提高人參皂苷m1與癸酰氯單酯化選擇性的合成方法
【專利摘要】本發(fā)明介紹了一種提高人參皂苷M1與癸酰氯單酯化選擇性的合成方法，首先將人參皂苷M1糖苷基的6號位羥基用叔丁基二甲基氯硅烷醚化保護(hù)起來，再與等當(dāng)量的癸酰氯在冰水浴，氮?dú)獗Ｗo(hù)，二氯甲烷為溶劑，三乙胺為敷酸劑，DMAP(4-二甲氨基吡啶)催化的條件下發(fā)生單酯化反應(yīng)，最后用四丁基氟化銨脫去硅保護(hù)基得到人參皂苷M1的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)產(chǎn)物。
【專利說明】提高人參皂苷M1與癸酰氯單酯化選擇性的合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及人參皂苷Ml的氯硅烷保護(hù)反應(yīng)，屬于中藥化學(xué)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]人參具有抗衰老、抗炎、抗過敏、降血糖、修復(fù)神經(jīng)損傷和保肝等作用。近年來的研究表明，人參皂苷具有抗腫瘤的作用，大部分都是以Rg3、Rh1, Rh2等為主要研究對象。他們在促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和腫瘤細(xì)胞分化等方面表現(xiàn)出顯著作用，不同結(jié)構(gòu)的人參皂苷在抗腫瘤活性方面存在差異，其中二醇型人參皂苷抗腫瘤活性明顯強(qiáng)于三醇型人參皂苷。隨著皂苷藥代動力學(xué)研究的深入，發(fā)現(xiàn)真正發(fā)揮抗腫瘤作用的是皂苷動物體內(nèi)的次級代謝產(chǎn)物Compound K又稱人參阜苷Ml,人參阜苷Compound K屬于原人參二醇型阜苷。研究表明人參皂苷Compound K的酯化衍生物具有更好的抗腫瘤活性。EMl (Ml的硬脂酸酯、棕櫚酸酯和油酸酯的混合物)與Ml相比具有更強(qiáng)的抗腫瘤活性。但是EMl來源有限，難以分離純化。而利用化學(xué)合成技術(shù)獲得的系列Ml衍生物水溶性差。采用酯鍵、醚鍵等方式給Ml的修飾基引入水溶性較好的基團(tuán)，使其兼具脂溶性和水溶性，人參皂苷Ml的結(jié)構(gòu)式上有六個羥基，從而選擇性酯化和提高單酯化產(chǎn)率具有很重要的研究價(jià)值。
[0003]氯硅烷保護(hù)-去保護(hù)過程廣泛應(yīng)用于羥基的保護(hù)反應(yīng)，用氯硅烷將Compound K的糖苷基上最活潑的6號位羥基保護(hù)上，再與酰氯發(fā)生酯化反應(yīng)，根據(jù)動力學(xué)和基團(tuán)位阻大小對酯化位置的影響，從而優(yōu)化了單酯化反應(yīng)的選擇性，易于分離提純，提高酯化反應(yīng)產(chǎn)率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]人參皂苷Ml和叔丁基二甲基氯硅烷為原料合成人參皂苷Ml的單醚化產(chǎn)物，將其產(chǎn)物與等當(dāng)量的癸酰氯在冰水浴，氮?dú)獗Ｗo(hù)，二氯甲烷為溶劑，三乙胺為敷酸劑，DMAP催化的條件下發(fā)生單酯化反應(yīng)，最后用四丁基氟化銨脫去叔丁基二甲基硅基。
[0005]本發(fā)明的積極效果在于用氯硅烷將Compound K的糖苷基上最活潑的6號位羥基保護(hù)上，再與酰氯發(fā)生酯化反應(yīng)，根據(jù)動力學(xué)和基團(tuán)位阻大小對酯化位置的影響，從而優(yōu)化了單酯化反應(yīng)的選擇性，易于分離提純，提高酯化反應(yīng)產(chǎn)率。
[0006]實(shí)驗(yàn):人參皂苷Ml與癸酰氯單酯化選擇性的合成 儀器與試劑:
儀器:Agilent 1260 LC高效液相色譜儀；尼高麗550型傅里葉變換紅外光譜儀；RE52CS-1旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；SHZ-D (III)旋轉(zhuǎn)水式真空泵，鞏義市英峪予華儀器廠；ETS-D4加熱磁力攪拌器，德國IKA公司；BT 323S電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；FH-203三用紫外分析儀(UV)，上海精科實(shí)業(yè)有限公司；KQ-50B超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；柱層析硅膠(200-300目)，煙臺牟平區(qū)康比諾化學(xué)試劑廠；薄層層析硅膠(GF254)，煙臺牟平區(qū)康比諾化學(xué)試劑廠；
試劑:叔丁基二甲基氯硅烷，阿法埃莎化學(xué)有限公司；癸酰氯，阿法埃莎化學(xué)有限公司；三乙胺，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；二氯甲烷，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；無水硫酸鈉，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；石油醚，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；乙酸乙酯，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司
1.人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯硅烷的單醚化合成
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人參皂苷Ml，5倍當(dāng)量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冰水浴下加入適量的三乙胺溶解，反應(yīng)10 min后，升至室溫，薄層色譜法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，24h反應(yīng)完畢后，加入飽和氯化銨溶液停止反應(yīng)。經(jīng)CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有機(jī)相,無水Na2SO4干燥,濃縮溶劑。
[0007]柱層析純化過程:硅膠量，6g ;流動相，甲醇/ 二氯甲烷；
梯度洗脫后得到Rf值為9/34(8%Me0H/CH2Cl2)的產(chǎn)物109 mg產(chǎn)物為乳白色固體，為人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯硅烷的單醚化合成產(chǎn)物人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚。
[0008]2.人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入90 mg人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚，5%當(dāng)量的DMAP，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冰水浴下加入適量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反應(yīng)10 min后，加入等當(dāng)量的癸酰氯，薄層色譜法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，24h反應(yīng)完畢后，加入飽和氯化銨溶液停止反應(yīng)。經(jīng)CH2Cl2(3X10 mL)萃取，Brine洗有機(jī)相，無水Na2SO4干燥，濃縮溶劑。
