專利名稱：：在芳核上由19-去甲甾族化合物衍生的基團(tuán)取代的新的末位苯氨基鏈烷酸及其鹽的制備方法
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：本發(fā)明的目的是提供一種制備式(Ⅰ)產(chǎn)物的方法，式中，R1代表含有1-8個碳原子的脂族烴基，Ra和Rb可以是相同或不同的，可以代表氫、含有1-4個碳原子的烷基，R2代表氫或含有1-12個碳原子并可被任意取代的烷基，n為1-6，Z代表游離羧基或呈堿金屬鹽或堿土金屬鹽、銨鹽或胺鹽形式的成鹽的羧基，X代表可任意取代并帶有不飽和度的五元或六元環(huán)的部分，13位上的波狀線表示R1可以在α位或β位。R1最好代含有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基或丁基。優(yōu)先選用其中R1在β位的產(chǎn)物。當(dāng)Ra或Rb代表烷基時，則優(yōu)先選用甲基，但Ra和Rb也可以代表乙基、丙基、異丙基或丁基。當(dāng)R2代表任意取代的烷基時，它最好為甲基、乙基或丙基。當(dāng)它為乙基或丙基時，該烷基可被二甲氨基或二乙氨基任意取代，或者也可被吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基任意取代。當(dāng)Z代表成鹽的羧基時，它最好為鈉鹽，鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、銨鹽或藥物制備中所用的胺鹽，如賴氨酸鹽、精氨酸鹽、半胱氨酸鹽、甜菜堿鹽、肉堿鹽、麥格魯明鹽、奎寧鹽、肌氨酸鹽、普魯卡因鹽、組氨酸鹽、或N-甲基葡糖胺鹽。本發(fā)明的目的特別是提供一種制備上述定義的式(Ⅰ)產(chǎn)物并相應(yīng)于式(Ⅰ′)產(chǎn)物的方法，式中，M代表氫或鈉。本發(fā)明的目的更特別是提供一種制備其中X代表下式的式(Ⅰ)產(chǎn)物的方法，式中R1具有上述定義，在16-17位的虛線代表可能存在的雙鍵，Y代表-(CR5R6)n1-，其中n1代表1或2，R5代表氫、含有1-8個碳原子的烷基、含有2-8個碳原子的鏈烯基或炔基，含有6-14個碳原子的芳基或含有7-15個碳原子的芳烷基，R6與R5可以相同或不同，R6可以為R5所代表的各基團(tuán)中的一個，也可以代表羥基，R3和R4可以相同或不同，代表氫;選自O(shè)H、Oalk1和O-CO-alk2中的一個基團(tuán)，其中alk1和alk2代表含有1-8個碳原子的烷基或含有7-15個碳原子的芳烷基;含有2-8個碳原子并可被任意取代的烷基、鏈烯基或炔基;-CO-CH2OH;-COCH2OCOalk3，其中alk3代表含有1-8個碳原子并可被任意取代的烷基或含有7-15個碳原子的芳烷基;CO-CO2H;CO-CO-alk4，其中alk4代表含有1-8個碳原子的烷基;-CHO;-CO-NHalk5，其中alk5代表含有1-8個碳原子的烷基或含有7-15個碳原子的芳烷基;-C≡N;或R3和R4與它們所連的原子一起形成下式基團(tuán)，式中Z1代表氫、含有1-8個碳原子的烷基或酰基，Z2代表含有1-8個碳原子的烷基;或R3和R4與它們所連的原子一起形成下式基團(tuán)式中U代表二價基-(CH2)n2-或-CH＝CH-(CH2)n3-，其中n2表示整數(shù)1、2、3或4，n3表示整數(shù)1或2，或者R3和R4與它們所連的原子一起形成下式基團(tuán)當(dāng)R5或R6代表烷基時，它最好為甲基或乙基。當(dāng)R5或R6代表鏈烯基時，它最好為乙烯基、異丙烯基或烯丙基。當(dāng)R5或R6代表炔基時，它最好為乙炔基或丙炔基。當(dāng)R5或R6代表芳基或芳烷基時，它最好為苯基或芐基。當(dāng)R3或R4代表Oalk1或OCOalk2時，alk1和alk2為甲基、乙基、正丙基、丁基、戊基、己或芐基。當(dāng)R3或R4代表任意取代的烷基、鏈烯基或炔基時，它最好為-C≡C-W、-CH＝CH-W或-CH2-CH2-W，其中W代表氫、鹵素、含3-12個碳原子的三烷基甲硅烷基、含1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基、或苯基，所述的烷基和苯基可被任意取代。alk3、alk4和alk5最好代表優(yōu)先選用的alk1和alk2中之一。Y最好代表亞甲基。具體地講，本發(fā)明的目的是提供一種制備以上定義的式(Ⅰ)產(chǎn)物的方法，其中甾核的環(huán)D為飽和的，R5和R6為氫、n1為1，更具體地講，本發(fā)明提供了制備相應(yīng)于式(Ⅰ″)產(chǎn)物的方法式中M如上定義，R″3代表羥基，在該情況下，R″4代表，其中虛線表示可能存在的第二個或第三個鍵，R7代表氫原子、鹵素原子、三甲基甲硅烷基或甲基，該甲基可由下述基團(tuán)任意取代一個或多個鹵素原子、羥基或含有1-4個碳原子的烷氧基、烷硫基或烷氨基、含2-8個碳原子的二烷氨基或含有3-12個碳原子的三烷基甲硅烷基，或R″4代表2-丙炔基或2-丙烯基，或者R″3和R″4與它們所連的原子一起代表下式基團(tuán)因此，在按照本發(fā)明得到的最好的化合物中，自然可以列舉出以下實施例中所述的產(chǎn)物，尤其是[[4-[17β-羥基-3-氧代-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉。本發(fā)明制備式(Ⅰ)產(chǎn)物的方法，其特征在于在堿存在下使式(Ⅱa)和(Ⅱb)產(chǎn)物與式(Ⅲ)鹵代酯作用，分別得到式(Ⅳa)和(Ⅳb)產(chǎn)物，式中R1、R2、Ra、Rb和X如上定義，X1具有上述X的定義，以及其中的活性官能團(tuán)被保護(hù)的形式，K代表受保護(hù)的氧代基，式中Hal代表鹵素原子，n具有上述定義，R7代表含有1-4個碳原子并可由一個或多個苯基任意取代的烷基，使式(Ⅳb)產(chǎn)物脫水并且使受保護(hù)的活性基團(tuán)有選擇地脫去保護(hù)，得到式(Ⅳa)產(chǎn)物，將式(Ⅳa)產(chǎn)物用堿處理，然后需要的話，用酸處理，得到式(Ⅰ)產(chǎn)物。實施本發(fā)明最好的方法是，在含氮的堿存在下使式(Ⅱ″a)和(Ⅱ″b)產(chǎn)物與溴乙酸乙酯作用，分別得到式(Ⅳ″a)和(Ⅳ″b)產(chǎn)物，式中K1代表以亞乙二氧基或二甲基縮羰基形式保護(hù)的氧代基，如果需要，將式(Ⅳ″a)和(Ⅳ″b)產(chǎn)物氫化，根據(jù)所用的催化劑，分別得到式(Ⅴ″a)和(Ⅴ″b)產(chǎn)物或式(Ⅳ″a)和(Ⅵ″b)產(chǎn)物用酸處理式(Ⅴ″b)和(Ⅵ″b)產(chǎn)物，得到式(Ⅴ″c)和(Ⅵ″c)產(chǎn)物如果需要，使式(Ⅴ″c)和(Ⅵ″c)產(chǎn)物與甲苯磺酰氯在吡啶中反應(yīng)，分別得到式(Ⅴ″d)和(Ⅵ″d)產(chǎn)物將式(Ⅳ″a)、(Ⅴ″a)、(Ⅴ″c)、(Ⅵ″a)、(Ⅵ″c)、(Ⅴ″d)和(Ⅵ″d)產(chǎn)物用氫氧化鈉的水醇溶液處理，然后，如果需要，用鹽酸處理，得到式(Ⅰ″)產(chǎn)物。與溴乙酸乙酯一起使用的含氮堿，優(yōu)先選用三乙胺。將叁鍵氫化成雙鍵的反應(yīng)在催化劑如氫氧化鈀/硫酸鋇存在下進(jìn)行;而將叁鍵完全氫化成單鍵的反應(yīng)最好在氯三(三苯膦)銠存在下進(jìn)行。實施上述方法來制備式(Ⅰ)產(chǎn)物的一些式(Ⅲ)化合物是市售產(chǎn)品;其它可用本
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專業(yè)人員已知的方法(例如參照MOUREU，MURAT和TAMPIER，reportsoftheAcademiedesSciences，172，P.1268及Annalesdechimie[9]15，P.233所述方法進(jìn)行制備。一般來說式(Ⅱa)和(Ⅱb)產(chǎn)物是已知的，其制備方法見下述文獻(xiàn)歐洲專利0，262，188，0，097，572和0，057，115以及法國專利2，566，799和2，620，707。式(Ⅰ)產(chǎn)物具有有效的藥理學(xué)作用。關(guān)于所述產(chǎn)物在激素受體方面的研究已涉及到類孕酮或抗類孕酮、雄激素或抗雄激素活性的主要方面。根據(jù)本專利申請說明書的方法得到的產(chǎn)物，也顯示出抗增殖，抗糖皮質(zhì)激素，抗雌激素和/或雌激素的性質(zhì)。因此，本發(fā)明的產(chǎn)物主要可用作對抗糖皮質(zhì)激素付作用的藥物;它們也可以用來對抗因糖皮質(zhì)激素分泌過多引起的失調(diào)，特別是普通的老化，更具體地說，它們可以用來對抗高血壓、青光眼，動脈粥樣硬化，骨質(zhì)疏松，糖尿病，肥胖癥，以及免疫力低下和失眠癥。具有抗類孕酮性質(zhì)的產(chǎn)物可用來制備新穎的避孕藥或用作中止妊娠的藥劑。根據(jù)本專利申請說明書的方法得到產(chǎn)物，也可用作婦女月經(jīng)的誘導(dǎo)劑，更一般地說，可用于溫血雌性動物。在孕甾酮發(fā)揮根本生理作用的時候，即在周期的黃體期，在著床(或胚胎的植入)時和在妊娠期，可以服用本發(fā)明的化合物。根據(jù)本發(fā)明避孕的方法為，最好在月經(jīng)周期末的一至五天里，將至少一種式(Ⅰ)產(chǎn)物給予婦女服用。這些產(chǎn)物最好通過口服或陰道給藥，但它們也可通過腸胃外給藥。根據(jù)本發(fā)明申請說明書的方法而得到的產(chǎn)物，也可以通過鼻內(nèi)給藥。具有抗類孕酮性質(zhì)的產(chǎn)物也可以用來治療激素失調(diào)，此外，它們可用于治療依賴于激素的腫瘤。這些產(chǎn)物對于垂體分泌的作用，使得它們可用于絕經(jīng)。這些產(chǎn)物同樣可用于農(nóng)場動物，特別是牛和羊的發(fā)情期的同步化。這些產(chǎn)物也可用來控制家畜(如狗和貓)的生育力。根據(jù)本專利申請說明書的方法而得到的產(chǎn)物，也可表現(xiàn)出類孕酮的性質(zhì)，因而可用來治療無月經(jīng)，經(jīng)痛和黃體機(jī)能不全。具有抗雄激素性質(zhì)的產(chǎn)物也可用于治療前列腺肥大和前列腺癌，女子男性化，貧血，多毛癥和痤瘡。它們也可用于男性避孕。最后，根據(jù)本專利申請說明書的方法得到的產(chǎn)物，它們還具有坑增殖，抗雌激素和/或雌激素性質(zhì)，因此可用于治療依賴于激素的癌癥，例如，乳房癌及其轉(zhuǎn)移。這些性質(zhì)也使得這些產(chǎn)物可用于治療良性的乳房腫瘤。上述產(chǎn)物表現(xiàn)出的雌激素性質(zhì)，使得它們可用于治療與雌酮過少相關(guān)的病癥，例如，無月經(jīng)，經(jīng)痛，重復(fù)性流產(chǎn)，月經(jīng)前病癥以及絕經(jīng)。因而可藥用的式(Ⅰ)化合物及其鹽可用作藥物。在本發(fā)明的這些藥物中，可以詳細(xì)地列舉前面提到的較好的式(Ⅰ)化合物特別是可藥用的式(Ⅰ′)和(Ⅰ″)產(chǎn)物或其鹽。