截短的人乳頭瘤病毒的l1蛋白、其類病毒顆粒及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及截短的人乳頭瘤病毒的L1蛋白，其類病毒顆粒，以及其制備方法和用途。具體地，本發(fā)明涉及人乳頭瘤病毒HPV6型、HPV11型、HPV16型、HPV18型或HPV58型的截短型L1蛋白，其類病毒顆粒，以及其制備方法和用途。
【專利說明】截短的人乳頭瘤病毒的L1蛋白、其類病毒顆粒及其制備方 法和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及截短的人乳頭瘤病毒的Ll蛋白，其類病毒顆粒，以及其制備方法和用 途。具體地，本發(fā)明涉及人乳頭瘤病毒HPV6型、HPVll型、HPV16型、HPV18型或HPV58型的 截短型Ll蛋白，其類病毒顆粒，以及其制備方法和用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 人乳頭瘤病毒（Human Papillomavirus, HPV)是一類雙鏈小分子DNA病毒，具有嚴(yán) 格的種屬特異性，主要感染人的皮膚和粘膜組織，引起相應(yīng)部位上皮組織的增生性病變。根 據(jù)核酸序列同源性，HPV可分為100多型。HPV16U8和58與宮頸癌的發(fā)生高度相關(guān)，其中 HPV16是最主要的致癌因素。HPV6和11是90%以上生殖器疣和喉乳頭瘤的致病因子。
[0003] 完整的人乳頭瘤病毒顆粒由病毒基因組DNA與衣殼兩部分組成。病毒基因組是雙 鏈環(huán)狀DNA(約8kb)，根據(jù)功能分為三個功能區(qū)：早期區(qū)，編碼6個非結(jié)構(gòu)蛋白（E1，E2，E4， E5, E6, E7)，所述蛋白與病毒的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)化作用有關(guān)；晚期區(qū)，含LI和L2兩個0RF， 編碼主要衣殼蛋白Ll和次要衣殼蛋白L2兩個結(jié)構(gòu)蛋白，參與病毒粒子的組裝；長控制區(qū) (LCR)，又稱非編碼區(qū)或上游調(diào)控區(qū)，不編碼任何蛋白，但含有復(fù)制起點(diǎn)、啟動子、增強(qiáng)子、沉 默子等多種調(diào)控元件，影響病毒的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。
[0004] HPV Ll蛋白為人乳頭瘤病毒主要衣殼蛋白，分子量為55-60kDa，是HPV疫苗主要 結(jié)構(gòu)蛋白。在多種表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的HPV Ll蛋白無需L2蛋白輔助，即可形成在形態(tài)結(jié)構(gòu) 與天然病毒顆粒相似的類病毒顆粒（Virus-Like Particle，VLP)。該種類病毒顆粒保留了 病毒顆粒的天然表位，具有較強(qiáng)的免疫原性，可誘導(dǎo)針對同型HPV病毒的中和杭體，是HPV 預(yù)防性疫苗主要研究方向。在動物實(shí)驗(yàn)中，只有Ll蛋白裝配成的VLP誘發(fā)的抗體具有中和 病毒、預(yù)防感染的能力，而變性的Ll蛋白免疫后不能預(yù)防感染。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)中主要采用原核系統(tǒng)大腸桿菌和真核系統(tǒng)釀酒酵母來表達(dá)HPV的類病 毒顆粒。但是原核系統(tǒng)所表達(dá)的HPV Ll蛋白翻譯后修飾程度低，無法自行正確折疊，大多 失去其天然構(gòu)象，主要以包含體形式存在。雖然通過包含體純化，復(fù)性等步驟也可得到HPV 的VLP，但是在復(fù)性過程中蛋白損失量大，用得率低，難以在大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)中應(yīng)用。釀 酒酵母作為一種表達(dá)異源蛋白的宿主也有其局限性。由實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)展到工業(yè)規(guī)模時，其產(chǎn)量 迅速下降。