抗-mif抗體和糖皮質(zhì)激素的聯(lián)合治療的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗-MIF抗體，特別是它們聯(lián)合糖皮質(zhì)激素用于對(duì)糖皮質(zhì)激素接受性疾病的治療。
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【專利說明】抗-MIF抗體和糖皮質(zhì)激素的聯(lián)合治療
[0001] 本發(fā)明涉及一種抗-MIF抗體，特別是它們聯(lián)合糖皮質(zhì)激素用于MIF相關(guān)疾病的治 療。

【背景技術(shù)】
[0002] 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（MIF)是一種細(xì)胞因子，起初是基于它能夠抑制腹膜滲出 液細(xì)胞從對(duì)結(jié)核菌素高度敏感的豚鼠（包含巨噬細(xì)胞）中體外隨機(jī)迀移的能力而被分離的 (Bloom et al. Science 1966, 153, 80-2 ;David et al. PNAS 1966, 56, 72-7)。今天，已經(jīng)知 道MIF作為先天性和獲得性免疫反應(yīng)的一個(gè)關(guān)鍵的上游調(diào)控子，上述免疫反應(yīng)具有廣譜活 性。
[0003] 人類 MIF cDNA 在 1989 年得到克?。╓eiser et al.，PNAS 1989, 86, 7522-6)，其 基因定位于22號(hào)染色體。人類MIF基因產(chǎn)品為具有114個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)（N端蛋氨酸裂 解后），其表觀分子量大約為12. 5kDa。MIF沒有與其他蛋白存在顯著的序列同源性。該蛋 白結(jié)晶成同一亞單位的三聚體。每個(gè)單體包含兩個(gè)反向平行的α螺旋，所述α螺旋包裹 (pack against)四鏈β片。該單體還有其他兩個(gè)β鏈，該β鏈和相鄰亞單位的β片相 互作用以在單體之間形成界面。三個(gè)亞單位排布成一個(gè)包含親溶劑通道的管道，該管道可 以沿著分子三重軸向穿過蛋白質(zhì)中心（Sun et al. PNAS 1996,93,5191-5196)。
[0004] 據(jù)報(bào)道，低濃度糖皮質(zhì)激素可以誘導(dǎo)巨細(xì)胞分泌MIF (Calandra et al. Nature 1995, 377, 68-71)。然而，MIF也會(huì)反方向調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素的作用，并刺激其他細(xì)胞因 子的分泌，例如腫瘤壞死因子TNF-α和白介素 IL-1 β (Baugh et al·，Crit Care Med 2002, 30, S27-35) JIF同樣表現(xiàn)出例如展示促血管生成、促增殖和抗凋亡的性質(zhì)，因此能促 進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)（Mitchell, R. A.，Cellular Signalling, 2004. 16 (1) :ρ· 13-19 ;Lue，H. et al.，Oncogene 2007. 26 (35) :ρ· 5046-59)。此外，例如它和淋巴瘤、黑素瘤和結(jié)腸癌的生 長(zhǎng)也有直接聯(lián)系（Nishihira et al. J Interferon Cytokine Res. 2000, 20:751-62) 〇
[0005] MIF是多種病理情況的中介物，因此，與多種疾病都有關(guān)聯(lián)，其包括但不限于炎癥 性腸?。↖BD)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)、急性呼吸窘迫綜合征（ARDS)、哮喘、血管球性腎炎、IgA 腎病、心肌梗死（MI)、敗血癥和癌癥。
[0006] 多克隆和單克隆抗-MIF抗體已經(jīng)用于抵抗重組人類MIF (Shimizu et al.，F(xiàn)EBS Lett. 1996 ;381，199-202 ;Kawaguchi et al, Leukoc. Biol. 1986, 39, 223-232，和Weiser et al.，Cell. Immunol. 1985, 90, 16778)。已經(jīng)表明抗-MIF 抗體具有治療用途。Calandra et al.，（J. Inflamm. (1995) ;47, 39-51)報(bào)道了使用抗-MIF抗體保護(hù)動(dòng)物免于實(shí)驗(yàn)上誘發(fā)的 革蘭氏陰性和革蘭氏陽性感染性休克。這表明抗-MIF抗體可作為一種治療手段來調(diào)控感 染性休克和其他炎癥疾病狀態(tài)中的細(xì)胞因子產(chǎn)生。
[0007] US 6, 645, 493公開了一種源自雜交瘤細(xì)胞的單克隆抗-MIF抗體，其能夠中和MIF 的生物學(xué)活性。在動(dòng)物模型中表明這些源自鼠的抗-MIF抗體在治療內(nèi)毒素誘發(fā)的休克中 具有有益效果。
[0008] US 2003 10235584公開了一種在動(dòng)物中制備對(duì)MIF具有高親和性的抗體，所述動(dòng) 物中的MIF基因已經(jīng)被純合（homozygously)敲除。
[0009] 糖基化抑制因子（GIF)是一種蛋白質(zhì)，具體描述見Galat et al. (Eur. J. Biochem, 1994, 224, 417-21)。MIF 和 GIF 被認(rèn)為是相同的。Watarai et al. (PNAS 2000, 97, 13251-6)描述了一種能夠結(jié)合到不同的GIF表位的多克隆抗體以識(shí)別Ts細(xì)胞中 的GIF翻譯后修飾的生物化學(xué)特性。Watarai et al, supra報(bào)道稱GIF在體外出現(xiàn)在不同 的構(gòu)象異構(gòu)體中。該異構(gòu)體的一個(gè)類型通過化學(xué)修飾單個(gè)半胱氨酸殘基而產(chǎn)生。該化學(xué)修 飾導(dǎo)致GIF蛋白內(nèi)部的構(gòu)象改變。
[0010] 糖皮質(zhì)激素，有時(shí)也被稱為糖皮質(zhì)類固醇，是一類可以與糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合的 甾類激素，其存在于幾乎所有的脊椎動(dòng)物。糖皮質(zhì)激素是免疫系統(tǒng)反饋機(jī)制的一部分，其能 夠減小免疫活動(dòng)，即炎癥。在醫(yī)學(xué)方面，它們用于治療因免疫過度引起的疾病，其代表性疾 病的例子是過敏、哮喘、自身免疫病和敗血癥。它們也干擾癌細(xì)胞中的一些異常機(jī)制，所以 也可以用于治療癌癥。在與糖皮質(zhì)激素激素受體結(jié)合之后，活化的糖皮質(zhì)激素受體復(fù)合物 可以通過被稱為反式激活的過程上調(diào)細(xì)胞核內(nèi)抗炎蛋白的表達(dá)，并通過減弱基因誘導(dǎo)作用 (通過即-1〇8、4?1、加11-加11同源二聚體等）抑制細(xì)胞溶質(zhì)中促炎蛋白的表達(dá)。理論上，糖 皮質(zhì)激素被定義為皮質(zhì)類固醇的亞組。此外，已經(jīng)知道一類具有糖皮質(zhì)激素活性（SEGRA、 選擇性糖皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑）的新型化合物。這些化合物只展現(xiàn)了整個(gè)興奮糖皮質(zhì)激素 的部分作用，即它們不能引起廣譜的反式激活、反式抑制和對(duì)基因誘導(dǎo)的間接作用（通過 NF-κ B、API、jun-jun同源二聚體等）。通過對(duì)選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERM' s =它莫 西芬、雷洛昔芬、托瑞米芬）用類推的方法，這些化合物也被稱為選擇性糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)劑 (SERM，s)。SEGRA' s/SEGRM' s 的例子包括 Mapracorate ( = B0L303242X = ZK245186)、化 合物 A、RU24856、RU24782、RU40066、ZK216348。
[0011] 天然糖皮質(zhì)激素的一個(gè)重要例子是皮質(zhì)醇（或氫化可的松），其為人體所必須并 且調(diào)控或支持不同的重要的心血管、新陳代謝、免疫學(xué)和穩(wěn)態(tài)功能。也有若干種合成的糖皮 質(zhì)激素是可以利用的。
[0012] 糖皮質(zhì)激素在三個(gè)主要領(lǐng)域起作用，即免疫學(xué)領(lǐng)域、代謝領(lǐng)域和胎兒發(fā)育領(lǐng)域。在 免疫領(lǐng)域，它們上調(diào)抗炎蛋白的表達(dá)并下調(diào)促炎蛋白的表達(dá)。
[0013] 代謝效應(yīng)總結(jié)如下所示：
[0014] ?刺激糖質(zhì)新生，特別是肝臟中的糖質(zhì)新生。該通路導(dǎo)致經(jīng)由非己糖底物例如氨基 酸合成葡萄糖，以及經(jīng)由甘油三酸酯裂解合成甘油，該通路在食肉動(dòng)物和某些食草動(dòng)物中 特別重要。增強(qiáng)涉及糖質(zhì)新生的酶的表達(dá)可能是糖皮質(zhì)激素最有名的代謝功能。
[0015] ?氨基酸從肝外組織的調(diào)動(dòng)：這些氨基酸作為糖質(zhì)新生的底物。
[0016] ?抑制肌肉和脂肪組織對(duì)葡萄糖的吸收：脂肪酸通過脂解作用釋放并被用于在例 如肌肉等的組織中生產(chǎn)能量，并且釋放的甘油為糖質(zhì)新生提供另一種底物。
[0017] 在胎兒發(fā)育中，糖皮質(zhì)激素促進(jìn)肺的成熟和表面活性劑的生成，所述表面活性劑 對(duì)于子宮外肺功能是必須的。進(jìn)一步地，它們對(duì)于正常腦發(fā)育是關(guān)鍵物質(zhì)。
