專利名稱：免疫鄰近催化劑的制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的免疫鄰近催化劑。該催化劑是由抗體分子衍生的。其方法包括根據(jù)它與所選反應(yīng)的轉(zhuǎn)換態(tài)配合物結(jié)構(gòu)的關(guān)系來選擇一種半抗原，使得該半抗原在連接到一種載體蛋白質(zhì)上并注入(有或沒有輔助劑)某種動物以后，就能誘發(fā)產(chǎn)生所需抗體的免疫應(yīng)答。該抗體通過與所選反應(yīng)中的催化基團特異的共價連接而被修飾，由此產(chǎn)生一種免疫臨近催化劑，這是一種底物特異的抗體催化劑。
催化劑被廣泛地應(yīng)用于化學、醫(yī)藥及食品加工工業(yè)不斷地需要新型和/或改進的催化劑。人們希望對其特殊性、選擇性、速率提高和穩(wěn)定性方面作出改進。在已知的催化劑中，酶-天然存在的氨基酸或RNA聚合物-能夠產(chǎn)生最高可能的反應(yīng)速度，同時又保持較高的特異性。一些簡單的催化劑(以有機物或金屬為基質(zhì)的)例如缺乏酶的特異性但常是較穩(wěn)定的。這些較簡單的催化劑通常缺少酶所固有的對反應(yīng)的立體和區(qū)域的化學控制能力。
酶作為催化劑的成功應(yīng)歸功于它的褶皺(fold)能力(即假設(shè)的一種立體結(jié)構(gòu))，因而對反應(yīng)物產(chǎn)生特異結(jié)合的凹囊，并把在該凹囊中的催化活性基團置于緊靠斷裂鍵附近，這些凹囊被人們稱為活性部位。
創(chuàng)制新的酶(對某一預(yù)定反應(yīng)物特異的并能催化所需反應(yīng))的一個主要障礙在于要對蛋白質(zhì)如何褶皺形成活性部位有最起碼的了解，某種酶(及它的催化性質(zhì))的微小變化是可以借助于部位突變來實現(xiàn)的。但是用單獨一個氨基酸代替蛋白質(zhì)序列中的另一個氨基酸會很大程度地且以無法預(yù)料的方式影響該分子的褶皺和/或功能。
要引用的具有代表性的現(xiàn)有技術(shù)是國際專利PC1/US84/01951;G.P.Royer(AdvanceInCatalysis29，197，1980);R.A.Lerner(AdvancesinImmunology36，1，1984);A.Tramontano等人(ProcNat.Acad.Sci.，USA83，6736，1986)等人(FEBSletters100，137，1979;104，201，1979;111，427，1980;和Biochim.Biophys.Acta629，328，1980);L.slobin(Biochemistry5，2836，1966);1986年6月23日提出的未決的美國專利申請V.S.S.N.877，273，V.Raso和B.D.Stollar(Biochemistry14，585，591，1975);A.Tramontano等人(Science234，1566，1986);和S.J.Pollack等人(Science234，1570，1986)。
本發(fā)明包括一種生產(chǎn)對于所給定的化學反應(yīng)的免疫鄰近催化劑的方法。該方法包括鑒別一個化學反應(yīng)的一種反應(yīng)物及一種催化基團，選擇一種與所說反應(yīng)物及催化基團的轉(zhuǎn)換態(tài)對應(yīng)的半抗原，利用所述的半抗原刺激一種產(chǎn)生抗體的免疫應(yīng)答，從對于所說的半抗原特異的所說的免疫應(yīng)答中得到的抗體進行分離和提純，選擇一種與所述試劑和催化基團的轉(zhuǎn)換態(tài)配合物對應(yīng)的但又不同于所說半抗原的轉(zhuǎn)化半抗原，通過共價連接該催化基團，同時將所述催化基團特異結(jié)合在所述被提純的抗體(作為所述轉(zhuǎn)化半抗原的一部份)的結(jié)合部位上來對所述提純抗體進行修飾，從而產(chǎn)生對所述化學反應(yīng)有活性的抗體-催化基團配合物，從所生成的修飾物中分離出對所述化學反應(yīng)有活性的抗體-催化基團配合物。
