用于蛋白純化的層析柱的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種用于蛋白純化的層析柱，屬于生物純化器械領(lǐng)域。本發(fā)明提供的層析柱，柱體上設(shè)置刻度，方便操作人員對填料高度和進(jìn)樣量的掌握；柱體頂端設(shè)置U型篩網(wǎng)，便于緩沖液、樣品液、洗脫液等液體從柱體的四壁流下，避免引起飛濺。本發(fā)明結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，蛋白的純化效果好。
【專利說明】用于蛋白純化的層析柱
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明屬于生物純化器械，具體涉及一種用于蛋白純化的層析柱。
【背景技術(shù)】
[0003]目前，多種化合物的組合物、天然產(chǎn)物及中藥的分離純化，主要是采用柱色譜，使用層析柱，通過柱層析過程來實現(xiàn)。傳統(tǒng)的柱色譜是將混合化合物放置在玻璃柱柱床的頂端，使混合溶劑組成的洗脫劑(流動相)在重力作用下，通過裝有吸附性介質(zhì)材料(固定相)的垂直玻璃柱，分離得到各個較純的產(chǎn)品(純品)，其原理是:由于混合化合物中各組分對色譜柱中固定相和流動相的親和力不同，故根據(jù)混合化合物的性質(zhì)選擇合適的固定相和流動相，可以達(dá)到將其中各組分盡可能分離的目的，分離的產(chǎn)品在柱子出口分別被收集到各個收集瓶中，然后，鑒定各個收集瓶中的收集到的層析液，根據(jù)鑒定結(jié)果合并和濃縮各相同層析液，得到各個純品。
[0004]常見層析柱根據(jù)壓力不同可分為常壓柱、中壓柱和高壓柱。常壓柱在實際中用得最多，常常是自己根據(jù)需要采用不同材料的層析柱、裝填不同的填料來實現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)的分離純化。玻璃層析柱又尤其常用，常包括柱體、活塞，有的還包括位于柱體上端的用于固定加液球的倒鉤等。目前常見的玻璃層析柱存在如下不足:一方面，在玻璃層析柱的填料裝填和被分離物質(zhì)樣品裝填中，常常根據(jù)不同填料和不同物質(zhì)采用不同的填料，樣品比例，以利于在達(dá)到最佳分離效果的同時節(jié)約填料，而填料.樣品的比例通常參照其體積比，但是目前常用玻璃柱沒有刻度，常常需要操作人員憑經(jīng)驗?zāi)繙y或用其他度量工具進(jìn)行測量，非常麻煩；另一方面，在層析過程中，常常需要掌握樣品在分離介質(zhì)即填料中的遷移速度，然后根據(jù)遷移速度進(jìn)行流出液的速度調(diào)節(jié)，以利于在達(dá)到最佳分離效果的同時節(jié)約層析時間，但是目前的層析柱沒有刻度，常常是在不同時間點對某個層析色帶的位置用記號筆標(biāo)記，這樣的做法不夠準(zhǔn)確，同時標(biāo)`記筆所標(biāo)記的記號可能會因為添加洗脫劑時的泄漏而被沖刷掉，需要再次標(biāo)記，很不方便。
[0005]此外，目前的層析柱在進(jìn)樣時，樣品溶液從層析柱頂端的中部直接流進(jìn)柱體，容易造成柱體內(nèi)填料飛濺至層析柱的內(nèi)壁上。由于層析用的填料常常是比較昂貴的，飛濺至內(nèi)壁上的填料沒有在層析中得到充分的利用，影響層析效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決上述問題，本發(fā)明提供一種用于蛋白純化的層析柱，采用如下技術(shù)方案: 一種用于蛋白純化的層析柱，包括柱頭和柱體，所述柱頭與柱體為螺紋連接，其特征在
于，所述柱頭的頂部設(shè)有供硅膠軟管通過的通孔；所述柱體采用透明的玻璃材質(zhì)，所述柱體上沿柱體軸向設(shè)置有均勻的刻度；所述柱體的頂部設(shè)置可拆卸的U型篩網(wǎng)，所述U型篩網(wǎng)為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網(wǎng)的側(cè)壁含有通孔；所述U型篩網(wǎng)的上部放置中速定性濾紙濾膜，所述濾膜的表面積大于或者等于U型篩網(wǎng)的表面積；所述柱體的底部為錐形出口 ；所述錐形出口的上部設(shè)置篩板，所述的篩板的孔徑為0.2^0.4 μ m。
[0007]優(yōu)選地，所述柱頭和柱體的連接處設(shè)有密封圈，所述的密封圈為硅膠材質(zhì)。
[0008]本發(fā)明具有如下有益效果:
1.本發(fā)明提供的層析柱，其柱體采用透明的玻璃材質(zhì)，并且在柱體上設(shè)置均勻的刻度，如此設(shè)置，有利于在層析柱的填料裝填和樣品上樣時方便準(zhǔn)確地把握填料樣品比例，通過觀察某個色帶在不同時間點所在的刻度位置，從而方便掌握被分離物質(zhì)在層析柱中的遷移速率，使整個層析過程更方便，提高分離效率和整個工作效率。
