jìn)行，提高目標(biāo)產(chǎn)物純度，上述步驟(4)中的強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂，優(yōu)選使用苯乙烯系大孔型陽離子交換樹脂，如DOOl大孔強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂、D-101大孔強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂或HD-8，以DOOl大孔強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂為最佳。為了使上述步驟￠)中層析分離效果佳，進(jìn)一步提高目標(biāo)產(chǎn)物純度，上述步驟(6)中的弱酸性大孔陽離子樹脂柱使用的樹脂優(yōu)選D151、D152或D113弱酸性大孔陽離子樹脂，其中以D152弱酸性大孔陽離子樹脂為最佳。上述步驟⑴中粉碎原料后，優(yōu)選過10-40目篩。上述提取方法中干燥優(yōu)選使用烘箱干燥、真空干燥或者噴霧干燥，以烘箱干燥為最佳。為了充分利用原料，從原料中提取高附加值產(chǎn)品桑葉多糖，上述高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法優(yōu)選將步驟(4)中收集的水洗液濃縮加入4-8倍濃縮液體積量的乙醇，所述乙醇的濃度在95%以上，通過在5°C條件下靜置6-24h、析出沉淀、過濾沉淀的沉淀方法，得到桑葉多糖沉淀；用2倍所述桑葉多糖沉淀重量的水溶解，加入5%水溶液重量的活性碳脫色，過濾，向濾液中加入4-8倍體積量的95%乙醇，離心過濾，真空干燥，粉碎，得到灰白色桑葉多糖粉末。所述沉淀方法可以用離心分離、絮凝沉淀、常壓過濾或者減壓過濾替代。上述步驟⑵中所述過濾，優(yōu)選采用離心過濾。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法采用酶解手段，選用利于桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹和/或蠶桑廢棄物原料酶解的酶進(jìn)行復(fù)配得組合酶，并與本發(fā)明除雜、純化等技術(shù)特征的有機(jī)結(jié)合，使得本發(fā)明提取方法具有如下優(yōu)點:1、極大程度上提高了 1-脫氧野尻霉素的提取率和提取效率，提取率不低于
0.1 % ；2、本發(fā)明提取方法環(huán)保無污染，在酶解和純化過程中使用具有安全、環(huán)保無污染優(yōu)點的酶和水，不僅利于環(huán)保，而且提高了產(chǎn)品質(zhì)量安全；3、本發(fā)明方法目標(biāo)產(chǎn)物1-脫氧野尻霉素純度高，高于98% ；4、本發(fā)明方法在1-脫氧野尻霉素的提取過程中，還對桑葉多糖進(jìn)行了分離提純，本發(fā)明方法通過對多組分的逐步提取，不但能夠有效提高1-脫氧野尻霉素的純度，同時還得到了高附加值的桑葉多糖，充分利用了原料，減少了提取后廢棄物并降低了環(huán)保負(fù)擔(dān)；并且，分離提取得到的桑葉多糖純度高，經(jīng)檢測多糖含量高于80%，應(yīng)用價值高。


圖1為實施例1 一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法流程圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合試驗例及具體實施方式
對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例，凡基于本發(fā)明內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。實施例1一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法，包括如下步驟:1.原料預(yù)處理:取桑枝經(jīng)由干燥后粉碎，過40目篩，得到提取用原料粉末；2.酶解浸提:(I)向原料粉末加入8倍重量的水，升溫至47±2°C后，加入原料粉末重量0.5%的組合酶，保溫，酶解浸提8小時，然后經(jīng)過離心過濾得到濾渣和濾液；所述組合酶的成分及其重量比為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=3:2:1;(2)對濾渣重復(fù)酶解浸提，操作同步驟(I)，過濾；(3)合并步驟⑴和步驟(2)兩次浸提濾液；3.浸提濾液用離心機(jī)離心除渣后用酸調(diào)節(jié)PH值為4-5 ；4.將經(jīng)過酸化后的濾液上強(qiáng)酸性陽離子樹脂柱，純化水沖洗3倍樹脂體積，收集得到水洗液，然后用3倍樹脂柱體積的0.2mol/L的氨水進(jìn)行洗脫，收集PH = 9-12的部分，得到氨水洗脫液；5.