本發(fā)明包括新型免疫鄰近催化劑及其產(chǎn)生方法。本發(fā)明的免疫鄰近催化劑在體內(nèi)、體外以及人類自身均能起作用。本發(fā)明的催化劑是抗體分子，它是通過用一種與所選定反應(yīng)物和催化基團反應(yīng)的轉(zhuǎn)換態(tài)配合物有關(guān)或相似但又不同的半抗原進行免疫，隨后再用轉(zhuǎn)化的半抗原修飾而獲得的。
半抗原與反應(yīng)物及催化基團的關(guān)系是這樣的半抗原中至少有一個化學基團與反應(yīng)物及催化基團中的一個基團在結(jié)構(gòu)及排列方向上是相同的，這就保證該半抗原與反應(yīng)物及催化基團共享抗原決定子，即由半抗原刺激的抗體結(jié)合必須與反應(yīng)物及催化基團起作用，該半抗原在結(jié)構(gòu)及化學上也必須與該反應(yīng)物及催化基團在反應(yīng)幸謀淶暮誦募傲蛹澆遣煌?。例燃偓用一庚}蚨喔齦嘸酆誦娜ト〈從ξ錆痛呋胖腥我壞幕蛄秸叩暮誦?。諒T┤〈暮舜腥〈渥饔檬竊詬每固褰岷媳礱姘卜鷗ㄖ拇呋挪⒉艘桓齷蚨喔齠鍆獾乃芄話Цㄒ蜃臃腫擁目籽?，这种一庚}蚨喔齷鞠嗨頻幕嘔蠆謝拇嬖詒Ｖち爍冒肟乖敕從ξ錛按呋毆蠶砉駁目乖齠ㄗ?。因刺K餼捅Ｖち爍每固迥苧≡裥緣厥侗鷥梅從ξ錚⒔檬蓯康拇呋歐旁謔實鋇奈恢?，译s行У仄鶇呋饔謾Ａ硪環(huán)矯媯冒肟乖誚峁購?fù)化学上与窂摩武澩催化基团栽嵜窂摩中要钢\淶募母澆遣煌模廡┎畋鳶ㄓ靡桓黿細嘸厶暮巳〈從ξ錆痛呋哦咧械囊桓齷蚋嗾庋暮?。此外，諒T┤〈暮慫郊擁牟謝吶帕心苡盞級鍆獾?，辅助基蛧I蠐糜詿俳呋饔玫撓肟固褰岷系母ㄒ蜃擁陌寄搖Ｕ廡┰誑固褰岷媳礱嬤寫嬖詰畝鍆饣盤岣吡舜呋判?，磦蝤大大提高翍Z俁?。最后，该半抗原哉洩与该抗体芯暽的共紛J澆氪呋挪煌?，该仓x氪呋胖邢嚶Φ牟謝且謊幕蚓哂邢嗨頻鬧魈搴團帕蟹較潁椿鞠嗨啤５牽痹詿呋胖惺褂昧艘恢止饣钚越渙潦?，半抗原中蠂娄的基团则是该綔o 一個不起反應(yīng)的類似物，而當催化基團中使用了一種親電子基團時，該半抗原中相應(yīng)的基團則是一個帶電荷的類似物，以在抗體結(jié)合表面誘發(fā)一個被定位的，起反應(yīng)的親核試劑。
接著對所述半抗原的免疫應(yīng)答中獲得的提純的、特異的抗體通過與轉(zhuǎn)化半抗原反應(yīng)而被修飾。轉(zhuǎn)化半抗原和抗原相似但有所不同。其關(guān)系如下轉(zhuǎn)化抗原和抗原除了下列幾方面以外是相同的1)真正的催化基團被用于轉(zhuǎn)化半抗原中，而在半抗原中使用的是類似物;2)沒有額外的殘基被附加到任何在反應(yīng)中要被改變的鍵附近的原子核上-就象半抗原情況下那樣;3)反應(yīng)中心的原子核，即結(jié)合半抗原催化基團類似物的半抗原基質(zhì)類似物中的原子核，可以被改變以滿足轉(zhuǎn)化半抗原的穩(wěn)定要求。在利用轉(zhuǎn)化半抗原修飾以后，該抗體除了具有一般的較高的選擇性結(jié)合能力以外，還具有催化能力。
由本方法獲得的免疫鄰近催化劑，不管是由多克隆還是由單克隆方法獲得的，由于它們是在免疫應(yīng)答中產(chǎn)生的，因而均是很好地褶皺的穩(wěn)定蛋白質(zhì)。因此，本發(fā)明避免了出現(xiàn)關(guān)于新型序列蛋白質(zhì)褶皺的不確定性。利用本發(fā)明的半抗原制備抗體的免疫方法可以稱為自動免疫。
本發(fā)明所述的蛋白質(zhì)經(jīng)過修飾后包括一類新的抗體，這類抗體能對它們的靶抗原物質(zhì)(反應(yīng)物)起化學反應(yīng)，因為它們以酶的形式而不是被動結(jié)合抗原的形式催化這些靶分子中的鍵斷裂。
使二分子的反應(yīng)轉(zhuǎn)換成單分子的反應(yīng)極大地提高了反應(yīng)速度。本發(fā)明的免疫鄰近催化劑將起此作用并與反應(yīng)物和催化基團一起使反應(yīng)速度達到最高。被催化的反應(yīng)類型僅受到能夠連接到所述抗體上的催化基團的類型的限制。這些催化基團包括一般的酸堿性、親核性、親電子性和金屬催化劑，也可以使用一種以上的催化基團，本發(fā)明催化劑所適用的兩大類反應(yīng)是水解反應(yīng)和氧化-還原反應(yīng)。
