專(zhuān)利名稱(chēng)：一種豬去氧膽酸的精制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種豬去氧膽酸的精制方法，具體的是一種由熔點(diǎn)為170°C以上的豬去氧膽酸粗品制備無(wú)腥味的、高純度的豬去氧膽酸的方法，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
豬去氧膽酸(Chenodeoxycholic Acid, HDCA)是廣泛存在于動(dòng)物膽汁中的一種生化物質(zhì)，含量為0.1% 0.2%，化學(xué)名稱(chēng)為3 α，6 α - 二羥基-5 β -膽烷酸，分子式C24H4004，分子量為392.58，在乙醇中易溶，丙酮中微溶，在乙酸乙酯、氯仿或乙醚中極微溶解，在水中幾乎不溶。HDCA具有降血脂、鎮(zhèn)痙和祛痰的作用，臨床上用于治療高血脂癥、動(dòng)脈粥樣硬化癥、氣管炎、小兒病毒性上呼吸道炎癥，以及由肝膽疾病引起的消化不良；對(duì)百日咳菌、白喉?xiàng)U菌、金黃色葡萄球菌等有一定的抑制作用；作為清開(kāi)靈注射劑中的有效成分，經(jīng)臨床觀察，對(duì)急性白血病的治療有良好作用，體外實(shí)驗(yàn)證明HDCA具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞增殖分裂的作用。HDCA是人工牛黃配方的重要原料，其產(chǎn)品質(zhì)量要求是熔點(diǎn)在170°C以上。清開(kāi)靈制劑中HDCA是主要成分之一，其質(zhì)量要求為熔點(diǎn)在190°C以上。并且，市售較純一點(diǎn)的HDCA均有一定的腥味，標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS-10001- (HD-0882)-2002規(guī)定豬去氧膽酸的性狀為:白色或類(lèi)白色的粉末；無(wú)臭或微腥，味微苦。經(jīng)過(guò)大量研究，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)高純度的HDCA是無(wú)腥味的，含腥味HDCA不但影響患者順應(yīng)性，還可能會(huì)帶來(lái)一定的注射過(guò)敏反應(yīng)。中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN101037463A (
公開(kāi)日2007_09_19)利用不同膽汁酸甲酯-苯加成物在苯中的不同溶解度，將HDCA轉(zhuǎn)化為豬去氧膽酸甲酯-苯加成物后堿分解，調(diào)節(jié)pH，沉淀，得 HDCA 純品(熔點(diǎn)為 197-198.2°C，純度> 99%) ；CN102838647A (
公開(kāi)日
2012-12-26)將粗HDCA轉(zhuǎn)化為粗豬去氧膽酸鎂后，酸化、結(jié)晶，獲得HDCA純品(純度> 99%，熔點(diǎn)199-200°C)；CN102617689A (
公開(kāi)日2012-08-01)將HDCA粗品用氨水溶解過(guò)濾去除不溶性雜質(zhì)，乙酸乙酯除去脂溶性物質(zhì)，酸化，析晶，過(guò)濾，水洗，干燥，得HDCA純品(純度> 99.8%，熔點(diǎn)> 197.5°C);CN102775459A (
公開(kāi)日2012-11-14)將HDCA粗品經(jīng)甲酯化、柱層析分離、堿水解后，加入無(wú)水乙醇或乙酸中，在機(jī)械攪拌條件下加熱至有機(jī)溶劑水溶液完全沸騰，待HDCA溶解后，分次加入水，繼續(xù)攪拌，待溫度降至10 20°C，再機(jī)械攪拌30 60min，進(jìn)行抽濾，得晶體，真空干燥，得HDCA純品(純度> 99%)。上述四種方法均需要將HDCA進(jìn)行化學(xué)預(yù)處理，工藝步驟繁瑣、不易操作、生產(chǎn)周期長(zhǎng)，其中使用的苯為致癌物質(zhì)。CN102863497A (
公開(kāi)日2013-01-09)將HDCA粗品加入5 10倍重量的甲醇、乙醇、乙二醇、N，N-二甲基甲酰胺、冰醋酸或異丙醇，加熱回流I 2小時(shí)，待其全部溶解后降至15 25°C，向其中滴加水，直至出現(xiàn)混濁物，停止滴加，繼續(xù)攪拌I小時(shí)，過(guò)濾后，再加入5 10倍重量的甲醇、乙醇、乙二醇、N, N-二甲基甲酰胺、冰醋酸或異丙醇，加熱回流I 2小時(shí)，待其全部溶解后降至15 25°C，向其中滴加水，直至出現(xiàn)混濁物，立即停止滴加，繼續(xù)攪拌I小時(shí)，過(guò)濾干燥即得HDCA純品(純度> 98%)。由于甲醇、乙醇、乙二醇、異丙醇、N, N- 二甲基甲酰胺對(duì)HD CA的溶解度太大，加入水以降低溶解度進(jìn)行析晶，這是一種很常規(guī)的析晶方法，且由于本品的性質(zhì)，加水后并未析出晶體而只是混濁，再進(jìn)行過(guò)濾，不利于大生產(chǎn)。另外，采用重結(jié)晶工藝處理，產(chǎn)品的收率將會(huì)大大降低。綜上所述，為了提高HDCA用藥安全性和順應(yīng)性，克服現(xiàn)有HDCA純化方法產(chǎn)品腥味、工藝繁瑣、不易操作、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、成本高等缺陷，急需開(kāi)發(fā)一種具有易于工藝化大生產(chǎn)、成本低、生產(chǎn)周期短等優(yōu)勢(shì)的制備無(wú)腥味的高純度的HDCA的精制方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種豬去氧膽酸的精制方法，其制備的豬去氧膽酸具有無(wú)腥味、高純度的特點(diǎn)。該方法包括下列步驟:步驟a:豬去氧膽酸中雜質(zhì)的除去取熔點(diǎn)170°C以上的豬去氧膽酸粗品，加酯類(lèi)有機(jī)溶劑回流提取I 5次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶2 10倍量、提取10 50分鐘，過(guò)濾，濾液棄去，藥渣備用；步驟b:豬去氧膽酸的精制將步驟a所得藥渣加酯類(lèi)有機(jī)溶劑回流提取8 40次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑2 8倍量、提取10 40分鐘，過(guò)濾，濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，放冷，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯椋吹秘i去氧膽酸成品。