原因是培養(yǎng)基中維持質(zhì)粒高拷貝數(shù)的選擇壓力消失，質(zhì)粒變得不穩(wěn)定，拷貝數(shù)下 降?？截悢?shù)是高效表達(dá)的必備因素，因此拷貝數(shù)下降，也直接導(dǎo)致外源基因表達(dá)量的下降。 釀酒酵母分泌的蛋白質(zhì)還可能會被過度糖基化修飾，這種過糖基化修飾會嚴(yán)重地改變蛋白 質(zhì)的免疫原性，降低活性，縮短在血液中滯留的時間。釀酒酵母分泌的許多蛋白質(zhì)，并沒有 分泌到培養(yǎng)基中，而是以與細(xì)胞結(jié)合的方式滯留在周質(zhì)空間，給大規(guī)模生產(chǎn)中蛋白質(zhì)的純 化制造了困難。
[0006] 桿狀病毒一昆蟲細(xì)胞體系的優(yōu)點(diǎn)在于安全性高，對外源基因克隆容量大，具有多 角體啟動子控制下的高效表達(dá)，翻譯后加工修飾，無內(nèi)毒素污染等特點(diǎn)，但在大規(guī)模工業(yè)化 生產(chǎn)中存在表達(dá)量低、培養(yǎng)成本高的問題，使得最終產(chǎn)品的成本高昂，限制了其應(yīng)用。因此 本領(lǐng)域中仍然需要提高HPV Ll蛋白在桿狀病毒一昆蟲細(xì)胞體系中的表達(dá)量，并在機(jī)體內(nèi)誘 發(fā)高滴度的中和抗體，進(jìn)一步降低大規(guī)模生產(chǎn)HPV疫苗的成本。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，與野生型HPV Ll基因相比，密碼子經(jīng)優(yōu)化的且去除C端核定位信 號的HPV Ll基因在桿狀病毒一昆蟲細(xì)胞體系中的表達(dá)量有明顯提高；同時發(fā)現(xiàn)與野生型 HPV Ll類病毒顆粒相比，去除C端核定位信號HPV Ll類病毒顆粒免疫動物后可誘導(dǎo)更高的 針對HPV的特異性中和抗體，在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0008] 本發(fā)明提供一種去除C端核定位信號的HPV Ll蛋白，由其組成的類病毒顆粒及含 該類病毒顆粒的疫苗。
[0009] 本發(fā)明的一方面涉及HPV Ll基因，包括根據(jù)昆蟲細(xì)胞偏愛密碼子進(jìn)行優(yōu)化的HPV Ll基因。
[0010] 本發(fā)明一方面涉及HPV，具體而言，涉及HPV6型、HPVll型、HPV16型、HPV18型或 HPV58 型。
[0011] 本發(fā)明一方面涉及以下HPV Ll蛋白：
[0012] C端截短了 9個或21個氨基酸的HPV6型Ll蛋白；優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為 SEQ ID N0:1或2 ;更優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID NO: 2 ;
[0013] C端截短了 9個或21個氨基酸HPVll型Ll蛋白；優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:3或4 ;更優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:4 ;
[0014] C端截短了 7個或22個氨基酸的HPV16L1蛋白；優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:5或6 ;更優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:6 ;
[0015] C端截短了 9個或24個氨基酸的HPV18L1蛋白；優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:7或8;更優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:8;或
[0016] C端截短了 7個或19個氨基酸的HPV58L1蛋白；優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID N0:9或10;更優(yōu)選地，該截短蛋白的序列為SEQ ID NO: 10。