定義反應(yīng)物-在一個具體的化學轉(zhuǎn)化過程中要被轉(zhuǎn)化成產(chǎn)品的分子。
催化基團-具有催化活性的部分，它被共價結(jié)合到被誘發(fā)的抗體分子上，占據(jù)抗體分子上它的特異部位。
輔因子-參加該反應(yīng)的一種或一些附加分子，水解反應(yīng)中包括水。
聯(lián)接劑基團-包括在催化基團中用來使催化基團與被誘發(fā)抗體形成共價相連接的部份。
半抗原-共價連接到一種載體蛋白質(zhì)上的一種分子，它能誘發(fā)出一種對自身的抗體應(yīng)答。
抗原-半抗原和載體結(jié)合起來的配合物，用來刺激免疫應(yīng)答。
轉(zhuǎn)化半抗原-用來將催化基團連接到被誘發(fā)抗體上的分子，同時它占據(jù)抗體結(jié)合位置處的特異凹囊。
所選的反應(yīng)物和催化基團被表示成有四個部分的分子的轉(zhuǎn)換態(tài)配合物。
化學式Ⅰ其中在起催化作用的部份被定為X以及催化基團為K以后，不參加催化過程的R1和R2代表了該試劑上殘余的化學基團。X代表了反應(yīng)物中在反應(yīng)期間要改變的鍵及其有關(guān)的核，K代表催化基團。
與反應(yīng)物-催化基團配合物對應(yīng)的本發(fā)明半抗原是一些選擇得到的或者化學合成得到的具有如下結(jié)構(gòu)的分子
化學式Ⅱ其中R′1和R′Z與反應(yīng)物中的R1和R2基本相似(除了可能增加如

圖1所示的用于將半抗原鍵合到載體上的基團的基團)，Y代表由一部分與試劑中X區(qū)域?qū)?yīng)的半抗原分子組成的原子核和有關(guān)的鍵，而且(1)X和Y相互的關(guān)系在于Y比X具有更高的價態(tài)且多一個或幾個鍵，表2表示了X和Y間的這種關(guān)系。
(2)Q代表一個(或多個)如表3所示的與(1)中Y結(jié)合的取代基，使得(a)當催化過程在抗體催化劑的活性表面中需要正電荷時，Q含有負電荷。反之亦然。
(b)當催化過程在抗體催化劑的活性表面中需要一個極性成分時，Q則為極性的和中性的。
(c)當催化過程在抗體催化劑的活性表面中需要一種非極性成分時，Q為非極性的(或疏水的)。
(d)如果反應(yīng)中使用了一種或多種輔因子時，則Q應(yīng)選擇基本上是松散的取代基，以便在活性表面中產(chǎn)生孔穴，從而使一種或多種所述的輔因子得以結(jié)合。水解反應(yīng)中輔因子包括水。
(e)如果需要在Y區(qū)域連接，則Q還含有一個如表1中所示的能將半抗原與載體鍵合起來的基團。
(3)Q′cat被合成為下列類型的分子K′-L′化學式Ⅲ其中K′代表一種催化基團類似物，如表4所示，L′代表鍵合基團L的一個不反應(yīng)的鍵合類似物，L′在抗體結(jié)合表面中誘導(dǎo)產(chǎn)生一種能與L起反應(yīng)的基團，L′和L均被表示在表5中。
在幾種可能的取代基均適合本發(fā)明的催化方法時，應(yīng)優(yōu)先選擇那些能使試劑和半抗原之間結(jié)合親和力差值最小的取代基，這些有關(guān)的親和力已被列表表示在Pressman和Grossberg的專題論文中，例如象“TheStructuralBasisofAntibodySpecificity，BenjaminaminNY.1969”中，這些數(shù)據(jù)可用來保證在試劑和半抗原的結(jié)合中具有充分的相似程度，以致能夠利用本發(fā)明得到的免疫鄰近催化劑將這兩種分子結(jié)合起來。
(4)構(gòu)成Y的殘留基團R1和R22可以被選擇成與X中的相應(yīng)基團相同或具有相似的大小及電荷，即它們基本相似。
前面所述的化學式Ⅰ-Ⅲ和規(guī)則規(guī)定了本發(fā)明中半抗原和試劑之間的對應(yīng)關(guān)系，也就是說，半抗原根據(jù)前面的化學式Ⅰ-Ⅲ被選擇成或化學合成得與反應(yīng)物相對應(yīng)。表6中描述了在一些重要反應(yīng)中X的成分。
與半抗原對應(yīng)的本發(fā)明的轉(zhuǎn)化半抗原是選擇得到的或經(jīng)化學合成得到的具有如下結(jié)構(gòu)的分子
