通過氫亞磷酸單酯中間體合成糖-1-單磷酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于化學(xué)合成領(lǐng)域，涉及糖-1-單磷酸合成。本發(fā)明方法包括1）咪唑與三氯化磷反應(yīng)得亞磷酸三咪唑，取亞磷酸三咪唑與端位脫保護的乙?；窃戏磻?yīng)，原位水解得到相應(yīng)的糖基-1-氫亞磷酸單酯；2）用N,O-雙（三甲基硅基）乙酰胺對糖基-1-氫亞磷酸單酯進行硅基化得到亞磷酸三酯中間體，有機堿/碘單質(zhì)體系氧化，原位水解得到乙?；Ｗo的糖-1-單磷酸；3）甲醇鈉脫除乙酰基保護基，經(jīng)過葡聚糖凝膠色譜純化，及離子交換得到相應(yīng)的高純度糖-1-單磷酸。本發(fā)明方法經(jīng)過三個步驟得到糖-1-單磷酸，總產(chǎn)率可以達到75%-85%。避免了以往方法中通過氫化脫除芐基帶來的損失，特別適用于糖-1-單磷酸的大量制備。
【專利說明】通過氫亞磷酸單酯中間體合成糖-1-單磷酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種通過糖基-1-氫亞磷酸單酯中間體合成糖-1-單磷酸的新型合成方法。
技術(shù)背景
[0002]糖是細胞結(jié)構(gòu)的重要組成部分和生物體內(nèi)能量貯存的主要形式，參與生物體內(nèi)很多重要的信號傳遞過程。糖進入細胞后在磷酸化酶作用下成為糖單磷酸，它是糖代謝過程中重要的中間體，如葡萄糖-6-磷酸是許多糖代謝途徑(無氧酵解、有氧氧化、磷酸戊糖途徑、糖原合成、糖原分解)的中間體。此外，在酶化學(xué)合成中利用糖基轉(zhuǎn)移酶制備各種寡糖、糖綴合物和含糖基天然產(chǎn)物時使用的糖基供體必須為活化的核苷二磷酸糖。而糖-1-單磷酸則是合成核苷二磷酸糖的重要原料。但是，由于缺乏對這類化合物有效的化學(xué)合成方法，其市場售價非常昂貴，且供應(yīng)量少，大部分的糖-1-單磷酸需要通過多步驟合成，產(chǎn)率很低。
[0003]目前，化學(xué)合成糖-1-單磷酸主要有四種方法。第一種是Wong等人報道使用端位脫保護糖原料與亞磷酰胺二芐酯在酸催化條件下發(fā)生醇解反應(yīng)得到亞磷酸三酯，然后原位氧化得到雙芐基保護的糖-1-單磷酸，最后脫保護得到糖-1-單磷酸的方法。該方法總產(chǎn)率通常為50%左右，但亞磷酰胺二芐酯需要特殊制備。第二種是Nikolaev等人報道使用1-鹵代糖原料與磷酸二芐酯反應(yīng)得到雙芐基保護的糖-1-單磷酸，然后脫保護得到糖-1-單磷酸的方法。該方法總產(chǎn)率較低，一般在40%左右。第三種是Fairbanks等人報道使用端位脫保護糖原料與二異丙基氨基鋰以及焦磷酸四芐酯反應(yīng)，得到雙芐基保護的糖-1-單磷酸，然后脫保護得到糖-1-單磷酸的方法。該方法反應(yīng)總產(chǎn)率通常為60%左右，但是反應(yīng)條件苛刻，而且焦磷酸四芐酯價格非常昂貴。第四種是通過糖基-1-氫亞磷酸二酯，然后原位氧化，脫保護得到糖-1-單磷酸的方法，Brockhausen等報道的產(chǎn)率僅為8%。因此，以上方法在實際應(yīng)用中大量制備糖-1-單磷酸時都存在一定的限制。因此，建立通用、簡單和高效的糖-1-單磷酸化學(xué)合成方法具有重要的實際應(yīng)用價值和意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是為一系列糖-1-單磷酸的化學(xué)合成提供一種新穎、通用和高效的方法。
