牡丹多肽，及制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種以牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅粕為原料制備牡丹多肽的方法，以及該方法制備出的多肽，和該多肽的應(yīng)用，在多肽制備過程中添加各種微生物菌發(fā)酵或者蛋白酶酶解從而得到牡丹多肽制品。該制品可以是粉劑、顆粒、片劑、膠囊、口服液等形式。牡丹多肽具有降低膽固醇、降血壓和促進(jìn)脂肪代謝、抗疲勞、增強(qiáng)人體免疫力、調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能等功效優(yōu)勢，在食品工業(yè)、保健和醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。
【專利說明】牡丹多肽，及制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于牡丹籽餅柏深加工【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種牡丹多肽的制備方法、該方法制備的多肽及多肽的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]牡丹籽油在2011年被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新資源食品，此后牡丹籽油進(jìn)入了大量生產(chǎn)階段。通過脫皮后采用壓榨法制備牡丹籽油后會產(chǎn)生大量的牡丹籽餅柏，約占牡丹籽總量的三分之一，這些籽餅柏中含有5-15 %脂肪，30-40 %蛋白，還含有芍藥苷類、苯甲酸、多糖等活性成分，因此充分利用這些剩余物中的活性和營養(yǎng)成分對綜合利用牡丹籽，提高牡丹產(chǎn)業(yè)附加值具有重要意義。 [0003]牡丹多肽，是指牡丹籽餅柏中的蛋白質(zhì)經(jīng)微生物發(fā)酵間接處理或蛋白酶直接作用后，再經(jīng)過分離和精制等處理得到的低聚肽混合物，但目前尚未有成熟的工藝對其進(jìn)行制備，阻礙了產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用，因此，為了充分利用資源，采用合適的生產(chǎn)工藝將這些植物蛋白利用，轉(zhuǎn)化為多肽并加以分離純化，制成多肽保健品，對提高牡丹產(chǎn)業(yè)的附加值和市場競爭力具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種牡丹多肽的制備方法，該方法制備的牡丹多肽制品及相關(guān)應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明提供一種牡丹多肽的制備方法，以牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的牡丹餅柏為原料制備而成。
[0006]進(jìn)一步，所述方法包括將牡丹餅柏(I)脫脂、(2)加水制漿、(3)微生物發(fā)酵、(4)離心或過濾制備而成，或者將牡丹餅柏(I)脫脂、(2)加水制漿、(3)蛋白酶水解、(4)脫苦脫色、(5)離心或過濾制備而成。
[0007]進(jìn)一步，所述方法在離心或過濾后還包括超濾膜精煉的步驟。
[0008]進(jìn)一步，所述方法在精煉后還包括干燥、滅菌的步驟。
[0009]優(yōu)選的，所述微生物選自毛霉、米曲霉、黑曲霉、納豆桿菌、放線菌、枯草芽孢桿菌等中的一種或者幾種。
[0010]優(yōu)選的，所述的微生物為枯草芽孢桿菌，或者枯草芽孢桿菌與毛霉或黑曲霉之一的組合或者毛霉、米曲霉和黑曲霉的組合。
[0011]優(yōu)選的所述微生物發(fā)酵的條件為按脫脂牡丹餅柏干基80-120%的接種量接種微生物菌種子液，放入25-40°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵30-120h。
[0012]優(yōu)選的，所述的蛋白酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、堿性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、上述微生物產(chǎn)生的蛋白酶等中的一種或者幾種。
[0013]優(yōu)選的，所述的蛋白酶為堿性蛋白酶，或者堿性蛋白酶與中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或胰蛋白酶之一的組合，或者中性蛋白酶與木瓜蛋白酶的組合，最優(yōu)選為堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶和中性蛋白酶的組合。
[0014]更優(yōu)選的，所述水解條件為添加脫脂牡丹餅柏干基3-10%的蛋白酶，25_75°C保溫酶解4-12h，再升溫至80-95°C高溫滅酶8-15min。
[0015]優(yōu)選的，所述脫苦脫色步驟為添加0.1-0.5%活性炭40-65 °C下攪拌處理30_40min。
[0016]優(yōu)選的，所述離心或過濾步驟為4000-10000r/min離心20_25min或板框過濾。
[0017]優(yōu)選的，所述超濾精煉步驟為將離心或者過濾得到的牡丹多肽液體用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，得到不同分子量牡丹多肽溶液；截留分子量為30Kda以下，優(yōu)選IOKda以下，更優(yōu)選5Kda以下，或3Kda以下，最優(yōu)選為IKda以下。
[0018]優(yōu)選的，所述的干燥，是在0.08-0.2個大氣壓下70_130°C噴霧干燥。
[0019]本發(fā)明還提供一種牡丹多肽，由上述任一的方法制備而成。
[0020]優(yōu)選的，所述多肽可以是粉末、或進(jìn)一步加工成顆粒、片劑、膠囊、口服液等形式。
