專利名稱：一種10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的高效提取純化工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化學(xué)藥物中間體的制備，一種以紅豆杉枝葉為原料簡單高效提取純化得到10-去乙酰基巴卡亭III (以下簡稱10-DAB)的工藝方法。
背景技術(shù)：
癌癥，已成為嚴重威脅人類健康的主要病癥之一，每年約有600萬新的病例被報道，由于癌癥早期診斷的困難，相當數(shù)量的癌癥患者將依賴藥物治療。紫杉醇，具有非常獨特的抗癌機理，對卵巢癌、非小細胞肺癌、乳腺癌、白血病、黑色素瘤和結(jié)腸癌等都具有很好的療效。主要是通過抑制微管解聚而使腫瘤細胞的有絲分裂終止致使腫瘤細胞死亡，還具有通過影響參與細胞凋亡的酶并激活與細胞凋亡有關(guān)的蛋白質(zhì)而促進腫瘤細胞凋亡的能力，是目前唯一能促使微管形成而抑制微管蛋白解聚的植物次生代謝產(chǎn)物。紫杉醇因其獨特的作用機理，已成為新一代抗癌藥物的代表。迄今為止，紫杉醇已在全球40多個國家上市。因其對多種癌癥療效確切、藥理作用獨特，紫杉醇自1992年上市以來，銷售額以年均5億美元的凈值迅速增長。目前紫杉醇主要有以下幾個來源，一是通過從多年生紅豆杉樹皮中直接提取。1966年采取400根試管的逆流分配色譜法，從12kg太平洋紅豆杉樹皮中提取0.5g紫杉醇，歷時兩年，其工藝十分繁瑣，且存在生產(chǎn)技術(shù)水平落后，工藝可靠性、重復(fù)性和穩(wěn)定性極差，收率極低，波動范圍大，生產(chǎn)中原料和輔料浪費大、生產(chǎn)成本高等缺陷，因樹皮中紫杉醇含量在0.06%左右，且樹皮為非再生性資源，用此種方法，收率極低，只能滿足短期需要，且大量犧牲有限的紅豆杉資源，因此為解決資源問題，全球的科學(xué)家們除了優(yōu)化改進提取純化工藝，提高產(chǎn)率之外，在全合成、半合成等方向也做了大量研究。二是全合成法，1994年，Nincolaou等運用逆合成分析法的戰(zhàn)略全合成了紫杉醇，但是反應(yīng)需要22-25步，過程復(fù)雜，總收率太低，成本較高，難以形成產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。三是細胞培養(yǎng)法，但其最高產(chǎn)率僅為22mg/L，成本高，且還面臨一系列難題，其市場競爭力低，難以實現(xiàn)工業(yè)化。四是從紅豆杉屬植物的枝葉中提取前體半 合成紫杉醇，1988年，法國Denis等首次報道以10-DAB為原料半合成了紫杉醇，10-DAB主要分布在一年生紅豆杉的枝葉中，其含量在0.1%以上，因枝葉為再生性資源，且10-DAB在紅豆杉中含量比紫杉醇豐富的多，分離提取的收率也高于紫杉醇，使得半合成方法越來越受到重視。IO-DAB,白色粉末結(jié)晶，分子式為C29H36Oltl，從紅豆杉屬植物的枝葉的提取，用于合成抗癌藥紫杉醇。已有的提取工藝有丙酮/乙酸乙酯混合溶液回流提取粉碎紅豆杉枝葉，回收溶劑得浸膏，水懸浮浸膏二氯甲烷萃取，柱層析分離純化。有機酸浸泡粉碎的紅豆杉枝葉，得到的浸取液用有機溶劑提取，蒸去溶劑，得到黏狀物中加入乙腈溶解，所得混合物放置冷卻析晶，得到粗品(專利公開號CN1903849)。肖虎申請專利(公開號CN101230053A)采用檸檬酸超聲提取粉碎的紅豆杉枝葉，得到的提取液用大孔吸附樹脂吸附，再用乙醇洗脫，蒸干溶解得到黃褐色提取物濃縮膏，有機溶劑溶解，除掉不溶物，蒸干溶劑，重結(jié)晶得到目標產(chǎn)物10-DAB，純度達到98%，但是產(chǎn)率很低。