[0018] 已經(jīng)研制多種合成的糖皮質(zhì)激素用于治療，有些比皮質(zhì)醇更有效。它們的藥代動(dòng) 力學(xué)（吸收、半衰期、分布容量和清除）和藥效不同。
[0019] 糖皮質(zhì)激素效力、療效時(shí)間和覆蓋（overlapping)鹽皮質(zhì)激素效力不同。皮質(zhì)醇 (氫化可的松）是糖皮質(zhì)激素效力的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照。氫化可的松是皮質(zhì)醇作為藥物制劑的名稱。 由于相當(dāng)一部分含量（一些案例中高至50% )可能不能由腸吸收，口服效力可能比腸胃外 (不經(jīng)腸道的）效力低。
[0020] 例子為：
[0021] 氫化可的松、醋酸可的松、可的松/考的索、氟可龍（Fluorocortolon)、潑尼松、氫 化潑尼松、甲基氫化潑尼松、氟羥氫化潑尼松、地塞米松、倍他米松、帕拉米松。
[0022] 此外，還有一些化合物：它們僅模仿糖皮質(zhì)激素的一些作用而不是全部作用；這 些化合物被稱為SEGRAs (選擇性糖皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑）。SEGRA' s/SEGRM' s的例子 包括 Mapracorate ( = B0L303242X = ZK245186)、化合物 A、RU24856、RU24782、RU40066、 ZK216348。
[0023] 主要用于局部施用（例如，噴霧-肺部、栓劑-結(jié)腸、乳霜-皮膚）的類固醇：氫化 可的松、倍氯米松、布地奈德、氟替卡松、氟尼縮松、莫美他松、環(huán)索奈德、氯倍他索。
[0024] 令人驚異是，在嚙齒動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)糖皮質(zhì)激素可以誘導(dǎo)而非抑制巨噬細(xì)胞 和 T 細(xì)胞 MIF 的產(chǎn)生（Calandra T，Bernhagen J，Metz CN et al·，（1995)MIF as a glucocorticoid-induced modulator of cytokine production. Nature 377:68-71; 和 Bacher Mj Metz CN，Calandra T，et al·，（1996)An essential regulatory role for macrophage migration inhibitory factor in T-cell activation.PNAS 93:7849-7854)。
[0025] 因?yàn)橐阎狹IF具有促炎作用，這些結(jié)果起初看來是相互矛盾并難以調(diào)解的。然而 隨后發(fā)現(xiàn)MIF甚至撤銷了糖皮質(zhì)激素的抗炎免疫抑制作用。
[0026] 雖然已經(jīng)表明糖皮質(zhì)激素對(duì)于治療一些不同疾病和紊亂（如下所示）是有用的而 且成功的，但是取決于用藥類型，施用時(shí)可能導(dǎo)致一系列的副作用。大多數(shù)副作用包括如下 所示：
[0027] ?免疫抑制
[0028] ?糖質(zhì)新生的提尚導(dǎo)致的尚血糖癥；膜島素耐受性；和受損的匍萄糖耐受性（"類 固醇糖尿病"）
[0029] ?皮膚脆性增加；易挫傷
[0030] ?因腸鈣吸收降低導(dǎo)致的鈣負(fù)平衡
[0031] ?類固醇誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥；降低骨密度（骨質(zhì)疏松癥、骨壞死、高骨裂風(fēng)險(xiǎn)、骨裂 愈合放緩）
[0032] ?內(nèi)臟和軀干脂肪沉積引起的體重增加（內(nèi)向性肥胖）和食欲刺激
[0033] ?腎上腺功能不全（使用較長(zhǎng)時(shí)間后突然停止，而不是逐漸減少用量）
[0034] ?肌肉分解（蛋白質(zhì)水解）、虛弱；肌肉質(zhì)量和修復(fù)功能下降
[0035] ?顴骨脂肪墊擴(kuò)張和皮膚中的小血管擴(kuò)張
[0036] ?停止排卵、月經(jīng)周期不規(guī)律
[0037] ?生長(zhǎng)障礙、青春期延遲
[0038] ?血漿氨基酸升高、尿素形成增加；氮負(fù)平衡
[0039] ?中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮作用（欣快、精神錯(cuò)亂）
[0040] ?顱壓升高引起的青光眼
[0041] ?白內(nèi)障
[0042] 因長(zhǎng)久使用、過度使用合成的或內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素引起的臨床問題的組合被稱之 為庫(kù)興氏綜合征（Cushing's syndrome)。
[0043] 除了上面列出的作用，由于外源性糖皮質(zhì)激素抑制下丘腦的促腎上腺皮質(zhì)激素釋 放激素（CRH)和垂體的促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH)，高劑量的類固醇用藥超過一周后開始抑 制病人腎上腺功能。隨著抑制的延長(zhǎng)，在停止外源性糖皮質(zhì)激素給藥后，腎上腺萎縮（生理 收縮）需要數(shù)月才能完全恢復(fù)功能。
[0044] 在恢復(fù)期間，該病人在受到壓力時(shí)例如生病時(shí)，容易出現(xiàn)腎上腺功能不全。
[0045] 最后（但并非最不重要），隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，接受糖皮質(zhì)激素的病人也會(huì)形成糖皮 質(zhì)激素耐受。在這些病人中，即使使用高劑量的糖皮質(zhì)激素也不足以引發(fā)足夠的抗炎反應(yīng) (Barnes PJ, Adcock IM. Glucocorticoid resistance in inflammatory diseases. Lancet 2009May 30 ；373 (9678):1905-1917)〇
[0046] 如果所述糖皮質(zhì)激素藥物的給藥劑量增加，上述副作用還會(huì)更加嚴(yán)重。降低給藥 劑量通常也會(huì)降低或減輕副作用。因此，本領(lǐng)域迫切需要提供一種對(duì)MIF相關(guān)疾病和紊亂 的治療，該治療可以減少給定糖皮質(zhì)激素的給藥劑量。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0047] 通過本發(fā)明已經(jīng)解決了該目標(biāo)。
[0048] 特別地，結(jié)果顯示抗-MIF抗體和給定糖皮質(zhì)激素聯(lián)合治療，可以檢測(cè)到協(xié)同效 應(yīng)，其使得可以采用較低劑量的糖皮質(zhì)激素治療MIF相關(guān)疾病，和/或與單獨(dú)使用糖皮質(zhì)激 素治療該疾病相比，相似劑量可以取得更強(qiáng)的效應(yīng)。
[0049] 特別地，如上所述以及本發(fā)明實(shí)施例所列舉的，抗-oxMIF抗體和給定糖皮質(zhì)激素 的聯(lián)合治療與協(xié)同效應(yīng)是相關(guān)的。很多疾病尤其是在炎性疾病或癌癥開始之后，就可以檢 測(cè)到評(píng)估的（evaluated) MIF水平，即MIF -般水平。然而，健康個(gè)體也存在MIF循環(huán)，這使 得難以清楚地區(qū)分。相反地，oxMIF不存在于健康個(gè)體中。oxMIF在疾病狀態(tài)下增加，并在 病人樣品例如血液、血清和尿液中可以檢測(cè)的到。
[0050] 在深入研宄MIF和其抗體后發(fā)現(xiàn)，抗體RAB9、RAB4和RABO能夠和oxMIF特異性結(jié) 合（而不能和redMIF結(jié)合）?？贵wRAM9、RAM4和RAMO也可以觀察到這種結(jié)合。
[0051] 在發(fā)明人的早期試驗(yàn)中，可以看到氧化過程例如胱氨酸介導(dǎo)的氧化、GSSG(〇X.谷 胱甘肽）介導(dǎo)的氧化或MIF與Proclin300或蛋白質(zhì)交聯(lián)劑（例如BMOE)溫育后可以使得 MIF與上述抗體結(jié)合。
[0052] 本發(fā)明人取得了下述令人驚異的結(jié)論：
[0053] ?重組MIF(人類、小鼠、大鼠、CHO和猴子）的氧化還原調(diào)制（胱氨酸/GSSG介導(dǎo) 的輕度氧化）或用Proclin300或蛋白質(zhì)交聯(lián)劑處理重組MIF可以導(dǎo)致重組MIF與Baxter 抗-MIF抗體RAB9、RAB4和RABO結(jié)合。
[0054] · oxMIF的還原導(dǎo)致抗體（Ab)結(jié)合的喪失。
[0055] · oxMIF亞型在體內(nèi)與生物學(xué)Ab的效力相關(guān)的特異性。
[0056] · oxMIF水平和疾病狀態(tài)相關(guān)。
[0057] 關(guān)于（Ox)MIF的其他知識(shí)可以用作本申請(qǐng)發(fā)明人進(jìn)一步研宄的基礎(chǔ)。
[0058] 本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施例為：
[0059] 1.抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素用于糖皮質(zhì)激素接受性疾病的治療。
[0060] 2.如項(xiàng)目1所述的抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，其中所述糖皮質(zhì)激素接受性疾病 對(duì)采用糖皮質(zhì)激素的治療有反應(yīng)。
[0061] 3.如項(xiàng)目1或2所述的抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，用于炎癥、過敏、癌癥或哮喘 的治療。
[0062] 4.如項(xiàng)目1、2或3所述的抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，其中所述抗體是抗-oxMIF 抗體。