化學式Ⅳ
其中R1和R22與反應(yīng)物中的R1和R22相同，Y與半抗原中的Y相同。Qcat含有活性催化基團K以及鍵合基團L，并且，(1)Q′可以是和半抗原中相同的基團，或為了
發(fā)的抗體的結(jié)合親和力，可以是氫。
(2)Qcat是一種化學合成的或選擇的具有以下類型的分子K-L化學式Ⅴ其中K是如表4所示的被選擇的催化基團，L是如表5所示的鍵合基團，它與選擇的催化基團共價結(jié)合，用來將被選擇的催化基團持久地、共價結(jié)合到被誘發(fā)的抗體上。當L被選擇成含有一種光活性交聯(lián)基團時，L′是該交聯(lián)基團的不反應(yīng)的類似物。
當L被選擇成含有一種親電子基團時，L′則是帶電荷的不反應(yīng)的類似物，該類似物能在抗體結(jié)合表面誘發(fā)一種定位的、起反應(yīng)的親核劑。
化學式Ⅳ和Ⅴ以及相應(yīng)的文字規(guī)定了反應(yīng)物、半抗原與轉(zhuǎn)化半抗原之間的關(guān)系，也就是說，轉(zhuǎn)化半抗原根據(jù)前面的化學式Ⅳ和Ⅴ被化學合成或選擇成與反應(yīng)物及半抗原相對應(yīng)。
用誘發(fā)抗體培育該轉(zhuǎn)化半抗原，轉(zhuǎn)化半抗原與所述抗體起反應(yīng)，或者被引起反應(yīng)、Y基團和Qcat基團之間的鍵被裂解(例如用弱酸或弱堿)但斷裂的方式使得抗體分子的完整性被保存住，而且
基團從抗體結(jié)合部位上被除去，從而產(chǎn)生了一個完全的催化抗體。
表1部分用于將半抗原連接到載體蛋白質(zhì)上的鍵合基團的表。
) 。
本發(fā)明的方法包括按照前面所述選擇或合成一種半抗原，通過如前面提出的鍵合殘基將所述的半抗原最好是共價鍵合到諸如鎖孔形
血蘭蛋白或用于此目年的標準使用的類似蛋白質(zhì)這樣的載體物質(zhì)上，將該配合物作為抗原注入到合適的動物中以刺激免疫應(yīng)答。經(jīng)過一段產(chǎn)生所述應(yīng)答足夠長的時間以后，抽取該動物的血，按照標準程序萃取及分組(最好在含有共價鍵合半抗原的柱上)血清以除去非特異抗體，包括僅對載體有應(yīng)答的那些抗體。然后用類似的轉(zhuǎn)化半抗原(按照前面有關(guān)轉(zhuǎn)化半抗原的規(guī)定進行選擇或合成)培育該提純抗體組分。按照所用的轉(zhuǎn)化半抗原的類型，該提純抗體-轉(zhuǎn)化半抗原配合物起反應(yīng)、被允許起反應(yīng)、或者僅是簡單提純(如果反應(yīng)是自發(fā)的話)，然后用弱酸或弱堿處理該反應(yīng)配合物-保存該抗體的結(jié)構(gòu)-再用緩沖液進行徹底滲析和分組(最好在含有共價鍵合半抗原的柱上)，利用常規(guī)手段測定此提純制劑的催化活性，該催化活性可能會被不含Q′cat基團的半抗原類似物抑制，但不會被大小、結(jié)構(gòu)相似的無關(guān)分子抑制。
如同該領(lǐng)域的專業(yè)人員顯然知道的那樣，這類免疫鄰近催化劑可以用作為具有工業(yè)上重要性的化學反應(yīng)的催化劑;例如它們可以作為洗滌劑中的活性成份，用于在“淀粉或纖維素向糖轉(zhuǎn)化中降解碳水化合物，用來生產(chǎn)乳酪以及治療人類疾病。
免疫鄰近催化劑有用的其他領(lǐng)域是有機合成與生物聚合物的部位特異裂解以及藥品或毒素的失活。
在有機合成中，它們對于手性化合物的合成，若干類似鍵之一的選擇性反應(yīng)以及對混合化合物之一的催化特別有用。傳統(tǒng)的催化劑缺乏立體定向性、選擇性和/或底物特異性，除了克服了這些問題以外，免疫鄰近催化劑比傳統(tǒng)的催化劑能更大地提高速度以及提供更合適的反應(yīng)條件。
當合成中使用了保護基團時，免疫鄰近催化劑還具有更重要的應(yīng)用。免疫鄰近催化劑能除去保護基團，而在其它方面不改變反應(yīng)物。
作為部位特異裂解催化劑時，免疫臨近催化劑從蛋白質(zhì)定序到抗癌治療均是有用的，為了簡化蛋白質(zhì)的定序，例如可以制備一種免疫鄰近催化劑來催化N-未端甲?；蛞阴；鶊F的水解，也可以制備一種免疫鄰近催化劑來催化諸如色氨酸、蛋氨酸或組氨酸這樣的稀少氨基酸處蛋白質(zhì)的裂解。