在本發(fā)明的藥物中，尤其需提出的是[[4-[17β-羥基-3-氧代-17α-(-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸的鈉鹽。有效劑量隨所需治療的疾病和給藥途徑而變化，例如，對于成年人，口服日劑量可以為10mg-1g。按本專利申請的方法制備的以上定義的產(chǎn)物可用來制備藥物組合物，該組合物中含有至少一種上述可藥用產(chǎn)物作為有效成份。上述產(chǎn)物可以通過消化道，腸胃外和局部途徑使用。它們可以單純的片劑形式或糖衣片，膠囊、粒劑、栓劑、陰道栓劑、油膏，乳膏，凝膠等形式服用，這些形式可按照通常的方法制備?？梢詫⒁环N或多種有效成份與藥用組合物中通常使用的賦形劑，如滑石粉，阿拉伯樹膠，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，可可脂，水或非水媒液，動物或植物源的脂肪物質(zhì)，石蠟衍生物，乙二醇類，各種潤濕劑，分散劑或乳化劑，防腐劑等一起混合配制。此外，其中Z代表成鹽的羧基的式(Ⅰ)產(chǎn)物，特別是其中M代表鈉的式(Ⅰ′)和(Ⅰ″)產(chǎn)物，它們在水中是非常易溶的。這便允許以飲用的、鼻用的或耳用的溶解物的形式及洗眼劑，氣霧劑，IM或IV注射液或膠囊的形式使用這些產(chǎn)物。實施例7產(chǎn)物在100ml水中溶解度大于59g。本發(fā)明的方法可以制備新的中間產(chǎn)物，即上述定義的式(Ⅳa)和(Ⅳb)產(chǎn)物。下述實施例和生物學(xué)研究是用來說明本發(fā)明的，而不是限制本發(fā)明。實施例1苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[17β-羥基-3-氧代-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將1.66g17β-羥基-11-[4-(甲氨基)苯基]-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮與3.2ml三乙胺一些溶于60ml苯中，在氮氣氣氛下將該溶液加熱回流，并加入3.2ml溴乙酸乙酯，冷卻后，用碳酸氫鈉水溶液稀釋反應(yīng)介質(zhì)，傾析分離后，有機(jī)相用水洗滌，干燥，然后蒸餾。在硅膠上層析，用環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(1∶1)洗脫，得到2g產(chǎn)物，用二氯甲烷-異丙醚混合液重結(jié)晶，得到1.7g所需產(chǎn)物，M.p.約為11℃。[α]D＝+120°(c＝1%，在CHCl3中)。Rf＝0.36[薄層層析;載體SiO2;展開劑∶環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(1∶1)]。步驟B[[4-[17β-羥基-3-氧代-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽。在環(huán)境溫度下將0.5g上步制得的酯置于10ml無水乙醇中并用1ml普通蘇打處理。于此溫度下放置15小時后，減壓蒸發(fā)該溶液，將所得殘留物溶于最少量的50%乙醇水溶液中，在LichrosorbKC18R上層析。先用70%甲醇水溶液洗脫，然后用50%甲醇水溶液洗脫，分離得到0.35g所需產(chǎn)物。[α]D＝+137°(c＝1%，在EtOH中)。Rf＝0.6[薄層層析;載體SilicaKC18WhatmanR;展開劑70%甲醇水溶液]。實施例2苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[3，3-[1，2-亞乙二氧基)-5α，17β-二羥基-17α-[3-(四氫-2H-2-吡喃氧基)-1-丙炔基]-雌甾-9-烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將7.1g5α，17β-二羥基-11β-[4-(甲氨基)苯基]-17α-[3-(四氫-2-吡喃氧基)-1-丙炔基]-雌甾-9-烯-3-酮縮亞乙基二醇與8ml三乙胺一起溶于140ml四氫呋喃中。然后在回流下于50分鐘內(nèi)向該溶液中加入5ml溴乙酸乙酯在25ml四氫呋喃中的溶液，回流下攪拌3小時后，依次加入1ml三乙胺和0.5ml溴乙酸乙酯，并將反應(yīng)介質(zhì)回流1小時，然后，冷卻后將反應(yīng)介質(zhì)倒入碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯提取，有機(jī)相用水洗滌，干燥并減壓蒸發(fā)。所得殘留物在硅膠上層析，用環(huán)己烷-乙酸乙酯的混合液(1∶1)洗脫，提到5.6g所需產(chǎn)物。Rf＝0.32[薄層層析;載體硅膠;展開劑∶環(huán)己烷-乙酸乙酯的混合液(1∶1)]。步驟B[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基-1-丙炔基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將0.5g上步所得產(chǎn)物與5ml2N鹽酸一起溶于5ml甲醇中，將所得溶液在環(huán)境溫度下放置2小時，然后用碳酸氫鈉水溶液中和，用二氯甲烷提取。有機(jī)相用水洗滌，干燥并蒸發(fā)。