[0063] 5.如項(xiàng)目1至4任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗-MIF 抗體 RAB9、RAB4、RABO、RAM9、RAM4 和 / 或 RAMOo
[0064] 6.如項(xiàng)目1至5任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述糖皮質(zhì)激素選自由糖皮質(zhì)激素受 體激動(dòng)劑構(gòu)成的組，例如甲基氫化潑尼松、氫化潑尼松、氟羥氫化潑尼松、地塞米松、帕拉米 松、氟可龍（Fluorocortolone)、布地奈德、氟替卡松、氟尼縮松、環(huán)索奈德、莫美他松、氯倍 他松、可的松和氫化可的松，和抗炎SEGRA' s/SEGRM's (例如，Mapracorate ( = B0L303242X =ZK245186)、化合物 A、RU24856、RU24782、RU40066、ZK 216348)。
[0065] 7.如項(xiàng)目1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、RAB4 或RABO或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選抗體RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下組：全 身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相關(guān)疾病是 炎癥，尤其是腎炎、更優(yōu)選狼瘡腎炎、腎小球性腎炎、IgA或IgM腎病、系統(tǒng)性血管炎（例如 結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、韋格納肉芽腫、Henoch-Sch6nlein紫癜）、抗-GBM腎炎和/或急進(jìn)性腎小 球腎炎（類型I、II、III或IV)，例如ANCA(抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體）腎炎）。
[0066] 8.如項(xiàng)目1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、RAB4 或RABO，或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選抗體RAM9，所述糖皮質(zhì)激素選自下組：全 身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，并且所述MIF相關(guān)疾 病是狼瘡腎炎。
[0067] 9.如項(xiàng)目1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、RAB4 或RABO、或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選RAM9，所述糖皮質(zhì)激素選自下組：全身給 藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，并且所述MIF相關(guān)疾病是 全身性紅斑狼瘡。
[0068] 10.如項(xiàng)目1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、 RAB4或RAB0、或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下組： 全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，并且所述MIF相關(guān) 疾病是皮膚炎癥。
[0069] 11.如項(xiàng)目1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、 RAB4或RAB0、或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下組： 全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，并且所述MIF相關(guān) 疾病是T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。
[0070] 12.如項(xiàng)目10或11所述的聯(lián)合治療，其中，所述T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)是皮膚炎 癥，例如銀肩病或接觸性超敏反應(yīng)。
[0071] 13.如項(xiàng)目10至12任一項(xiàng)所述的聯(lián)合治療，其中，所述糖皮質(zhì)激素是布地奈德，并 且布地奈德配制為局部施用。
[0072] 14.如項(xiàng)目1至5任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、 RAB4或RABO、或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選RAM9，所述糖皮質(zhì)激素是布地奈德， 所述MIF相關(guān)疾病是炎癥性腸病（IBD)，其中所述IBD選自潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。
[0073] 15.如項(xiàng)目1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、 RAB4或RAB0、或RAM9、RAM4或RAMO中的任意一種，優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下組： 全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，并且所述MIF相關(guān) 疾病是多發(fā)性硬化。
[0074] 16. -種試劑盒，其包含如上述項(xiàng)目1至15任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合以及使用說明。
[0075] 17.如上述項(xiàng)目1至15任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，或如項(xiàng)目16所述的試劑盒用于糖皮 質(zhì)激素接受性疾病的治療，特別是用于炎癥、過敏、哮喘或癌癥的治療。
[0076] 上述抗體通過它們的序列以及保存在大腸桿菌（E. coli) (TG1菌株）中的質(zhì)粒中 進(jìn)行表征和支持，所述質(zhì)粒分別包含上述抗體RABO、RAB4和RAB9,以及RAMO、RAM4和RAM9 的各自輕鏈或重鏈中的一種。
[0077] 上述質(zhì)粒用它們的DSM編號(hào)表征，DSM是根據(jù)布達(dá)佩斯條約在德國(guó)的微生物保藏 和細(xì)胞培養(yǎng)（DSMZ)(位于德國(guó)，布倫瑞克，Mascheroder Weg Ib)保存時(shí)得到的官方號(hào)碼。 這些質(zhì)粒分別保存在大腸桿菌（E. coli)菌株中。
[0078] 編號(hào)為DSM25110的質(zhì)粒包含抗-MIF抗體RAB4的輕鏈序列。
[0079] 編號(hào)為DSM25112的質(zhì)粒包含抗-MIF抗體RAB4的重鏈（IgG4)序列。
[0080] 質(zhì)粒DSM25110和DSM25112在適宜宿主細(xì)胞中的共同表達(dá)可引起優(yōu)選的抗-MIF 抗體RAB4的生成。
[0081] 編號(hào)為DSM25111的質(zhì)粒包含抗-MIF抗體RAB9的輕鏈序列。
[0082] 編號(hào)為DSM25113的質(zhì)粒包含抗-MIF抗體RAB9的重鏈（IgG4)序列。
[0083] 質(zhì)粒DSM25111和DSM25113在適宜宿主細(xì)胞中的共同表達(dá)可引起優(yōu)選的抗-MIF 抗體RAB9的生成。
[0084] 編號(hào)為DSM25114的質(zhì)粒包含抗-MIF抗體RABO的輕鏈序列。
[0085] 編號(hào)為DSM25115的質(zhì)粒包含抗-MIF抗體RABO的重鏈（IgG4)序列。
[0086] 質(zhì)粒DSM25114和DSM25115在適宜宿主細(xì)胞中的共同表達(dá)可引起優(yōu)選的抗-MIF 抗體RABO的生成。
[0087] 同樣地，分別包含RAM0、RAM9和RAM4的輕鏈和重鏈序列的其他質(zhì)粒已經(jīng)根據(jù)布達(dá) 佩斯條約于2012年4月12日保存在DSMZ (德國(guó)，布倫瑞克）。使用以下命名：
[0088] RAM9 -重鏈：E. coli GA. 662-01. pRAM9hc - DSM 25860。
[0089] RAM4 -輕鏈：Ε· coli GA. 906-04. pRAM41c - DSM 25861。
[0090] RAM9 -輕鏈：E. coli GA. 661-01. pRAM91c - DSM 25859。
[0091] RAM4 -重鏈：E. coli GA. 657-02. pRAM4hc - DSM 25862。
[0092] RAMO -輕鏈：E. coli GA. 906-01. pRAMOlc - DSM 25863。
[0093] RAMO -重鏈：Ε· coli GA. 784-01. pRAMOhc - DSM 25864。
[0094] 術(shù)語"預(yù)防性"或"治療性"治療在本領(lǐng)域是熟知的，其是指對(duì)病人進(jìn)行給藥。如 果是在有不希望的狀態(tài)的臨床表現(xiàn)（例如，個(gè)體的疾病或其他不希望的狀態(tài)）之前給藥，那 么該治療就是預(yù)防性的，即它保護(hù)個(gè)體免于形成不希望的狀態(tài)，而如果是在不希望的狀態(tài) 表現(xiàn)之后給藥，那么該治療就是治療性的（即其是為了從中減小、減輕或維持現(xiàn)存的不希 望的狀態(tài)或其副作用）。
[0095] 此處，抗-(Ox)MIF化合物是指能夠減弱、抑制、對(duì)抗、抵消或降低（Ox)MIF生物學(xué) 活性的任意試劑?？?-(〇x)MIF的化合物可為能夠抑制或中和（ox)MIF活性的試劑，例如抗 體、特別優(yōu)選此處所述的抗體，更優(yōu)選抗體RAB9、RAB4和/或RABO或RAM9、RAM4或RAM0。
