以杜仲葉提取綠原酸后藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法
【專利摘要】一種以杜仲葉提取綠原酸后藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法，包括以食用乙醇從杜仲葉提取綠原酸后藥渣中提取桃葉珊瑚苷粗提物，并將該桃葉珊瑚苷粗提物以NKA-2大孔樹(shù)脂分離純化以得到桃葉珊瑚苷提取物。該方法采用食用乙醇安全無(wú)毒地提取并分離桃葉珊瑚苷，不僅能工業(yè)化生產(chǎn)安全有效的不同純度規(guī)格的桃葉珊瑚苷提取物，變廢為寶，而且真正地實(shí)現(xiàn)了安全、簡(jiǎn)便、合理、經(jīng)濟(jì)的杜仲資源的高值化利用和系列產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)，充分體現(xiàn)出綠色化學(xué)生產(chǎn)的理念和循環(huán)經(jīng)濟(jì)的策略。
【專利說(shuō)明】以杜仲葉提取綠原酸后藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從杜仲葉提取綠原酸后的藥渣中制備桃葉珊瑚苷的綠色化學(xué)工藝技術(shù)，尤指一種采用食用乙醇提取杜仲葉提取綠原酸后藥渣中桃葉珊瑚苷然后以NKA-2大孔樹(shù)脂分離純化中的桃葉珊瑚苷的綠色分離純化方法。
【背景技術(shù)】
[0002]杜仲((Eucommia Ulmoides Olive)是杜仲科杜仲屬植物,落葉喬木。我國(guó)適應(yīng)杜仲生長(zhǎng)的地域十分廣闊，可用于種植杜仲的土地達(dá)1000萬(wàn)公頃以上，目前全國(guó)杜仲栽培面積約35萬(wàn)公頃，占世界杜仲種植總面積的99%以上，具有獨(dú)特的資源優(yōu)勢(shì)，我國(guó)每年可產(chǎn)葉400萬(wàn)噸。
[0003]桃葉珊瑚苷(aucubin,AU)的化學(xué)名為β _D_批喃葡萄糖苷,為環(huán)烯醚職苷類化合物，環(huán)烯醚萜類物質(zhì)一般味苦，但具有多種生理活性。桃葉珊瑚苷具有清濕熱、利小便、鎮(zhèn)痛、降壓、保肝護(hù)肝、抗腫瘤、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、抗骨質(zhì)疏松等多種生理活性，主要用于醫(yī)藥保健、日用化工和飼料添加等行業(yè)，與人類生活息息相關(guān)。
[0004]目前分離純化桃葉珊瑚苷常采用醇提鉛鹽沉淀法、薄層色譜分離法和大孔吸附樹(shù)月旨法等。 [0005]醇提鉛鹽沉淀法:用乙醇提取，將提取液濃縮制備浸膏，再加水轉(zhuǎn)溶，然后加鉛鹽沉淀，濾過(guò)沉淀物，將濾液通入H2S除鉛，減壓濃縮后將殘?jiān)帽芙猓瑢⒈簼饪s，得到桃葉珊瑚苷粗品，最后重結(jié)晶得純品。因?yàn)殂U沉法對(duì)桃葉珊瑚苷有一定的選擇性，所以此方法可得到較純的桃葉珊瑚苷，但是由于使用了有毒的重金屬鉛，所以可能對(duì)桃葉珊瑚苷產(chǎn)品造成一定的污染。
[0006]薄層色譜分離法:以甲醇-氯仿-石油醚-醋酸乙酯為展開(kāi)劑，用薄層色譜法予以分離。該法每次測(cè)定前要制備一定數(shù)量的薄板，而薄板制備的好壞直接影響著色譜及分離結(jié)果，所以測(cè)定者必須具備良好的制板技術(shù)；加之硅膠的吸附作用，如果所吸附的桃葉珊瑚苷不能完全洗脫下來(lái)，勢(shì)必導(dǎo)致分離結(jié)果偏低。
[0007]大孔吸附樹(shù)脂法:大孔吸附樹(shù)脂是一種不含交換基團(tuán)、具有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑，也是一種親脂性物質(zhì)。它具有選擇性好、機(jī)械強(qiáng)度高、再生處理方便、吸附速度快、操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)，所以特別適合于分離提純水溶性化合物。但是該方法耗用時(shí)間長(zhǎng)，清洗吸附樹(shù)脂比較困難。目前應(yīng)用于純化桃葉珊瑚苷的吸附樹(shù)脂主要有S-8型樹(shù)脂、HZ-820型樹(shù)脂和SIP1-7型樹(shù)脂。