[0009]2.本發(fā)明提供的層析柱，在柱體的頂部設(shè)置可拆卸的U型篩網(wǎng)，所述U型篩網(wǎng)為為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，并且U型篩網(wǎng)的側(cè)壁含有通孔，如此設(shè)置，有利于緩沖液、樣品液、洗脫液從柱體頂部進(jìn)入時，是沿著柱體的四壁流下的，不會造成柱體內(nèi)液體的飛濺，引起填料飛濺在柱體的四壁上，影響填料高度，從而影響蛋白的純化效果。
[0010]3.本發(fā)明提供的層析柱，在錐形出口的上部設(shè)置篩板，并限定篩板的孔徑為
0.2、.4μπι，如此這樣便可以達(dá)到蛋白純化時的填料不會隨著緩沖液、樣品液、洗脫液一起，從錐形出口流失，但又不會影響緩沖液、樣品液和洗脫液從錐形出口的流出效果。
[0011]4.本發(fā)明提供的層析柱，U型篩網(wǎng)的上部放置中速定性濾紙濾膜，可以對待分離的樣品液進(jìn)行初步分離，攔截粒徑比較大的未處理完全的菌體等雜質(zhì)。
[0012]5.本發(fā)明提供的層析柱，在柱頭和柱體的連接處設(shè)有密封圈，便于柱頭和柱體的密閉，避免緩沖液、樣品液、洗脫液從兩者的縫隙處流出，造成浪費。
[0013]6 .本發(fā)明提供的層析柱，結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，蛋白的純化效果好。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖；其中，I表示柱頭；2表示硅膠軟管；3表示錐形出口 ；4表刻度；5表篩板；6表不U型篩網(wǎng)；7表柱體。
【具體實施方式】
[0015]下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。除下述實施方式外，本發(fā)明還可以有其他實施方式，凡采用等同替換或等效變換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明要求的保護(hù)范圍內(nèi)。
[0016]如圖1所示，一種用于蛋白純化的層析柱，包括柱頭I和柱體7，所述柱頭I與柱體7為螺紋連接，其特征在于，所述柱頭I的頂部設(shè)有供硅膠軟管2通過的通孔；所述柱體7采用透明的玻璃材質(zhì)，所述柱體7上沿柱體軸向設(shè)置有均勻的刻度4 ;所述柱體7的頂部設(shè)置可拆卸的U型篩網(wǎng)6，所述U型篩網(wǎng)6為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網(wǎng)6的側(cè)壁含有通孔；所述U型篩網(wǎng)6的上部放置中速定性濾紙濾膜(在圖中并沒有標(biāo)示出來，其設(shè)置在篩網(wǎng)的上部，但是不超過柱體頂部的水平位置)，所述濾膜的表面積大于或者等于U型篩網(wǎng)6的表面積；所述柱體7的底部為錐形出口 3 ;所述錐形出口 3的上部設(shè)置篩板5，所述的篩板5的孔徑為0.2^0.4 μ m。
[0017]作為優(yōu)選，在柱頭I和柱體7的連接處設(shè)有密封圈(在圖中并沒有標(biāo)注出來)，用于密封作用，所述的密封圈為硅膠材質(zhì)，密封效果更佳。
【權(quán)利要求】
1.一種用于蛋白純化的層析柱，包括柱頭(I)和柱體(7)，所述柱頭(I)與柱體(7)為螺紋連接，其特征在于，所述柱頭(I)的頂部設(shè)有供硅膠軟管(2)通過的通孔；所述柱體(7)采用透明的玻璃材質(zhì)，所述柱體(7)上沿柱體軸向設(shè)置有均勻的刻度(4);所述柱體(7)的頂部設(shè)置可拆卸的U型篩網(wǎng)(6)，所述U型篩網(wǎng)(6)為上端開口、下端封閉的喇叭形狀，所述U型篩網(wǎng)(6)的側(cè)壁含有通孔；所述U型篩網(wǎng)(6)的上部放置中速定性濾紙濾膜，所述濾膜的表面積大于或者等于U型篩網(wǎng)(6)的表面積；所述柱體(7)的底部為錐形出口(3);所述錐形出口(3)的上部設(shè)置篩板(5)，所述的篩板(5)的孔徑為0.2^0.4 μ m0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于蛋白純化的層析柱，其特征在于，所述柱頭(I)和柱體(7)的連接處設(shè)有密封`圈，所述的密封圈為硅膠材質(zhì)。
【文檔編號】C07K1/16GK103691153SQ201310644005
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月5日
【發(fā)明者】朱輝, 鄧濤 申請人:成都雅途生物技術(shù)有限公司