[0017] 本發(fā)明一方面涉及編碼C端截短的HPV Ll蛋白且密碼子經(jīng)優(yōu)化的HPV Ll基因， 根據(jù)昆蟲細(xì)胞偏愛密碼子進(jìn)行優(yōu)化，其中：
[0018] 所述C端截短的HPV Ll蛋白為C端截短了 9個或21個氨基酸HPV6型Ll蛋白； 優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序列為SEQ ID NO: 11或12;更優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序 列為 SEQ ID NO: 12 ;
[0019] 所述C端截短的HPV Ll蛋白為C端截短了 9個或21個氨基酸HPVll型Ll蛋白； 優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序列為SEQ ID NO: 13或14 ;更優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序 列為 SEQ ID NO: 14 ;
[0020] 所述C端截短的HPV Ll蛋白為C端截短了 7個或22個氨基酸的HPV16L1蛋白； 優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序列為SEQ ID NO: 15或16;更優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序 列為 SEQ ID NO: 16 ;
[0021] 所述C端截短的HPV Ll蛋白為C端截短了 9個或24個氨基酸的HPV18L1蛋白； 優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序列為SEQ ID NO: 17或18;更優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序 列為 SEQ ID NO: 18 ;或
[0022] 所述C端截短的HPV LI蛋白為C端截短了 7個或19個氨基酸的HPV58L1蛋白； 優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序列為SEQ ID NO: 19或20 ;更優(yōu)選地，所述HPV Ll基因的序 列為 SEQ ID NO:20。
[0023] 以及含有上述基因的載體。
[0024] 本發(fā)明一方面涉及包含上述載體的細(xì)胞，所述細(xì)胞包含sf9、sf21、HighFive等昆 蟲細(xì)胞。
[0025] 本發(fā)明一方面涉及包含上述C端截短的Ll蛋白或其多核苷酸或載體或細(xì)胞的組 合物。
[0026] 本發(fā)明一方面涉及HPV6型、HPVll型、HPV16型、HPV18型或HPV58型類病毒顆粒， 其中上述類病毒顆粒包含：
[0027] C端截短了 9個或21個氨基酸HPV6型Ll蛋白；優(yōu)選地，
[0028] 所述C端截短的HPV Ll蛋白的序列為SEQ ID NO: 1或2 ;
[0029] 更優(yōu)選地，C端截短的HPV Ll蛋白的序列為SEQ ID NO:2 ;
[0030] C端截短了 9個、21個氨基酸HPVll型Ll蛋白；優(yōu)選地，
[0031] 所述C端截短的HPV Ll蛋白的序列SEQ ID NO: 3或4 ;
[0032] 更優(yōu)選地，C端截短的HPV Ll蛋白的序列為SEQ ID N0:4 ;
[0033] C端截短了 7個、22個氨基酸HPV16型LI蛋白；優(yōu)選地，
[0034] 所述C端截短的HPV Ll蛋白的序列SEQ ID NO: 5或6 ;
[0035] 更優(yōu)選地，C端截短的HPV Ll蛋白的序列為SEQ ID N0:6 ;
[0036] C端截短了 9個、24個氨基酸HPV18型LI蛋白；優(yōu)選地，
[0037] 所述C端截短的HPV Ll蛋白的序列SEQ ID NO: 7或8 ;
[0038] 更優(yōu)選地，C端截短的HPV Ll蛋白的序列為SEQ ID N0:8 ;或
[0039] C端截短了 7個、19個氨基酸HPV58型Ll蛋白；優(yōu)選地，
