專利名稱：一種青黛酮的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種青黛酮的制備方法。
背景技術(shù)：
青黛酮(Qingdainone)為生物堿類物質(zhì)，暗紫色細(xì)針晶，CAS號(hào)97457-31-3，分子式 C23H13N3O2,分子量 363.38,來源于爵床科(Acanthaceae)馬蘭 BaphicacanthusCusia(Nees)Brem.的莖葉。研究表明，青黛酮具有抗腫瘤活性。對(duì)小鼠Lewis肺癌及黑色素瘤細(xì)胞株B16均有抑制作用。馬蘭味辛，性微寒。歸肝、腎、胃、大腸經(jīng)。能清熱解毒，散瘀止血，利濕，消食，消積。用于感冒發(fā)燒，咳嗽，急性咽炎，扁桃體炎，流行性腮腺炎，傳染性肝炎，胃、十二指腸潰瘍，小兒疳積，腸炎，痢疾，吐血，崩漏，月經(jīng)不調(diào)；外用治瘡癤腫痛，乳腺炎，外傷出血；痢疾或濕熱腹瀉；咽喉腫痛，癰腫瘡瘍；血熱衄血、便血；濕熱黃疸；或水腫，小便不利；飲食積滯，脘腹脹滿。通過文獻(xiàn)檢索，國內(nèi)尚未見采用超臨界流體萃取法從馬蘭的莖葉中制備青黛酮的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種青黛酮的制備方法，工藝簡(jiǎn)單、提取率高，整個(gè)過程具有安全、無毒等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:
一種青黛酮的制備方法，其特征在于以下步驟:
a.取馬蘭的莖葉粉碎，加入超臨界萃取釜中，95%乙醇溶液為夾帶劑，在萃取壓力28-35MPa、溫度45-62 °C的條件下，通入液態(tài)CO2萃取50_100min，在壓力6.5_9MPa，溫度30-40°C解析得萃取物；
b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物；
c.上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，冷藏結(jié)晶，得青黛酮。步驟a中所述CO2流量為3.5_5ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10-15%。步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目，石油醚-丙酮體積比為20-3:3。步驟c中所述高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水組合，比例為5-7:8-10:3-4:5-7，下相為流動(dòng)相，上相為固定相。本發(fā)明的積極效果是:
1.采用超臨界CO2萃取，高效無溶劑殘留，對(duì)環(huán)境無污染；
2.采用柱層析純化，操作簡(jiǎn)單，處理量大；3.采用高速逆流色譜分離，分離速度快，樣品無損失，溶劑可以循環(huán)使用，適合連續(xù)制備。
具體實(shí)施方式
:
下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明。實(shí)施例1:
馬蘭的莖葉粉碎，取Ikg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2，設(shè)置萃取壓力28MPa、溫度45°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為4ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的12%，動(dòng)態(tài)萃取90min，在壓力6.5MPa、溫度40°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮20: 3、12:3、3:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按7:9:4:5混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時(shí)開轉(zhuǎn)主機(jī)IOOOrpm，泵入下相做流動(dòng)相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2.5ml/min,同時(shí)用固定相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度 97.2%ο實(shí)施例2:
馬蘭的莖葉粉碎，取2kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2，設(shè)置萃取壓力30MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為3.5ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10%，動(dòng)態(tài) 萃取50min，在壓力9MPa、溫度35°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮18:3、10:3、3:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5:8:3:7混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時(shí)開轉(zhuǎn)主機(jī)900rpm，泵入下相做流動(dòng)相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min，同時(shí)用固定相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度98.0%。實(shí)施例3:
馬蘭的莖葉粉碎，取2kg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)CO2，設(shè)置萃取壓力35MPa、溫度62°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)CO2流量為5ml/g生藥/min，95%乙醇溶液為夾帶劑，夾帶劑用量為總萃取溶劑的15%，動(dòng)態(tài)萃取lOOmin，在壓力8MPa、溫度30°C下解析，所得萃取物加甲醇溶解后，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮17:3、9:3、3:3混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5:10:3:5混合，混合充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜柱，同時(shí)開轉(zhuǎn)主機(jī)800rpm，泵入下相做流動(dòng)相，待系統(tǒng)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2.5ml/min,同時(shí)用固定相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)流分，連續(xù)制備，冷藏流分，得結(jié)晶物，經(jīng)HPLC檢測(cè)，純度 97.1%。
權(quán)利要求
1.一種青黛酮的制備方法，其特征在于以下步驟: a.取馬蘭的莖葉粉碎，加入超臨界萃取釜中，95%乙醇溶液為夾帶劑，在萃取壓力28-35MPa、溫度45-62 °C的條件下，通入液態(tài)CO2萃取50_100min，在壓力6.5_9MPa，溫度30-40°C解析得萃取物； b.上述萃取物用甲醇溶解，加少量中性氧化鎂拌樣，揮干溶劑，干法上氧化鎂柱，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物； c.上述粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，冷藏結(jié)晶，得青黛酮。
2.據(jù)權(quán)利要求1所述青黛酮的制備方法，其特征在于步驟a中所述CO2流量為3.5-5ml/g生藥/min，夾帶劑用量為總萃取溶劑的10_15%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述青黛酮的制備方法，其特征在于步驟b中所述中性氧化鎂為200-300目，石油釀-丙麗體積比為20-3:3。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述青黛酮的制備方法，其特征在于步驟c中所述高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水組合，比例為5-7:8-10:3-4:5-7，下相為流動(dòng)相，上相為固定相。`
全文摘要
本發(fā)明公開了一種青黛酮的制備方法。方法步驟如下a.取馬蘭的莖葉粉碎，加入超臨界萃取釜中，乙醇為夾帶劑進(jìn)行超臨界CO2萃??；b.萃取物采用中性氧化鎂柱層析進(jìn)行純化，石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得粗提物；c.粗提物采用高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，收集目標(biāo)成分，冷藏結(jié)晶，得青黛酮。采用本發(fā)明制備青黛酮，工藝簡(jiǎn)單、效率高，所得產(chǎn)品含量高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D487/04GK103242320SQ20131018871
公開日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2013年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月21日
發(fā)明者劉東鋒, 萬冬梅 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司