一種由梔子黃色素制備高純度西紅花酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種由梔子黃色素制備高純度西紅花酸的方法，本發(fā)明采用硅膠柱層析法提取分離梔子黃色素得到純度較高的西紅花苷，將西紅花苷置于堿性條件下水解，可得到純度較高的西紅花酸；即梔子黃色素經(jīng)層析柱分離洗脫后，收集洗脫液，干燥，在高效液相色譜440nm波長(zhǎng)下檢測(cè)，測(cè)得西紅花苷的含量可達(dá)90%以上，經(jīng)堿性水解和N,N-二甲基酰胺重結(jié)晶后，在高效液相色譜420nm波長(zhǎng)下檢測(cè)，得到西紅花酸的純度可達(dá)95%以上，所得產(chǎn)物純度高，工藝可操作性強(qiáng)，可被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域。
【專利說(shuō)明】一種由梔子黃色素制備高純度西紅花酸的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種高純度西紅花酸的制備方法，即以桅子黃色素中西紅花苷為底物 制備西紅花酸的方法，屬于新醫(yī)藥領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 研究表明西紅花具有良好的抗腫瘤活性，同時(shí)具有抗病毒、抗氧化、抗凝血及免 疫調(diào)節(jié)等多種藥理作用，西紅花酸為西紅花中的主要活性成分之一，具有明顯的抗動(dòng)脈粥 樣硬化作用，但是西紅花作為名貴藥材，我國(guó)目前仍主要依賴進(jìn)口供藥用，雖然進(jìn)行引種栽 培，提供少量商品，但是因種源少、適宜栽培的地區(qū)有限、條件苛刻等因素，滿足不了市場(chǎng)的 需求，出現(xiàn)了供不應(yīng)求的局面。
[0003] 為解決這一局面，研究人員通過(guò)發(fā)展大規(guī)模培養(yǎng)西紅花細(xì)胞來(lái)高效提取純化西紅 花苷和西紅花酸，大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)將動(dòng)植物細(xì)胞在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行無(wú)菌繁殖的 技術(shù)，但是培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)物易受污染，培養(yǎng)細(xì)胞不穩(wěn)定，工藝過(guò)程復(fù)雜，操作勞動(dòng)強(qiáng)度 大，培養(yǎng)環(huán)境要求苛刻，并且難以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，因此，難以滿足西紅花酸的大量需求。
[0004] 此外，也可以用工業(yè)化學(xué)方法來(lái)制備西紅花酸，如：由2-萘酚用98%硫酸在低溫 橫化，加純喊使少量薛佛氏酸沉淀，濾去后從母液制得；或者以E-1, 4-二溴_2_ 丁烯和 亞磷酸三乙酯為起始物，通過(guò)Wittig-Horner反應(yīng)合成化合物2, 7-二甲基-2, 4, 6-辛三 烯-1，8-二醛；然后以E-2-甲基-2-丁烯酸為起始物經(jīng)過(guò)溴代、酯化合成E-2-甲基-2-丁 烯酸甲酯-4-膦酸二乙酯,兩化合物通過(guò)Wittig-Horner反應(yīng)生成西紅花酸二甲酯,然后將 西紅花酸二甲酯水解得西紅花酸?；し椒m然適用于大規(guī)模生產(chǎn)，但是生產(chǎn)過(guò)程污染嚴(yán) 重，產(chǎn)物也只能用于化工級(jí)應(yīng)用，不能作為藥品原料添加使用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中提取制備的西紅花酸純度不高，質(zhì)量指標(biāo)達(dá)不到 醫(yī)藥行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，其技術(shù)所用化學(xué)試劑毒性較大，對(duì)環(huán)境污染大，生產(chǎn)成本高等問(wèn)題，采用 硅膠層析柱提取分離桅子黃色素得到純度較大的西紅花苷，再對(duì)西紅花苷進(jìn)行堿性水解得 到純度在90%以上的西紅花酸，分離西紅花苷采用的是硅膠柱層析法，西紅花苷水解采用 堿性水解法。其機(jī)理如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種由桅子黃色素制備高純度西紅花酸的方法，按以下步驟進(jìn)行： 步驟一：分離西紅花苷 (1) 準(zhǔn)備：將硅膠與乙酸乙酯調(diào)勻，浸泡12h，備用，取適量桅子黃色素溶液，加水調(diào)成 糊狀，50°C烘干，研磨成粉狀，備用，以乙酸乙酯：甲醇：水為10-15:2-10:1-5的溶液作為硅 膠層析法洗脫流動(dòng)相； (2) 溶解：取精制的桅子黃色素適量，用95%甲醇溶解； (3) 上柱：取200?300目的柱層析硅膠適量，將步驟（2)中的溶解液緩慢加入硅膠中， 邊加邊攪拌，充分混勻，在一定溫度下將甲醇揮干，取一定量200?300目的柱層析硅膠， 用（1)中流動(dòng)相與硅膠混勻，裝柱，將拌有桅子黃色素精品的柱層析硅膠緩慢加入層析柱 中； (4) 洗脫：用上述步驟（1)中流動(dòng)相進(jìn)行洗脫除雜，并且收集洗脫溶液； (5) 干燥：將所得溶液進(jìn)行烘干，研磨成粉狀，置于干燥通風(fēng)處避光保存； (6) 分析檢測(cè)：將樣品在高效液相色譜440nm處進(jìn)行檢測(cè)； 步驟二：精制西紅花酸晶體 (1) 水解：取適量西紅花苷溶于一定量10%_20%的KOH水溶液中，控制溫度為 90°C -KKTC，恒溫?cái)嚢杌亓鞣磻?yīng)2h-3h ; (2) 酸化：待反應(yīng)停止，讓產(chǎn)物自然冷卻，滴加20%-30%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=2-3 ; (3) 干燥：抽濾，得濾餅，用水沖洗幾次濾餅，干燥得到粗品西紅花酸； (4) 除雜：將（3)中所得沉淀用95%甲醇溶解除雜，控制溫度50°C -60°C，回流30min， 冷卻，抽濾； (5) 結(jié)晶：將所得固體用N，N-二甲基酰胺重結(jié)晶，得到純凈的西紅花酸晶體； (6) 分析檢測(cè)：在檢查波長(zhǎng)為420nm處，用高效液相色譜法對(duì)西紅花酸含量進(jìn)行測(cè)定。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法中，其特征在于：所述步驟一中（1)的工藝條件是硅膠層 析法洗脫流動(dòng)相中各成分的體積比為乙酸乙酯：甲醇：水=10-15:2-10:1-5。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法中，其特征在于：所述步驟一中（2)的溶劑為95%甲醇。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法中，其特征在于：所述步驟一中（3)的工藝條件是柱層 析硅膠的規(guī)格為200?300目。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法中，其特征在于：所述步驟二中（1)的工藝條件是KOH 的濃度為10%_20%，控制溫度為90°C -KKTC。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法中，其特征在于：所述步驟二中（2)的鹽酸濃度為 20%-30%，pH 調(diào)節(jié)到 2-3。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法中，其特征在于：所述步驟二中（4)的工藝條件是控制 溫度在 50°C -60°C。
【文檔編號(hào)】C07C51/09GK104402702SQ201410666585
【公開(kāi)日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年11月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月20日
【發(fā)明者】王河?xùn)|, 李磊 申請(qǐng)人:威海諾達(dá)藥業(yè)集團(tuán)有限公司