收集粗產(chǎn)物，用乙醚重結(jié)晶，得到0.32g所需產(chǎn)物。M.p.約為140℃。[α]＝+109°(c＝1%，在CHCl3中)。Rf＝0.53[薄層層析;載體硅膠;展開劑乙酸乙酯]。步驟C[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基-1-丙炔基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽在60℃和氮氣下，將0.32g上步制得的產(chǎn)物溶于1.5ml甲醇和0.55ml普通蘇打中。于此溫度下80分鐘后，將混合物冷卻，然后在BondapackC18R上進(jìn)行層析，先用甲醇-水混合液(25∶75)洗脫，再用甲醇-水混合液(30∶70)洗脫。得到280mg所需產(chǎn)物。[α]D＝+133°(c＝1%，在EtOH中)。實施例3(Z)-[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基-1-丙烯基)3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A(Z)-[[4-[3，3-(1，2-亞乙二氧基)-5α，17β-二羥基-17α-[3-(四氫-2H-2-吡喃氧基)-1-丙烯基]-雌甾-9-烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯和其(E)異構(gòu)體將0.8g實施例2步驟A制得的產(chǎn)物與0.3ml吡啶一起溶于16ml乙酸乙酯中。向該溶液中加入12ml10%氫氧化鈀/硫酸鋇，并將整個混合物氫化40分鐘(吸收27.1ml氫)。用氮氣清洗后，分出催化劑，蒸發(fā)濾液。得到0.8g(E)和(Z)異構(gòu)體的混合物，在硅膠上進(jìn)行層析分離，用環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(1∶1)洗脫。得到0.655g(Z)異構(gòu)體和0.065g(E)異構(gòu)體。步驟B(Z)-[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基-1-丙烯基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將6.3g上步制得的產(chǎn)物((Z)異構(gòu)體)溶于60ml甲醇中。然后加入60ml2N鹽酸，將該溶液在環(huán)境溫度下放置5小時，然后小心地倒入碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷提取。有機(jī)相用水洗滌，干燥后減壓蒸發(fā)。得到5.27g混合物，在硅膠上層析，用環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(2∶8)洗脫。得到3.76g所需產(chǎn)物。將500mg所得產(chǎn)物用乙醚-異丙醚混合液重結(jié)晶純化。得到0.486g純化產(chǎn)物。M.p.為163℃。[α]D＝+20°(c＝1%，在CHCl3中)。Rf＝0.29[薄層層析;硅膠;展開劑∶環(huán)己烷-乙酸乙酯的混合液(2∶8)]。步驟C(Z)-[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基-1-丙烯基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽在60℃和惰性氣氛下，將0.78g上步制得的產(chǎn)物溶于3.5ml甲醇和1.5ml普通蘇打中。加熱1小時后冷卻，在BondapackRKC18上層析，用甲醇-水混合液(4∶6)洗脫。將洗脫液冷凍干燥。得到0.712g所需產(chǎn)物。[α]D＝+202°(c＝1%，在EtOH中)。Rf＝0.60[薄層層析;載體硅膠KC18WhatmanR;展開劑∶甲醇-0.05M乙酸銨的水溶液(65∶35)]。實施例4[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基丙基)-3-氧代)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉步驟A[[4-[3，3-(亞乙二氧基)-5α，17β-二羥基-17α-[3-(四氫-2H-2-吡喃氧基)丙基)-雌甾-9-烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將5.6g實施例2步驟A制得的產(chǎn)物溶于70ml甲苯中。加入1.38gWilkinson試劑[氯三(三苯膦)銠]，進(jìn)行氫化直至達(dá)至飽和。真空蒸發(fā)后，得到7.2g紅色樹脂狀物，經(jīng)硅膠層析，用環(huán)己烷-乙酯乙酯混合液(1∶1)洗脫后，得到5.6g所需產(chǎn)物。步驟B[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基丙基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將5.6g上步得到的產(chǎn)物與50ml2N鹽酸一起溶于50ml甲醇中。該溶液在環(huán)境溫度下放置2小時后倒入碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷提取。