[0005]本發(fā)明涉及的糖基-1-單磷酸的合成包括以下三個步驟:1)咪唑與三氯化磷反應(yīng)得亞磷酸三咪唑，取亞磷酸三咪唑與端位脫保護的乙?；窃?1-2，9-11)反應(yīng)，原位水解得到糖基-1-氫亞磷酸單酯(3-4，12-14)，產(chǎn)率為90-95% ;2)用％ 雙(三甲基硅基)乙酰胺(BSA)對糖基-1-氫亞磷酸單酯進行硅基化得到亞磷酸三酯中間體，有機堿/碘單質(zhì)體系氧化，原位水解得到乙?；Ｗo的糖-1-單磷酸(5-6，15-17)，產(chǎn)率為85-89% ；3)甲醇鈉脫除乙?；Ｗo基，經(jīng)過葡聚糖凝膠色譜純化，及離子交換得到5種高純度糖-1-單磷酸(7-8，18-20)，產(chǎn)率為 96-98%ο[0006]如圖1、圖2所示，本方法步驟一中，三氯化磷與咪唑的摩爾比例為1:6，端位脫保護的乙?；窃?1-2，9-11)與亞磷酰三咪唑的摩爾比例為1:5至1:10，反應(yīng)溶劑選自無水二氯甲烷、乙腈、乙醚、四氫呋喃、或1，2- 二氯乙烷任一種，反應(yīng)溫度為0-30°C，反應(yīng)時間為2小時至4小時；水解時，端位脫保護的乙?；窃吓c水的摩爾比例為1:5至1:20，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間是5分鐘至15分鐘。
[0007]本方法步驟二中，硅基化試劑使用％ 雙(三甲基硅基)乙酰胺(BSA)，糖基-1-氫亞磷酸單酯(3-4，12-14)與BSA的摩爾比例為1:3至1:5，反應(yīng)溶劑為無水吡啶，四氫呋喃，二氯甲烷，乙腈，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為10分鐘至30分鐘。有機堿/碘單質(zhì)體系氧化時，有機堿可以使用三甲胺、三乙胺、三正丙胺、三異丙胺、三正丁胺或二異丙基乙基胺，糖基-1-氫亞磷酸單酯與有機堿的摩爾比例為1:3至1:5，與碘單質(zhì)的摩爾比例為1:1至1:1.5，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為10分鐘至30分鐘；水解時，糖基_1_氫亞磷酸單酯與水的摩爾比例為1:10至1:20，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為5分鐘至30分鐘。
[0008]本方法步驟三中，使用甲醇鈉脫除乙?；?，甲醇鈉與乙酰化糖-1-單磷酸(5-6，15-17)的摩爾比例為6:1至10:1，反應(yīng)溶劑為無水甲醇或乙醇，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為2小時至6小時。
[0009]為了達到更好的技術(shù)效果，整個合成反應(yīng)在氬氣保護下進行。
[0010]本發(fā)明專利預(yù)先使用廉價的三氯化磷與咪唑反應(yīng)合成亞磷酸三咪唑,不需純化直接與乙酰化糖原料反應(yīng)高產(chǎn)率的得到糖基-1-氫亞磷酸單酯中間體，與以往文獻報道的方法相比，糖基-1-氫亞磷酸單酯的合成產(chǎn)率由62%提高到90%以上。糖基-1-氫亞磷酸單酯原位一鍋硅基化，碘氧化，水解得到保護的糖-1-單磷酸，反應(yīng)時間在I小時左右，且反應(yīng)分離產(chǎn)率可以達到85-89%。最后利用甲醇鈉脫除乙?；弋a(chǎn)率的得到糖-1-單磷酸。該新方法經(jīng)過三個步驟得到糖-1-單磷酸，總產(chǎn)率可以達到75%-85%。該方法可以避免了以往方法中通過氫化脫除芐基帶來的損失，特別適用于糖-1-單磷酸的大量制備。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1.L-糖-1-單磷酸的合成方法。
[0012]圖2.D-糖-1-單磷酸的合成方法。
【具體實施方式】
[0013]實施例1:
a -L-鼠李糖-1-單磷酸二鈉鹽7的合成:
