1,5-脫水山梨醇免疫原及其特異性抗體及檢測(cè)試劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及1,5-脫水山梨醇免疫檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種1,5-脫水山梨醇免疫原及其特異性抗體及檢測(cè)試劑。本發(fā)明的1,5-脫水山梨醇免疫原，免疫原性高，可以誘導(dǎo)得到高效價(jià)的抗1,5-脫水山梨醇特異性抗體。本發(fā)明的抗1,5-脫水山梨醇特異性抗體，特異性高，與1,5-脫水山梨醇的結(jié)合力強(qiáng)，敏感度遠(yuǎn)高于現(xiàn)有的抗1,5-脫水山梨醇抗體。本發(fā)明的1,5-脫水山梨醇免疫原及抗1,5-脫水山梨醇特異性抗體用于制備1,5-脫水山梨醇檢測(cè)試劑，可以方便、準(zhǔn)確地確定樣品中的1,5-脫水山梨醇含量。
【專利說(shuō)明】1 ’ 5-脫水山梨醇免疫原及其特異性抗體及檢測(cè)試劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及1，5-脫水山梨醇免疫檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種1，5-脫水山梨醇免疫原及其特異性抗體及檢測(cè)試劑。
【背景技術(shù)】
[0002]I, 5-脫水山梨醇(1，5-anhydro glucitol, I, 5-AG),其結(jié)構(gòu)式如式(III)所示:
[0003]
【權(quán)利要求】
1.1，5-脫水山梨醇免疫原，其結(jié)構(gòu)式如式(I )所示:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的1，5-脫水山梨醇免疫原，其特征在于:R為-(CH2)4-C00-。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的1，5-脫水山梨醇免疫原，其特征在于:所述的載體為血清蛋白、血藍(lán)蛋白或甲狀腺球蛋白。
4.一種抗1，5-脫水山梨醇特異性抗體，由權(quán)利要求1~3任意一項(xiàng)所述的1，5-脫水山梨醇免疫原免疫動(dòng)物后生產(chǎn)得到。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗1，5-脫水山梨醇特異性抗體，其特征在于:所述的抗體為完整的抗體分子，或者為，保留與1，5-脫水山梨醇特異性結(jié)合的能力的抗體片段或抗體衍生物。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種抗1，5-脫水山梨醇特異性抗體，其特征在于:抗1，5-脫水山梨醇特異性抗體的效價(jià)為1:30000。
7.—種1,5-脫水山梨醇衍生物，其結(jié)構(gòu)式如式(II)所示:
8.1, 5-脫水山梨醇免疫原的制備方法，由載體和權(quán)利要求5所述的1，5-脫水山梨醇衍生物連接而成，取η=4時(shí)，其特征在于:1，5-脫水山梨醇衍生物的制備步驟如下:
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的1，5_脫水山梨醇免疫原的制備方法，其特征在于，載體與。1，5-脫水山梨醇衍生物的連接步驟為: (1)將載體蛋白200mg溶解于50ml0.2M，pH8.5的磷酸緩沖液中； (2)將如下化學(xué)品加入到小燒杯中攪拌溶解:200mg合成的1,5-脫水山梨醇衍生物、3.5ml 二甲基酰胺、3.5ml乙醇、7.0mllOmM，pH5.0的磷酸鉀緩沖液、200mgl_乙基-3-(-3-二甲氨丙基)碳二亞胺、50mg N-羥基硫代琥珀酰亞胺，將這些化學(xué)品在室溫下攪拌溶解反應(yīng)30min ； (3)將溶解好的溶液滴加至載體蛋白溶液中，并在2~8°C下攪拌過(guò)夜，得到抗原；將合成好的抗原經(jīng)過(guò)透析進(jìn)行純化，得到1，5-脫水山梨醇免疫原。
10.1, 5-脫水山梨醇免疫原及抗1，5-脫水山梨醇特異性抗體在制備1，5-脫水山梨醇檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C07K14/795GK103804491SQ201410047074
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2014年2月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月11日
【發(fā)明者】虞留明, 李冬, 唐燕, 張曼, 顧國(guó)浩 申請(qǐng)人:蘇州博源醫(yī)療科技有限公司