[0008]杜仲葉含有多種類型的化合物，其性質(zhì)差異很大(從極性到非極性);同一類型化合物中異構(gòu)體多，其差異性又很小，難以分離。其中一些化合物熱敏感性強(qiáng)，又極易氧化、異構(gòu)、分解。顯然上述有關(guān)杜仲葉桃葉珊瑚苷的提取、分離純化方法雖能制備具有一定純度和得率的杜仲葉桃葉珊瑚苷提取物，但由于受到技術(shù)手段的限制以及加工過(guò)程中使用了大量的有毒有機(jī)溶劑或化學(xué)制劑，使得產(chǎn)品明顯存在安全性欠佳或者純度與得率不高、設(shè)備成本過(guò)高、產(chǎn)品的品質(zhì)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力不足等缺陷。[0009]目前對(duì)杜仲葉的利用大部分都局限于杜仲綠原酸的提取利用，提取后的殘留藥渣直接丟棄，不僅沒(méi)有使杜仲葉資源得到充分高效合理利用，而且造成了嚴(yán)重環(huán)境污染。為此，本發(fā)明利用此藥渣通過(guò)合理利用，以期實(shí)現(xiàn)杜仲葉的高值化利用，并為桃葉珊瑚苷藥理藥效的研究以及功能性終端產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供支撐。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是:針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種高效、綠色安全、低成本、高得率、高純度適用于工業(yè)生產(chǎn)的以杜仲葉提取綠原酸后的藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法。
[0011]為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:一種以杜仲葉提取綠原酸后藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法，該方法包括以體積濃度為40%~80%的食用乙醇于60°C~100°C條件下從杜仲葉提取綠原酸后藥渣中提取桃葉珊瑚苷粗提物，提取時(shí)間Ih~3h，還包括將所述桃葉珊瑚苷粗提物以NKA-2大孔樹(shù)脂分離純化的步驟:
將所述桃葉珊瑚苷粗提物用蒸懼水溶解，配制成濃度為0.1 mg/mL~0.3 mg/mL的溶解液，將2.0BV~4.0BV溶解液以2.0 BV/h~4.0 BV/h的流速通過(guò)NKA-2大孔樹(shù)脂的層析柱進(jìn)行吸附分離，至吸附飽和；然后用IBV~3BV的蒸餾水以lBV/h~3BV/h流速?zèng)_洗至無(wú)色，再用IBV~3BV的40%~60%體積濃度的食用乙醇以lBV/h~3.0 BV/h的流速洗脫桃葉珊瑚苷，收集洗脫液，將洗脫液在-0.05 MPa~-0.09MPa、45°C~55°C條件下濃縮，回收食用乙醇，-0.05 MPa~-0.09MPa、40°C~60°C真空冷凍干燥，即得。 [0012]上述的以體積濃度為40%~80%且pH為5~8的食用乙醇于60°C~100°C從杜仲葉提取綠原酸后藥渣中提取桃葉珊瑚苷粗提物是指:將杜仲葉提取綠原酸后藥渣用體積濃度為40%~80%且pH為5~8的食用乙醇于60V~100°C下以1:8~1:12的料液比提取I~3h，將浸提液過(guò)濾并將濾液在-0.05 MPa~-0.09MPa、40°C~50°C下濃縮，回收食用乙醇溶劑，-0.05 MPa~-0.09MPa、40°C~60°C真空干燥，即得桃葉珊瑚苷粗提物。
[0013]本發(fā)明方法中，采用經(jīng)靜態(tài)吸附與解吸篩選出來(lái)的NKA-2大孔吸附樹(shù)脂吸附杜仲葉桃葉珊瑚苷，對(duì)未被大孔吸附樹(shù)脂吸附部分，經(jīng)減壓濃縮回收食用乙醇。對(duì)上述步驟中吸附在大孔吸附樹(shù)脂的杜仲葉桃葉珊瑚苷進(jìn)行洗脫回收時(shí)，先用蒸餾水洗至無(wú)色，再用食用乙醇洗脫杜仲葉桃葉珊瑚苷，得到的桃葉珊瑚苷的純度和得率都較高。