[0040] 所述C端截短的HPV Ll蛋白的序列SEQ ID NO:9或10 ;
[0041] 更優(yōu)選地，C端截短的HPV Ll蛋白的序列為SEQ ID NO: 10 ;。
[0042] 本發(fā)明再一方面涉及一種獲得HPV6型、HPVll型、HPV16型、HPV18型或HPV58型 類病毒顆粒的方法，其包括在桿狀病毒一昆蟲細(xì)胞中表達(dá)前述截短的HPV6型、HPVll型、 HPV16型、HPV18型或HPV58型Ll基因片段，裂解所述細(xì)胞，然后將含有上述截短的HPV Ll 蛋白的裂解上清進(jìn)行純化處理。
[0043] 本發(fā)明還涉及預(yù)防性HPV疫苗，其包含本發(fā)明所述的由HPV16L1蛋白形成的類病 毒顆粒。優(yōu)選地，該疫苗還包含至少一種選自以下的類病毒顆粒：本發(fā)明所述的由HPV6L1 蛋白形成的HPV6類病毒顆粒、由HPVl ILl蛋白形成的HPVll類病毒顆粒、由HPV18L1蛋白 形成的HPV18類病毒顆粒和由HPV58L1蛋白形成的HPV58類病毒顆粒。
[0044] 在一個實(shí)施方案中，所述疫苗含有本發(fā)明所述的由HPV58L1蛋白形成的HPV58類 病毒顆粒。優(yōu)選地，所述疫苗含有由具有SEQ ID NO: 10蛋白序列的HPV58型Ll蛋白形成的 HPV58類病毒顆粒。更優(yōu)選地，所述疫苗還含有本發(fā)明所述的由HPV16L1蛋白形成的HPV16 類病毒顆粒和由HPV18L1蛋白形成的HPV18類病毒顆粒，特別是含有由具有SEQ ID N0:6 蛋白序列的HPV16型LI蛋白形成的HPV16類病毒顆粒，含有由具有SEQ ID NO:8蛋白序列 的HPV18型LI蛋白形成的HPV18類病毒顆粒。
[0045] 在一個實(shí)施方案中，所述疫苗含有本發(fā)明所述的由HPV6L1蛋白形成的HPV6類病 毒顆粒和由HPV11L1蛋白形成的HPVll類病毒顆粒。優(yōu)選地，所述疫苗含有由具有SEQ ID NO:2蛋白序列的HPV6型Ll蛋白形成的HPV6類病毒顆粒和含有由具有SEQ ID NO:4蛋白 序列的HPVll型Ll蛋白形成的HPVll類病毒顆粒。更優(yōu)選地，所述疫苗還含有本發(fā)明所述 的由HPV16L1蛋白形成的HPV16類病毒顆粒和由HPV18L1蛋白形成的HPV18類病毒顆粒， 特別是含有由具有SEQ ID NO:6蛋白序列的HPV16型Ll蛋白形成的HPV16類病毒顆粒，含 有由具有SEQ ID NO:8蛋白序列的HPV18型Ll蛋白形成的HPV18類病毒顆粒。
[0046] 在一個實(shí)施方案中，所述疫苗含有本發(fā)明所述的HPV6類病毒顆粒、HPVll類病毒 顆粒和HPV58類病毒顆粒。優(yōu)選地，所述疫苗含有由具有SEQ ID NO:2蛋白序列的HPV6型 Ll蛋白形成的HPV6類病毒顆粒、含有由具有SEQ ID N0:4蛋白序列的HPVll型Ll蛋白形 成的HPVll類病毒顆粒和含有由具有SEQ ID NO: 10蛋白序列的HPV58型Ll蛋白形成的 HPV58類病毒顆粒。更優(yōu)選地，所述疫苗還含有本發(fā)明所述的由HPV16L1蛋白形成的HPV16 類病毒顆粒和由HPV18L1蛋白形成的HPV18類病毒顆粒，特別是含有由具有SEQ IDN0:6蛋 白序列的HPV16型Ll蛋白形成的HPV16類病毒顆粒，含有由具有SEQ ID NO:8蛋白序列的 HPV18型Ll蛋白形成的HPV18類病毒顆粒。
[0047] 相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明選用密碼子優(yōu)化設(shè)計的且C端截短的HPV6L1基因、 HPV11L1基因、HPV16L1基因、HPV18L1基因、或HPV58L1基因，表達(dá)于桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞 表達(dá)系統(tǒng)，使上述截短的HPV Ll蛋白表達(dá)量較野生型HPV6型、HPVll型、HPV16型、HPV18 型或HPV58型Ll蛋白表達(dá)量有明顯提高。表達(dá)所得類病毒顆粒經(jīng)純化后在電鏡下觀察為 50-60nm，與野生型HPV Ll病毒顆粒相似。以密碼子優(yōu)化設(shè)計的C端截短的HPV6型、HPVll 型、HPV16型、HPV18型或HPV58型類病毒顆粒免疫小鼠，較野生型HPV6型、HPVll型、HPV16 型、HPV18型或HPV58型，能產(chǎn)生更高效價的HPV特異性中和抗體。