總結(jié)起來，以上10-DAB提取制備方法存在以下缺陷:(I)反應(yīng)不完全，無法將10-DAB從紅豆杉中完全提取出來；(2)溶劑使用量大，雜質(zhì)多，質(zhì)量難以控制，產(chǎn)率低，導(dǎo)致生產(chǎn)成本高；(3)工藝程序繁雜，能耗大，不適合工業(yè)化生產(chǎn)；本發(fā)明為克服上述不足之處進一步研究，對其工藝進行改進，發(fā)明一個高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)低成本適合大工業(yè)生產(chǎn)的10-DAB提取純化工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的:發(fā)明一種以紅豆杉枝葉為原料反應(yīng)流程簡單易操作、節(jié)能低碳環(huán)保的10-DAB高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的提取純化工藝。(I)將紅豆杉枝葉烘干干燥后，粉碎過60目-80目篩得粉末，丙酮/乙酸乙酯(I: I) 5倍體積冷浸提取24h，重復(fù)3次，回收溶劑得浸膏，溶劑回收可循環(huán)利用；(2)將上步得到的浸膏以3倍量乙醇溶液溶解，(TC靜置，離心除去葉綠素，減壓濃縮回收溶劑得膏狀物，除去葉綠素可大大減少下步反應(yīng)溶劑的浪費，更利于后續(xù)粗品的純化步驟；(3)用二氯甲烷提取除去葉綠素的醇膏，提取3次過濾除去不溶物，再加入20%乙醇和2%氫氧化鈉的混合溶液萃取，萃取液用無水硫酸鈉干燥，回收溶劑可循環(huán)利用。較傳統(tǒng)工藝直接用懸浮浸膏二氯甲烷萃取，降低乳化，節(jié)約溶劑使用量，提高10-DAB的收率和
含量;(4)不采用柱層 析分離純化，直接以甲醇-水結(jié)晶和石油醚-丙酮重結(jié)晶得到目標產(chǎn)物，含量在96.5%以上，收率達到67.2%。本發(fā)明原料干燥粉碎再有機溶劑冷浸提取，減少反應(yīng)溶劑使用量同時提高收率，溶劑可回收再利用，綠色環(huán)保，該工藝操作簡單、高效、節(jié)能低碳環(huán)保，適合工業(yè)化大生產(chǎn)。


圖1為10-DAB的結(jié)構(gòu)式圖2為10-DAB提取工藝流程圖
具體實施例方式在下面的實施例中進一步說明了本發(fā)明，這并不限制本發(fā)明的范圍。實施例1稱取紅豆杉枝葉10kg，干燥粉碎過80目篩，加入乙酸乙酯/丙酮(I: 1)50.0L冷浸提取24h，重復(fù)3次，回收溶劑循環(huán)利用，得浸膏，30L乙醇加熱回流溶解浸膏，加入9L水，(TC靜置，離心，真空減壓濃縮回收溶劑得膏狀物，乙醇回收循環(huán)利用；加入二氯甲烷溶解醇膏，提取3次除去不溶物，加入20%乙醇和2%氫氧化鈉混合溶液萃取，萃取液用無水硫酸鈉干燥得浸膏；以甲醇-水結(jié)晶和石油醚-丙酮重結(jié)晶，得到10-DAB精品，HPLC檢測含量96.6%，收率 67.2%o實施例2稱取紅豆杉枝葉10kg，干燥粉碎過50目篩，加入乙酸乙酯/丙酮(I: 1)50.0L冷浸提取24h，重復(fù)3次，回收溶劑循環(huán)利用，得浸膏，30L乙醇加熱回流溶解浸膏，加入9L水，(TC靜置，離心，真空減壓濃縮回收溶劑得膏狀物，乙醇回收循環(huán)利用；加入二氯甲烷溶解醇膏，提取3次除去不溶物，加入20%乙醇和2%氫氧化鈉混合溶液萃取，萃取液用無水硫酸鈉干燥得浸膏；加入甲醇-水結(jié)晶和石油醚-丙酮重結(jié)晶，得到10-DAB精品，HPLC檢測含量 95.3%，收率 63.5%。