一種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法，包括下述步驟:原料處理、超高壓處理、超聲波處理、酶解、微濾、超濾、干燥即得成品。本發(fā)明通過采用兩種提取方式的結(jié)合，一方面縮短了提取時間，另一方面提高了產(chǎn)品得率，保證了分子量10000-15000的縮合單寧的含量，同時也保證了分子量為1700的低分子量單寧的含量。
【專利說明】_種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種柿單寧的提取方法，具體涉及一種從柿子中提取小分子單寧含量 多的柿單寧的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 柿子是柿樹科漿果類溫帶落葉果樹，原產(chǎn)我國，在我國已有一千多年的種植歷史。 目前我國種植面積最大，而且柿果產(chǎn)量最多。柿子柔嫩多汁、甘甜爽口、營養(yǎng)豐富。有甜柿 和澀柿兩種，澀柿不可直接食用，需要經(jīng)過脫澀處理。甜柿可以鮮食，也可以做柿餅、柿醋、 柿酒等，柿葉可以做柿茶。柿子含有大量的單寧。單寧又叫鞣酸，是一種多酚的聚合物，是 一種由兒茶酚等聚合而成多酚聚合物，含有許多鄰位的酚羥基，因而有許多功能。Seguin于 1796年定義了 一個專門術(shù)語Tannin (單寧）來表示植物水浸提物中能使生皮轉(zhuǎn)化為革的化 學(xué)成分。后來通過研宄逐漸認(rèn)識到，植物浸提物中能產(chǎn)生鞣制作用的是一系列多酚類化合 物，其有效成分的分子量在500-3000之間。單寧又稱鞣酸，淡黃色至淺棕色無晶粉末，屬于 多元苯酷的復(fù)雜化合物。將植物單寧又改稱為植物多酷（plant polyphonies)，即存在于柿 果使其呈澀味的酚類物質(zhì)稱為柿單寧（kaki tannin)。在柿子單寧組分中，主要以縮合單寧 (分子量10000-15000)為主，占總酷的70-75%，而游離的小分子單寧（分子量1700)組分 較少。柿單寧具有防曬保濕、抗皺美容、防腐殺菌、預(yù)防心血管疾病、吸附金屬離子以及和蛋 白質(zhì)相互作用等諸多功能。
[0003] 目前，柿單寧主要來源于天然提取或化學(xué)合成。提取小分子單寧含量多的柿單寧 的傳統(tǒng)常用方法主要有酸提、堿提和水提等，其中以熱水浸提居多，酸、堿提取都會破壞柿 單寧的結(jié)構(gòu)，同時也會對硫酸根的含量產(chǎn)生影響；而熱水浸提的提取率一般較低，難以滿足 生產(chǎn)需求。一般經(jīng)過水或醇提取后，提取液減壓濃縮后要經(jīng)過充分的吸附、淋洗、洗脫等系 列流程，特別是需用蒸餾水反復(fù)淋洗至洗出液用苯酚-硫酸法檢測不出糖為止，操作過程 繁瑣，否則在后期干燥過程中由于柿單寧濃縮液含糖份比例過高，干燥機(jī)"粘壁"嚴(yán)重，無法 達(dá)到物料干燥粉狀固態(tài)化。中國專利CN102550993B，公開了一種小分子單寧含量多的澀柿 子粉的制備方法，它是將七八成熟的柿子進(jìn)行清洗、破碎、榨汁，復(fù)合酶解、護(hù)色、過濾、滅酶 殺菌、真空脫氣，得到柿子原汁，再將柿子原汁經(jīng)過微濾、超濾、冷凍干燥，即得到小分子單 寧含量多的澀柿子粉，但該方法對柿子原料的前處理比較簡單，影響最終的產(chǎn)品含量和收 率。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種從柿子中提取小分子單寧含量多的 柿單寧的方法。
[0005] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0006] -種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法，包括下述步驟：
[0007] 1)原料處理：將七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0008] 2)超高壓處理：破碎后的柿子中加入5-10倍重量份的純凈水，壓力350MPa，作用 溫度40-50°C，超高壓處理2-5min ;
[0009] 3)超聲波處理：將步驟2)得到溶液，超聲波處理5-10min，作用溫度40-50°C，功 率為300W ;