[0048] 實(shí)驗(yàn)證明：Sf9昆蟲細(xì)胞表達(dá)的HPV全長Ll蛋白的VLP主要定位于Sf9細(xì)胞核。 C-末端截短核定位信號后不影響VLP的形成，并且其VLP形成效率大大提高。因此，在 不影響VLP形成及生物活性的情況下，使所表達(dá)的Ll蛋白主要定位于胞漿，而不進(jìn)入細(xì)胞 核，從而使得Ll蛋白純化變得相對容易，而且還能增加表達(dá)水平。
[0049] 去除C端核定位信號的截短型HPV16L1蛋白（HPV16-483)中和抗體滴度顯著高于 全長型（HPV16-505)，說明截短型所誘發(fā)的體液免疫應(yīng)答水平顯著高于全長型。這可能是由 于去除核定位信號的HPV16VLP滯留在細(xì)胞質(zhì)中，而含有核定位信號的HPV16VLP定位于細(xì) 胞核中，而細(xì)胞質(zhì)中的截短型HPV16VLP比全長HPV16VLP更易于呈遞給B淋巴細(xì)胞，誘發(fā)特 異性的體液免疫應(yīng)答。通過上述研究結(jié)果可知，去除核定位信號的HPV VLP更易于被B淋 巴細(xì)胞識別，有利于產(chǎn)生高滴度的中和抗體。

【具體實(shí)施方式】
[0050] 下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步舉例描述。
[0051] 實(shí)施例1密碼子優(yōu)化設(shè)計合成人乳頭瘤病毒Ll基因
[0052] 按照昆蟲細(xì)胞使用的密碼子偏愛性、mRNA二級結(jié)構(gòu)、mRNA自由能穩(wěn)定性、GC含量 等原則，設(shè)計全長HPV6型、HPVl 1型、HPV16型、HPV18型、HPV58型核酸序列（參見序列表中 的對應(yīng)序列）。由捷瑞公司分別商業(yè)合成上述全長基因。
[0053] 實(shí)施例2各型HPV Ll蛋白-重組桿粒構(gòu)建
[0054] 表1.引物表：
[0055]
[0056]

【權(quán)利要求】
1. 一種部分去除c端核定位信號的人乳頭瘤病毒L1蛋白，其中所述人乳頭瘤病毒為 HPV6型、HPV11型、HPV16型、HPV18型或HPV58型，所述L1蛋白選自： C端截短了 9個、21個氨基酸的HPV6型L1蛋白；優(yōu)選該截短蛋白具有SEQ ID NO: 1、 2 ;優(yōu)選 SEQ ID N0:2 ; C端截短了 9個、21個氨基酸的HPV11型LI蛋白；優(yōu)選該截短蛋白具有SEQ ID NO: 3、 4 ;優(yōu)選 SEQ ID NO:4 ; C端截短了 7個、22個氨基酸的HPV16L1蛋白；優(yōu)選該截短蛋白具有SEQ ID N0:5、6 ; 優(yōu)選 SEQ ID NO:6 ; C端截短了 9個、24個氨基酸的HPV18L1蛋白；優(yōu)選該截短蛋白具有SEQ ID N0:7、8; 優(yōu)選 SEQ ID NO:8 ; C端截短了 7個、19個氨基酸的HPV58L1蛋白；優(yōu)選該截短蛋白具有SEQ ID N0:9、10 ; 優(yōu)選 SEQ ID NO: 10。
2. -種編碼權(quán)利要求1所述的HPV LI蛋白的多核苷酸序列，優(yōu)選地，所述多核苷酸序 列是經(jīng)密碼子優(yōu)化設(shè)計的；更優(yōu)選地，所述多核苷酸序列是按照昆蟲細(xì)胞使用的密碼子優(yōu) 化設(shè)計的；優(yōu)選地，其中： 所述HPV L1基因的序列為SEQ ID N0:11或12 ;更優(yōu)選地， 所述HPV L1基因的序列為SEQ ID N0:12 ; 所述HPV L1基因的序列為SEQ ID NO: 13或14 ;更優(yōu)選地， 所述HPV L1基因的序列為SEQ ID NO: 14 ; 所述HPV L1基因的序列為SEQ ID NO: 15或16 ;更優(yōu)選地， 所述HPV L1基因的序列為SEQ ID NO: 16 ; 所述HPV LI基因的序列為SEQ ID NO: 17或18 ;更優(yōu)選地， 所述HPV LI基因的序列為SEQ ID NO: 18 ;或 所述HPV LI基因的序列為SEQ ID NO: 19或20 ;更優(yōu)選地， 所述HPV LI基因的序列為SEQ ID N0:20。