[0021]本發(fā)明還提供一種上述牡丹多肽的應(yīng)用，所述應(yīng)用包括作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0022]優(yōu)選的，所述營養(yǎng)食品是為病人或者嬰兒提供的營養(yǎng)食品；所述保健食品是為老年人或者亞健康人群提供的保健食品，所述蛋白飲料是指牡丹多肽單獨沖飲或者作為現(xiàn)有飲料的伴侶沖飲。
[0023]本發(fā)明方法制備得到的牡丹多肽具有良好的營養(yǎng)特性，易消化吸收，尤其是某些低分子的肽類，不僅能迅速提供機(jī)體能量，而且具有獨特的加工性能，如無蛋白變性、無豆腥味、無苦味、無殘渣、易溶于水、流動性持水性好、酸性條件下不產(chǎn)生沉淀、加熱不凝固、低抗原性等，可作為營養(yǎng)食品、運動員食品和蛋白飲料。同時，牡丹多肽具有降低膽固醇、降血壓和促進(jìn)脂肪代謝、抗疲勞、增強(qiáng)人體免疫力、調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能等功效優(yōu)勢，在食品工業(yè)、保健食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。
【具體實施方式】
[0024]下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)理解，這些實例不能作為本發(fā)明的限制，在不背離本發(fā)明精神和實質(zhì)的情況下，所作的修改或替換均屬于本發(fā)明的范圍。若未特別指明，下述實施方案中的手段為本領(lǐng)域所熟知的常規(guī)手段。
[0025]實施例1
[0026]步驟一研磨粉碎將牡丹餅柏用粉碎機(jī)粉碎至80目，以上的牡丹餅柏是牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅柏。
[0027]步驟二脫脂將粉碎后的餅柏裝入索氏抽提器中脫脂6h后，取出風(fēng)干獲得脫脂牡丹餅柏粉備用。
[0028]步驟三制漿取IOg脫脂牡丹餅柏粉，加90ml的95°C熱水，攪拌均勻讓牡丹餅柏粉充分溶解在熱水里。
[0029]步驟四滅菌冷卻用壓力蒸汽滅菌器高溫高壓滅菌15min，作為發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0030] 步驟五接菌發(fā)酵接種IOml的枯草芽孢桿菌種子液(每mL種子液中含有枯草芽孢桿菌3.4X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為7.2，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入32°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間48h。
[0031]步驟六濾液分離離心4000r/min,25min,取上清液,從而得到牡丹多肽粗液。
[0032]步驟七精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為5KDa0
[0033]步驟八干燥在0.08個大氣壓下，130°C噴霧干燥。
[0034]步驟九滅菌140°C高溫瞬時滅菌8s，得到牡丹多肽制品。
[0035]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為23.8%，得到的多肽制品無苦味。
[0036]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0037]實施例2
[0038]步驟一研磨粉碎將牡丹餅柏用粉碎機(jī)粉碎至80目，以上的牡丹餅柏是牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅柏。
[0039]步驟二脫脂將粉碎后的餅柏裝入索氏抽提器中脫脂6h后，取出風(fēng)干獲得脫脂牡丹餅柏粉備用。
[0040]步驟三制漿取1Og脫脂牡丹餅柏粉，加90ml的95°C熱水，攪拌均勻讓牡丹餅柏粉充分溶解在熱水里。
[0041]步驟四滅菌冷卻用壓力蒸汽滅菌器高溫高壓滅菌20min，作為發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0042]步驟五接菌發(fā)酵接種IOml的毛霉種子液(每mL種子液中含有毛霉4X 107cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)PH為9，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入30°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間96h。
[0043]步驟六濾液分離通過板框過濾機(jī)去除酶解液中的固體雜質(zhì)，從而得到牡丹多肽粗濾液。
[0044]步驟七精煉將牡丹多肽粗濾液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為30KDao
[0045]步驟八干燥在0.12個大氣壓下，100°C噴霧干燥。
[0046]步驟九滅菌140°C高溫瞬時滅菌10s，得到牡丹多肽制品。
[0047]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為18.7%，得到的多肽制品無苦味。
[0048]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0049]實施例3
[0050]步驟一研磨粉碎將牡丹餅柏用粉碎機(jī)粉碎至100目，以上的牡丹餅柏是牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅柏。
[0051]步驟二脫脂將粉碎后的餅柏裝入索氏抽提器中脫脂6h后，取出風(fēng)干獲得脫脂牡丹餅柏粉備用。
[0052]步驟三制漿取IOg脫脂牡丹餅柏粉，加90ml的95°C熱水，攪拌均勻讓牡丹餅柏粉充分溶解在熱水里。
[0053]步驟四滅菌冷卻用壓力蒸汽滅菌器高溫高壓滅菌20min，作為發(fā)酵培養(yǎng)基。