有機(jī)相用水洗滌，干燥并蒸發(fā)。所得殘留物在硅膠上層析，用環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(2∶8)洗脫。用乙醚重結(jié)晶后，得到2.286g所需產(chǎn)物。M.p.為100℃。[α]D＝+175°(c＝1%，在CHCl3中)。Rf＝0.30[薄層層析;載體硅膠;展開劑乙酸乙酯]。步驟C[[4-[17β-羥基-17α-(3-羥基丙基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽將1.5ml普通蘇打在4ml甲醇中的溶液通過鼓入氮氣進(jìn)行脫氣，然后向其中加入0.8g上步制得的產(chǎn)物。加熱至80℃維持1小時后，冷卻該溶液，在Bondapack柱上層析，用甲醇-水混合液(3∶7)洗脫。將洗脫液冷凍干燥，得到0.637g所需產(chǎn)物。[α]D＝+179°(c＝0.95%，在EtOH中)。實施例5[[4-[3-氧代-螺-[雌甾-4，9-二烯-17β，2′(5H)-呋喃]-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[3-氧代-螺-[雌甾-4，9-二烯-17β，2′(5H)-呋喃]-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將2.08g實施例3步驟B制得的產(chǎn)物溶于40ml吡啶中。在0℃下冷卻該溶液，于攪拌下加入4g甲苯磺酰氯，將溫度升至環(huán)境溫度，使該溶液反應(yīng)4小時。冷卻下用水稀釋后，用二氯甲烷提取。然后，有機(jī)相用水洗滌，干燥并減壓蒸發(fā)。將所得粗產(chǎn)物在硅膠上層析，用環(huán)己烷乙酸乙酯混合液(1∶1)洗脫。得到1.74g所需產(chǎn)物。[α]D＝+229°(c＝1%，在CHCl3中)。Rf＝0.38[薄層層析;載體硅膠;展開劑∶環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(6∶4)]。步驟B[[4-[3-氧代-螺-[雌甾-4，9-二烯-17β，2′(5H)-呋喃]-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽將1.01g上步制得的產(chǎn)物溶于30ml甲醇和2ml普通蘇打中。形成的溶液在氮氣下攪拌15.5小時，然后在不加熱的情況下減壓蒸發(fā)。所得殘留物在BondapackKC18R上層析，用甲醇-水混合液(45∶55)洗脫。冷凍干燥洗脫液，得到0.655g所需的鹽。[α]D＝+253°(c＝1%，在EtOH中)。實施例6[[4-[4′，5′-二氫-3-氧代-螺-[雌甾-4，9-二烯-17β，2′(3′H)-呋喃]-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[4′，5′-二氫-3-氧代-螺-[雌甾-4，9-二烯-17β-2′(3′H)-呋喃]-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將1.71g實施例4步驟B制得的產(chǎn)物溶于34ml吡啶中。在0℃下冷卻形成的溶液，在攪拌下加入1.7g甲苯磺酰氯，然后將反應(yīng)介質(zhì)升至環(huán)境溫度并維持3小時。加入幾片冰后，加入水，并用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用水洗滌，干燥并蒸發(fā)。所得殘留物在硅膠上層析，用環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(7∶3)洗脫，得到1.375g所需產(chǎn)物。[α]D＝+174°(c＝1%，在CHCl3中)。Rf＝0.33[薄層層析;載體硅膠;展開劑∶環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(7∶3)]。步驟B[[4-[4′，5′-二氫-3-氧代-螺-[雌甾-4，9-二烯-17β-2′(3′H)-呋喃]-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽將0.92g上步制得的產(chǎn)物溶于9ml甲醇和1.8ml普通蘇打中。在惰性氣氛下于70℃的油浴上加熱1小時后，將溶液濃縮，并在BandapackR(10μm)上洗進(jìn)行層析，用甲醇-水混合液(30∶70)洗脫，然后用甲醇-水混合液(50∶50)洗脫，將洗脫液冷干燥，得到0.65g所需的鹽。[α]D＝+187°(c＝1%，在乙醇中)。實施例7[[4-[17β-羥基-17α-(2-丙炔基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[17β-羥基-17α-(2-丙炔基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將1.178g17β-羥基-11β-[4-(甲氨基)苯基]-17α-(2-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮與2.3ml三乙胺一起溶于41ml甲苯中。然后加入2.3ml溴乙酸乙酯，并將該溶液于80℃攪拌11.5小時，冷卻后用飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋。傾出水相，再用乙酸乙酯提取。