[0010] 4)酶解：步驟3)得到的溶液，置于密封發(fā)酵罐內(nèi)，加入活化好的果膠酶、蘋果淀粉 酶、果膠裂解酶的復(fù)合酶進(jìn)行酶解，酶解時間為20-30分鐘，酶解溫度為43-45?，果膠酶、 蘋果淀粉酶、果膠裂解酶的重量比是5 :3:2，復(fù)合酶加入量是4〇-8〇11^/1^;
[0011] 5)微濾、超濾：將步驟4)得到的酶解液高溫瞬時殺菌滅酶，溫度121-125°C，過濾， 濾液再用〇. 22 μ m的微濾膜，進(jìn)行微濾，將過微濾膜的濾液先用截留20000分子量的超濾膜 進(jìn)行第一次超濾，將過第一次超濾膜后的濾液再用截留1000分子量的超濾膜進(jìn)行第二次 超濾；
[0012] 6)將步驟5)得到的濾液濃縮，冷凍干燥干燥得到小分子單寧含量多的柿單寧。
[0013] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點：
[0014] 1、本發(fā)明采用超高壓處理柿子原料，在預(yù)定壓力保持一段時間，使原料細(xì)胞內(nèi)外 壓力達(dá)到平衡（有效成分達(dá)到溶解平衡）后迅速卸壓，使細(xì)胞內(nèi)外滲透壓力差突然增大， 細(xì)胞內(nèi)的有效成分穿過細(xì)胞膜（細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)在超高壓下發(fā)生變化），轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的提 取液中，達(dá)到提取目標(biāo)成分的目的。超高壓提取避免了因長時間高溫而引起的有效成分的 變化、損失以及生理活性的降低，同時因為超高壓是在密閉的環(huán)境下進(jìn)行的，沒有溶劑的揮 發(fā)，不會對環(huán)境造成污染。是一種安全有效的提取活性物質(zhì)的方法。
[0015] 2、本發(fā)明在采用超高壓處理原料后，接著再采用超聲波提取，超聲波提取利用的 是強(qiáng)烈的機(jī)械剪切作用，促進(jìn)柿單寧的溶出，本發(fā)明通過采用兩種提取方式的結(jié)合，一方面 縮短了提取時間，另一方面提高了產(chǎn)品得率，柿單寧含量95%以上，提取率75%以上。
[0016] 3、本發(fā)明對柿子提取液進(jìn)行復(fù)合酶處理，可以充分分解柿子中的糖分，使大分子 物質(zhì)斷裂成小分子成分，采用截留20000分子量的超濾膜進(jìn)行第一次超濾，將過第一次超 濾膜后的濾液再用截留1000分子量的超濾膜進(jìn)行第二次超濾，收集第二次超濾的截留液， 保證了分子量10000-15000的縮合單寧的含量，同時也保證了分子量為1700的低分子量單 寧的含量。
[0017] 4、本發(fā)明避免了柱層析、吸附、淋洗、洗脫等系列流程，糖類物質(zhì)通過復(fù)合酶分解， 提取液減壓濃縮后直接干燥，操作簡單易行。

【具體實施方式】
[0018] 下面以實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不局限于這些實施例。
[0019] 實施例1 :
[0020] 一種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法，包括下述步驟：
[0021] 1)原料處理：將IOkg七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0022] 2)超高壓處理：破碎后的柿子中加入50kg的純凈水，壓力350MPa，作用溫度 50°C，超高壓處理2min ;
[0023] 3)超聲波處理：將步驟2)得到溶液，超聲波處理8min，作用溫度40°C，功率為 300W ；
[0024] 4)酶解：步驟3)得到的溶液，置于密封發(fā)酵罐內(nèi)，加入活化好的果膠酶、蘋果淀粉 酶、果膠裂解酶的復(fù)合酶進(jìn)行酶解，酶解時間為20分鐘，酶解溫度為43-45?，果膠酶、蘋果 淀粉酶、果膠裂解酶的重量比是5:3:2，復(fù)合酶加入量是8〇11^/1^ ;
[0025] 5)微濾、超濾：將步驟4)得到的酶解液高溫瞬時殺菌滅酶，溫度121-125?，過濾， 濾液再用〇. 22 μ m的微濾膜，進(jìn)行微濾，將過微濾膜的濾液先用截留20000分子量的超濾膜 進(jìn)行第一次超濾，將過第一次超濾膜后的濾液再用截留1000分子量的超濾膜進(jìn)行第二次 超濾；
[0026] 6)將步驟5)得到的濾液濃縮，冷凍干燥干燥得到小分子單寧含量多的柿單寧。
