一種從積雪草中提取積雪草苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從積雪草中提取積雪草苷的方法，其處理步驟包括：原料粉碎，過80目篩，復(fù)合酶發(fā)酵，發(fā)酵后的原料加入5~8倍的50~60%的乙醇，置于雙頻超聲提取器中，超聲頻率分別為40KHz、80KHz，功率為400~600W，于50~60℃提取60~90min，過濾，濃縮，石油醚-水萃取，取下層，經(jīng)氧化鋁柱分離純化、濃縮、重結(jié)晶等步驟，得到積雪草苷。本發(fā)明提取時(shí)間短、得率高、操作方便、安全可靠，是一種高效節(jié)能的積雪草苷提取分離的方法，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種從積雪草中提取積雪草苷的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種積雪草中提取積雪草苷的方法，具體涉及一種復(fù)合酶發(fā)酵協(xié)同雙頻超聲波提取積雪草苷的方法，屬于天然植物提取產(chǎn)物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]積雪草為傘形科植物的干燥全草，其性含，味苦、辛，具有清熱利濕，解毒消腫之功效，主要用于濕熱黃疸、中暑腹瀉、砂淋、血淋、癰腫瘡毒、跌撲損傷等癥。其主要成分為積雪草苷和羥基積雪草苷等三萜皂苷類成分，具有促進(jìn)傷口愈合，刺激肉芽生長(zhǎng)，促進(jìn)表皮角質(zhì)化，并有助于形成新的結(jié)締組織，對(duì)燒傷增生性癜痕有明顯療效。
[0003]酶工程技術(shù)，通過選用恰當(dāng)?shù)拿钢苿?，如纖維素酶、果膠酶、蛋白酶等與植物細(xì)胞作用，破壞細(xì)胞壁的致密結(jié)構(gòu)，引起細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)間結(jié)構(gòu)產(chǎn)生局部疏松、膨脹、崩潰等變化，減小細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)等傳質(zhì)屏障對(duì)有效成分從細(xì)胞內(nèi)向提取介質(zhì)擴(kuò)散的傳質(zhì)阻力，從傳質(zhì)角度促使有效成分的提取率提聞。
[0004]雙頻超聲法是一門新興的技術(shù)，雙頻超聲同時(shí)輻射，能顯著地增加空化效果，減少駐波所造成的死角，在低溫下即可得到高的提取率，為熱不穩(wěn)定物質(zhì)的提取提供了一種新的強(qiáng)化方法。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，未見與本發(fā)明相同的的公開文獻(xiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡(jiǎn)單、得率高、提取時(shí)間短且安全可靠的從積雪草中提積雪草苷的方法。
[0006]本發(fā)明包括以下步驟:
積雪草粉碎，過80目篩，將相當(dāng)于積雪草粉末f2%的復(fù)合酶噴灑其上，薄膜包裹，堆積在溫度35~45°C的暗室內(nèi)，發(fā)酵15~24h，發(fā)酵后的原料加入5~8倍的50~60%的乙醇，置于雙頻超聲提取器中，超聲頻率分別為40KHz、80KHz，功率為40(T600W，于5(T60°C提取6(T90min，過濾，濃縮，石油醚-水萃取，取下層，上氧化鋁柱，1(T15BV的50~70%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮，甲醇重結(jié)晶2次，得到積雪草苷。
[0007]本發(fā)明所述的復(fù)合酶為纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶按重量比0.5:0.3:0.2的混合物。
[0008]本發(fā)明所述的超聲功率為雙頻超聲作用時(shí)總功率(40KHz與80KHz各取一半)。
[0009]本發(fā)明的有益效果在于:(I)采用復(fù)合酶處理，能破壞植物的細(xì)胞壁，有利于有效成分的溶出，大大縮短處理時(shí)間，提高生產(chǎn)效率；(2)采用雙頻超聲萃取，利用超聲的空化作用，減少駐波所造成的死角，加速積雪草苷的溶出；(3)本發(fā)明操作方便，工藝簡(jiǎn)單，得率高，且生產(chǎn)安全可靠。
[0010]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
[0011]【具體實(shí)施方式】:實(shí)施例1:
積雪草粉碎，過80目篩，取Ikg粉末，將相當(dāng)于積雪草粉末1%的復(fù)合酶(纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶的重量比為0.5:0.3:0.2)噴灑其上，薄膜包裹，堆積在溫度35°C的暗室內(nèi)，發(fā)酵24h，發(fā)酵后的原料加入8倍的50%的乙醇，置于雙頻超聲提取器中，超聲頻率分別為40KHz、80KHz，功率為400W，于60°C提取60min，過濾，濃縮，石油醚-水萃取，取下層，上氧化鋁柱，1BV的50%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮，甲醇重結(jié)晶2次，得到積雪草苷10.2g，純度為90.5%，得率為1.02%。
[0012]實(shí)施例2:
積雪草粉碎，過80目篩，取Ikg粉末，將相當(dāng)于積雪草粉末1.5%的復(fù)合酶(纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶的重量比為0.5:0.3:0.2)噴灑其上，薄膜包裹，堆積在溫度40°C的暗室內(nèi)，發(fā)酵20h，發(fā)酵后的原料加入6倍的60%的乙醇，置于雙頻超聲提取器中，超聲頻率分別為40KHz、80KHz，功率為600W，于55°C提取80min，過濾，濃縮，石油醚-水萃取，取下層，上氧化鋁柱，12BV的60%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮，甲醇重結(jié)晶2次，得到積雪草苷12.2g，純度為94.1%，得率為1.22%。
[0013]實(shí)施例3:
積雪草粉碎，過80目篩，取Ikg粉末，將相當(dāng)于積雪草粉末2%的復(fù)合酶(纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶的重量比為0.5:0.3:0.2)噴灑其上，薄膜包裹，堆積在溫度45°C的暗室內(nèi)，發(fā)酵15h，發(fā)酵后的原料加入5倍的55%的乙醇，置于雙頻超聲提取器中，超聲頻率分別為40KHz、80KHz，功率為500W，于50 V提取90min，過濾，濃縮，石油醚-水萃取，取下層，上氧化鋁柱，15BV的70% 的乙醇洗脫，洗脫液濃縮，甲醇重結(jié)晶2次，得到積雪草苷12.4g，純度為93.6%，得率為1.24%ο
【權(quán)利要求】
1.一種從積雪草中提取積雪草苷的方法，其特征在于，包括以下步驟:積雪草粉碎，過80目篩，將相當(dāng)于積雪草粉末f 2%的復(fù)合酶噴灑其上，薄膜包裹，堆積在溫度35~45°C的暗室內(nèi)，發(fā)酵15~24h，發(fā)酵后的原料加入5~8倍的50-60%的乙醇，置于雙頻超聲提取器中，超聲頻率分別為40ΚΗζ、80ΚΗζ，功率為40(T600W，于5(T60°C提取6(T90min，過濾，濃縮，石油醚-水萃取，取下層，上氧化鋁柱，1(T15BV的50-70%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮，甲醇重結(jié)晶2次，得到積雪草苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從積雪草中提取積雪草苷的方法，其特征在于，所述的復(fù)合酶為纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶按重量比0.5:0.3:0.2的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從積雪草中提取積雪草苷的方法，其特征在于，所述的超聲功率為雙頻超聲 作用時(shí)總功率(40ΚΗζ與80ΚΗζ各取一半)。
【文檔編號(hào)】C07J63/00GK104072569SQ201410266406
【公開日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司