純化水洗液濃縮后加入相當(dāng)于其體積5倍體積的乙醇，5°C條件下靜置過夜，析出沉淀，然后離心過濾沉淀，得到桑葉多糖沉淀，多糖用2倍體積水溶解，加入5%活性碳脫色，過濾，濾液加入5倍體積95%乙醇，過濾多糖沉淀，真空干燥，粉碎，得到灰白色多糖粉末，經(jīng)檢測(硫酸-苯酚法)多糖含量為85% ；6.將氨水洗脫液經(jīng)過納濾膜進(jìn)行膜分離濾除大分子雜質(zhì)，經(jīng)由薄膜蒸發(fā)器濃縮后得到濃縮液；7.將濃縮液經(jīng)過弱酸性陽離子樹脂柱進(jìn)行柱層析，用濃度為0.2mol/L的氨水洗脫，分段收集洗脫液，以標(biāo)準(zhǔn)品對照，收集斑點顏色均一致部分，濃縮結(jié)晶，真空干燥后，得成品；經(jīng)HPLC檢測，目標(biāo)產(chǎn)物1-脫氧野尻霉素含量為98.5%，提取率為0.21%。本例步驟7中使用的標(biāo)準(zhǔn)品購于Sigma-Aldrich公司生產(chǎn)的1-Deoxynojirimycin (1-DNJ)試劑。實施例2一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法，包括如下步驟:1.原料預(yù)處理:取桑葉經(jīng)由干燥后粉碎，過40目篩，得到提取用原料粉末；2.酶解浸提:向原料粉末加入12倍重量的水，升溫至58±2°C后，加入原料粉末重量0.8%的組合酶，保溫，酶解浸提10小時，然后經(jīng)過離心過濾得浸提濾液；所述組合酶的成分及其重量比為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=5:4:1;3.浸提濾液用離心機(jī)離心除渣后用酸調(diào)節(jié)PH為4-5 ；4.將經(jīng)過酸化后的濾液上強(qiáng)酸性陽離子樹脂柱，純化水沖洗4倍樹脂體積，收集得到水洗液，然后用4倍樹脂柱體積的0.lmol/L的氨水進(jìn)行洗脫，收集PH = 9-12的部分，得到氨水洗脫液；5.水洗液濃縮后中入相當(dāng)于其體積4倍體積的乙醇，5°C條件下靜置過夜，析出沉淀，然后過濾沉淀，得到桑葉多糖沉淀，多糖用2倍體積水溶解，加入5%活性碳脫色，過濾，濾液加入4倍體積95%乙醇，過濾多糖沉淀，真空干燥，粉碎，得到灰白色多糖粉末，經(jīng)檢測(硫酸-苯酚法)多糖含量為81% ；6.將氨水洗脫液經(jīng)過納濾膜(200D)進(jìn)行膜分離濾除大分子雜質(zhì)，經(jīng)由薄膜濃后得到濃縮液； 7.將濃縮液經(jīng)過弱酸性陽離子樹脂柱進(jìn)行柱層析，用濃度為0.lmol/L的氨水洗脫，分段收集洗脫液，以標(biāo)準(zhǔn)品(與實施例1相同)對照，收集斑點顏色均一致部分，濃縮結(jié)晶，真空干燥后，得成品j^HPLC檢測，目標(biāo)產(chǎn)物1-脫氧野尻霉素含量為98.2%，提取率為
0.12%。實施例3一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法，包括如下步驟:1.原料預(yù)處理:取蠶桑廢棄物(蠶砂)經(jīng)由干燥后粉碎，過30目篩，得到提取用原料粉末；2.酶解浸提:(I)向原料粉末加入10倍重量的水，升溫至55±2°C后，加入原料粉末重量0.5%的組合酶，保溫，酶解浸提12小時，然后經(jīng)過離心過濾得浸提濾液；所述組合酶的成分及其重量比為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=4:3:1;(2)對濾渣重復(fù)酶解浸提，操作同步驟(I)，過濾；(3)合并步驟(I)和步驟(2)兩次浸提濾液；3.浸提濾液用離心機(jī)離心除渣后用酸調(diào)節(jié)PH為4-5 ；4.將經(jīng)過酸化后的濾液上強(qiáng)酸性陽離子樹脂柱，純化水沖洗3倍樹脂體積，收集得到水洗液，然后用3倍樹脂柱體積的0.5mol/L的氨水進(jìn)行洗脫，收集PH = 9-12的部分，得到氨水洗脫液；5.水洗液濃縮后中入相當(dāng)于其體積8倍體積的乙醇，5°C條件下靜置過夜，析出沉淀，然后過濾沉淀，得到桑葉多糖沉淀，多糖用2倍體積水溶解，加入5%活性碳脫色，過濾，濾液加入8倍體積95%乙醇，過濾多糖沉淀，真空干燥，粉碎，得到灰白色多糖粉末，經(jīng)檢測(硫酸-苯酚法)多糖含量為83% ；6.將氨水洗脫液經(jīng)過納濾膜(200D)進(jìn)行膜分離濾除大分子雜質(zhì)，經(jīng)由薄膜蒸發(fā)器濃縮后得到濃縮液；7.將濃縮液經(jīng)過弱堿性陰離子樹脂柱進(jìn)行柱層析，用濃度為0.5mol/L的氨水洗脫，分段收集洗脫液，以標(biāo)準(zhǔn)品(與實施例1相同)對照，收集斑點顏色均一致部分，濃縮結(jié)晶，真空干燥后，得成品j^HPLC檢測，目標(biāo)產(chǎn)物1-脫氧野尻霉素含量為98.5%，提取率為