有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，并減壓蒸發(fā)至干。所得殘留物在硅膠上層析，用乙酸乙酯-精油G混合液(50∶50)洗脫，得到1.038g產(chǎn)物，用二氯甲烷-異丙醚混合液重結(jié)晶，得到0.968g所需產(chǎn)物。M.p.＝195℃。Rf＝0.25[薄層層析;載體硅膠F254Merck60R;展開劑∶環(huán)己烷-乙酸乙酯混合液(7∶3)]。步驟B[[4-[17β-羥基-17α-(2-丙炔基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽將0.894g上步制得的產(chǎn)物與1.8ml普通蘇打一起溶于18ml無水乙醇中。在環(huán)境溫度下攪拌9小時后，加入13ml無水乙醇，并繼續(xù)攪拌25小時。然后過濾該溶液，將濾液減壓蒸發(fā)至干。所得殘留物在BondapackKC18R上層析用甲醇-水混合液(先30∶70，然后50∶50)洗脫。將洗脫液減壓濃縮以除去甲醇，通過45μ微孔膜過濾并冷凍干燥。得到0.704g所需產(chǎn)物。[α]D＝+192°±3°(c＝1%，在EtOH中)。Rf＝0.73[薄層層析;載體KC18WhatmanR;展開劑甲醇-水混合液(70∶30)]。實施例8苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[17β-羥基-3-氧代-17α-(2-丙烯基)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將1.068g17β-羥基-11β-[4-(甲氨基)苯基]-17α-(2-丙烯基)-雌甾-4，9-二烯-3-酮與2.1ml三乙胺一起置于37ml甲苯中，然后加入2.1ml溴乙酸乙酯、按與實施例7步驟A相同的操作方法進(jìn)行制備。用二氯甲烷-異丙醚混合液重結(jié)晶后得到1.151g白色晶狀的所需產(chǎn)物。M.p.＝191℃。Rf＝0.27[薄層層析;載體硅膠F254Merck60R;展開劑∶乙溴乙酸-精油G混合(50∶50)]。步驟B[[4-[17β-羥基-17α-(2-丙烯基)-3-氧代-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽將1.079g上步制得的產(chǎn)物溶于22ml乙醇和21.7ml普通蘇打中，環(huán)境溫度下攪拌3小時后加入3ml乙醇，并繼續(xù)攪拌23小時。過濾該溶液，并減壓蒸發(fā)濾液。所得殘留物在KC18BondapackR上層析。用甲醇-水混合液(先用30∶70，然后用50∶50)洗脫。濃縮洗脫液以除去甲醇，過濾并冷凍干燥。得到0.878g所需的鹽。[α]D＝+203°±3°(c＝1%，在EtOH中)。Rf＝0.63[薄層層析;載體KC18WhatmanR;展開劑∶甲醇-水混合液(7∶3)]。實施例9苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽步驟A[[4-[21-氯-17β-羥基-3-氧代-19-去甲-17α-孕甾-4，9-二烯-20-炔-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸乙酯將1.38g21-氯-17β-[4-(甲氨基)苯基]-19-去甲-17α-孕甾-4，9-二烯-20-炔-3-酮與2.5ml三乙胺一起溶于47ml甲苯中。加入2.5ml溴乙酸乙酯后將該溶液于80℃攪拌2小時，然后冷卻，加到飽和碳酸氫鈉水溶液中。傾出水相，有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，并減壓蒸發(fā)至干。所得粗產(chǎn)物在硅膠上層析，用乙酸乙酯-精油G混合液(40∶60)洗脫，用二氯甲烷-異丙醚混合液重結(jié)晶后得到1.555g所需的酯。M.P.＝105℃，Rf＝0.27[薄層層析;載體硅膠;展開劑∶乙酸乙酯-精油G混合液(1∶1)]。步驟B[[4-[21-氯-17β-羥基-3-氧代-19-去甲-17α-孕甾-4，9-二烯-20-炔-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽將1.494g上步制得的產(chǎn)物溶于29ml無水乙醇和2.9ml普通蘇打中。在環(huán)境溫度下將該溶液攪拌22.5小時，過濾，濾液蒸發(fā)至干。所得殘留物在KC18Bondapack上層析，用甲醇-水混合液(先用30∶70，再用50∶50)洗脫，濃縮洗脫液以除去甲醇，過濾，冷凍干燥。得到1.23g所需的鹽。[α]＝+124°±2.5°(c＝1%，在EtOH中)。Rf＝0.67[薄層層析;載體KC18WhatmanR;展開劑∶甲醇-水混合液(70∶30)]。實施例10制備相應(yīng)于下述配方的洗眼劑-實施例1產(chǎn)物…2g-賦形劑…10ml(賦形劑的具體成分蒸餾水，氯化鈉，甲基纖維素，硼酸鈉)藥理學(xué)研究1)甾體激素受體的相對鍵親和力的測定大鼠胸腺的糖皮質(zhì)激素受體將重量160-200g的雄體大白鼠的腎上腺切除。切除后4-8天，將動物殺死，切除胸腺，于0℃，用波特氏聚四氟乙烯燒瓶在TSD(10mMTris，0.25M蔗糖，2mM二硫蘇糖醇，HClPH7.4緩沖溶液)中進(jìn)行勻化(1g組織/10mlTSD)。然后在0℃將勻漿超速離心(105，000g×90mn)。