[0014]本方法中使用的NKA-2大孔樹(shù)脂的處理:新樹(shù)脂采用體積濃度為95%的乙醇浸泡48h，之后用乙醇洗到無(wú)混濁，然后用蒸餾水洗至無(wú)醇味。用過(guò)的樹(shù)脂先用體積濃度為95%的乙醇洗至無(wú)色，然后用蒸餾水洗至無(wú)醇味；用質(zhì)量濃度為5%的鹽酸洗至無(wú)色，再用水洗至中性；用質(zhì)量濃度為5%的NaOH洗至無(wú)色后，用水洗至中性，備用。
[0015]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:
1、本發(fā)明采用工業(yè)生產(chǎn)中杜仲葉提取綠原酸后的藥渣經(jīng)提取、分離純化得到桃葉珊瑚苷，真正做到了變廢為寶，資源高值化利用。
[0016]2、集成采用食用乙醇安全無(wú)毒地提取杜仲葉活性成分、NKA-2大孔樹(shù)脂分離純化桃葉珊瑚苷等方法，不僅能工業(yè)化生產(chǎn)安全有效的不同純度規(guī)格的桃葉珊瑚苷提取物以用于后續(xù)的保肝護(hù)肝、抗炎、抗氧化等功能產(chǎn)品的研發(fā)，而且真正地實(shí)現(xiàn)了安全、簡(jiǎn)便、合理、經(jīng)濟(jì)的杜仲葉資源的高值化利用和系列產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)，充分體現(xiàn)出綠色化學(xué)生產(chǎn)的理念和循環(huán)經(jīng)濟(jì)的策略。因而，本發(fā)明具有理論新穎、技術(shù)科學(xué)、操作及產(chǎn)品安全、工藝簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)可行、環(huán)境友好等特點(diǎn)。
[0017]3、采用天然產(chǎn)物化學(xué)及現(xiàn)代化生產(chǎn)技術(shù)提取、分離純化杜仲葉主要活性成分桃葉珊瑚苷，將其制成國(guó)際通行的各種純度規(guī)格的桃葉珊瑚苷提取物，較好地順應(yīng)和滿足現(xiàn)代功能食品、保健品、藥品、日化用品等健康領(lǐng)域，對(duì)其天然、安全、有效、方便的需求。
[0018]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
將Ikg杜仲葉提取綠原酸后的藥渣用40%體積濃度且pH為6的食用乙醇8 L, 60°C下浸提I小時(shí)后過(guò)濾，濾液在-0.05 MPa、45°C下濃縮，回收食用乙醇溶劑，-0.05 MPa, 50°C真空干燥，得桃葉珊瑚苷粗提物。測(cè)得桃葉珊瑚苷得率57.8%，純度為2.83%。
[0019]選用已處理的NKA-2大孔吸附樹(shù)脂作為桃葉珊瑚苷的分離純化樹(shù)脂，將上述桃葉珊瑚苷粗提物用蒸餾水制成濃度為0.1 mg/mL的溶解液。將2 BV溶解液以2.0 BV/h的流速通過(guò)裝有NKA-2大孔樹(shù)脂的分離柱進(jìn)行吸附分離，至吸附飽和，然后用IBV的蒸餾水以lBV/h流速?zèng)_洗至無(wú)色，再用1.5 BV體積濃度為40%的食用乙醇以2.0 BV/h的流速進(jìn)行洗脫桃葉珊瑚苷，收集洗脫液，將洗脫液在-0.05MPa、45°C條件下濃縮，回收食用乙醇，-0.05MPa、50°C條件下真空干燥，便得純化的桃葉珊瑚苷提取物，測(cè)得桃葉珊瑚苷得率為37.11%，純度為29.3 %。
[0020]實(shí)施例2: 將Ikg杜仲葉提取綠原酸后的藥渣用60%體積濃度且pH為7的食用乙醇10L，80°C下浸提2小時(shí)后過(guò)濾，濾液在-0.07 MPa、40°C下濃縮，回收食用乙醇溶劑，-0.07 MPa,55°C下真空干燥，得桃葉珊瑚苷粗提物。測(cè)得桃葉珊瑚苷得率59.1%，純度為2.61%。
