一種連翹葉苷類組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種連翹葉苷類組合物，其經(jīng)下述步驟獲得：1）在60－85℃的水中直接加入連翹葉進(jìn)行提??；2）提取液固液分離棄去殘?jiān)瑸V液減壓濃縮后室溫靜置，分離沉淀和水層，沉淀經(jīng)水洗、干燥得連翹葉苷類成分Ⅰ；3）水層加入大孔吸附樹脂柱中，水洗脫至無色后，用30－90V%乙醇洗脫，回收洗脫液并濃縮干燥；或?qū)⑺畬佑盟柡偷恼〈既芤狠腿?，有機(jī)層經(jīng)減壓濃縮、干燥得連翹葉苷類成分Ⅱ；4）將連翹葉苷類成分Ⅰ和連翹葉苷類成分Ⅱ混合，粉碎，即得本發(fā)明連翹葉苷類組合物。該連翹葉苷類組合物具有抗菌、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等作用，可作為飼料添加劑、抗菌或抗病毒藥物應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中，能改善畜禽的生長(zhǎng)性能及健康狀況。
【專利說明】一種連翹葉苷類組合物及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物天然產(chǎn)物應(yīng)用研究【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種連翹葉苷類組合物及 其作為畜禽飼料添加劑的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 連翅(Thunb. ) Vahl 為木犀科 Oleaceae 連翅屬 Forsythia 落葉灌木，是中藥中最常用藥材之一，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、疏散風(fēng)熱的功效。我國(guó)連翹 資源豐富，南北部均有分布，以河南、山西、陜西產(chǎn)量最大。據(jù)研究，連翹屬植物葉子與果實(shí) 的成分有較好的一致性，并且葉子中的有效成分如連翹苷、連翹酯苷等苷類成分的含量均 比果實(shí)中的含量高。
[0003] 近年來，由于抗生素類飼料添加劑在畜禽飼料中的濫用，一方面會(huì)引起病原微生 物產(chǎn)生抗藥性，動(dòng)物疾病防治效果降低；另一方面會(huì)在肉蛋奶及環(huán)境中產(chǎn)生藥物殘留，威脅 人體健康。植物提取物具有低毒、低殘留等優(yōu)點(diǎn)，其活性物質(zhì)能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，提高動(dòng) 物抗病能力，改善動(dòng)物生產(chǎn)性能，已成為飼料添加劑研究熱點(diǎn)。
[0004]目前各種文獻(xiàn)資料中，尚未有將連翹葉苷類組合物作為飼料添加劑或獸用藥物應(yīng) 用于畜禽養(yǎng)殖中。中國(guó)專利201110209731. 3公布了一種從連翹葉中提取連翹苷和連翹酯 苷的方法，但對(duì)其苷類成分的組合及其組合物的具體應(yīng)用并未進(jìn)行研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的在于提供一種連翹葉苷類組合物及其作為畜禽飼料添加劑的應(yīng)用。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案： 一種連翹葉苷類組合物，其經(jīng)下述步驟獲得： 1) 在60 - 85°C的水中直接加入連翹葉進(jìn)行提取，每次提取時(shí)間0. 5 - 2h，提取2 - 4 次，連翹葉和水的重量比為1 :6-20; 2) 合并所得提取液，固液分離棄去殘?jiān)?，濾液減壓濃縮后室溫靜置，分離沉淀和水層， 沉淀經(jīng)水洗(蒸餾水洗2 - 4次)、干燥獲得連翹葉苷類成分I ; 3) 水層加入大孔吸附樹脂柱(如：D101、AB-8、HP-20等非極性樹脂）中，水洗脫至無色 后，用30-90V%乙醇洗脫，回收洗脫液并濃縮干燥；或者將水層用水飽和的正丁醇溶液萃 取1 一 3次，棄去水層，有機(jī)層經(jīng)減壓濃縮、干燥得連翹葉苷類成分II; 4) 將上述連翹葉苷類成分I和連翹葉苷類成分II混合，粉碎，即得本發(fā)明連翹葉苷類 組合物。