給出如前面表中所示的用于制備免疫鄰近催化劑的化合物只是為了說明本發(fā)明而不是為了限制本發(fā)明，這些化合物可以利用有機合成中的傳統(tǒng)技術(shù)來制備。
本發(fā)明人的愿望在于在免疫酶(Immunozyme)的商標下在商業(yè)上發(fā)展出于此描述并提出權(quán)利要求的免疫鄰近催化劑。
表2在反應(yīng)物X區(qū)域中核的一些高價態(tài)取代物底物X中的核半抗原Y中的核O，S(氧、硫)N或C(氯或碳)N(氮)C(碳)c(碳)P(磷)表3一些在半抗原Y區(qū)域中連接有用的取代基QA)用于在抗體結(jié)合表面導(dǎo)入(+)電荷-CO(-)2-PO(-2)4-SO(-2)4-SO(-2)3B)用于在抗體結(jié)合表面導(dǎo)入(-)電荷-NH(+)3-NRH(+)2-NR2H(+)-NR(+)3-SR(+)2R＝任何一種穩(wěn)定的烷基或芳基基團-所有R基團不必相同用于取代試劑中的-OH-Cl-Br-CF3＝O用于產(chǎn)生極性環(huán)境-NO2
-N-(CH2F)2-Cl-Br-CF3-SH-OH
用于為水提供孔穴-CO(-)2-NH2/NH(+)3-NO2
用于轉(zhuǎn)化半抗原和半抗原的一些小分子催化劑琄和穩(wěn)定的類似物K′
表5用來將催化基團K連接到抗體上的一些基團L以及它們的對應(yīng)基團L′，用于半抗原中
※n可以變化，以使連接及抗原性最大，-CH-以外的基團(
)可以用作為隔離基表6一些重反應(yīng)中X的成份A)一般的酯水解反應(yīng)
B)一般的胺水解反應(yīng)
E)一般的乙縮醛水解反應(yīng)
表7對于一些選定的反應(yīng)，反應(yīng)物-X，催化基團K、R1和R2;半抗原-Y，Q′cat、R1和R2;與轉(zhuǎn)化半抗原Y-Q′catR1和R2的關(guān)系A(chǔ))反應(yīng)丁酸對硝基苯酯的水解反應(yīng)
D)反應(yīng)Carbaryl的水解
E)反應(yīng)由賴氨酸中除去芐氧羰基保護基團
權(quán)利要求
1.生產(chǎn)用于化學反應(yīng)的免疫鄰近催化劑的方法，包括(1)對所說的反應(yīng)鑒別出一種反應(yīng)物及一種催化基團；(2)選擇一種與所說反應(yīng)物及所說催化基團的轉(zhuǎn)換態(tài)配合物相對應(yīng)的半抗原。(3)用所說的半抗原刺激一種免疫應(yīng)答以產(chǎn)生抗體；(4)由所說的免疫應(yīng)答中分離出被提純的對所說半抗原特異的抗體；(5)選擇一種與所說反應(yīng)物及所說催化基團的轉(zhuǎn)換態(tài)配合物相對應(yīng)的轉(zhuǎn)化半抗原，(6)通過共價連接催化基團，同時將所說的催化基團特異鍵合到作為所說轉(zhuǎn)化半抗原的一部分的所說提純抗體的結(jié)合部位上，來對所說的提純抗體進行修飾，從而產(chǎn)生對所說化學反應(yīng)具有活性的抗體-催化基團配合物。(7)由所說的修飾物中分離出對所說化學反應(yīng)有活性的抗體-催化基團配合物
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中反應(yīng)物及催化基團是用化學式
表示，轉(zhuǎn)化半抗原是用化學式
其中X代表包括了在反應(yīng)中被改變的反應(yīng)物部分的核及有關(guān)鍵，K代表催化基團，而Y代表包括了半抗原分子和轉(zhuǎn)化半抗原分子的類似部分的核及有關(guān)鍵，并且X和Y之間的關(guān)系是Y比X具有一個較高的價態(tài)并且多一個或更多的鍵。Q和Q′分別代表與半抗原和轉(zhuǎn)化半抗原中的Y鍵合的一個或更多的取代基，Qcat代表催化基團以及與Y結(jié)合的鍵合基團，它以化學式K-L表示，其中K代表催化基團，而L代表鍵合基團，該鍵合基團是該分子的用于催化基團和抗體分子之間形成永久鍵的殘余部分，Q′cat代表所選催化基團以及與Y鍵合基團的類似物，它用化學式K′-L′表示，其中K′代表K的不起反應(yīng)的類似物，它與Y形成一種穩(wěn)定鍵，L′是L的不起反應(yīng)的類似物，它在抗體的結(jié)合表面中能誘導(dǎo)產(chǎn)生一個能與L起反應(yīng)的基團。