[0054]步驟五接菌發(fā)酵按接種IOml的米曲霉種子液(每mL種子液中含有米曲霉4X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為6.8，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入35°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間84h。
[0055]步驟六濾液分離10000r/min離心20min,取上清液,從而得到牡丹多肽粗液。[0056]步驟七精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為IOKDa。
[0057]步驟八干燥在0.2個大氣壓下，70 V噴霧干燥。
[0058]步驟九滅菌140°C高溫瞬時滅菌8s，得到牡丹多肽制品。
[0059]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為21.6%，得到的多肽制品無苦味。
[0060]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0061]實施例4
[0062]步驟一至步驟四、步驟六至步驟九，同實施例1。
[0063]步驟五接菌發(fā)酵接種量8ml的黑曲霉種子液(每mL種子液中含有黑曲霉
3.2 X IO7Cfu)，倒入發(fā) 酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為6.0，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入30°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間84h。
[0064]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為20.1 %，得到的多肽制品無苦味。
[0065]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0066]實施例5
[0067]步驟一至步驟四、步驟六、步驟八至步驟九，同實施例2。
[0068]步驟五接囷發(fā)酵接種9ml的混合囷種子液，黑曲霉.米曲霉.毛霉體積比為3:2: 4(黑曲霉種子液中每mL含有黑曲霉3.2X 107cfu，米曲霉種子液中每mL含有米曲霉4X 107cfu，毛霉種子液中每mL含有毛霉4X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為5.0，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入30°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間72h。
[0069]步驟七精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為IKDa。
[0070]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為29.7%，得到的多肽制品無苦味。
[0071]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0072]實施例6
[0073]步驟一至步驟四、步驟六、步驟八至步驟九，同實施例3。
[0074]步驟五接菌發(fā)酵接種IOml的混合菌種子液，枯草芽孢桿菌:毛霉體積比為4: I (枯草芽孢桿菌種子液中每mL含有枯草芽孢桿菌3.4X IO7Cfu，毛霉種子液中每mL含有毛霉4X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為6.5，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入32°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間110h。
[0075]步驟七精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為IKDa。
[0076]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為29.3%，得到的多肽制品無苦味。
[0077]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0078]實施例7
[0079]步驟一至步驟四、步驟六、步驟八至步驟九，同實施例4。
[0080]步驟五接菌發(fā)酵接種9ml的混合菌種子液，枯草芽孢桿菌:黑曲霉體積比為2: I (枯草芽孢桿菌種子液中每mL含有枯草芽孢桿菌3.4X IO7Cfu，黑曲霉種子液中每mL有黑曲霉3.2 X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，在自然pH值條件下，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入35°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間110h。[0081]步驟七精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為3KDa0
[0082]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為27.4%，得到的多肽制品無苦味。
[0083]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0084]實施例8
[0085]步驟一至步驟四、步驟六至步驟九，同實施例3。
[0086]步驟五接菌發(fā)酵接種8ml的納豆桿菌種子液(每mL種子液中含有納豆桿菌
4.4X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為7.0，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入34°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間36h。
