超聲輔助酶解提取油茶籽粕蛋白方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種超聲輔助酶解提取油茶籽粕蛋白方法,包括下列步驟:(1)酶解:將粉碎后過80~100目篩的油茶籽粕粉按料液比1:6~7與水混合均勻,調(diào)pH值至7.25~7.30,加入油茶籽粕粉質(zhì)量0.04~0.05%的復(fù)合植物水解酶,于65~70℃酶解3~3.5h,酶解結(jié)束后滅酶,然后離心獲得油茶籽粕殘?jiān)?;?)超聲輔助堿提:將步油茶籽粕殘?jiān)c適量水混合均勻,調(diào)pH值至10.0~10.5,于40~45℃堿提80~90min,堿提過程中采用超聲波輔助,超聲波的功率為300~1000W,超聲時間為20min,堿提結(jié)束后離心分離得上清液;(3)酸沉:將步驟(2)獲得的上清液調(diào)pH值至4.6,于室溫靜置1~1.5h,然后離心得沉淀,所述沉淀經(jīng)過冷凍干燥得油茶籽粕蛋白。本發(fā)明的提取工藝條件溫和,制得的油茶籽粕蛋白形態(tài)、色澤佳,可以廣泛應(yīng)用于食品添加劑。
【專利說明】超聲輔助酶解提取油茶籽粕蛋白方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種蛋白提取方法,具體的說是涉及一種超聲輔助酶解提取油茶籽柏蛋白方法。
【背景技術(shù)】
[0002]油茶(Camellia Oleifera)為常綠小喬木,屬茶科,山茶屬,是我國南方丘陵地區(qū)的一種優(yōu)良的木本油料植物,我國是產(chǎn)茶大國,僅油茶林的種植面積就達(dá)400萬hm2,是世界上油茶品種最多、分布最廣、油茶籽產(chǎn)量最高的國家,年產(chǎn)油茶籽約54.98萬噸、茶油20萬噸、油茶籽副產(chǎn)品一油茶籽柏的年平均產(chǎn)量約為39.71萬噸。油茶籽柏中蛋白質(zhì)含量約為12%-15%,其氨基酸組成為17種,其中8種為人體必需氨基酸,因此,油茶籽柏蛋白具有很高的經(jīng)濟(jì)價值,可將其作為生產(chǎn)蛋白飲料、沖調(diào)食品、焙烤食品的蛋白質(zhì)強(qiáng)化劑以及作為醬油等發(fā)酵產(chǎn)品的蛋白原料。因此,以油茶籽柏為原料提取蛋白,進(jìn)行開發(fā)和利用是非常有意義的。現(xiàn)有技術(shù)中多采用堿溶酸沉法提取油茶籽柏蛋白,但該方法提取效率低,提取獲得的油茶籽柏蛋白形態(tài)、色澤差,不利于油茶籽柏蛋白作為食品添加劑的使用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種超聲輔助酶解提取油茶籽柏蛋白方法。該方法提取效率高, 提取獲得的油茶籽柏蛋白形態(tài)、顏色佳,提取條件溫和,廢液及廢棄物少,提取成本低。
[0004]本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:
酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,所述方法包括下列步驟:
(O酶解:將粉碎后過80-100目篩的油茶籽柏粉按料液比1:6~7與水混合均勻,調(diào)pH值至7.25~7.30,加入油茶籽柏粉質(zhì)量0.04~0.05%的復(fù)合植物水解酶,于65~70°C酶解3^3.5h,酶解結(jié)束后滅酶,然后離心獲得油茶籽柏殘?jiān)?br>
(2)超聲輔助堿提:將步驟(1)獲得的油茶籽柏殘?jiān)c適量水混合均勻,調(diào)pH值至10.0-10.5,于4(T45°C堿提8(T90min,堿提過程中采用超聲波輔助,超聲波的功率為30(Tl000W,超聲時間為20min,堿提結(jié)束后離心分離得上清液;
(3)酸沉:將步驟(2)獲得的上清液調(diào)pH值至4.6,于室溫靜置f 1.5h,然后離心得沉淀,所述沉淀經(jīng)過冷凍干燥得油茶籽柏蛋白。
[0005]本發(fā)明通過復(fù)合植物水解酶先將油茶籽柏粉中的非蛋白質(zhì)如糖類分解掉,然后再通過堿提、酸沉來獲得油茶籽柏蛋白,其中堿提通過超聲波強(qiáng)化,提取效果好,堿提的提取率高,由于本發(fā)明的提取工藝條件溫和,制得的油茶籽柏蛋白形態(tài)、色澤佳,可以廣泛應(yīng)用于食品添加劑。