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，步驟a中，回流提取次數(shù)為2 4次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提 取20 40分鐘。在一些優(yōu)選實(shí)施方案中，步驟b中，回流提取次數(shù)為8 30次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取時(shí)間20 40分鐘。在另一些優(yōu)選實(shí)施方案中，步驟a中，回流提取次數(shù)為2 4次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取20 40分鐘；步驟b中，回流提取次數(shù)為8 30次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取20 40分鐘。本發(fā)明中，所述酯類(lèi)有機(jī)溶劑的用量“倍量”是以粗品質(zhì)量計(jì)算的體積重量比，例如當(dāng)粗品質(zhì)量為lg，溶劑用量為6倍量是體積為6ml。本發(fā)明中，所述“酯”是指含有4 6個(gè)碳原子的有機(jī)酯類(lèi)，包括但不限于，乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸異丙酯、丙酸乙酯、異丙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丁酯、丁酸乙酯、異丁酸乙酯等。在一些本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述酯優(yōu)選乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯，更優(yōu)選乙酸乙酯。本發(fā)明中，所述“濃縮”是指將溶劑從體系中移除以增大溶質(zhì)的濃度的過(guò)程，包括但不限于，常壓濃縮、減壓濃縮等。本發(fā)明中，所述HDCA“含量”是指HDCA在豬去氧膽酸粗品或成品中的質(zhì)量百分比，其也可以用純度進(jìn)行表述。令人驚喜的是，本發(fā)明制備的豬去氧膽酸熔點(diǎn)可達(dá)196.5°C及以上，熔距小于2°C，含量達(dá)98%以上，并且具有無(wú)腥味的特點(diǎn)，能夠大大提升該品的安全性、增強(qiáng)患者的順應(yīng)性。本發(fā)明的方法具有如下優(yōu)點(diǎn):(1)該方法制備的豬去氧膽酸無(wú)腥味、純度高，藥品安全性和品質(zhì)高；(2)該方法一步實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)品精制且無(wú)腥味的技術(shù)效果，并且克服了復(fù)雜、繁瑣的預(yù)處理、結(jié)晶和析出工藝；(3)該方法所用有機(jī)溶劑毒性小、更經(jīng)濟(jì)，且經(jīng)過(guò)回收后加入到提取容器中，實(shí)現(xiàn)了溶劑的重復(fù)利用，降低了能耗成本。由此可見(jiàn)，本發(fā)明的方法具有產(chǎn)品質(zhì)量高、成品效率高、生產(chǎn)效率高、生產(chǎn)成本低、工藝簡(jiǎn)單而具有重復(fù)性等優(yōu)勢(shì)，從制藥工業(yè)觀點(diǎn)來(lái)看，更適合工業(yè)應(yīng)用、具有良好的應(yīng)用前景。
具體實(shí)施方案 下述具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步解釋和說(shuō)明本發(fā)明，但并不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例1取豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為172.5°C 174.7°C，純度為72%) 750g，加乙酸乙酯回流提取3次，每次加乙酸乙酯3000ml、回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液棄去，藥渣加乙酸乙酯回流提取12次，每次加乙酸乙酯3000ml、回流提取30分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯椋冒咨呢i去氧膽酸成品393g，收率52.4%。熔點(diǎn)為196.9。。 197.7V。按照中國(guó)藥典2010年版第一增補(bǔ)本清開(kāi)靈注射液項(xiàng)下豬去氧膽酸標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)，成品中豬去氧膽酸(HDCA)含量為99.4%。無(wú)腥味。實(shí)施例2取的豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為172.5°C 174.7°C) 750g，加乙酸乙酯回流提取4次，每次加乙酸乙酯2250ml、回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液棄去，藥渣加乙酸乙酯提取18次，每次加乙酸乙酯2250ml、回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，放冷，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯?，得白色的豬去氧膽酸成品386g，收率為51.5%，熔點(diǎn)為197.5°C 198.10C，HDCA 含量為 98.9%,無(wú)腥味。實(shí)施例3取豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為172.5°C 174.7°C ) 750g，加乙酸丙酯回流提取4次，每次加乙酸丙酯3500ml、回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液棄去，藥渣加乙酸丙酯回流提取20次，每次加乙酸丙酯3500ml、回流提取25分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，放冷，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯?，得白色的豬去氧膽酸成品380g，收率50.7%，熔點(diǎn)為196.7°C 198.2 0C，HDCA 含量為 98.4%,無(wú)腥味。