R1，R2和R′1，R′2代表反應(yīng)物、半抗原和轉(zhuǎn)化半抗原上其余的化學基團，它們不參加催化過程，R1和R′1以及R2和R′2分別地彼此基本相似。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中Q是從由(a)一個正電荷、(b)一個負電荷，(c)極性、(d)非極性和(e)基本松散物(Substantial bulk)組成的取代基組中選擇的。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中Q′選自于由(a)一個正電荷、(b)一個負電荷，(c)極性、(d)非極性和(e)基本松散物和(f)氫組成的取代基組。
5.如權(quán)利要求2所述的方法，其中L含有一種光活性交聯(lián)基團，而L′是所說交聯(lián)基團不起反應(yīng)的類似物。
6.如權(quán)利要求2所述的方法，其中L含有一個親電子基團，而L′是一個帶電荷的不起反應(yīng)的類似物，它能在抗體結(jié)合表面中誘發(fā)一個定位的、可起反應(yīng)的親核基團。
7.如權(quán)利要求2所述的方法，其中X為O或S，Y為N或C。
8.如權(quán)利要求2所述的方法，其中X為N而Y為C
9.如權(quán)利要求2所述的方法，其中X為C而Y為P，
10.如權(quán)利要求3所述的方法，其中Q為一種由一個正電荷構(gòu)成的取代基，
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中Q為從NH(+)3，-NR2HH(+)，-NR2H(+)，-NR(+)3和-SR(+)2組成的組中選擇出的一種取代基，
12.如權(quán)利要求3所述的方法，其中Q為由一個負電荷構(gòu)成的取代基，
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中Q是從由-CO(-)2、PO(-2)4、和-SO(-2)4組成的組中選擇出的取代基，
14.如權(quán)利要求3所述的方法，其中Q是極性的一種取代基，
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中Q是從由-NO2，
，-N-(CH2F2)，-cl，-Br，-CF3，-SH和-OH組成的組中選擇出的一種取代基，
16.如權(quán)利要求5所述的方法，其中Q是非極性的一種取代基，
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中Q是從由-C(CH3)3，
，-CH3，-CH(CH3)2，
組成的組中選出的一種取代基。
18.如權(quán)利要求3所述的方法，其中Q是由基本松散物(bulk)組成的取代基。
19.如權(quán)利要 8所述的方法，其中Q是從由-CO(-)2，-NH2-NH(+)3和-NO2組成的組中選出的一種取代基。
20.如權(quán)利要求2所述的方法，其中K是從由
，-NH2，-OH，SH，
，-CO′2H，-H2PO3和含有Fe，CO，Cu，Pb，Ti，Al，Pd，B或Mg的螯合物組成的組中選擇出的一種催化劑。
21.如權(quán)利要求2所述的方法，其中K′是從由
，-CH2-，
和未配合的螯合物組成的組中選出的一種催化劑。
22.如權(quán)利要求1所述的方法，其中免疫應(yīng)答是單克隆刺激起來的，
23.如權(quán)利要求1所述的方法，其中免疫應(yīng)答是多克隆刺激起來的，
24.如權(quán)利要求1所述的方法，其中化學反應(yīng)是一般的酸堿催化反應(yīng)，
25.如權(quán)利要求1所述的方法，其中化學反應(yīng)是一種親核催化反應(yīng)，