[0006]作為優(yōu)選,步驟(1)中油茶籽柏粉的粒徑為80目,料液比為1: 6,pH值為7.28,復(fù)合植物水解酶的添加量為0.048%,酶解溫度為68°C,酶解時間為3.25h。此工藝參數(shù)系復(fù)合植物水解酶酶解的最佳工藝條件,非蛋白類雜質(zhì)去除率高,后續(xù)堿提過程中可以節(jié)省堿的用量,堿的用量減少,對油茶籽柏蛋白的破壞減少,避免了堿性太強(qiáng)引起脫氨、脫羧、肽鍵斷裂,引起“胱賴反應(yīng)”,將氨基酸轉(zhuǎn)變?yōu)橛卸净衔?。[0007]作為優(yōu)選,步驟(2)中油茶籽柏殘?jiān)?以干基計(jì))與水的質(zhì)量比為1:25。料液比設(shè)計(jì)合理,堿提的提取效率高,產(chǎn)生的廢水少,降低了生產(chǎn)成本。
[0008]作為優(yōu)選,步驟(2)中堿提的pH值為10.0,浸提溫度為40°C,浸提時間為80min。
[0009]作為優(yōu)選,所述離心的轉(zhuǎn)速為3000~3200rpm,離心時間為10~20min。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過復(fù)合植物水解酶先將油茶籽柏粉中的非蛋白質(zhì)如糖類分解掉,然后再通過堿提、酸沉來獲得油茶籽柏蛋白,其中堿提通過超聲波強(qiáng)化,提取效果好,堿提的提取率高,由于本發(fā)明的提取工藝條件溫和,制得的油茶籽柏蛋白形態(tài)、色澤佳,可以廣泛應(yīng)用于食品添加劑。
【具體實(shí)施方式】
[0011]下面通過具體實(shí)施例,對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的具體說明。
[0012]復(fù)合植物水解酶:諾維信公司生產(chǎn),酶活100FBG/g。
[0013]水分的測定105°C恒重法,按照GB/T 5497-1985。
[0014]灰分的測定灼燒重量法,按照GB/T 8307-2002。
[0015]粗蛋白的測定按照GB/T 5009.5-2010。
[0016]粗脂肪的測定索氏提取法,GB/T 5512-2008。
[0017]粗纖維的測定按照GB/T 5515-2008。
[0018]實(shí)施例1:
酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,所述方法包括下列步驟:
(O酶解:將粉碎后過80目篩的油茶籽柏粉按料液比1:6與水混合均勻,調(diào)pH值至
7.25,加入油茶籽柏粉質(zhì)量0.04%的復(fù)合植物水解酶,于65°C酶解3.5h,酶解結(jié)束后于85°C滅酶IOmin,然后于3000rpm離心15min獲得油茶籽柏殘洛;
(2)超聲輔助堿提:將步驟(1)獲得的油茶籽柏殘?jiān)?以干基計(jì))按質(zhì)量比1:25與水混合均勻,調(diào)PH值至10.0,于40°C堿提90min,堿提過程中采用超聲波輔助,超聲波的功率為300W,超聲時間為20min,堿提結(jié)束后于3000rpm離心15min分離得上清液;
(3)酸沉:將步驟(2)獲得的上清液調(diào)pH值至4.6,于室溫靜置Ih,然后于3000rpm離心15min得沉淀,所述沉淀經(jīng)過冷凍干燥得油茶籽柏蛋白。
[0019]實(shí)施例2:
酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,所述方法包括下列步驟:
(O酶解:將粉碎后過100目篩的油茶籽柏粉按料液比1:7與水混合均勻,調(diào)pH值至7.30,加入油茶籽柏粉質(zhì)量0.05%的復(fù)合植物水解酶,于70°C酶解3h,酶解結(jié)束后于85°C滅酶15min,然后于3200rpm離心IOmin獲得油茶籽柏殘洛;