[0096] 根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的MIF拮抗劑是抗-MIF抗體。更優(yōu)選的抗-MIF抗體是針對(duì) oxMIF的抗體。在其他實(shí)施例中，所述抗-oxMIF抗體，例如上述抗體或結(jié)合oxMIF的抗原結(jié) 合部分，其Kd小于ΙΟΟηΜ，優(yōu)選K D小于50nM，更優(yōu)選K D小于ΙΟηΜ。
[0097] 本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種試劑盒，其包含抗-MIF抗體或其抗原結(jié)合部分以及本發(fā) 明所述的糖皮質(zhì)激素。除了抗體和糖皮質(zhì)激素，試劑盒還進(jìn)一步包含治療劑及其用途。試 劑盒也可包含在治療方法中的使用說明。
[0098] 早期結(jié)果表明，在動(dòng)物模型中，抗-MIF抗體只能結(jié)合oxMIF而不能結(jié)合redMIF，并 能夠抑制GCO和/或細(xì)胞增殖，從而帶來有益效果。
[0099] 發(fā)明詳述
[0100] 本
【發(fā)明內(nèi)容】
通過所附附圖進(jìn)行進(jìn)一步描述。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0101] 圖1 :實(shí)施例Ia中進(jìn)行的地塞米松的劑量探索治療示意圖。
[0102] 圖2 :幾個(gè)不同劑量的地塞米松給藥后第8天的蛋白尿。
[0103] 圖3 :幾個(gè)不同劑量的地塞米松給藥后的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。測(cè)定每個(gè)腎小球橫截面 的巨噬細(xì)胞（EDI陽性細(xì)胞）的數(shù)量。顯示每只動(dòng)物的結(jié)果以及每組動(dòng)物的平均值。
[0104] 圖4 :幾個(gè)不同劑量的地塞米松給藥后的腎小球新月體。顯示測(cè)得的每只動(dòng)物中 腎小球新月體的百分比和每組動(dòng)物中腎小球新月體比例的平均值。
[0105] 圖5 :根據(jù)實(shí)施例Ib所述的甘氨酸配方中的抗-MIF抗體RAM9的劑量探索示意圖。
[0106] 圖6 :兩種劑量的抗體RAM9給藥后第8天的蛋白尿。
[0107] 圖7 :兩種劑量的抗體RAM9給藥后的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。測(cè)定每個(gè)腎小球橫截面的巨 噬細(xì)胞（EDI陽性細(xì)胞）的數(shù)量。顯示每只動(dòng)物的結(jié)果以及每組動(dòng)物的平均值。
[0108] 圖8 :兩種劑量的抗體RAM9給藥后的腎小球新月體的形成。顯示測(cè)得的每只動(dòng)物 中腎小球新月體的百分比和每組動(dòng)物中腎小球新月體比例的平均值。
[0109] 圖9 :根據(jù)實(shí)施例Ic所述的地塞米松聯(lián)合抗體RAM9的治療日程示意圖。
[0110] 圖10 :抗體RAM9 (劑量范圍：0-120mg/kg)聯(lián)合地塞米松（0· 025mg/kg)治療后蛋 白尿的降低。提供了兩組獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值。箭頭表示使用不同劑量的地塞米松而不使用 抗體時(shí)蛋白尿降低的百分比。
[0111] 圖11 :抗體RAM9 (劑量范圍：0-120mg/kg)聯(lián)合地塞米松（0· 025mg/kg)治療后觀 察到的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的降低。提供了兩組獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值。箭頭表示使用不同劑量地塞 米松而不使用抗體時(shí)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)降低的百分比。
[0112] 圖12 :抗體RAM9 (劑量范圍：0-120mg/kg)聯(lián)合地塞米松（0· 025mg/kg)治療后新 月體形成的下降。提供了兩組獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值。箭頭表示使用不同劑量地塞米松而不使 用抗體時(shí)新月體形成降低的百分比。
[0113] 圖13 :針對(duì)DNFB的接觸性超敏反應(yīng)（CHS)。與單獨(dú)使用RAM9而沒有使用氫化可 的松（-HC)治療小鼠相比，抗-MIF(RAM9)聯(lián)合氫化可的松（+HC)治療小鼠的被刺激的耳朵 后CHS反應(yīng)減弱。使用同型對(duì)照抗體治療小鼠（不施用/局部施用氫化可的松）作為陰性 對(duì)照。每組使用八只小鼠，通過測(cè)量右耳（被刺激的）和左耳（未被刺激的）的耳朵厚度 的差值而將耳朵接觸性皮炎的降低進(jìn)行量化。
[0114] 定義和基本技術(shù)
[0115] 除非此處另有定義，本發(fā)明所使用科學(xué)和技術(shù)術(shù)語的含義為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員 通常所理解的含義。一般而言，與此處所述的細(xì)胞和組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物 學(xué)、基因和蛋白質(zhì)以及核苷酸化學(xué)相關(guān)的所用術(shù)語和技術(shù)是本領(lǐng)域眾所周知的且通用的。 除非特別指出，本發(fā)明的方法和技術(shù)一般按照本領(lǐng)域已知的傳統(tǒng)方法和本說明書中所引用 和討論的各種綜述和更特定的文獻(xiàn)中所描述的方法進(jìn)行。見例如，Sambrook等，分子克?。?實(shí)驗(yàn)手冊(cè)第2版，冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社，冷泉港，紐約（1989)和Ausubel等，當(dāng)代分子生物 學(xué)操作手冊(cè)，格林出版聯(lián)合社（1992)以及Harlow和Lane抗體：實(shí)驗(yàn)手冊(cè)，冷泉港實(shí)驗(yàn)室 出版社，冷泉港，紐約（1990)，通過引用其被包括在此處。
[0116] "MIF"或"巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子"是指一種蛋白質(zhì)，已知其在免疫反應(yīng)和炎癥 反應(yīng)中是一種關(guān)鍵的調(diào)節(jié)子，并且其是糖皮質(zhì)激素的抗調(diào)控子。MIF包括哺乳動(dòng)物MIF， 特別是人MIF(Swiss-Prot原始登記號(hào)：P14174)，其中單體形式編碼為含115個(gè)氨基酸的 蛋白質(zhì)，但由于在起始蛋氨酸處裂解，最終形成含114個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。"MIF"也包括 "GIF"（糖基化抑制因子）和其他形式的MIF，例如MIF的融合蛋白。MIF的氨基酸編號(hào)起 始于N端的蛋氨酸（氨基酸1號(hào)），結(jié)束于C端的丙氨酸（氨基酸115號(hào)）。
[0117] 根據(jù)本發(fā)明的目的，"氧化的MIF"或oxMIF定義為MIF的異構(gòu)體，其通過采用溫和 氧化劑例如胱氨酸處理MIF得到。如之前本申請(qǐng)所示，用該方式處理的重組oxMIF包括MIF 的異構(gòu)體，該異構(gòu)體和oxMIF共享結(jié)構(gòu)的重排，oxMIF(例如）在動(dòng)物感染細(xì)菌之后在體內(nèi) 產(chǎn)生。
[0118] 根據(jù)本發(fā)明的目的，redMIF被定義為還原的MIF，其為不和RAB0、RAB9和/或RAB4 結(jié)合的MIF。
[0119] 本發(fā)明所述的抗-oxMIF抗體能夠區(qū)分oxMIF和redMIF，所述oxMIF和redMIF分 別通過溫和氧化或還原得到?？?oxMIF抗體對(duì)于特異性地檢測(cè)oxMIF是有用的。這些構(gòu) 象異構(gòu)體之間的區(qū)別可通過ELISA或表面等離子體共振進(jìn)行評(píng)估。這兩種技術(shù)的操作對(duì)于 本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的，并可以采用下述方法進(jìn)行操作。
[0120] 用Biacore評(píng)估抗體的差異結(jié)合
[0121] 使用Biacore 3000系統(tǒng)，通過表面等離子體共振分析檢測(cè)oxMIF和redMIF與抗 體RAB9和RABO的結(jié)合動(dòng)力學(xué)。所述抗體涂覆于CM5(=甲基葡聚糖）芯片，并且注射與 0. 2%的Proclin300預(yù)先溫育的重組MIF蛋白。（Proclin300由穩(wěn)定oxMIF結(jié)構(gòu)的氧化異 噻挫酮構(gòu)成）。在不添加 Proclin300的天然HBS-EP緩沖液（=Biacore電泳緩沖液）中， 不能與RAB9、RABO或相關(guān)抗體（不相關(guān)的同型對(duì)照抗體）的重組MIF蛋白用作陰性（背 景）結(jié)合對(duì)照。
[0122] 在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中，oxMIF是與抗體RAB9、RAB4和/或RABO或者是其抗原-結(jié) 合片段差異性結(jié)合的MIF，意味著這些抗體能與oxMIF結(jié)合，而redMIF不與這些抗體中的任 何一個(gè)結(jié)合。