[0009]柱層析純化過程:硅膠量，6 g ; 流動相，乙酸乙酯/石油醚；
梯度洗脫后得到Rf值為16/38 (30%EA/PE)的產(chǎn)物80 mg 產(chǎn)物為白色固體，產(chǎn)率約為80%
人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)產(chǎn)物，結(jié)構(gòu)鑒定:經(jīng)紅外光譜儀，高效液相色譜儀，核磁譜圖鑒定圖1為所得產(chǎn)物化合物結(jié)構(gòu)式。
[0010]3.脫保護(hù)基反應(yīng)
將實(shí)驗(yàn)例2的產(chǎn)物加入到50 ML的圓底燒瓶中，用無水四氫呋喃溶解，加入1.5當(dāng)量的四丁基氟化銨，反應(yīng)2h后停止。
[0011]柱分離后得到人參皂苷Ml的單酯產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式見圖2【專利附圖】

【附圖說明】
圖1人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式 圖2人參皂苷Ml的單酯產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式
【具體實(shí)施方式】
[0012]實(shí)施例1人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯硅烷的單醚化合成
在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人參皂苷Ml，5倍當(dāng)量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冰水浴下加入適量的三乙胺溶解，反應(yīng)10 min后，升至室溫，薄層色譜法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，24h反應(yīng)完畢后，加入飽和氯化銨溶液停止反應(yīng)。經(jīng)CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有機(jī)相,無水Na2SO4干燥,濃縮溶劑。
[0013]柱層析純化過程:硅膠量，6g ;流動相，甲醇/ 二氯甲烷；梯度洗脫后得到Rf值為9/34 (8%Me0H/CH2Cl2)的產(chǎn)物109 mg產(chǎn)物為乳白色固體為人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯硅烷的單醚化合成產(chǎn)物人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚。
[0014]在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入90 mg人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚，5%當(dāng)量的DMAP，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冰水浴下加入適量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反應(yīng)10 min后，加入等當(dāng)量的癸酰氯，薄層色譜法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，24h反應(yīng)完畢后，加入飽和氯化銨溶液停止反應(yīng)。經(jīng)CH2Cl2(3X10 mL)萃取，Brine洗有機(jī)相，無水Na2SO4干燥，濃縮溶劑。柱層析純化后得到人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)產(chǎn)物。
【權(quán)利要求】
1.一種提高人參皂苷Ml與癸酰氯單酯化選擇性的合成方法，反應(yīng)流程為保護(hù)-酯化_去保護(hù) 具體方法:首先，在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人參皂苷Ml，5倍當(dāng)量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冰水浴下加入適量的三乙胺溶解，反應(yīng)10 min后，升至室溫，薄層色譜法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，24h反應(yīng)完畢后，加入飽和氯化銨溶液停止反應(yīng)，經(jīng)CH2Cl2 (3 X 10 mL)萃取，Brine洗有機(jī)相，無水Na2SO4干燥，濃縮溶劑；柱層析純化過程:硅膠量，6g ;流動相，甲醇/ 二氯甲烷；梯度洗脫后得到Rf值為9/34(8%Me0H/CH2Cl2)的產(chǎn)物109 mg產(chǎn)物為乳白色固體為人參皂苷Ml與叔丁基二甲基氯硅烷的單醚化合成產(chǎn)物人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚；其次，在裝有電磁攪拌器的25mL休良克瓶中，加入90 mg人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚，5%當(dāng)量的DMAP，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冰水浴下加入適量的二氯甲烷溶解和三乙胺，反應(yīng)10 min后，加入等當(dāng)量的癸酰氯，薄層色譜法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，24h反應(yīng)完畢后，加入飽和氯化銨溶液停止反應(yīng)；最后，經(jīng)CH2Cl2(3X 10 mL)萃取，Brine洗有機(jī)相，無水Na2SO4干燥，濃縮溶劑，柱層析純化后得到人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)產(chǎn)物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，人參皂苷Ml和叔丁基二甲基氯硅烷為原料合成人參皂苷Ml的單醚化產(chǎn)物，將其產(chǎn)物與等當(dāng)量的癸酰氯在冰水浴，氮?dú)獗Ｗo(hù)，二氯甲烷為溶劑，三乙胺為敷酸劑，DMAP催化的條件下發(fā)生單酯化反應(yīng)，最后用四丁基氟化銨脫去叔丁基二甲基硅基，完成合成反應(yīng)。`
3.根據(jù)權(quán)利要求1，第二步反應(yīng)人參皂苷Ml的叔丁基二甲基硅醚與癸酰氯的單酯化反應(yīng)產(chǎn)物中選擇性生成3號位單酯的產(chǎn)率達(dá)到80%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1，人參皂苷Ml的單酯產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式見圖2。
【文檔編號】C07J17/00GK103694297SQ201310577993
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月19日
【發(fā)明者】弓曉杰, 陳麗榮, 陸俊霞 申請人:大連杰信生物科技有限公司