專利名稱：取代的n-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的取代的N-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物，這類衍生物是血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑，可用于調(diào)節(jié)由血管緊張素Ⅱ引起的或加重的高血壓，也可用于治療充血性心衰、腎衰和青光眼。本發(fā)明還涉及含有取代的N-(咪唑基)烷基丙氨酸衍生物的藥用組合物和用這些化合物作為血管緊張素Ⅱ的拮抗劑、抗高血壓劑和充血性心衰、腎衰及青光眼的治療劑的方法。
稱之為肽加壓激素類具有血管加壓作用，這一作用與人類高血壓的病因?qū)W有關(guān)。腎素一血管緊張素系統(tǒng)的不適當(dāng)?shù)幕钚运坪跏亲园l(fā)性高血壓、充血性心衰和某些腎病的關(guān)鍵因素。除了直接作用于動脈和小動脈外，作為已知的最有效的內(nèi)源性血管收縮劑之一的血管緊張素Ⅱ(AⅡ)能刺激腎上腺皮質(zhì)的醛甾酮釋放。因此，由于它參與腎鈉處理的控制，腎素-血管緊張素系統(tǒng)在心血管的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起重要作用。
用轉(zhuǎn)換酶抑制劑(例如Captopril)阻斷腎素-血管緊張素系統(tǒng)已經(jīng)證明在高血壓和充血性心衰的臨床治療中是有效的〔Abrams，W.B.，et al.，(1984)，F(xiàn)ederation Proc.，43，1314〕。抑制腎素-血管緊張素系統(tǒng)的最直接的途徑是阻斷AⅡ?qū)κ荏w的作用。令人信服的證據(jù)表明AⅡ也引起腎血管收縮和鈉潴留，后者是許多失調(diào)(如心衰、肝硬變和妊娠綜合癥)的特征〔Hollenberg，N.K.，(1984)，J.Cardiovas.Pharmacol.，6，S176〕。此外，最近的動物研究表明腎素-血管緊張素系統(tǒng)的抑制可以有益于停止或減慢慢性腎衰的發(fā)展〔Anderson，S.，et al.，(1985)，J.Clin.Invest.，76，612〕。最近的專利申請(南非專利，申請?zhí)枮?7/01，653)要求授權(quán)AⅡ拮抗劑用于降低和控制哺乳動物升高的眼內(nèi)壓，特別是青光眼。
本發(fā)明化合物能抑制、阻斷和拮抗激素AⅡ的作用，因此用于調(diào)節(jié)和改善血管緊張素誘導(dǎo)的高血壓、充血性心衰、腎衰、青光眼和由于AⅡ引起的其它疾病。當(dāng)將本發(fā)明化合物給予哺乳動物時，可降低AⅡ?qū)е碌母哐獕海⒛軠p小或控制AⅡ?qū)е碌钠渌Y狀。預(yù)計本發(fā)明化合物也可能有利尿作用。
阻斷和抑制AⅡ作用的重要性的認(rèn)識激勵人們努力合成AⅡ拮抗劑。下述文獻公開了咪唑衍生物，它們具有AⅡ阻斷活性，用作抗高血壓劑。
美國專利4，340，598號公開了取代的咪唑-5-基烷酸及其酰胺和低級烷基酯衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下
式中R1是低級烷基或任意被鹵素或硝基取代的苯基C1-2烷基;
R2是低級烷基，環(huán)烷基或任意取代的苯基;
R3和R4中之一是-(CH2)nCOR5，其中R5是氨基、低級烷氧基或羥基，n是0-2;R3和R4的另一個是氫或鹵素。
實例包括1-芐基-2-正丁基-4-氯咪唑-5-乙酰胺和1-芐基-2-正丁基-5-氯咪唑-4-乙酸。
美國專利4，355，040號公開了1-芐基咪唑-5-基乙酸衍生物，其結(jié)構(gòu)式為
式中R1是低級烷基、環(huán)烷基或任意取代的苯基;X1、X2和X3分別是氫，鹵素，硝基，氨基，低級烷基，低級烷氧基，芐氧基或羥基;Y是鹵素和R2是氫或低級烷基。具體化合物是1-(2-氯芐基)-2-正丁基-4-氯咪唑-5-乙酸。
歐洲專利申請103，647號公開了下式所示取代的1-芐基-2-苯基-4-氯-咪唑-5-基乙酸衍生物