在增加濃度(0-2，500nM)的冷地塞米松或冷的被測驗產(chǎn)物的存在下，將得到的上層清液的等分試樣(即“細(xì)胞溶質(zhì)”)與恒定濃度(T＝2.5nM)的氚化地塞米松一起于0℃培育4小時和24小時。然后用碳葡聚糖吸收技術(shù)，測定每個培育液試樣中鍵合的氚化地塞米松的濃度(B)。兔子宮的孕甾酮受體體重約1Kg未成年的雌兔，接受25μg雌甾二醇的皮敷劑。處理五天后，將動物殺死，切除子宮，稱重，在0℃用波特氏聚四氟乙烯在TS(10mMTris，0.25M蔗糖，HClPH7.4緩沖液)中進(jìn)行勻化(1g)組織/50mlTS)。在0℃將勻漿超速離心(105，000g×90mn)。這樣得到的上層清液的等分試樣即“細(xì)胞溶質(zhì)”，在增大濃度(0-2500nm)的冷孕甾酮或被測驗產(chǎn)物存在下，與恒定濃度(T＝5nm)的氚化R5020(17，21-二甲基-19-去甲-4，9-孕甾二烯-3，20-二酮，具體強(qiáng)的類孕酮活性，對孕甾酮受體具有大的親合力)一起于0℃培育2小時和24小時。然后用碳-葡聚糖吸收技術(shù)，測定每個培育液試樣中鍵合的氚化R5020的濃度(B)。大鼠前列腺的雄激素受體將體重160-200g的雄性大鼠閹割，閹割后24小時將它們殺死，切除前列腺并稱重，于0℃用波特氏聚四氟乙烯燒瓶在TSDPM(10mMTris，0.25M蔗糖，0.1nM苯基甲磺酰氟，20mM鉬酸鹽，2mM二硫蘇糖醇，HClPH7.4緩沖液)中勻化(1g組織/5mlTSOPM)。在0℃將勻漿超速離心(105，000g×60mn)。這樣得到的上層清液的等分試樣(即”細(xì)胞溶質(zhì)”)在增加濃度(0-1000nM)的冷睪酮或被試驗產(chǎn)物的存在下與恒定濃度的氚化睪酮于0℃進(jìn)行培育。培育半小時和24小時之后，用碳-葡聚糖吸收技術(shù)測量每一培育液中鍵合氚化睪酮的濃度(B)。相對鍵親合力的計算相對鍵親合力(RBA)的計算對于所有的受體都是相同的。繪制下面兩條曲線，鍵合的氚化激素的百分比B/T作為冷的參考激素濃度對數(shù)的函數(shù)，B/T作為冷的被測驗產(chǎn)物濃度對數(shù)的函數(shù)。測得的方程的直線為I50＝((B)/(T)max+(B)/(T)min)/2(B)/(T)max＝在濃度(T)下培育該氚化的激素，鍵合的氚化激素的百分比。(B)/(T)min＝在大大過量(2500×10-9M)的冷激素存在下，在濃度(T)下培育該氚化的激素，鍵合的氚化激素的百分比。直線I50與曲線的交點使得能夠?qū)鋮⒖技に氐臐舛?CH)和冷的被試驗產(chǎn)物的濃度(CX)進(jìn)行測定，它是抑制受體50%鍵合的氚化激素的濃度。被試驗產(chǎn)物的相對健親合力(RBA)可通過方程＝100((CH))/((CX))而測得。得到的實驗結(jié)果如下</tables>2)與地塞米松抗糖皮質(zhì)激素活性的比較體外研究大鼠胸腺細(xì)腺細(xì)胞中尿核甙的結(jié)合糖皮質(zhì)激素引起淋巴組織中核苷結(jié)合受到抑制。在被試驗產(chǎn)物的存在下，通過測定胸腺細(xì)胞中放射活性的尿核甙的結(jié)合，能夠?qū)λ奶瞧べ|(zhì)激素活性進(jìn)行評價。方法這是按照Dausse和Coll所描述的技術(shù)進(jìn)行的。切除腎上腺已被切除的大鼠(160-180g)的胸腺并切碎，在Hanks液中用聚四氟乙烯勻化器慢慢勻化。得到的細(xì)胞懸浮液用紗布過濾，以800g×10mn離心。然后再以800g×10mn離心，這樣得到的沉淀物懸浮于營養(yǎng)介質(zhì)(M.E.M.Gibco)中，將細(xì)胞濃度調(diào)節(jié)到大約20×106個細(xì)胞/ml。然后在有或者沒有增加濃度(10-8M-10-6M)的產(chǎn)物存在下，于37℃和卡波金條件下，將250μl等分試樣與5×10-8M的地塞米松一起培育3小時，然后向每一培育液試樣中加0.1uCi氚化的尿核甙，繼續(xù)培育1小時。冷卻培育液，加入1ml5%重量/體積的三氯乙酸(TCA)冷溶液。用WhatmanGF/C過濾器收集沉淀，用2ml5%的冰冷的TCA洗滌4次。用液體閃爍光譜測量儀測定保留在過濾器上的放射活性(代表在胸腺細(xì)胞中結(jié)合的氚化尿核甙)。胸腺細(xì)胞尿核甙結(jié)合的抑制百分率被試驗產(chǎn)物的摩爾濃度</tables>上述測定表明實施例1的產(chǎn)物具有良好的抗糖皮質(zhì)激素活性。權(quán)利要求1.制備式(Ⅰ)產(chǎn)物的方法，式中，R1代表含有1-8個碳原子的脂族烴基，Ra和Rb可以相同或不同，代表氫、含有1-4個碳原子的烷基，R2代表氫或含有1-12個碳原子并且可被任意取代的烷基，n為1-6，Z代表游離羧基或呈堿金屬鹽或堿土金屬鹽、銨鹽或胺鹽形式的成鹽的羧基，X代表可任意地取代并帶有不飽和度的五元或六元環(huán)的部分，13位上的波狀線表示R1可以在α位或β位，所述方法的特征在于在堿存在下使式(Ⅱa)和(Ⅱb)產(chǎn)物與式(Ⅲ)的鹵代酯作用，分別得到了式(Ⅳa)和(Ⅳb)產(chǎn)物，式中R1、R2、Ra、Rb和X如上定義，X1具有權(quán)利要求1中X的定義，以及其中的活性官能團(tuán)被保護(hù)的形式，K代表保護(hù)了的氧代基，式中Hal表示鹵素原子，n具有上述定義，R7代表含有1-4個碳原子并可由一個或多個苯基任意取代的烷基，使式(Ⅳb)產(chǎn)物脫水，如果需要，使受保護(hù)的活性基團(tuán)脫去保護(hù)，得到式(Ⅳa)產(chǎn)物，將式(Ⅳa)產(chǎn)物用堿處理，然后需要的話，用酸處理，得到式(Ⅰ)產(chǎn)物。