實施例3稱取紅豆杉枝葉10kg，干燥粉碎過100目篩，加入乙酸乙酯/丙酮(I: 1)50.0L冷浸提取24h，重復(fù)3次，回收溶劑循環(huán)利用，得浸膏，30L乙醇加熱回流溶解浸膏，加入9L水，(TC靜置，離心，真空減壓濃縮回收溶劑得膏狀物，乙醇回收循環(huán)利用；加入二氯甲烷溶解醇膏，提取3次除去不溶物，加入20%乙醇和2%氫氧化鈉混合溶液萃取，萃取液用無水硫酸鈉干燥得浸膏；加入甲 醇-水結(jié)晶和石油醚-丙酮重結(jié)晶，得到10-DAB精品，HPLC檢測含量95.1%，收率67.3%0實施例4稱取紅豆杉枝葉10kg，干燥粉碎過80目篩，加入乙酸乙酯/丙酮(I: 1)50.0L冷浸提取24h，重復(fù)3次，回收溶劑循環(huán)利用，得浸膏，30L乙醇加熱回流溶解浸膏，加入9L水，(TC靜置，離心，真空減壓濃縮回收溶劑得膏狀物，乙醇回收循環(huán)利用；水懸浮浸膏加入二氯甲烷萃取，萃取液用無水硫酸鈉干燥得浸膏；加入甲醇-水結(jié)晶和石油醚-丙酮重結(jié)晶，得到10-DAB精品，HPLC檢測含量61.4%,收率62.6%0
權(quán)利要求
1.一種以紅豆杉枝葉為原料提取制備IO-DAB的工藝，其特征在于以紅豆杉為原料，應(yīng)用先進高效的提取分離純化技術(shù)，將紅豆杉枝葉干燥，粉碎過篩，有機溶劑浸泡提取，將浸膏用有機溶劑溶解，純化處理得到10-DAB。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于將紅豆杉枝葉干燥，粉碎過60-80目篩，有機溶劑冷浸提取24h，重復(fù)3次，回收溶劑得浸膏。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，所使用有機溶劑為丙酮/乙酸乙酯(V: V)1: I混合液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于有機溶劑溶解浸膏，(TC靜置，離心除去葉綠素，得醇膏。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，所使用有機溶劑為乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，采用二氯甲烷提取除去葉綠素的醇膏，過濾除去不溶物，再加入20%乙醇和2%氫氧化鈉的混合溶液萃取。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于用甲醇-水結(jié)晶和石油醚-丙酮重結(jié)晶萃取液得到10-DAB，含量在96. 5%以上，收率達到67.2%。
全文摘要
一種以紅豆杉枝葉為原料提取制備10-DAB的工藝，它是合成療效確切、藥理作用獨特抗癌藥紫杉醇、多烯紫杉醇的重要原料。本發(fā)明以有機溶劑浸泡、提取，有機溶劑溶解除雜、萃取和特殊溶劑中純化處理得到10-DAB。該工藝得到10-DAB的含量在96.5％以上，收率達到67.2％。
文檔編號C07D305/14GK103145653SQ201310125299
公開日2013年6月12日 申請日期2013年4月12日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月12日
發(fā)明者張梅, 彭學(xué)東, 趙金召, 邱潔 申請人:江蘇斯威森生物醫(yī)藥工程研究中心有限公司