實(shí)施例4取豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為172.5°C 174.7°C) 500g，加乙酸丁酯回流提取4次，每次加3000ml、回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液棄去，藥渣加乙酸丁酯回流提取30次，每次加乙酸丁酯3000ml、回流提取30分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，放冷，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯椋冒咨呢i去氧膽酸成品246.5g，收率49.3%，熔點(diǎn)為196.5°C 197.4°C, HDCA含量為99.5%，無(wú)腥味。工藝成品比較研究I)乙酸乙酯-水結(jié)晶法取豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為172.5°C 174.7°C，純度為72%) 200g，加乙酸乙酯600mL,回流，不溶，再加水20mL，回流提取，溶解，加入20%無(wú)水硫酸鈉脫水，過(guò)濾，放置兩天，析出晶體，取晶體 壓榨干燥，得豬去氧膽酸成品92g，所得中HDCA含量為88.4%，腥味較大。2 )無(wú)水乙酸乙酯結(jié)晶
取豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為191.2°C 192.8°C，純度為88.4%)20g，加入乙酸乙酯50倍量，回流溶解，過(guò)濾，放置，析晶，取晶體壓榨干燥，得豬去氧膽酸成品12.4g，HDCA含量為94.6%，有一定的腥味。3)丙酮結(jié)晶法取豬去氧膽酸粗品(熔點(diǎn)為191.2°C 192.8°C，純度為88.4%) 50g，加丙酮500mL回流溶解，放置兩天，析出晶體，取晶體，再用丙酮重結(jié)晶一次，結(jié)果析出白色的針狀晶體，取晶體壓榨過(guò)濾，干燥，得豬去氧膽酸成品23g，HDCA含量為99.4%，但仍含有一定的腥味。較乙酸乙酯-水、乙酸乙酯和丙酮結(jié)晶法，本發(fā)明實(shí)施例1-4制備的豬去氧膽酸成品具有無(wú)腥味、高純度(HDCA含量> 98%)、產(chǎn)品收率高的特點(diǎn)，并且制備工藝更簡(jiǎn)單、工藝周期更短、 更利于工業(yè)化大生產(chǎn)。
權(quán)利要求
1.一種豬去氧膽酸的精制方法，其特征在于包括下列步驟: 步驟a，取熔點(diǎn)170°C以上的豬去氧膽酸粗品，加酯類(lèi)有機(jī)溶劑回流提取I 5次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑2 10倍量、提取10 50分鐘，過(guò)濾，濾液棄去，藥渣備用； 步驟b，將步驟a所得藥渣加酯類(lèi)有機(jī)溶劑回流提取8 40次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑2 8倍量、提取10 40分鐘，過(guò)濾，濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，放冷，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯椋吹秘i去氧膽酸成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟a中，回流提取次數(shù)為2 4次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取20 40分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟b中，回流提取次數(shù)為8 30次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取20 40分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟a中，回流提取次數(shù)為2 4次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取20 40分鐘；步驟b中，回流提取次數(shù)為8 30次，每次加酯類(lèi)有機(jī)溶劑3 6倍量、提取20 40分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要 求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于所述酯是含有4 6個(gè)碳原子的酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述酯選自乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯中任意一種或它們?nèi)我獾幕旌衔铩?br> 7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述酯選自乙酸乙酯。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述酯選自乙酸丙酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求5中所述的方法，其特征在于所述酯選自乙酸丁酯。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種豬去氧膽酸的精制方法，是采用酯類(lèi)有機(jī)溶劑回流提取熔點(diǎn)170℃以上豬去氧膽酸粗品9～45次，棄去前1～5次提取液，收集第6～45次提取液，濃縮至熱時(shí)有晶體析出時(shí)，停止，放冷，過(guò)濾，殘?jiān)稍锓鬯榧吹脽o(wú)腥味的、高純度的豬去氧膽酸，其熔點(diǎn)≥196.5℃，熔距＜2℃，純度＞98%。該方法具有產(chǎn)品質(zhì)量高、成品效率高、生產(chǎn)效率高、生產(chǎn)成本低、工藝簡(jiǎn)單而具有重復(fù)性等優(yōu)勢(shì)，從制藥工業(yè)觀點(diǎn)來(lái)看，更適合工業(yè)應(yīng)用、具有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C07J9/00GK103159818SQ20131007565
公開(kāi)日2013年6月19日 申請(qǐng)日期2013年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月8日
發(fā)明者趙伯友, 陳浩達(dá), 馮玉康, 姜國(guó)志, 孫勝斌, 張巖巖 申請(qǐng)人:神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司