I)在氬氣保護下，將咪唑(14.1 g，207 mmol)溶于干燥的二氯甲烷(100 mL)，在O ° C下加入三氯化磷(3.0 mL，34.5 mmol)，反應(yīng)0.5小時得到亞磷酸三咪唑，然后向反應(yīng)瓶中滴入2，3，4-0-三乙酰基-a-L-鼠李糖(2.0 g，6.9 mmol)的干燥二氯甲烷溶液(20 mL),升至30 ° C繼續(xù)攪拌2小時，加入H2O (0.62 mL)攪拌5分鐘，用二氯甲烷(70 mL)稀釋反應(yīng)液，然后用pH值為5的氯化銨水溶液(50 mLX2)洗，再用二氯甲烷(70 mLX2)萃取水相，收集并合并有機相，用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮得到2，3，A-O-三乙?；?a -L-鼠李糖-1-氫亞磷酸單酯粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1加入0.5%三乙胺)，得到無色油狀的2，3，A-O-三乙?；?a -L-鼠李糖-1-氫亞磷酸單酯2.98 g，產(chǎn)率為95%。
[0014]2)在氬氣保護下，將2，3，4-0-三乙?；?a -L-鼠李糖_1_氫亞磷酸單酯(2.5g，5.5 mmol)溶于干燥的吡啶(30 mL)，加入 BSA (6.75 mL，27.5 mmol),30。C 硅基化 10分鐘，然后加入三乙胺(3.8 mL, 27.5 mmol),再加入碘單質(zhì)(2.1 g,8.25 mmol),當反應(yīng)液的顏色不再褪色時，繼續(xù)反應(yīng)5分鐘，最后加入H2O (2 mL)攪拌5分鐘后，減壓濃縮反應(yīng)液，得到2，3，4-0-三乙?；?a -L-鼠李糖-1-單磷酸粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1至5:1加入0.5%三乙胺)得到2，3，A-O-三乙酰基-a -L-鼠李糖-1-單磷酸三乙胺鹽2.3 g，產(chǎn)率為89%。
[0015]3)在氬1氣保護下,將2，3, A-O- 二乙酸基-a -L-鼠李糖-1-單憐酸二乙胺鹽(2.0g,4.25 mmol)溶于干燥的甲醇(30 mL),加入甲醇鈉(1.38 g, 25.5 mmol)配制的甲醇鈉甲醇溶液(20 mL),30 ° C反應(yīng)2小時，用鹽酸甲醇溶液(0.1 M)中和至pH為7，減壓濃縮反應(yīng)液，得到a-L-鼠李糖-1-單磷酸粗品，葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)柱層析分離(去離子水)得到a -L-鼠李糖-1-單磷酸純品，最后經(jīng)鈉離子型陽離子交換樹脂交換洗脫，合并含產(chǎn)物洗脫液，減壓濃縮得到a-L-鼠李糖-1-單磷酸二鈉鹽白色固體1.2 g，產(chǎn)率為98%。
[0016]實施例2:
6-脫氧-a -L-塔羅糖-1-單磷酸二鈉鹽8的合成:
I)在氬氣保護下，將咪唑(14.1 g，207 mmol)溶于干燥的1,2-二氯乙烷(100 mL)，在O ° C下加入三氯化磷(3.0 mL，34.5 mmol)，反應(yīng)0.5小時得到亞磷酸三咪唑，然后向反應(yīng)瓶中滴入2，3，4-0-三乙?；?6-脫氧-a-L-塔羅糖(2.0 g，6.9 mmol)的干燥1，2-二氯乙烷溶液(20 mL)，在O ° C下繼續(xù)攪拌4小時，加入H2O (1.24 mL)攪拌15分鐘，用1，2-二氯乙烷(70 mL)稀釋反應(yīng)液，然后用pH值為5的氯化銨水溶液(50 mLX2)洗，再用二氯甲烷(70 mLX 2)萃取水 相，收集并合并有機相，用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮得到2，3，4-0-三乙?；?6-脫氧-a -L-塔羅糖_1_氫亞磷酸單酯粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1加入0.5%三乙胺)，得到無色油狀的2，3，4-0-三乙?；?6-脫氧-a-L-塔羅糖-1-氫亞磷酸單酯2.92 g，產(chǎn)率為93%。