[0027] 實施例2 :
[0028] -種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法，包括下述步驟：
[0029] 1)原料處理：將IOkg七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0030] 2)超高壓處理：破碎后的柿子中加入IOOkg的純凈水，壓力350MPa，作用溫度 40°C，超高壓處理5min ;
[0031] 3)超聲波處理：將步驟2)得到溶液，超聲波處理5min，作用溫度45°C，功率為 300W ；
[0032] 4)酶解：步驟3)得到的溶液，置于密封發(fā)酵罐內(nèi)，加入活化好的果膠酶、蘋果淀粉 酶、果膠裂解酶的復(fù)合酶進(jìn)行酶解，酶解時間為30分鐘，酶解溫度為43-45?，果膠酶、蘋果 淀粉酶、果膠裂解酶的重量比是5:3:2，復(fù)合酶加入量是4〇11^/1^ ;
[0033] 5)微濾、超濾：將步驟4)得到的酶解液高溫瞬時殺菌滅酶，溫度121-125°C，過濾， 濾液再用〇. 22 μ m的微濾膜，進(jìn)行微濾，將過微濾膜的濾液先用截留20000分子量的超濾膜 進(jìn)行第一次超濾，將過第一次超濾膜后的濾液再用截留1000分子量的超濾膜進(jìn)行第二次 超濾；
[0034] 6)將步驟5)得到的濾液濃縮，冷凍干燥干燥得到小分子單寧含量多的柿單寧。
[0035] 實施例3 :
[0036] -種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法，包括下述步驟：
[0037] 1)原料處理：將IOkg七八分成熟的柿子清洗、破碎；
[0038] 2)超高壓處理：破碎后的柿子中加入80kg的純凈水，壓力350MPa，作用溫度 45°C，超高壓處理3min ;
[0039] 3)超聲波處理：將步驟2)得到溶液，超聲波處理lOmin，作用溫度50°C，功率為 300W ；
[0040] 4)酶解：步驟3)得到的溶液，置于密封發(fā)酵罐內(nèi)，加入活化好的果膠酶、蘋果淀粉 酶、果膠裂解酶的復(fù)合酶進(jìn)行酶解，酶解時間為25分鐘，酶解溫度為43-45?，果膠酶、蘋果 淀粉酶、果膠裂解酶的重量比是5:3:2，復(fù)合酶加入量是6〇11^/1^ ;
[0041] 5)微濾、超濾：將步驟4)得到的酶解液高溫瞬時殺菌滅酶，溫度121-125°C，過濾， 濾液再用〇. 22 μ m的微濾膜，進(jìn)行微濾，將過微濾膜的濾液先用截留20000分子量的超濾膜 進(jìn)行第一次超濾，將過第一次超濾膜后的濾液再用截留1000分子量的超濾膜進(jìn)行第二次 超濾；
[0042] 6)將步驟5)得到的濾液濃縮，冷凍干燥干燥得到小分子單寧含量多的柿單寧。
[0043] 結(jié)果：
[0044]

【權(quán)利要求】
1. 一種從柿子中提取小分子單寧含量多的柿單寧的方法，其特征在于，包括下述步 驟： 1) 原料處理：將七八分成熟的柿子清洗、破碎； 2) 超高壓處理：破碎后的柿子中加入5-10倍重量份的純凈水，壓力350MPa，作用溫度 40-50 °C，超高壓處理2-5min ; 3) 超聲波處理：將步驟2)得到溶液，超聲波處理5-10min，作用溫度40-50°C，功率為 300W ； 4) 酶解：步驟3)得到的溶液，置于密封發(fā)酵罐內(nèi)，加入活化好的果膠酶、蘋果淀粉酶、 果膠裂解酶的復(fù)合酶進(jìn)行酶解，酶解時間為20-30分鐘，酶解溫度為43-45°C，果膠酶、蘋果 淀粉酶、果膠裂解酶的重量比是5:3:2，復(fù)合酶加入量是4〇-8〇11^/1^; 5) 微濾、超濾：將步驟4)得到的酶解液高溫瞬時殺菌滅酶，溫度121-125°C，過濾，濾液 再用0. 22 y m的微濾膜，進(jìn)行微濾，將過微濾膜的濾液先用截留20000分子量的超濾膜進(jìn)行 第一次超濾，將過第一次超濾膜后的濾液再用截留1000分子量的超濾膜進(jìn)行第二次超濾； 6) 將步驟5)得到的濾液濃縮，冷凍干燥干燥得到小分子單寧含量多的柿單寧。
【文檔編號】C07H1/08GK104478950SQ201410795380
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月19日
【發(fā)明者】劉小峰, 何明茜, 羅知頌, 李京生, 劉二偉 申請人:桂林得坤生物科技股份有限公司