3. -種包含權(quán)利要求2所述的多核苷酸的載體。
4. 一種包含權(quán)利要求3所述的載體的細(xì)胞，優(yōu)選地，所述細(xì)胞為昆蟲細(xì)胞；更優(yōu)選地， 所述細(xì)胞選自sf9、sf21、HighFive昆蟲細(xì)胞。
5. -種組合物，包含權(quán)利要求1所述的L1蛋白；或者權(quán)利要求2所述的多核苷酸；或 者權(quán)利要求3所述的載體；或者權(quán)利要求4所述的細(xì)胞。
6. -種人乳頭瘤病毒類病毒顆粒，其包含權(quán)利要求1所述的L1蛋白。
7. -種獲得權(quán)利要求6所述的類病毒顆粒的方法，包括在桿狀病毒一昆蟲細(xì)胞中表達(dá) 權(quán)利要求2所述的多核苷酸序列，然后將含有所述截短的L1蛋白的裂解上清進(jìn)行純化處 理。
8. -種HPV疫苗，其包括權(quán)利要求6的由HPV16L1蛋白形成的HPV16類病毒顆粒；更 優(yōu)選地，所述疫苗還包含選自以下的至少一種HPV類病毒顆粒：權(quán)利要求6的由HPV6L1蛋 白形成的HPV6類病毒顆粒、由HPV11L1蛋白形成的HPV11類病毒顆粒、由HPV18L1蛋白形 成的HPV18類病毒顆粒和由HPV58L1蛋白形成的HPV58類病毒顆粒。
9. 一種HPV疫苗，其包括權(quán)利要求6的由HPV58L1蛋白形成的HPV58類病毒顆粒；優(yōu) 選地，所述疫苗含有具有SEQ ID NO: 10蛋白序列的HPV58L1蛋白的HPV58類病毒顆粒；優(yōu) 選地，所述疫苗還含有權(quán)利要求6的由HPV16L1蛋白形成的HPV16類病毒顆粒和由HPV18L1 蛋白形成的HPV18類病毒顆粒；優(yōu)選地，HPV16類病毒顆粒含有具有SEQ ID N0:6蛋白序列 的HPV16L1蛋白，HPV18類病毒顆粒含有具有SEQ ID N0:8蛋白序列的HPV18L1蛋白。
10. -種HPV疫苗，所述疫苗含有權(quán)利要求6的由HPV6L1蛋白形成的HPV6類病毒顆粒 和由HPV11L1蛋白形成的HPV11類病毒顆粒；優(yōu)選地，所述疫苗含有具有SEQ ID N0:2蛋白 序列的HPV6L1蛋白的HPV6類病毒顆粒和含有具有SEQ ID勵:4蛋白序列的即￥1111蛋白 的HPV11類病毒顆粒；優(yōu)選地，所述疫苗還含有權(quán)利要求6的由HPV16L1蛋白形成的HPV16 類病毒顆粒和由HPV18L1蛋白形成的HPV18類病毒顆粒；優(yōu)選地，HPV16類病毒顆粒含有具 有SEQ ID N0:6蛋白序列的HPV16L1蛋白，HPV18類病毒顆粒含有具有SEQ ID N0:8蛋白 序列的HPV18L1蛋白。
11. 一種HPV疫苗，所述疫苗含有權(quán)利要求6的由HPV6L1蛋白形成的HPV6類病毒顆 粒、由HPV11L1蛋白形成的HPV11類病毒顆粒和由HPV58L1蛋白形成的HPV58類病毒顆粒； 優(yōu)選地，所述疫苗含有具有SEQ ID腸:2蛋白序列的即￥611蛋白的即￥6類病毒顆粒、含有 具有5￡〇10勵:4蛋白序列的即￥1111蛋白的即￥11類病毒顆粒和含有具有5￡〇10勵：10 蛋白序列的HPV58L1蛋白的HPV58類病毒顆粒；優(yōu)選地，所述疫苗還含有權(quán)利要求6的由 HPV16L1蛋白形成的HPV16類病毒顆粒和由HPV18L1蛋白形成的HPV18類病毒顆粒；優(yōu)選 地，HPV16類病毒顆粒含有具有SEQ ID N0:6蛋白序列的HPV16L1蛋白，HPV18類病毒顆粒 含有具有SEQ ID N0:8蛋白序列的HPV18L1蛋白。
【文檔編號】C07K14/025GK104418942SQ201310388695
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】孔維, 姜春來, 孫博, 徐菲, 宋海鵬, 張喆 申請人:長春百克生物科技股份公司, 吉林大學(xué)