[0123] 在其他實(shí)施例中，抗-oxMIF抗體，例如，上述抗體或其結(jié)合oxMIF的抗原結(jié)合部分 的K d值低于ΙΟΟηΜ，優(yōu)選K D值低于50nM，更優(yōu)選K D值低于10nM。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施例 中，結(jié)合oxMIF的抗體的Kd值低于5nM。
[0124] 抗體例如RAB9、RAB4或RABO能否結(jié)合（例如oxMIF或redMIF)可以根據(jù)本領(lǐng)域 技術(shù)人員已知的方法確定，舉例而言可以是下述方法中的任何一個(gè)：使用還原態(tài)或氧化態(tài) 的重組MIF的ELISA，或使用還原態(tài)或氧化態(tài)的重組MIF的表面等離子體共振，例如上述已 知的Biacore實(shí)驗(yàn)。
[0125] 用于確定抗體與例如rec. (ox)MIF結(jié)合的一個(gè)優(yōu)選的方法是表面等離子體共振， 其中"結(jié)合"意味著Kd值低于ΙΟΟηΜ，優(yōu)選低于50nM，甚至更優(yōu)選低于ΙΟηΜ，其中未結(jié)合 redMIF表征為Kd值高于400nM。"結(jié)合"和"特異性結(jié)合"在本文可交換使用，定義如上所 述。"差異性結(jié)合"在本申請(qǐng)上下文中是指一種化合物，特別是本文所述的抗體，其能夠結(jié)合 oxMIF (例如，其Kd值如上所述），而不能結(jié)合redMIF (如上所述未結(jié)合）。
[0126] "抗體"是指完整的抗體或能夠與用于（特異性）結(jié)合的完整抗體相競(jìng)爭(zhēng)的抗原結(jié) 合部分。一般參見免疫基礎(chǔ)，第7章（Paul, W.，ed.，第2章 .Raven Press，紐約（1989)) (通過引用包含在本文）。術(shù)語抗體包括但不限于人類抗體、哺乳動(dòng)物抗體、分離的抗體和 基因工程形式的抗體例如嵌合體、駱駝化或人源化抗體。
[0127] 術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"是指抗體的一個(gè)或一個(gè)以上保留特異性結(jié)合抗原 (例如（ox)MIF)能力的片段?？乖Y(jié)合部分可以通過重組DNA技術(shù)制備，也可以通過酶或 化學(xué)裂解完整抗體而制備?？乖Y(jié)合部分包括但不限于例如下述：Fab、Fab'、F(ab'）2、Fv 和互補(bǔ)性決定區(qū)域（CDR)片段、單鏈抗體（scFv)、嵌合抗體、抗體和包含至少抗體的一部分 的多肽，其中，所述抗體足以使得特異性抗原結(jié)合到多肽，即ox或redMIF。從N端到C端， 成熟輕鏈和重鏈的可變區(qū)包含F(xiàn)R I、CDRI、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4區(qū)域。每個(gè)區(qū)域中氨 基酸的排列與下述文獻(xiàn)的定義保持一致：Kabat，Sequences of Protein of immunological interest《具有免疫性興趣的蛋白序列》（國(guó)家衛(wèi)生研宄院，貝塞斯達(dá)，Md. (1987和 1991)) ；Chothia et al. J. Mol. Biol. 196:901-917(1987),或 Chothia et al.，Nature 342:878-883(1989)?？贵w或其抗原結(jié)合部分可以衍生或連接到另一個(gè)功能分子（例如另 外一種肽或蛋白質(zhì)）。例如，能夠功能性地連接到一個(gè)或一個(gè)以上其他分子實(shí)體的抗體或其 抗原結(jié)合部分，例如另一種抗體（例如雙特異性抗體或雙鏈抗體（diabody))、可檢測(cè)試劑、 細(xì)胞毒性試劑、藥物試劑、和/或連接分子。
[0128] 根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的通常知識(shí)，術(shù)語"KD"此處是指特定抗體相對(duì)于各自抗原的 平衡解離常數(shù)。該平衡解離常數(shù)可以測(cè)量親和力。親和力決定了在平衡態(tài)（結(jié)合和解離保 持平衡的穩(wěn)定狀態(tài)）形成了多少?gòu)?fù)合物（此處：〇x或redMIF和抗體）。
[0129] ka =結(jié)合速度常數(shù)[if1 ?Γ1]
[0130] kd =解離速度常數(shù)[?Γ1]
[0131] Kd =平衡解離常數(shù)=kd/ka[M]
[0132] 術(shù)語"人類抗體"是指可變區(qū)和恒定區(qū)是人類序列的任何抗體。該術(shù)語包括帶有 源自人類基因但卻被改變過的序列的抗體，所述改變例如為降低可能的免疫原性、增加親 和力、去除可能引起不良折疊的半胱氨酸等。該術(shù)語包含了在非人類細(xì)胞重組制備的抗體， 其能夠如給予人類細(xì)胞非典型的糖基化。
[0133] 術(shù)語"人源化抗體"是指包含人類序列并包含非人類序列的抗體；特別地，"人源化 抗體"是指非人類抗體，其中添加了人類序列和/或人類序列替換非人類序列。
[0134] 術(shù)語"駱駝化抗體"是指一種抗體，其中所述抗體結(jié)構(gòu)或序列已經(jīng)發(fā)生改變，其和 源自駱駝的抗體更加相似，也被命名為駱駝抗體。設(shè)計(jì)和制備駱駝化抗體的方法是本領(lǐng)域 技術(shù)人員所熟知的基本知識(shí)的一部分。
[0135] 術(shù)語"嵌合抗體"是指包含來自兩種或兩種以上不同物種的區(qū)域的抗體。
[0136] 術(shù)語"分離的抗體"或"其分離的抗原結(jié)合部分"是指從抗體源例如噬菌體展示庫(kù) 或B細(xì)胞譜中被識(shí)別和挑選的一種抗體或其抗原結(jié)合部分。
[0137] 根據(jù)本發(fā)明所述的抗-(Ox)MIF抗體的制備包含采用基因工程生成重組DNA的任 何方法，例如通過反向轉(zhuǎn)錄RNA和/或擴(kuò)增DNA和將其克隆到表達(dá)載體。在一些實(shí)施例中， 所述載體是病毒載體，其中額外的DNA片段可連接到病毒基因組。在一些實(shí)施例中，所述 載體能夠在被引入的宿主細(xì)胞中自我復(fù)制（例如具有細(xì)菌復(fù)制起點(diǎn)的細(xì)菌載體和游離型 (印isomal)哺乳動(dòng)物載體）。在其他實(shí)施例中，所述載體（例如非-游離型哺乳動(dòng)物載體） 在引入宿主細(xì)胞時(shí)可以整合到宿主細(xì)胞的基因組中，從而可以和宿主基因組一起復(fù)制。此 夕卜，特定的載體能夠引導(dǎo)與它們可操作地連接的基因的表達(dá)。這樣的載體此處被稱為"重組 表達(dá)載體"（或簡(jiǎn)稱為"表達(dá)載體"）。
[0138] 抗-(OX)MIF抗體尤其可以通過傳統(tǒng)表達(dá)載體制備，例如細(xì)菌載體（例如pBR322 和它的衍生物）或真核載體。編碼抗體的那些序列能與調(diào)控復(fù)制、表達(dá)和/或從宿主細(xì)胞 分泌的調(diào)控序列一起被提供。這些調(diào)控序列包括例如啟動(dòng)子（例如CMV或SV40)和信號(hào)序 列。表達(dá)載體也包含選擇和擴(kuò)增標(biāo)志物，例如二氫葉酸還原酶基因（DHFR)、潮霉素-B-磷酸 轉(zhuǎn)移酶和胸苷激酶。所用載體的成分例如選擇標(biāo)記物、復(fù)制子、增強(qiáng)子可以通過商購(gòu)獲得或 通過傳統(tǒng)方法制備。該載體可以被構(gòu)建以在不同細(xì)胞培養(yǎng)基中表達(dá)，例如哺乳動(dòng)物細(xì)胞例 如010、0^、冊(cè)1(293、呢0、纖維組織母細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、酵母或細(xì)菌例如大腸桿菌伍.(3〇11)。 在一些例子中，所用的細(xì)胞可以獲得表達(dá)蛋白的最佳糖基化。
[0139] 所述抗-(ox) MIF抗體的輕鏈基因和抗-(ox) MIF抗體的重鏈基因可以插入到不同 的載體或插入到同一個(gè)表達(dá)載體中。所述抗體基因通過標(biāo)準(zhǔn)方法插入到表達(dá)載體中，例如 通過抗體基因片段和載體上的互補(bǔ)限制性位點(diǎn)的連接、或如果沒有限制性位點(diǎn)則通過平末 端連接。
[0140] 抗-(Ox)MIF或其抗原結(jié)合片段的制備包括本領(lǐng)域已知的通過轉(zhuǎn)染將重組DNA 導(dǎo)入到真核細(xì)胞的任何方法，例如通過電穿孔或微注射。例如，可以通過下述方法實(shí)現(xiàn) 抗-(ox) MIF抗體的重組表達(dá)：將包含編碼抗-(ox) MIF抗體的DNA序列的表達(dá)質(zhì)粒通過適 當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞株，所述序列受一種或多種調(diào)控序列例如強(qiáng)啟動(dòng)子的控 制，從而得到所轉(zhuǎn)入的序列已經(jīng)穩(wěn)定整合到基因組的細(xì)胞。該脂質(zhì)轉(zhuǎn)染方法只是根據(jù)本發(fā) 明可能使用到的方法的一個(gè)舉例。
[0141] 抗-(ox)MIF抗體的制備也可包含本領(lǐng)域已知的用于培養(yǎng)所述轉(zhuǎn)化細(xì)胞的任何方 法，例如連續(xù)或分批培養(yǎng)，以及抗-(Ox)MIF抗體的表達(dá)，例如組成性或誘導(dǎo)性表達(dá)。特別是 進(jìn)一步參考在WO 2009/086920中提及的抗-(ox)MIF抗體的制備。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施例中， 根據(jù)本發(fā)明制備的抗-(ox)MIF抗體可以結(jié)合oxMIF或其表位。根據(jù)本發(fā)明，特別優(yōu)選的抗 體是抗體RAB9、RAB4和/或RAB0。或者優(yōu)選的抗體是RAM9、RAM4和/或RAM0。
[0142] 這些抗體的序列已在WO 2009/086920中被公開，本申請(qǐng)的其他序列如下所示：
[0143] RAB9輕鏈的氨基酸序列SEQ ID NO: 1 :