[0007] 步驟2)中減壓濃縮前后濾液的體積比優(yōu)選為7 - 15 :1，室溫靜置時(shí)間優(yōu)選為 10-48h。
[0008] 步驟2)所得連翹葉苷類成分I的主要成分為連翹苷。步驟3)所得連翹葉苷類成 分II的主要成分為連翹酯苷A;還含有連翹酯苷H、連翹脂素、連翹酯苷I、松脂素葡萄糖苷 等。
[0009] 上述連翹葉苷類組合物作為飼料添加劑、抗菌藥物或抗病毒藥物在畜禽養(yǎng)殖中的 應(yīng)用。
[0010] 具體的，所述畜禽可以為仔雞或仔豬等。
[0011] 所述連翹葉苷類組合物添加量可以按不低于飼料重量或飲水體積的0.1%。添加到 畜禽飼料或飲水中。
[0012] 本發(fā)明所述的連翹葉苷類組合物具有抗菌、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等作用，應(yīng)用于畜禽 養(yǎng)殖中可促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，改善畜禽的生長(zhǎng)性能及健康狀況，在飼料添加劑或獸用藥物上的 應(yīng)用前景廣闊，作為一種價(jià)格低廉的資源植物具有極大的開發(fā)價(jià)值。
[0013]和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果： 1) 本發(fā)明產(chǎn)品是純天然植物連翹葉經(jīng)提取精制而成的天然連翹葉苷類組合物，不含違 禁成分，與抗生素類添加劑相比具有無毒副作用、無藥物殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)、有益 于動(dòng)物和人類健康； 2) 本發(fā)明產(chǎn)品原料為目前廢棄不用的連翹葉，藥源豐富，價(jià)格低廉，生產(chǎn)應(yīng)用不受人畜 爭(zhēng)藥的限制； 3) 本發(fā)明產(chǎn)品采用提取、分離加工工藝，活性成分含量高，用量少，不影響飼料的營(yíng)養(yǎng) 配比。此外,成本低,在提高安全水準(zhǔn)的同時(shí)不過分加大生產(chǎn)成本甚至降低成本。

【具體實(shí)施方式】
[0014] 以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局 限于此。
[0015] 實(shí)施例1: 一種連翹葉苷類組合物，其經(jīng)下述步驟獲得： 1) 將5kg連翹葉加入到60L、溫度75°C的水中進(jìn)行提取，提取2次，每次提取I. 5h ; 2) 合并所得提取液，過濾，棄去殘?jiān)?，濾液減壓濃縮至IOL左右，室溫靜置24h，分離沉 淀和水層，沉淀蒸餾水洗3次、干燥獲得53g連翹葉苷類成分I; 3) 水層加入大孔吸附樹脂柱DlOl中，水洗脫至無色后，用60V%乙醇洗脫，回收洗脫液 并濃縮干燥得320g連翹葉苷類成分II; 4) 將上述連翹葉苷類成分I和連翹葉苷類成分II混合，粉碎，即得本發(fā)明連翹葉苷類 組合物373g。HPLC檢測(cè)，其中連翹苷含量為11. 3%，連翹酯苷A含量為27. 9%，連翹酯苷H 含量為5. 22%、連翹脂素含量為5. 06%、連翹酯苷I含量為3. 01%、松脂素葡萄糖苷含量為 2. 32%。
[0016] 實(shí)施例2: 一種連翹葉苷類組合物，其經(jīng)下述步驟獲得： 1) 將8kg連翹葉加入到80L、溫度85°C的水中進(jìn)行提取，提取2次，每次提取2h ; 2) 合并所得提取液，過濾，棄去殘?jiān)瑸V液減壓濃縮至15L左右，室溫靜置12h，分離沉 淀和水層，沉淀蒸餾水洗4次、干燥獲得97g連翹葉苷類成分I; 3) 將水層用水飽和的正丁醇溶液萃取2次，棄去水層，有機(jī)層經(jīng)減壓濃縮、干燥得506g 連翹葉苷類成分II; 4) 將上述連翹葉苷類成分I和連翹葉苷類成分II混合，粉碎，即得本發(fā)明連翹葉苷類 組合物603g。HPLC檢測(cè)，其中連翹苷含量為10. 8%，連翹酯苷A含量為26. 4%，連翹酯苷H 含量為5. 18%、連翹脂素含量為5. 09%、連翹酯苷I含量為3. 11%、松脂素葡萄糖苷含量為 2. 10%。