[0017]2)在氬氣保護下，將2，3，A-O-三乙?；鵢6_脫氧-a -L-塔羅糖_1_氫亞磷酸單酯(2.5 g，5.5 mmol)溶于干燥的四氫呋喃(30 mL)，加入 BSA (4.05 mL, 16.5 mmol), 30° C娃基化10分鐘,然后加入三正丙胺(3.2 mL, 16.5 mmol),再加入碘單質(zhì)(1.68 g, 6.6mmol)，當反應(yīng)液的顏色不再褪色時，繼續(xù)反應(yīng)5分鐘，最后加入H20(2 mL)攪拌5分鐘后，減壓濃縮反應(yīng)液，得到2，3, A-O- 二乙酸基_6_脫氧-a -L-塔羅糖-1-單憐酸粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1至5:1加入0.5%三乙胺)得到2，3，4-0-三乙酰基-6-脫氧-a -L-塔羅糖_1-單憐酸二乙胺鹽2.25 g,廣率為87%。
[0018]3)在氬氣保護下，將2，3，\-0~三乙?；?6-脫氧-a -L-塔羅糖_1_單磷酸三乙胺鹽(2.0 g, 4.25 mmol)溶于干燥的甲醇(30 mL),加入甲醇鈉(2.3 g, 42.5 mmol)配制的甲醇鈉甲醇溶液(30 mL),20 ° C反應(yīng)3小時，用鹽酸甲醇溶液(0.1 M)中和至pH為7，減壓濃縮反應(yīng)液，得到6-脫氧-a -L-塔羅糖-1-單磷酸粗品，葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20 )柱層析分離(去離子水)得到6-脫氧- a -L-塔羅糖-1-單磷酸純品，最后經(jīng)鈉離子型陽離子交換樹脂交換洗脫，合并含產(chǎn)物洗脫液，減壓濃縮得到6-脫氧-a -L-塔羅糖-1-單磷酸二鈉鹽白色固體1.19 g，產(chǎn)率為97%。[0019]實施例3:
a -D-甘露糖-1-單磷酸二鈉鹽18的合成 :
I)在氬氣保護下，將咪唑(28.2 g，414 mmol)溶于干燥的乙腈(150 mL)，在O ° C下加入三氯化磷(6.0 mL，69 mmol)，反應(yīng)0.5小時得到亞磷酸三咪唑，然后向反應(yīng)瓶中滴入2，3，4，6-0-四乙酰基-a-D-甘露糖(2.4 g，6.9 mmol)的干燥乙腈溶液(20 mL)，升至30 ° C繼續(xù)攪拌2小時，加入H2O (0.62 mL)攪拌5分鐘。減壓濃縮反應(yīng)液，用二氯甲烷(150 mL)溶解殘余物，然后用pH值為5的氯化銨水溶液(50 mLX 2)洗，再用二氯甲烷(70mLX 2)萃取水相，收集并合并有機相，用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮得到2，3，4，6~0~四乙?；?a-D-甘露糖-1-氫亞磷酸單酯粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1加入0.5%三乙胺)，得到無色油狀的2，3，4，6-0-四乙酰基-a -D-甘露糖-1-氫亞磷酸單酯3.26 g，產(chǎn)率為92%。