(2)超聲輔助堿提:將步驟(1)獲得的油茶籽柏殘?jiān)?以干基計(jì))按質(zhì)量比1:25與水混合均勻,調(diào)PH值至10.5,于45°C堿提80min,堿提過程中采用超聲波輔助,超聲波的功率為1000W,超聲時間為20min,堿提結(jié)束后于3200rpm離心IOmin分離得上清液;
(3)酸沉:將步驟(2)獲得的上清液調(diào)pH值至4.6,于室溫靜置1.5h,然后于3200rpm離心IOmin得沉淀,所述沉淀經(jīng)過冷凍干燥得油茶籽柏蛋白。[0020]實(shí)施例3:
酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,所述方法包括下列步驟:
(O酶解:將粉碎后過100目篩的油茶籽柏粉按料液比1:6與水混合均勻,調(diào)pH值至
7.28,加入油茶籽柏粉質(zhì)量0.048%的復(fù)合植物水解酶,于68°C酶解3.25h,酶解結(jié)束后于90°C滅酶5min,然后于3000rpm離心20min獲得油茶籽柏殘?jiān)?br>
(2)超聲輔助堿提:將步驟(1)獲得的油茶籽柏殘?jiān)?以干基計(jì))按質(zhì)量比1:25與水混合均勻,調(diào)pH值至10.0,于40°C堿提80min,堿提過程中采用超聲波輔助,超聲波的功率為800W,超聲時間為20min,堿提結(jié)束后于3000rpm離心20min分離得上清液;
(3)酸沉:將步驟(2)獲得的上清液調(diào)pH值至4.6,于室溫靜置1.5h,然后于3000rpm離心20min得沉淀,所述沉淀經(jīng)過冷凍干燥得油茶籽柏蛋白。
[0021]實(shí)施例1~3獲得的油茶籽柏蛋白的感官特性指標(biāo)見表1,油茶籽柏蛋白的質(zhì)量指標(biāo)見表2所示:
表1油茶籽柏蛋白的感官特性指標(biāo)
【權(quán)利要求】
1.酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,其特征在于:所述方法包括下列步驟: (O酶解:將粉碎后過80-100目篩的油茶籽柏粉按料液比1:6~7與水混合均勻,調(diào)pH值至7.25~7.30,加入油茶籽柏粉質(zhì)量0.θ4~θ.05%的復(fù)合植物水解酶,于65~70°C酶解3^3.5h,酶解結(jié)束后滅酶,然后離心獲得油茶籽柏殘?jiān)? (2)超聲輔助堿提:將步驟(1)獲得的油茶籽柏殘?jiān)c適量水混合均勻,調(diào)pH值至10.0-10.5,于4(T45°C堿提8(T90min,堿提過程中采用超聲波輔助,超聲波的功率為30(Tl000W,超聲時間為20min,堿提結(jié)束后離心分離得上清液; (3)酸沉:將步驟(2)獲得的上清液調(diào)pH值至4.6,于室溫靜置f 1.5h,然后離心得沉淀,所述沉淀經(jīng)過冷凍干燥得油茶籽柏蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,其特征在于:步驟(1)中油茶籽柏粉的粒徑為80目,料液比為1:6,pH值為7.28,復(fù)合植物水解酶的添加量為0.048%,酶解溫度為68°C,酶解時間為3.25h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,其特征在于:步驟(2)中油茶籽柏殘?jiān)?以干基計(jì))與水的質(zhì)量比為1:25。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,其特征在于:步驟(2)中堿提的PH值為10.0,浸提溫度為40°C,浸提時間為80min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶解超聲輔助提取油茶籽柏蛋白方法,其特征在于:所述離心的轉(zhuǎn)速為300(T3200rpm,離心時間為l(T20min。
【文檔編號】C07K1/30GK103626833SQ201310621114
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月29日
【發(fā)明者】何東平, 胡傳榮, 陳哲, 劉京偉 申請人:衢州劉家香食品有限公司