[0144] DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRSSQRIM TYLNWYQQKP GKAPKLLIFV ASHSQSGVPS RFRGSGSETD FTLTISGLQP EDSATYYCQQ SFWTPLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SWCLLNNFY PREAKVQWICV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSK AD YEKH K VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC；
[0145] RAB4輕鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:2 :
[0146] DIQM 丁 QSPG 丁 LSLSPGERAT LSCRASQGVS SSSLAWYQQK PGQAPRIXIY G 丁 SSRATGIP DRFSGSASGT DF 丁 LTISRLQ PEDFAVYYCQ QYGRSLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SWCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC；
[0147] RABO輕鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:3 :
[0148] DIQMTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQGVS SSSLAWYQQK PGQAPRLLIY GTSSRATGIP DRFSGSASGT DFTLT1SRLQ PEDFAVYYCQ QYGRSLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SWCLLNNFY PREAKVQWICV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHIC VYACEVTHQG LSSPVTKSFNRGEC；
[0149] RAB2輕鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:4 :
[0150] DIQMTQSPVT LSLSPGERAT LSCRASQSVR SSYLAWYQQK PGQTPRLLIY GASN RATGIP DRFSGSGSGT DFTLTISRLE PEDFAVYYCQ QYGNSLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SWCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSK.ADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC；
[0151] RAB9重鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:5 :
[0152] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS IYSMNffVRQA PGKGLEffVSS IGSSGGTTYY ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAGSQ WLYGMDVffGQ GTTVTVSSAS TKGPSVFPLA PCSRSTSEST AALGCLVKDY FPEPVTVSffN SGALTSGVHT FPAVLQSSGL YSLSSVVTVP SSSLGTKTYT CNVDHKPSNT KVDKRVESKY GPPCPPCPAP EFLGGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSQEDPE VQFNWYVDGV EVHNAKTKPR EEQFNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKGLPSSI EKTISKAKGQ PREPQVYTLP PSQEEMTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEffE SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSRLTV DKSRffQEGNV FSCSVMHEAL HNHYTQKSLS LSLGK ；
[0153] RAB4重鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:6 :
[0154] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS IYAMDffVRQA PGKGLEffVSG IVPSGGFTKY ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARVN VIAVAGTGYY YYGMDVffGQG TTVTVSSAST KGPSVFPLAP CSRSTSESTA ALGCLVKDYF PEPVTVSffNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS SSLGTKTYTC NVDHKPSNTK VDKRVESKYG PPCPPCPAPE FLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSQEDPEV QFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQFNSTYRVV SVLTVLHQDff LNGKEYKCKV SNKGLPSSIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SQEEMTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEffES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSRLTVD KSRffQEGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SLGK ；
[0155] RABO重鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:7 :
[0156] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS WYAMDffVRQA PGKGLEffVSG IYPSGGRTKY ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARVN VIAVAGTGYY YYGMDVffGQG TTVTVSSAST KGPSVFPLAP CSRSTSESTA ALGCLVKDYF PEPVTVSffNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS SSLGTKTYTC NVDHKPSNTK VDKRVESKYG PPCPPCPAPE FLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSQEDPEV QFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQFNSTYRVV SVLTVLHQDff LNGKEYKCKV SNKGLPSSIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SQEEMTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEffES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSRLTVD KSRffQEGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SLGK ；
[0157] RAB2重鏈的氨基酸序列SEQ ID NO:8 :
[0158] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS IYAMDWVRQA PGKGLEWVSG IVPSGGFTKY ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARVN
[0159] VIAVAGTGYY YYGMDVffGQG TTVTVSSAST KGPSVFPLAP CSRSTSESTA ALGCLVKDYF PEPVTVSffNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS SSLGTKTYTC NVDHKPSNTK VDKRVESKYG PPCPPCPAPE FLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSQEDPEV QFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQFNSTYRVV SVLTVLHQDff LNGKEYKCKV SNKGLPSSIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SQEEMTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEffES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSRLTVD KSRffQEGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SLGK ；
[0160] RAMOhc 的氨基酸序列 SEQ ID NO:9 :
[0161] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS WYAMDWVRQA PGKGLEWVSG IYPSGGRTKY ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARVN VIAVAGTGYY Y YGM DVWGQG TTVTVSSAST KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA
[0162] ALGCLVKDYF PEPVTVSffNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS
[0163] SSLGTQTYIC NVN H KPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP APELLCiGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK
[0164] GQPREPQVYT LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN
[0165] YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK；
[0166] RAMOlc 的氨基酸序列 SEQ ID NO: 10 :
[0167] D1QMTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQGVS SSSLAVVYQQK PGQAPRLLIY GTSSRATGIP DR FSGS ASGT DFTLTISRLQ PEDFAVYYCQ QYGRSLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAK.VQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC：
[0168] RAM9hc 的氨基酸序列 SEQ ID NO: 11 :
[0169] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS IYSMNWVRQA PGKGLEWVSS IGSSGGTTYY ADSVKGRFTI SRDNiSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCAGSQ WLYGM DVWGQ GTTVTVSSAS TKGPS VFPL A PSSKSTSGGT AALGCLVKDY FPEPVTVSWN sgaltsgvht fpavlqssgl yslssvvtvp SSSLGTQTYl CNVNHKPSNT KVDKRVEPKS CDKTHTCPPC PA PE L LGG PS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCV V VDVSHE DPEVKFN W YV dgvevhn AKT kpreeqynst YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSN'IvALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSREEMT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKITPPVLD
[0170] SDGSFFLYSK LTVDKSRffQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK ；
[0171] RAM91c 的氨基酸序列 SEQ ID NO: 12 :
[0172] DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCRSSQRIM TYLNWYQQKP GKAPKLLIFV ASHSQSGVPS RFRGSGSETD FTLTISGLQP EDSATYYCQQ SFWTPLTFGG
[0173] GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC；
[0174] RAM4hc 的氨基酸序列 SEQ ID NO: 13 :
[0175] EVQLLESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS IYAMDWVRQA PGKGLEWVSG IVPSGGFTKY ADSVKGRFT 丨 SRDNSICNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARVN VIAVAGTG Y Y YYGM DVWGQG TTVTVSSAST KGPSVFPLAP SSKSTSGGTA ALGCLVKDYF PEPVTVSWNS GALTSGVHTF PAVLQSSGLY SLSSVVTVPS SSLGTQTYIC NVNHKPSNTK VDKRVEPKSC DKTHTCPPCP APELLGGPSV
[0176] FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK
[0177] PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK ；
[0178] RAM41c 的氨基酸序列 SEQ ID N0:14 :
[0179] DIQMTQSPGT LSLSPGERAT LSCRASQGVS SSSLAWYQQK PGQAPRLLIY GTSSR ATGIP DR FSGS ASGT DFTLTISRLQ PEDFAVYYCQ QYGRSLTFGG GTKVEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY PREAKVQWKV DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK VYACEVTHQG LSSPVTKSFN RGEC0
[0180] 本發(fā)明的抗-MIF抗體優(yōu)選分離的單克隆抗體。該抗-MIF抗體可以是IgG、IgM、 IgE、IgA或IgD分子。在其他實(shí)施例中，該抗-MIF抗體是IgGl、IgG2、IgG3和IgG4亞類。 在其他實(shí)施例中，該抗體是IgGl或IgG4亞類。在其他實(shí)施例中，該抗體是IgG4亞類。在 一些實(shí)施例中，該IgG4抗體帶有一個(gè)單獨(dú)突變，其將絲氨酸（絲氨酸228)改變成脯氨酸。 相應(yīng)地，IgG4的Fc區(qū)域中的子序列CPSC變?yōu)镃PPC，CPPC是IgGl的子序列（Angal et al .Mol Immunol. 1993, 30, 105-108)〇
[0181] 此外，抗-(ox) MIF抗體的制備可包含本領(lǐng)域已知的用于純化抗體的任何方法，例 如通過陰離子交換色譜或親和色譜。在一個(gè)實(shí)施例中，抗-(ox) MIF抗體可以通過體積排阻 色譜純化。
[0182] 術(shù)語MIF的"中心區(qū)域"和"C端區(qū)域"分別是指包含人類MIF氨基酸第35-68位 和氨基酸第86-115位的區(qū)域，優(yōu)選分別包含人類MIF氨基酸第50-68位和氨基酸第86-102 位的區(qū)域。本發(fā)明的特別優(yōu)選的抗體能夠結(jié)合人類MIF氨基酸第50-68位或第86-102位 的區(qū)域。這同樣被能與優(yōu)選的下述抗體結(jié)合的表位所反應(yīng)，例如RAB0、RAB4、RAB2和RAB9， 以及RAM4、RAMO和RAM9,它們的結(jié)合如下所示：
[0183] RAB4 和 RAM4 :aa 86-102
[0184] RAB9 和 RAM9 :aa 50-68
[0185] RABO 和 RAMO :aa 86-102
[0186] RAB2 :aa 86-102
[0187] 因此，RAM4和RAB4,如同RAM9和RAB9具有相同的特異性。RAMO和RABO也是如 此。這同樣在實(shí)施例中也可以得到反應(yīng)，在這些實(shí)施例體現(xiàn)出使用這些抗體可以得到類似 的結(jié)果。
[0188] 術(shù)語"表位"包括能夠特異性結(jié)合免疫球蛋白或抗體片段的任何蛋白決定簇?？?原決定簇一般由化學(xué)性質(zhì)活躍的表面分子基團(tuán)例如暴露的氨基酸、氨基糖或其他碳水化合 物側(cè)鏈構(gòu)成，一般具有特異的三維結(jié)構(gòu)特點(diǎn)以及特異的電荷特征。
[0189] 術(shù)語"載體"是指一種核苷酸分子，其能夠?qū)⑵渌暮塑账徇\(yùn)輸至與其被連接處。 在一些實(shí)施例中，所述載體是質(zhì)粒，即連接有額外DNA片段的圓形雙鏈DNA環(huán)。
[0190] 術(shù)語"宿主細(xì)胞"是指一種細(xì)胞系，其在引入表達(dá)載體后可以制備重組蛋白。術(shù)語 "重組細(xì)胞系"是指已經(jīng)引入重組表達(dá)載體的細(xì)胞系。應(yīng)該理解的是，"重組細(xì)胞系"不僅指 特定個(gè)體細(xì)胞系，也指該細(xì)胞系的后代。由于突變或者環(huán)境影響，后代可能發(fā)生特定修飾， 其后代雖然事實(shí)上可能和母細(xì)胞不一致，但是仍然屬于此處所述的術(shù)語"重組細(xì)胞系"的范 圍之內(nèi)。
[0191] 根據(jù)本發(fā)明的宿主細(xì)胞類型是例如COS細(xì)胞、CHO細(xì)胞或例如HEK293細(xì)胞或其他 本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何宿主細(xì)胞，也包括例如細(xì)菌細(xì)胞例如大腸桿菌（E. coli)細(xì)胞。 在一個(gè)實(shí)施例中，該抗-MIF抗體在DHFR-缺乏的CHO細(xì)胞系例如DXBll中表達(dá)，其中添加 G418作為選擇標(biāo)志物。當(dāng)編碼抗體基因的重組表達(dá)載體被引入到CHO宿主細(xì)胞時(shí)，通過培 養(yǎng)宿主細(xì)胞至足夠的時(shí)間使得抗體在宿主細(xì)胞表達(dá)或者抗體分泌到宿主細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng) 基中，從而制備抗體。