[0020]2)在氬氣保護下，將2，3，4，6-0-四乙?；?a -D-甘露糖_1_氫亞磷酸單酯(2.82g, 5.5 mmol)溶于干燥的乙腈(40 mL),加入BSA (5.4 mL, 22.0 mmol),在O ° C下娃基化30分鐘,然后加入三乙胺(3.1 mL, 22.0 mmol),再加入碘單質(zhì)(1.54 g,6.0 mmol),當反應(yīng)液的顏色不再褪色時，繼續(xù)反應(yīng)30分鐘。最后在O ° C下加入H2O (I mL)攪拌30分鐘，減壓濃縮反應(yīng)液，得到2，3，4，6-0-四乙?；?a -D-甘露糖_1_單磷酸粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1至5:1加入0.5%三乙胺)得到2，3，4，6-0-四乙?；?a-D-甘露糖-1-單磷酸三乙胺鹽2.5 g，產(chǎn)率為86%。
[0021]3)在IS氣保護下，將2，3, 4, 6-0-四乙?；?a -D-甘露糖-1-單磷酸二乙胺鹽(2.25 g,4.25 mmol)溶于干燥的乙醇(30 mL),加入甲醇鈉(1.84 g, 34 mmol)配制的甲醇鈉乙醇溶液(25 mL)，0 ° C反應(yīng)6小時，用鹽酸乙醇溶液(0.1 M)中和至pH為7，減壓濃縮反應(yīng)液，得到a-D-甘露糖-1-單磷酸粗品,葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)柱層析分離(去離子水)得到a -D-甘露糖-1-單磷酸純品，最后經(jīng)鈉離子型陽離子交換樹脂交換洗脫，合并含產(chǎn)物洗脫液，減壓濃縮得到a-D-甘露糖-1-單磷酸二鈉鹽白色固體1.25 g，產(chǎn)率為97%。
[0022]實施例4:
D-半乳糖-1-單磷酸二鈉鹽19的合成:
I)在氬氣保護下，將咪唑(14.1 g，207 mmol)溶于干燥的四氫呋喃(100 mL)，在O ° C下加入三氯化磷(3.0 mL，34.5 mmol)，反應(yīng)0.5小時得到亞磷酸三咪唑，然后向反應(yīng)瓶中滴入2，3，4，6-0-四乙?；?D-半乳糖(2.4 g，6.9 mmol, α:β = 2.2:1)的干燥四氫呋喃溶液(20 mL)，在O ° C下繼續(xù)攪拌4小時，加入H2O (1.24 mL)攪拌15分鐘。減壓濃縮反應(yīng)液，用二氯甲烷(150 mL)溶解殘余物，然后用pH值為5的氯化銨水溶液(50 mLX2)洗，再用二氯甲烷(70 mLX 2)萃取水相，收集并合并有機相，用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮得到2，3，4，6-0-四乙?；?D-半乳糖-1-氫亞磷酸單酯粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1加入0.5% 二乙胺)，得到無色油狀的2，3，4，6-0-四乙酸基-D-半乳糖-1-氧亞憐酸單酯3.29 g，產(chǎn)率為93%。
[0023]2)在氬氣保護下，將2，3，4，6-0-四乙?；?D-半乳糖-1-氫亞磷酸單酯(2.82 g，
5.5 mmol)溶于干燥的吡啶(30 mL)，30。C 加入 BSA(6.75 mL，27.5 mmol)，硅基化 10 分鐘，然后加入二異丙基乙基胺(4.8 mL, 27.5 mmol),再加入碘單質(zhì)(1.8 g, 7.15 mmol),當反應(yīng)液的顏色不再褪色時，繼續(xù)反應(yīng)10分鐘，最后加入H2O (2 mL)攪拌5分鐘后，減壓濃縮反應(yīng)液，得到2，3，4，6-0-四乙?；?D-半乳糖-1-單磷酸粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1至5:1加入0.5%三乙胺)得到2，3，4，6~0~四乙酰基-D-半乳糖-1-單磷酸三乙胺鹽2.53 g，產(chǎn)率為87%。