[0021]選用已處理的NKA-2大孔吸附樹(shù)脂作為杜仲葉桃葉珊瑚苷的分離純化樹(shù)脂，將上述桃葉珊瑚苷粗提物用蒸餾水配制成濃度為0.2mg/mL的溶液。將3.0 BV溶解液以2.0BV/h的流速通過(guò)裝有NKA-2大孔樹(shù)脂的分離柱進(jìn)行吸附分離，至吸附飽和，然后用2BV的蒸餾水以2BV/h流速?zèng)_洗至無(wú)色，再用2.0 BV體積濃度為50%的食用乙醇以3.0 BV/h的流速進(jìn)行洗脫桃葉珊瑚苷，收集洗脫液，將洗脫液在-0.05MPa、45°C條件下濃縮，回收食用乙醇，-0.07 MPa、55°C下真空干燥，便得純化的桃葉珊瑚苷提取物，測(cè)得桃葉珊瑚苷得率為60.02%,純度為 30.37 %。
[0022]實(shí)施例3:
將Ikg杜仲葉提取綠原酸后的藥渣用80%體積濃度且pH為8的食用乙醇12L，100°C下浸提3小時(shí)后過(guò)濾，濾液在-0.09 MPa、50°C下濃縮，回收食用乙醇溶劑，-0.09 MPa,60°C真空干燥，得桃葉珊瑚苷粗提物。測(cè)得桃葉珊瑚苷得率63.4%，純度為2.44%。
[0023]選用已處理的NKA-2大孔吸附樹(shù)脂作為杜仲葉桃葉珊瑚苷的分離純化樹(shù)脂，將上述桃葉珊瑚苷粗提物用蒸餾水配制成濃度為0.3 mg/mL的溶液。將3.5 BV該溶解液以3.0BV/h的流速通過(guò)裝有NKA-2大孔樹(shù)脂的分離柱進(jìn)行吸附分離，至吸附飽和，然后用3BV的蒸餾水以3BV/h流速?zèng)_洗至無(wú)色，再用2.5 BV體積濃度為60%的食用乙醇以4.0 BV/h的流速進(jìn)行洗脫桃葉珊瑚苷，收集洗脫液，將洗脫液在-0.09MPa、55°C條件下濃縮，回收食用乙醇，-0.09 MPa、60°C真空干燥，便得純化的桃葉珊瑚苷提取物，測(cè)得桃葉珊瑚苷得率為58.06%,純度為 26.73 %。
【權(quán)利要求】
1.一種以杜仲葉提取綠原酸后藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法，該方法包括以體積濃度為40%~80%的食用乙醇于60V~100°C條件下從杜仲葉提取綠原酸后藥渣中提取桃葉珊瑚苷粗提物，提取時(shí)間Ih~3h，其特征在于還包括將所述桃葉珊瑚苷粗提物以NKA-2大孔樹(shù)脂分離純化的步驟: 將所述桃葉珊瑚苷粗提物用蒸懼水溶解，配制成濃度為0.1 mg/mL~0.3 mg/mL的溶解液，將2.0BV~4.0BV溶解液以2.0 BV/h~4.0 BV/h的流速通過(guò)NKA-2大孔樹(shù)脂的層析柱進(jìn)行吸附分離，至吸附飽和；然后用IBV~3BV的蒸餾水以lBV/h~3BV/h流速?zèng)_洗至無(wú)色，再用IBV~3BV的40%~60%體積濃度的食用乙醇以lBV/h~3.0 BV/h的流速洗脫桃葉珊瑚苷，收集洗脫液，將洗脫液在-0.05 MPa~-0.09MPa、45°C~55°C條件下濃縮，回收食用乙醇，-0.05 M Pa~-0.09MPa、40°C~60°C真空冷凍干燥，即得。
2.如權(quán)利要求1所述的以杜仲葉提取綠原酸后藥渣制備桃葉珊瑚苷的方法，其特征在于:所述以體積濃度為40%~80%的食用乙醇于60V~100°C從杜仲葉提取綠原酸后藥渣中提取桃葉珊瑚苷粗提物是指:將杜仲葉提取綠原酸后藥渣用體積濃度為40%~80%且pH為5~8的食用乙醇于60°C~100°C下以1:8~1:12的料液比提取I~3h，將浸提液過(guò)濾并將濾液在-0.05 MPa~-0.09MPa、40°C~50°C下濃縮，回收食用乙醇溶劑，-0.05MPa~-0.09MPa、40°C~60°C真空干燥，即得桃葉珊瑚苷粗提物。
【文檔編號(hào)】C07H17/04GK103980331SQ201410228653
【公開(kāi)日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年5月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月28日
【發(fā)明者】盛達(dá)成, 肖文軍, 劉家波, 馮林 申請(qǐng)人:湖南天下康生物科技有限公司