一種3-o-煙?；?5,15-o-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種3-O-煙?；?5,15-O-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，采用二維液相色譜技術(shù)從千金子中提取3-O-煙?；?5,15-O-二乙?；m(xù)隨子醇，該方法通過色譜柱、溶解液、流動(dòng)相等的合理選擇，流速、洗脫方式、收集區(qū)段等工藝條件的優(yōu)化，以及第一維和第二維的正交性而達(dá)到的互補(bǔ)分離，使得整個(gè)分離純化方法切實(shí)可行，可操作性高，且得到的3-O-煙酰基-5,15-O-二乙?；m(xù)隨子醇純度高，最高可以達(dá)到96％以上，整個(gè)過程工藝穩(wěn)定，操作簡便，分離效率高。
【專利說明】-種3-0-煙醜基-日，1日-0-二乙醜基續(xù)隨子醇的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化合物生產(chǎn)領(lǐng)域，尤其是一種3-0-煙醜基-5, 15-0-二己醜基續(xù)隨子 醇的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 千金子系大戟科植物續(xù)隨子化地orbia lathyris的干燥成熟種子，是我國傳統(tǒng) 中藥材之一。千金子性溫，味辛，有小毒，主要功效為逐水消腫、破血消癒，用于治療水 腫、姨飲、積滯脹滿、二便不通、血癒經(jīng)閉，外治頑癖、巧費(fèi)。在國外，該植物種子早有用于 癌癥治療的記載，并且其甲醇提取物對于抗惡性腫瘤相關(guān)活性的初步篩選測定中已顯示 具有抗癌的效果。3-0-煙醜基-5, 15-0-二己醜基續(xù)隨子醇就是該樣的一類化合物，是廣泛 存在于大戟科植物的一種重要的天然活性成分，其結(jié)構(gòu)如下：
[0003]

【權(quán)利要求】
1. 一種3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其特征在于：具體步驟 如下： (1) 取千金子為原料，進(jìn)行粉碎得到千金子粉末； (2) 取千金子粉進(jìn)行有機(jī)試劑提取，有機(jī)試劑為乙酸乙酯，收集提取后的上清，過濾，濃 縮、干燥； (3) 將步驟（2)得到的沉淀重復(fù)1?5次提取，收集提取后的上清，進(jìn)行過濾，濃縮、干 燥，得到QJZ初提物； (4) 取步驟（3)得到QJZ初提物用流動(dòng)相進(jìn)行全部溶解，所述流動(dòng)相為流動(dòng)相A或流動(dòng) 相B或兩者的組合，經(jīng)制備液相DAC正相色譜柱進(jìn)行分離，采用二元流動(dòng)相體系進(jìn)行洗脫分 離，所述流動(dòng)相A和流動(dòng)相B采用正己烷、乙醇中的一種或幾種的組合，洗脫方式梯度洗，檢 測波長為210nm，收集目的峰，干燥后得到組分化合物QJZ-8,60°C鼓風(fēng)干燥箱吹干，進(jìn)行下 一步分離純化； (5) 取步驟（4)得到QJZ-8組分用流動(dòng)相進(jìn)行全部溶解，所述流動(dòng)相為流動(dòng)相A或流動(dòng) 相B或兩者的組合，經(jīng)制備液相色譜柱進(jìn)行分離，采用二元流動(dòng)相體系進(jìn)行洗脫分離，所述 流動(dòng)相A和流動(dòng)相B采用正己烷、乙酸乙酯、乙醇、二氯甲烷、甲醇中的一種或幾種的組合， 洗脫方式梯度洗，檢測波長為210nm，收集目的峰，干燥后得到組分化合物QJZ-8-5,60°C鼓 風(fēng)干燥箱吹干，QJZ-8-5為最終活性目標(biāo)單體3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙酰基續(xù)隨子醇的制備方法，其特 征在于：所述步驟（2)中有機(jī)溶劑提取的溫度為40?60°C，提取時(shí)間為4?6h，靜置一夜。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其 特征在于：所述步驟（3)中所述千金子粉或沉淀與有機(jī)試劑的重量體積比按Kg :L計(jì)為 1: (3?8)，將千金子粉或沉淀與有機(jī)試劑進(jìn)行混合浸提。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其特 征在于：所述步驟（4)的分離過程中一維液相色譜采用的色譜柱類型為正相硅膠軸向加壓 色譜柱，流速：600ml/min，檢測波長：210nm，使用時(shí)柱溫為室溫或25-40°C。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其特 征在于：所述步驟（4)的分離過程中取QJZ初提物用60-80%正己烷-乙醇溶解至濃度為 lml/ml，混合均勻后，用0. 45 y m有機(jī)膜抽濾后經(jīng)制備液相DAC正相色譜柱進(jìn)行分離。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其特 征在于：所述步驟（4)的分離過程中洗脫方式具體為100%正己烷等度洗脫5min，100%正 己燒一70%乙醇梯度洗脫35-501^11，100%乙醇10111111。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙酰基-5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其特 征在于：所述步驟（5)的分離過程中二維液相色譜采用的色譜柱類型為ACCOH Diol色譜 柱，流速：2-4ml/min，檢測波長：210nm，使用時(shí)柱溫為室溫或25-40°C。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙?；m(xù)隨子醇的制備方法，其特 征在于：所述步驟（5)的分離過程中取QJZ-8組分用50%正己烷-乙醇40°C超聲至剛好溶 解至濃度為5〇-75mg/ml，用0. 45iim有機(jī)膜過濾。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的3-0-煙?；?5, 15-0-二乙酰基續(xù)隨子醇的制備方法，其 特征在于：所述步驟（5)的分離過程中洗脫方式具體為100%正己燒一90%乙醇梯度洗脫 30_40min，100% 乙醇 10min〇
【文檔編號】C07D213/80GK104447526SQ201410707744
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月28日
【發(fā)明者】張耀洲, 楊珊珊, 顧朋嬡, 李聰聰 申請人:天津耀宇生物技術(shù)有限公司