[0087]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為21.3%，得到的多肽制品無苦味。
[0088]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0089]實施例9
[0090]步驟一至步驟四、步驟六至步驟九，同實施例2。
[0091]步驟五接菌發(fā)酵接種12ml的放線菌種子液((每mL種子液中含有放線菌1.2 X IO7Cfu)，倒入發(fā)酵培養(yǎng)基，調(diào)pH為7.0，用玻璃棒混合均勻后用發(fā)酵封口膜封住瓶口，放入30°C的培養(yǎng)箱發(fā)酵，發(fā)酵時間96h。
[0092]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為19.8%，得到的多肽制品無苦味。
[0093]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0094]實施例10
[0095]步驟一研磨粉碎將牡丹餅柏用粉碎機(jī)粉碎至80目，以上的牡丹餅柏是牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅柏。
[0096]步驟二脫脂將粉碎后的餅柏裝入索氏抽提器中脫脂7h后，取出風(fēng)干獲得脫脂牡丹餅柏粉備用。
[0097]步驟三制漿取IOg脫脂牡丹餅柏粉，加90ml的95°C熱水，攪拌均勻讓牡丹餅柏粉充分溶解在熱水里。
[0098]步驟四液體酶解在溫度為55°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g堿性蛋白酶，保溫酶解4h，pH 為 9.0。
[0099]步驟五滅酶待酶解完畢后,迅速加熱降解物至80°C,對酶解液進(jìn)行滅酶15min。
[0100]步驟六脫苦脫色待酶解液降溫至40°C時，加入0.5%活性炭攪拌處理30min。
[0101]步驟七濾液分離通過板框過濾機(jī)去除酶解液中的固體雜質(zhì)，從而得到牡丹多肽粗濾液。
[0102]步驟八精煉將牡丹多肽粗濾液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為5KDa0
[0103]步驟九干燥在0.15個大氣壓下，90°C噴霧干燥。
[0104]步驟十滅菌140°C高溫瞬時滅菌8s，得到牡丹多肽制品。
[0105]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為24.9%，得到的多肽制品無苦味。
[0106]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0107]實施例11
[0108]步驟一研磨粉碎將牡丹餅柏用粉碎機(jī)粉碎至100目，以上的牡丹餅柏是牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅柏。
[0109]步驟二脫脂將粉碎后的餅柏裝入索氏抽提器中脫脂6h后，取出風(fēng)干獲得脫脂牡丹餅柏粉備用。
[0110]步驟三制漿取IOg脫脂牡丹餅柏粉，加90ml的95°C熱水，攪拌均勻讓牡丹餅柏粉充分溶解在熱水里。
[0111]步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g中性蛋白酶，保溫酶解4h，pH 為 6.5。
[0112]步驟五滅酶待酶解完畢后，迅速加熱降解物至85°C，對酶解液進(jìn)行滅酶lOmin。
[0113]步驟六脫苦脫色待酶解液降溫至50°C時，加入0.15%活性炭攪拌處理40min。
[0114]步驟七濾液分離4000r/min離心25min,取上清液,從而得到牡丹多肽粗液。
[0115]步驟八精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為IOKDa。 [0116]步驟九干燥在0.2個大氣壓下，80°C噴霧干燥。
[0117]步驟十滅菌140°C高溫瞬時滅菌8s，得到牡丹多肽制品。
[0118]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為21.4%，得到的多肽制品無苦味。
[0119]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0120]實施例12
[0121]步驟一研磨粉碎將牡丹餅柏用粉碎機(jī)粉碎至80目，以上的牡丹餅柏是牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的餅柏。
[0122]步驟二脫脂將粉碎后的餅柏裝入索氏抽提器中脫脂6h后，取出風(fēng)干獲得脫脂牡丹餅柏粉備用。
[0123]步驟三制漿取IOg脫脂牡丹餅柏粉，加90ml的95°C熱水，攪拌均勻讓牡丹餅柏粉充分溶解在熱水里。
[0124]步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量6%加0.6g酸性蛋白酶，保溫酶解
3.5h, pH 為 3.5。
[0125]步驟五滅酶待酶解完畢后，迅速加熱降解物至95°C，對酶解液進(jìn)行滅酶8min。
[0126]步驟六脫苦脫色待酶解液降溫至65°C時，加入0.10%活性炭攪拌處理30min。
[0127]步驟七濾液分離10000r/min離心20min,取上清液,從而得到牡丹多肽粗液。
[0128]步驟八精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為30KDao
[0129]步驟九干燥在0.15個大氣壓下，90°C噴霧干燥。
[0130]步驟十滅菌140°C高溫瞬時滅菌8s，得到牡丹多肽制品。
[0131]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為19.8%，得到的多肽制品無苦味。
[0132]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0133]實施例13
[0134]步驟一至步驟三、步驟五至七、步驟九至步驟十，同實施例11。