[0024]3)在氬氣保護下，將2，3，4，6~0~四乙?；鵢D_半乳糖_1_單磷酸三乙胺鹽(2.25g,4.25 mmol)溶于干燥的甲醇(30 mL),加入甲醇鈉(2.3 g,42.5 mmol)配制的甲醇鈉甲醇溶液(30 mL),30 ° C反應(yīng)2小時，用鹽酸甲醇溶液(0.1 M)中和至pH為7，減壓濃縮反應(yīng)液，得到D-半乳糖-1-單磷酸粗品，葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)柱層析分離(去離子水)得到D-半乳糖-1-單磷酸純品，最后經(jīng)鈉離子型陽離子交換樹脂交換洗脫，合并含產(chǎn)物洗脫液，減壓濃縮得到D-半乳糖-1-單磷酸二鈉鹽白色固體1.25 g (α:β= 2.2:1)，產(chǎn)率為 97%。[0025]實施例5:
D-葡萄糖-1-單磷酸二鈉鹽20的合成:
I)在氬氣保護下，將咪唑(14.1 g，207 mmol)溶于干燥的二氯甲烷(50 mL)，在O ° C下加入三氯化磷(3.0 mL，34.5 mmol)，反應(yīng)0.5小時得到亞磷酸三咪唑，然后向反應(yīng)瓶中滴入2，3，4，6-0-四乙?；?D-葡萄糖(2.4 g,6.9 mmol, α: β = 3:1)的干燥二氯甲燒溶液(20 mL)，升至30 ° C繼續(xù)攪拌2小時，加入H2O (0.62 mL)攪拌5 min，用二氯甲烷(70 mL)稀釋反應(yīng)液，然后用pH值為5的氯化銨水溶液(50 mLX 2)洗，再用二氯甲烷(70mLX 2)萃取水相，收集并合并有機相，用無水Na2SO4干燥，減壓濃縮得到2，3，4，6~0~四乙?；?D-葡萄糖-1-氫亞磷酸單酯粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1加入0.5%三乙胺)，得到無色油狀的2，3，4，6-0-四乙酰基-D-葡萄糖-1-氫亞磷酸單酯3.19 g，產(chǎn)率為90%。
[0026]2)在氬氣保護下，將2，3，4，6-0-四乙?；?D-葡萄糖-1-氫亞磷酸單酯(2.82 g，5.5 mmol)溶于干燥的四氫呋喃(30 mL),加入BSA (6.75 mL, 27.5 mmol),在O ° C下娃基化30分鐘,然后加入三正丁胺(6.5 mL, 27.5 mmol),再加入I2 (1.68 g, 6.6 mmol),當反應(yīng)液的顏色不再褪色時，繼續(xù)反應(yīng)30 min，最后加AH2O (2 mL)攪拌20分鐘后，減壓濃縮反應(yīng)液，得到2，3，4，6-0-四乙?；?D-葡萄糖-1-單磷酸粗品，柱層析分離(二氯甲烷:甲醇=20:1至5:1加入0.5%三乙胺)得到2，3，4，6~0~四乙?；?D-葡萄糖-1-單磷酸三乙胺鹽2.47 g，產(chǎn)率為85%。
[0027]3)在氬氣保護下，將2，3，4，6~0~四乙酰基_D_葡萄糖_1_單磷酸三乙胺鹽(2.25g,4.25 mmol)溶于干燥的甲醇(30 mL),加入甲醇鈉(1.84 g, 34 mmol)配制的甲醇鈉甲醇溶液(25 mL)，0 ° C反應(yīng)6小時，用鹽酸甲醇溶液(0.1 M)中和至pH為7，減壓濃縮反應(yīng)液，得到D-葡萄糖-1-單磷酸粗品，葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)柱層析分離(去離子水)得到D-葡萄糖-1-單磷酸純品，最后經(jīng)鈉離子型陽離子交換樹脂交換洗脫，合并含產(chǎn)物洗脫液，減壓濃縮得到D-葡萄糖-1-單磷酸二鈉鹽白色固體1.24 g (α: β= 3:1)，產(chǎn)率為96%。
【權(quán)利要求】