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于如果需要，使式(Ⅳa)和(Ⅳb)產(chǎn)物以任意次序進(jìn)行一步或多步下述反應(yīng)a)使可以帶有X和Xa的重鍵進(jìn)行部分氫化或完全氫化，b)使X帶有的兩活性官能團(tuán)以一種方式環(huán)化，從而在甾核的17位形成螺環(huán)。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，制備的是相應(yīng)于式(Ⅰ′)的式(Ⅰ)產(chǎn)物，式中M代表氫原子或鈉原子，所述方法的特征在于所用的原料為其中n＝1的式(Ⅲ)產(chǎn)物，4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任何一項的方法，其特征在于以下述式(Ⅱa)或(Ⅱb)產(chǎn)物為原料，其中X代表下式式中R1具有上述定義，在16-17位的虛線表示可能存在的雙鍵，Y代表-(CR5R6)n1-，其中n1代表1或2，R5代表氫、含有1-8個碳原子的烷基、含有2-8個碳原子的鏈烯基或炔基、含有6-14個碳原子的芳基或含有7-15個碳原子的芳烷基，R6與R5可以相同或不同，R6可以為R5所代表的各基團(tuán)中的一個，也可以代表羥基，R3和R4可以相同或不同，代表氫;選自O(shè)H、Oalk1和O-CO-alk2中的一個基團(tuán)，其中alk1和alk2代表含有1-8個碳原子的烷基或含有7-15個碳原子的芳烷基;含有2-8個碳原子并可被任意取代的烷基、鏈烯基或炔基;-CO-CH2OH;-COCH2OCOalk3，其中alk3代表含有1-8個碳原子并可被任意取代的烷基或含有7-15個碳原子的芳烷基;CO-CO2H;CO-CO-alk4，其中alk4代表含有1-8個碳原子的烷基;-CHO;-CO-NHalk5，其中alk5代表含有1-8個碳原子的烷基或含有7-15個碳原子的芳烷基;-C≡N;或R3和R4與它們所連的原子一起形成下式基團(tuán)，式中Z1代表氫、含有1-8個碳原子的烷基或?；?，Z2代表含有1-8個碳原子的烷基;或R3和R4與它們所連的原子一起形成下式基團(tuán)，式中U代表二價基-(CH2)n2-或-CH＝CH-(CH2)n3-，其中n2表示整數(shù)1、2、3或4，n3表示整數(shù)1或2，或者R3和R4與它們所連的原子一起形成下述基團(tuán)5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于用作原料的式(Ⅱa)或(Ⅱb)產(chǎn)物中，甾核的環(huán)D不帶有不飽和度，R5和R6代表氫原子，n為1。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任何一項的方法，其中制備的是相應(yīng)于式(Ⅰ″)的權(quán)利要求1所定義的通式產(chǎn)物，式中M如上定義，R″3代表羥基，在該種情況下，R″4表示--R7，其中虛線表示可能存在的第二個或第三個鍵，R7代表氫原子、鹵素原子、三甲基甲硅烷基或甲基，該甲基可由下述基團(tuán)任意取代一個或多個鹵素原子、羥基或含有1-4個碳原子的烷氧基、烷硫基或烷氨基、含2-8個碳原子的二烷氨基或含有3-12個碳原子的三烷基甲硅烷基，或R″4表示2-丙炔基或2-丙烯基，或者R″3和R″4與它們所連的原子一起表示下式基團(tuán)所述方法的特征在于在含氮堿存在下使相應(yīng)于式(Ⅱ″a)和(Ⅱ″b)的權(quán)利要求1所定義的式(Ⅱa)和(Ⅱb)產(chǎn)物與溴乙酸乙酯作用，分別得到式(Ⅳ″a)和(Ⅳ″b)產(chǎn)物，式中K1代表以亞乙二氧基或二甲基縮羰基形式保護(hù)的氧代基，如果需要，將式(Ⅳ″a)和(Ⅳ″b)產(chǎn)物氫化，根據(jù)所用的催化劑，分別得到式(Ⅴ″a)和(Ⅴ″b)產(chǎn)物或式(Ⅵ″a)和(Ⅳ″b)產(chǎn)物用酸處理式(Ⅴ″b)和(Ⅵ″b)產(chǎn)物，得到式(Ⅴ″c)和(Ⅵ″c)產(chǎn)物如果需要，使式(Ⅴ″c)和(Ⅵ″c)產(chǎn)物與甲苯磺酰氯在吡啶中反應(yīng)，分別得到式(Ⅴ″d)和(Ⅵ″d)產(chǎn)物將式(Ⅳ″a)、(Ⅴ″a)、(Ⅴ″c)、(Ⅵ″a)、(Ⅵ″c)、(Ⅴ″d)和(Ⅵ″d)產(chǎn)物用氫氧化鈉的水醇溶液處理，然后，如果需要，用鹽酸處理，得到式(Ⅰ″)產(chǎn)物。7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任意一項的方法，其特征在于權(quán)利要求1中定義的式(Ⅰ)產(chǎn)物為[[4-[17β-羥基-3-氧代-17α-(1-丙炔基)-雌甾-4，9-二烯-11β-基]苯基]甲氨基]乙酸鈉鹽。全文摘要本發(fā)明提供了在芳核上由19-去甲甾族化合物衍生的基團(tuán)取代的新的末位苯氨基鏈烷酸及其鹽，所述化合物的制備方法以及含有所述化合物的藥物組合物。文檔編號C07J63/00GK1051362SQ9010716公開日1991年5月15日申請日期1990年8月23日優(yōu)先權(quán)日1989年8月23日發(fā)明者馬蒂娜·莫古伊魯斯基,呂西安·內(nèi)德列克,弗朗索瓦·尼克,丹尼爾·菲利貝爾申請人:魯索-艾克勒夫公司