[0135]步驟四液體酶解在溫度為55°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g木瓜蛋白酶，保溫酶解4h，pH 為 7.5。
[0136]步驟八精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為5KDa0
[0137]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為23.2%，得到的多肽制品無苦味。
[0138]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0139]實施例14
[0140]步驟一至步驟三、步驟五至步驟十，同實施例11。
[0141]步驟四液體酶解在溫度為45°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g菠蘿蛋白酶，保溫酶解5h，pH 為 6.6。
[0142]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為21.5%，得到的多肽制品無苦味。
[0143]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0144]實施例15
[0145]步驟一至步驟三、步驟五至步驟十，同實施例12。
[0146]步驟四液體酶解在溫度為32°C，按干基質(zhì)量3%加0.3g胃蛋白酶，保溫酶解3h，pH 為 2.5。
[0147]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為18.5%，得到的多肽制品無苦味。
[0148]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0149]實施例16
[0150]步驟一至步驟三、步驟五至步驟十，同實施例11。
[0151 ]步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量8%加0.8g胰蛋白酶，保溫酶解2.5h，
pH 為 7.5。
[0152]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為22.3%，得到的多肽制品無苦味。
[0153]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0154]實施例17
[0155]步驟一至步驟三、步驟五至步驟十，同實施例12。
[0156] 步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量4%加0.4g風(fēng)味蛋白酶，保溫酶解4h，pH 為 6.7。
[0157]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為19.8%，得到的多肽制品無苦味。
[0158]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0159]實施例18
[0160]步驟一至步驟三、步驟五至七、步驟九至步驟十，同實施例10。
[0161]步驟四液體酶解在溫度為50.5°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g混合蛋白酶，堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、中性蛋白酶質(zhì)量比為8: 5: 7，保溫酶解6h，pH為8.0。
[0162]步驟八精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為IKDa。
[0163]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為39.9%，得到的多肽制品無苦味。
[0164]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0165]實施例19
[0166]步驟一至步驟三、步驟五至七、步驟九至步驟十，同實施例10。
[0167]步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量10%加Ig混合蛋白酶，堿性蛋白酶、中性蛋白酶質(zhì)量比為15: 4，保溫酶解3h，pH為7.0。[0168]步驟八精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為3KDa0
[0169]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為31.1%，得到的多肽制品無苦味。
[0170]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0171]實施例20
[0172]步驟一至步驟三、步驟五至步驟七、步驟九至步驟十，同實施例10。
[0173]步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g混合蛋白酶，中性蛋白酶、木瓜蛋白酶質(zhì)量比為1:1，保溫酶解4.5h，pH為7.5。
[0174]步驟八精煉將牡丹多肽粗液用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，截留分子量為3KDa0
[0175]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為32.8%，得到的多肽制品無苦味。
[0176]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0177]實施例21
[0178]步驟一至步驟三、步驟五至步驟十，同實施例20。
[0179]步驟四液體酶解先在溫度為55°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g堿性蛋白酶，保溫酶解2h，pH為8.0。再在溫度為55°C，按干基質(zhì)量3%加0.3g木瓜蛋白酶，保溫酶解2.5h，pH為6.5o