26.如權(quán)利要求24所述的方法，其中化學反應(yīng)包括轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定。
27.如權(quán)利要求25所述的方法，其中化學反應(yīng)包括轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定，
28.如權(quán)利要求1所述的方法，其中化學反應(yīng)是一種氧化-還原催化反應(yīng)
29.如權(quán)利要求24所述的方法，其中一般的酸堿催化反應(yīng)是含有特定核酸序列的聚脫氧核苷酸或聚核苷酸的水解反應(yīng)，
30.如權(quán)利要求25所述的方法，其中親核催化反應(yīng)是含有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)分子的水解反應(yīng)，
31.如權(quán)利要求26所述的方法，其中轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)分子的水解反應(yīng)，
32.如權(quán)利要求27所述的方法，其中轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)分子的水解反應(yīng)，
33.如權(quán)利要求24所述的方法，其中一般的酸堿催化反應(yīng)是含有特定核酸序列的聚脫氧核苷酸或聚核苷酸的水解反應(yīng)，
34.如權(quán)利要求25所述的方法，其中親核催化反應(yīng)是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核苷酸的水解反應(yīng)，
35.如權(quán)利要求26所述的方法，其中轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核糖苷酸的水解反應(yīng)，
36.縟ɡ 7所述的方法，其中轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核糖苷酸的水解反應(yīng)，
37.如權(quán)利要求24所述的方法，其中一般的酸堿催化反應(yīng)是從由酯、酰胺和縮醛鍵組成的組中選出的藥品的水解反應(yīng)，
38.如權(quán)利要求25所述的方法，其中親核催化反應(yīng)是從由酯、酰胺和縮醛鍵組成的組中選出的藥品的水解反應(yīng)，
39.如權(quán)利要求24所述的方法，其中一般的酸堿催化反應(yīng)是一種縮醛鍵的水解反應(yīng)。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，其中縮醛鍵處在含有特定糖序列的多糖中。
41.如權(quán)利要求25所述的方法，其中親核催化反應(yīng)是一種縮醛鍵的水解反應(yīng)，
42.如權(quán)利要求41所述的方法，其中縮醛鍵處在含有特定糖序列的多糖中，
43.由權(quán)利要求1所述的方法制得的一種免疫鄰近催化劑，
44.由權(quán)利要求2所述的方法制得的一種免疫鄰近催化劑，
45.由權(quán)利要求2所述的方法中，在化學反應(yīng)是一般酸堿催化反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑
46.由權(quán)利要求2所述的方法中，在化學反應(yīng)是親核催化反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
47.由權(quán)利要求24所述的方法中，在化學反應(yīng)包括轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定時制得的一種免疫催化劑，
48.由權(quán)利要求25所述的方法中，在化學反應(yīng)包括轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定時制得的一種免疫鄰近催化劑，