1.通過氫亞磷酸單酯中間體合成糖-1-單磷酸的方法，其特征包括如下步驟:1)咪唑與三氯化磷反應(yīng)得亞磷酸三咪唑，取亞磷酸三咪唑與端位脫保護的L-型或D-型乙酰化糖原料反應(yīng)，原位水解得到相應(yīng)的糖基-1-氫亞磷酸單酯；所述端位脫保護的L-乙?；窃? OHejOAc^rI H料為，其中民=0六(3，1?2=!1或R1=H, R2=OAciD-乙?；窃蠟椋琑: '人 OAck OH其中 R5=OAc, R6=H, R7=OAc, R8=H 或 R5=H, R6=OAc, R7=H, R8=OAc 或尺5=!1，R6=OAc, R7=OAc,R8=H ;2)用％ 雙(三甲基硅基)乙酰胺BSA對糖基-1-氫亞磷酸單酯進行硅基化得到亞磷酸三酯中間體，有機堿/碘單質(zhì)體系氧化，原位水解得到乙酰基保護的糖-1-單磷酸；3)甲醇鈉脫除乙?；Ｗo基，經(jīng)過葡聚糖凝膠色譜純化，及離子交換得到相應(yīng)的高純度糖-1-單磷酸。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟I)中，三氯化磷與咪唑的摩爾比例為1:6，端位脫保護的乙酰化糖原料與亞磷酰三咪唑的摩爾比例為1:5至1:10，反應(yīng)溶劑選自無水二氯甲烷、乙腈，乙醚、四氫呋喃、或1，2-二氯乙烷任一種，反應(yīng)溫度為0-30°C，反應(yīng)時間為2小時至4小時。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟I)中，原位水解時，端位脫保護的乙酰化糖原料與水的摩爾比例為1:5至1:20，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間是5分鐘至15分鐘。
4.如權(quán)利要求1所述的`方法，其特征在于所述步驟2)中，硅基化試劑使用％雙(三甲基硅基)乙酰胺BSA，糖基-1-氫亞磷酸單酯與BSA的摩爾比例為1:3至1:5，反應(yīng)溶劑選自無水吡啶，四氫呋喃，二氯甲烷，或乙腈任一種，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為10分鐘至30分鐘。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟2)中，有機堿/碘單質(zhì)體系氧化時，有機堿選自三甲胺、三乙胺、三正丙胺、三異丙胺、三正丁胺、或二異丙基乙基胺，糖基-1-氫亞磷酸單酯與有機堿的摩爾比例為1:3至1:5，與碘單質(zhì)的摩爾比例為1:1至1:1.5，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為10分鐘至30分鐘。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟2)中，水解時，糖基-1-氫亞磷酸單酯與水的摩爾比例為1:10至1:20，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為5分鐘至30分鐘。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟3)中，使用甲醇鈉脫除乙?；?，甲醇鈉與乙?；?1-單磷酸的摩爾比例為6:1至10:1，反應(yīng)溶劑為無水甲醇或乙醇，反應(yīng)溫度在0-30°C之間，反應(yīng)時間為2小時至6小時。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于整個合成反應(yīng)在氬氣保護下進行。
【文檔編號】C07H11/04GK103509067SQ201310469014
【公開日】2014年1月15日 申請日期:2013年10月10日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月10日
【發(fā)明者】孫麒, 龔珊珊, 李星見, 蒲守智, 劉剛, 劉國棟 申請人:江西科技師范大學(xué)