0.15 %。
權(quán)利要求
1.一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)原料預(yù)處理:取桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹和/或蠶桑廢棄物，經(jīng)由干燥后粉碎，得原料粉末； (2)酶解浸提:向原料粉末加入8-12倍重量水，升溫至45-60°C后，加入原料粉末重量0.5% -1 %的組合酶，保溫，酶解浸提8-12小時，過濾；所述組合酶的成分及其重量比為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=3-5:2-4:1; (3)調(diào)節(jié)浸提濾液pH值為4-5，得酸化濾液； (4)將酸化濾液上強(qiáng)酸性陽離子樹脂柱，用2-4倍樹脂體積量的純水沖洗，收集得到水洗液，然后用2-4倍樹脂柱體積量的0.1-0.5mol/L氨水進(jìn)行洗脫，收集pH = 9-12的洗脫液，得到氨水洗脫液； (5)將氨水洗脫液經(jīng)過納濾膜進(jìn)行膜分離濾除大分子雜質(zhì)，經(jīng)由薄膜蒸發(fā)器濃縮后得到濃縮液； (6)將濃縮液經(jīng)過弱酸性陽離子樹脂柱進(jìn)行柱層析，用濃度為0.1-0.5mol/L的氨水洗脫，分段收集洗脫液，以標(biāo)準(zhǔn)品對照，收集斑點顏色均一致部分，濃縮結(jié)晶，真空干燥后，得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟(2)中所述組合酶的成分及其重量比為纖維素酶:葡聚糖酶:果膠酶=4:3:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步驟(2)中所述組合酶的用量為0.6-0.8%。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的提取方法，其特征在于，步驟(2)中所述組合酶的用量為0.7%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步驟(2)中水的用量為10倍原料粉末重量。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步驟(2)中對原料粉末進(jìn)行兩次酶解浸提。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步驟(4)中所述強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂為D001、D-101或HD-8大孔強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步驟(6)中所述大孔弱酸性陽離子樹脂柱為D151、D152或D113弱酸性大孔陽離子樹脂。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步驟(I)中粉碎原料后，過10-40目篩，得原料粉末。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，對步驟(4)中收集的水洗液濃縮，加入4-8倍濃縮液體積量的乙醇，所述乙醇的濃度在95%以上，通過在5°C條件下靜置6-24h、析出沉淀、過濾沉淀的沉淀方法，得到桑葉多糖沉淀；用2倍所述桑葉多糖沉淀重量的水溶解，加入5%水溶液重量的活性碳脫色，過濾，向濾液中加入4-8倍體積量的95%乙醇，過濾，真空干燥，粉碎，得到灰白色桑葉多糖粉末。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法，包括如下步驟原料預(yù)處理，酶解浸提，酸化濾液，將酸化濾液上強(qiáng)酸性陽離子樹脂柱、用氨水洗脫、得氨水洗脫液，對氨水洗脫液進(jìn)行膜分離除雜、濃縮，濃縮液經(jīng)過弱酸性陽離子樹脂柱進(jìn)行柱層析、氨水洗脫、分段收集洗脫液，濃縮結(jié)晶、干燥，得1-脫氧野尻霉素精品；所述酶解浸提步驟使用了組合酶，其成分及其重量比為纖維素酶∶葡聚糖酶∶果膠酶＝3-5∶2-4∶1。本發(fā)明高純度1-脫氧野尻霉素的提取方法采用酶解手段，與本發(fā)明除雜、純化等技術(shù)特征的有機(jī)結(jié)合，使得本發(fā)明提取方法具有目標(biāo)產(chǎn)物的提取率和純度均較高，純度高于98％；環(huán)保無污染，提高了產(chǎn)品質(zhì)量安全等優(yōu)點。
文檔編號C07D211/46GK103204800SQ20131005170
公開日2013年7月17日 申請日期2013年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月14日
發(fā)明者湯世江 申請人:成都科源生物技術(shù)有限公司