[0180]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為32.2%，得到的多肽制品無苦味。
[0181]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0182]實施例22
[0183]步驟一至步驟三、步驟五至步驟十，同實施例18。
[0184]步驟四液體酶解在溫度為50°C，按干基質(zhì)量5%加0.5g混合蛋白酶，堿性蛋白酶、胰蛋白酶質(zhì)量比為1:1，保溫酶解3h，pH為8.0。
[0185]經(jīng)測定，本實施例的餅柏的水解度為33.3%，得到的多肽制品無苦味。
[0186]上述制品直接作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
[0187]實施例23牡丹多肽顆粒劑的制備
[0188]按照下列重量百分比稱取各組分:實施例1-22任一的牡丹多肽粉末35.0%、蔗糖45.0%，變性淀粉16.0 %、檸檬酸2.0 %、蘋果酸2.0%。
[0189]先將上述各物料進(jìn)行粉碎或過篩；按配方量依次稱取粉碎或過篩后的物料；將稱量好的物料投入混合機(jī)，混合均勻；加入適量酒精，通過制粒機(jī)進(jìn)行制粒；將制好的顆粒用干燥設(shè)備進(jìn)行干燥，隨后通過整粒機(jī)進(jìn)行整粒；最后分裝，即制得本發(fā)明所述的牡丹多肽顆粒劑。
[0190]實施例24牡丹多肽片劑的制備
[0191]按照下列重量百分比稱取各組分:實施例1-22任一的牡丹多肽粉末35.0%、蔗糖28.5 %、淀粉10.0 %、包衣維生素Cl.5 %、微晶纖維素15.0 %、糊精8.0 %、薄膜包衣劑
1.0 %、硬脂酸鎂0.6%、二氧化硅0.4%。
[0192]先將上述各物料進(jìn)行粉碎或過篩；按配方量依次稱取粉碎或過篩后的物料；將稱量好的物料投入混合機(jī)，混合均勻；加入適量酒精，通過制粒機(jī)進(jìn)行制粒；將制好的顆粒用干燥設(shè)備進(jìn)行干燥，隨后通過整粒機(jī)進(jìn)行整粒；加入硬脂酸鎂、二氧化硅進(jìn)行總混，將總混均勻后的物料通過壓片機(jī)進(jìn)行壓片，素片暫存，備用；將薄膜包衣劑加入適量水中，攪拌均勻，配制成濃度為5.0-15.0%的包衣液，通過包衣機(jī)對壓好的素片進(jìn)行包衣處理；最后分裝，即制得本發(fā)明所述牡丹多肽的片劑。
[0193]實施例25牡丹多肽膠囊的制備
[0194]按照下列重量百分比稱取各組分:實施例1-22任一的牡丹多肽粉末54.0%、包衣維生素C9.0%、微晶纖維素36.0%、硬脂酸鎂0.6%、二氧化硅0.4%。
[0195]先將上述各物料進(jìn)行粉碎、過篩；按配方量依次稱取粉碎、過篩后的物料；將稱量好的物料投入混合機(jī)，混合均勻；然后通過膠囊充填機(jī)對膠囊進(jìn)行填充；最后分裝，即制得本發(fā)明所述的牡丹多肽膠囊。
[0196]實施例26牡丹多肽口服液的制備 [0197]按照下列重量百分比稱取各組分:實施例1-22任一的牡丹多肽粉末30.0%、蜂蜜10.0% ;果糖20.0%、維生素C鈉鹽5%、蘋果酸2.0%、檸檬酸1.6%、卡拉膠1.0%、甜菊糖甙0.2%、安賽蜜0.2 %、30 %純凈用水。
[0198]按配方量稱取上述各物料，投入水中，充分溶解；然后將所得溶液轉(zhuǎn)移至口服液灌裝機(jī)中，注入容器內(nèi)；滅菌，即制得本發(fā)明所述的牡丹多肽口服液。
【權(quán)利要求】
1.一種牡丹多肽的制備方法，其特征在于，以牡丹籽壓榨制備牡丹籽油后的牡丹餅柏為原料制備而成。
2.如權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述方法包括將牡丹餅柏(I)脫脂、(2)加水制漿、(3)微生物發(fā)酵、(4)離心或過濾制備而成，或者將牡丹餅柏(I)脫脂、(2)加水制漿、(3)蛋白酶水解、(4)脫苦脫色、(5)離心或過濾制備而成。
3.如權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述方法在離心或過濾后還包括超濾膜精煉的步驟。優(yōu)選的，所述方法在精煉后還包括干燥、滅菌的步驟。
4.如權(quán)利要求2或3所述方法，其特征在于，所述微生物選自毛霉、米曲霉、黑曲霉、納豆桿菌、放線菌、枯草芽孢桿菌等中的一種或者幾種。
5.如權(quán)利要求2或3所述方法，其特征在于，所述的蛋白酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、堿性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、或者毛霉、米曲霉、黑曲霉、納豆桿菌、放線菌、枯草芽孢桿菌等產(chǎn)生的蛋白酶等中的一種或者幾種。
6.如權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，所述超濾精煉步驟為將離心或者過濾得到的牡丹多肽液體用超濾膜按分子量進(jìn)行分級分離，得到不同分子量牡丹多肽溶液；截留分子量為30Kda以下，優(yōu)選IOKda 以下，更優(yōu)選5Kda以下，或3Kda以下，最優(yōu)選為IKda以下。
7.權(quán)利要求1-6任一方法制備的牡丹多肽。
8.如權(quán)利要求7所述的多肽，其特征在于，所述多肽是粉末、或進(jìn)一步加工成顆粒、片劑、膠囊、口服液等形式。
9.權(quán)利要求7或8所述多肽的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用包括作為營養(yǎng)食品、保健食品、運動員食品或蛋白飲料。
10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述營養(yǎng)食品是為病人或者嬰兒提供的營養(yǎng)食品；所述保健食品是為老年人或者亞健康人群提供的保健食品，所述蛋白飲料是指牡丹多肽單獨沖飲或者作為現(xiàn)有飲料的伴侶沖飲。
【文檔編號】C07K14/415GK103937865SQ201410185874
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】李 杰, 胡良富 申請人:李 杰