[0017] 應(yīng)用試驗(yàn):為表明本發(fā)明產(chǎn)品的應(yīng)用效果，提供以下試驗(yàn)數(shù)據(jù)： 1.抗菌作用 1. 1試驗(yàn)設(shè)計(jì) 體外抗菌活性采用藥敏片法進(jìn)行。先制備營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿，并在其底面用蠟筆劃分為6 個(gè)等區(qū)。用滅菌棉簽蘸取備用菌液均勻涂布于分好區(qū)的瓊脂平皿上，稍置片刻。用小鑷子 取濾紙片浸入不同濃度（100、50、25、12.5、6.25、3.12 11^/1111)的實(shí)施例1組合物溶液，使其 充分浸透后取出，輕蘸去掉多余的藥液，然后將紙片貼在平皿劃區(qū)的中央，做好記號(hào)。將平 皿倒置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h，取出，用直尺測(cè)量抑菌圈直徑（d)的大小，并據(jù)此判 斷其抑菌活性。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。抑菌效果判斷標(biāo)準(zhǔn)為：d < 8 mm為不敏感；8 mm < d < 13 mm為低度敏感；13 mm < d彡19 mm為中度敏感；d > 19 mm為高度敏感。
[0018] 1.2體外抗菌活性試驗(yàn)結(jié)果 體外抗菌活性如表1所示。結(jié)果表明：本發(fā)明連翹葉苷類組合物對(duì)金黃色葡萄球菌、大 腸桿菌、沙門氏菌、鏈球菌的最小抑菌濃度分別為3.12 mg/ml、50 mg/ml、25 mg/ml、50 mg/ ml，具有較好的抗菌活性。
[0019] 表1?對(duì)金葡菌、大腸桿菌、沙門菌、鏈球菌的抑菌圈直徑（mm)

【權(quán)利要求】
1. 一種連翹葉苷類組合物，其特征在于，經(jīng)下述步驟獲得： 1) 在60 - 85°C的水中直接加入連翹葉進(jìn)行提取，提取2 - 4次，每次提取時(shí)間0. 5 - 2h，連翹葉和水的重量比為1 :6 - 20 ; 2) 合并所得提取液，固液分離棄去殘?jiān)?，濾液減壓濃縮后室溫靜置，分離沉淀和水層， 沉淀經(jīng)水洗、干燥獲得連翹葉苷類成分I ; 3) 水層加入大孔吸附樹脂柱中，水洗脫至無色后，用30 - 90V%乙醇洗脫，回收洗脫液 并濃縮干燥；或者將水層用水飽和的正丁醇溶液萃取，棄去水層，有機(jī)層經(jīng)減壓濃縮、干燥 得連翹葉苷類成分II ; 4) 將上述連翹葉苷類成分I和連翹葉苷類成分II混合，粉碎，即得連翹葉苷類組合物。
2. 權(quán)利要求1所述連翹葉苷類組合物作為飼料添加劑、抗菌藥物或抗病毒藥物在畜禽 養(yǎng)殖中的應(yīng)用。
3. 如權(quán)利要求2所述連翹葉苷類組合物作為飼料添加劑、抗菌藥物或抗病毒藥物在畜 禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于，所述畜禽為仔雞或仔豬。
4. 如權(quán)利要求2或3所述連翹葉苷類組合物作為飼料添加劑、抗菌藥物或抗病毒藥物 在畜禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于，所述連翹葉苷類組合物添加量按不低于飼料重量或飲 水體積的〇. 1%。添加到畜禽飼料或飲水中。
【文檔編號(hào)】C07H15/26GK104474030SQ201410670956
【公開日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】李曉, 王偉, 范毅, 董建軍, 郭唯, 王學(xué)方, 張麗先, 王建軍, 全彥濤 申請(qǐng)人:河南省科高植物天然產(chǎn)物開發(fā)工程技術(shù)有限公司