[0192] 抗-(ox)MIF抗體可以使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白純化方法從培養(yǎng)基中回收。
[0193] 本發(fā)明提供的聯(lián)合治療的第二個(gè)活性成分是糖皮質(zhì)激素。
[0194] 糖皮質(zhì)激素，有時(shí)也被稱為糖皮質(zhì)類固醇，是一類可以與糖皮質(zhì)激素受體（糖皮 質(zhì)激素受體α)結(jié)合的留類激素，其幾乎存在于所有的脊椎動(dòng)物。糖皮質(zhì)激素是免疫系統(tǒng) 反饋機(jī)制的一部分，其能夠減小免疫活動(dòng)，即減少炎癥。在醫(yī)學(xué)方面，它們用于治療因免疫 過度引起的疾病，其代表性疾病的例子是過敏、哮喘、自身免疫病和敗血癥。它們也干擾癌 細(xì)胞中的一些異常機(jī)制，所以可以用于治療癌癥。在與糖皮質(zhì)激素激素受體結(jié)合之后，活化 的糖皮質(zhì)激素受體復(fù)合物可以通過被稱為反式激活的過程上調(diào)細(xì)胞核內(nèi)抗炎蛋白的表達(dá)， 并抑制細(xì)胞溶質(zhì)中促炎蛋白的表達(dá)。理論上，糖皮質(zhì)激素被定義為皮質(zhì)類固醇的亞組。此 夕卜，已經(jīng)知道一類具有糖皮質(zhì)激素活性（SEGRA，選擇性糖皮質(zhì)激素受體激動(dòng)劑）的新型化 合物。
[0195] 這些化合物只展現(xiàn)了完全興奮糖皮質(zhì)激素的部分作用，即它們不能引起廣譜的反 式激活、反式抑制和對(duì)基因誘導(dǎo)的間接作用（通過NF- κ B、AP1、jun-jun同源二聚體等）。通 過對(duì)選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERM' s =它莫西芬、雷洛昔芬、托瑞米芬）用類推的方法， 這些化合物也被稱為選擇性糖皮質(zhì)激素受體調(diào)節(jié)劑（SERT s)。SEGR^ s/SEGRT s的例 子包括 Mapracorate ( = B0L303242X = ZK245186)、化合物 A、RU24856、RU24782、RU40066、 ZK216348。
[0196] 所有這些化合物已經(jīng)在本領(lǐng)域中被公開，其對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的。 特別參考綜述文獻(xiàn) De Bosscher et al, 2010, Curr Opin Pharmacol 10:497-504。如文獻(xiàn) VayssiSre et al，1997, Mol Endocrinol 11:1245-1255 公開了 RU 24856、RU 40066 和 RU 24782。它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)式分別如下所示：

【權(quán)利要求】
1. 抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素用于糖皮質(zhì)激素接受性疾病的治療。
2. 如權(quán)利要求1所述的抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，其中所述糖皮質(zhì)激素接受性疾病 對(duì)采用糖皮質(zhì)激素的治療有反應(yīng)。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，用于炎癥、過敏、癌癥或哮喘 的治療。
4. 如權(quán)利要求1、2或3所述的抗-MIF抗體聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，其中所述抗體是抗-oxMIF 抗體。
5. 如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體選自于下組：抗-MIF 抗體RAB9、RAB4 和 / 或RAB0、或RAM9、RAM4 或RAM0。
6. 如權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述糖皮質(zhì)激素選自于由糖皮質(zhì)激素 受體激動(dòng)劑構(gòu)成的組，例如甲基氫化潑尼松、氫化潑尼松、氟羥氫化潑尼松、地塞米松、帕拉 米松、氟可龍、布地奈德、氟替卡松、氟尼縮松、環(huán)索奈德、莫美他松、氯倍他松、可的松和氫 化可的松，和抗炎SEGRA's/SEGRM's(例如，Mapracorate( =B0L303242X=ZK245186)、化 合物A、RU24856、RU24782、RU40066、ZK216348)。
7. 如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗體 RAB9、抗體RABO和抗體RAB0,或RAM9、RAM4或RAM0,優(yōu)選抗體RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自 下組：全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相 關(guān)疾病是炎癥，尤其是腎炎、更優(yōu)選狼瘡腎炎、腎小球性腎炎、IgA或IgM腎病、系統(tǒng)性血管 炎（例如結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、韋格納肉芽腫、Henoch-SchSnIdn紫癜）、抗-GBM腎炎和/或急 進(jìn)性腎小球腎炎（類型I、II、III或IV)，例如ANCA(抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體）腎炎）。
8. 如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體是抗體RAB9、抗體 RABO和抗體RABO，或RAM9、RAM4或RAMO，優(yōu)選抗體RAM9，所述糖皮質(zhì)激素選自下組：全身給 藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相關(guān)疾病是狼瘡 腎炎。
9. 如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗體 RAB9、抗體RABO和抗體RABO、或RAM9、RAM4或RAMO，優(yōu)選RAM9，所述糖皮質(zhì)激素選自下組： 全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相關(guān)疾病 是全身性紅斑狼瘡。
10. 如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗 體RAB9、抗體RABO和抗體RAB0、或RAM9、RAM4或RAM0,優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下 組：全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相關(guān) 疾病是皮膚炎癥。
11. 如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗 體RAB9、抗體RABO和抗體RAB0、或RAM9、RAM4或RAM0,優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下 組：全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相關(guān) 疾病是T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。
12. 如權(quán)利要求10或11所述的聯(lián)合治療，其中，所述T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)是皮膚炎 癥，例如銀肩病或接觸性超敏反應(yīng)。
13. 如權(quán)利要求10至12任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述糖皮質(zhì)激素是布地奈德， 并且布地奈德配制為局部施用。
14. 如權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗 體RAB9、抗體RABO和抗體RABO、或RAM9、RAM4或RAMO,優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素是布地 奈德，所述MIF相關(guān)疾病是炎癥性腸?。↖BD)，其中，所述IBD選自潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩 病。
15. 如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合治療，其中，所述抗-MIF抗體選自下組：抗 體RAB9、抗體RABO和抗體RAB0、或RAM9、RAM4或RAM0,優(yōu)選RAM9,所述糖皮質(zhì)激素選自下 組：全身給藥時(shí)為（甲基）氫化潑尼松和地塞米松，局部給藥時(shí)為布地奈德，所述MIF相關(guān) 疾病是多發(fā)性硬化。
16. -種試劑盒，其包含權(quán)利要求1至15任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，以及使用說明。
17. 如權(quán)利要求1至15任一項(xiàng)中所述的聯(lián)合，或如權(quán)利要求16所述的試劑盒，用于糖 皮質(zhì)激素接受性疾病的治療，特別是用于炎癥、過敏、哮喘或癌癥的治療。
【文檔編號(hào)】C07K16/24GK104470540SQ201380028648
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2013年4月16日 優(yōu)先權(quán)日:2012年4月16日
【發(fā)明者】R·克西堡曼, D·弗爾克爾, F·沙伊夫林格, H·埃爾利希 申請(qǐng)人:巴克斯特保健股份有限公司, 巴克斯特國(guó)際公司