49.由權(quán)利要求1所述方法中，在化學反應(yīng)是一種氧化-還原催化反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑
50.由權(quán)利要求25所述方法中，在一般的酸堿催化反應(yīng)是含有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)分子的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
51.由權(quán)利要求26所述方法中，在過渡態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)分子的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑。
52.由權(quán)利要求27所述方法中，在轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定氨基酸序列的蛋白質(zhì)分子的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
53.由權(quán)利要求24所述方法中，在一般的酸堿催化反應(yīng)是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核糖核苷酸的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑。
54.由權(quán)利要求25所述方法中，在親核催化反應(yīng)是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核糖核苷酸的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近的催化劑，
55.由權(quán)利要求26所述方法中，在轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核糖核苷酸的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
56.由權(quán)利要求27所述方法中，在轉(zhuǎn)換態(tài)的電荷穩(wěn)定或不穩(wěn)定是含有特定核酸序列的多聚脫氧核苷酸或多聚核糖核苷酸的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
57.由權(quán)利要求24所述方法中，在一般的酸堿催化反應(yīng)是從由酯、酰胺和縮醛鍵組成的組中選出的藥品的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
58.由權(quán)利要求25所述方法中，在親核催化反應(yīng)是從由酯、酰胺和縮醛鍵組成的組中選出的藥品的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
59.由權(quán)利要求24所述方法中，在一般的酸堿催化反應(yīng)是縮醛鍵的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
60.由權(quán)利要求59所述方法中，在縮醛鍵處在含有特定糖序列的多糖中時制得的一種免疫鄰近催化劑，
61.由權(quán)利要求25所述方法中，在親核催化反應(yīng)是縮醛鍵的水解反應(yīng)時制得的一種免疫鄰近催化劑，
62.由權(quán)利要求61所述方法中，在縮醛鍵處在含有特定糖序列的多糖中時制得的一種免疫鄰近催化劑。
全文摘要
制備用于某種化學反應(yīng)的免疫鄰近催化劑的方法，本發(fā)明還公開了使用免疫鄰近催化劑的化學反應(yīng)。
文檔編號C07K16/00GK1034021SQ88107059
公開日1989年7月19日 申請日期1988年9月1日 優(yōu)先權(quán)日1987年9月2日
發(fā)明者金彼得, 內(nèi)維爾·R·卡倫巴哈 申請人:伊根有限公司, 內(nèi)維爾·R·卡倫巴哈