式中R是低級烷基。具體公開的化合物是4-氯-1-(4-甲氧基-3-甲基芐基)-2-苯基咪唑-5-乙酸。
歐洲專利申請245，637號公開了下式的取代的4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并〔4，5-C〕吡啶衍生物
式中
是單鍵或雙鍵;有一個R1存在并代表下述基團，例如任意取代的(CH2)1-6萘基、(CH2)1-6雜芳基或(CH2)1-6苯基;R3包括下述基團，例如COC1-15烷基或任意取代的(CH2)1-6Ph;R4包括CO2R9，其中R9是氫、低級烷基或芐基;n是0-3。公開的具體化合物是5-〔(4-硝基苯基)乙酰基〕-1-(苯甲基)-4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并〔4，5-C〕吡啶-6-羧酸。
歐洲專利申請253，310號公開了下式的取代的1-芳基咪唑
式中R1包括下述基團，例如任意取代的苯基或金剛烷基甲基;R2包括下列基團，例如氫、鹵素、NO2、C1-4烷基、或C1-4烷氧基;R3是氫、鹵素、C1-4烷基，或C1-4烷氧基;R6包括下列基團，例如C2-10烷基、C3-10鏈烯基、C3-8環(huán)烷基、任意取代的芐基或Z(CH2)1-5R5，其中Z是0或S，R5是氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基或鏈烯基;R7是氫、鹵素、NO2、CF3或CN;和R8包括下列基團例如C1-10烷酸、酯和酰胺和烷基N-烷基氨基甲酸酯。實例包括2-正丁基-5-氯-1-(4-硝基芐基)咪唑-4-乙酸，1-〔(2′-羧基聯(lián)苯基-4-基)甲基〕-正丁基-4-氯咪唑-5-羧酸甲酯。
英國專利1，341，375號描述了一系列取代的咪唑化合物，由于它們對H-1，H-2和/或其他組胺受體有活性，所以它們是有用的。在該專利中公開的取代的氨基烷基咪唑化合物的結(jié)構(gòu)式如下
式中A是任意被烷基或芳烷基取代的C1-6烷基;R是取代或未取代的烷基，芳基或芳烷基;R1是氫，烷基，苯基，苯烷基或咪唑烷基;R20是氫，可任意被鹵素、OH、CN、CO2H、NH2或CONH2取代的烷基，或COY，其Y是R11O或R11NH，R11是取代或未取代的烷基、芳基、芳烷基或氨基;X是0-3。實例包括N-〔2-〔4(5)-咪唑基〕乙基〕甘氨酸和1-芐基-5-(2-氨乙基)咪唑。
下式代表的本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽是血管緊張素Ⅱ受體的阻斷劑
式中R是金剛烷基甲基，或苯基，聯(lián)苯基或萘基，上述的每個芳基可以是未取代芳基或者被1-3個下列基團取代，這些基團選自Cl、Br、F、I、C1-6烷基、硝基、CO2R7、C1-6烷氧基、羥基、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、四唑-5-基、SO2NHR7、NHSO2R7、SO3H、PO(OR7)2、CONR7R7、CN、NR7R7、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7CON(R7)2、NR7COW、SO2W或W;
R1是C2-10烷基，C3-10鏈烯基，(CH2)0-8C3-6環(huán)烷基，或被下述1-3個基團取代或未取代的(CH2)0-8苯基，所述基團選自C1-6烷基、硝基、Cl、Br、F、I、羥基、C1-6烷氧基、NR7R7、CO2R7、CN、CONR7R7、W、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7COW、SC1-6烷基、SO2W或SO2C1-6烷基;
R2是氫，Cl，Br，F(xiàn)，I，CHO，羥甲基，C1-6烷基，NR7R7，CO2R7，CONR7R7，NO2，CN，苯基或W;
X是單鍵，S或0;
R3是H，C1-6烷基，C3-6鏈烯基，COC1-5烷基或(CH2)0-3苯基;
R4是H，C1-6烷基，C3-6鏈烯基，或(CH2)0-3苯基;
R5是CO2R7，CONR7R7或四唑-5-基;
每個n分別是0-4;
R6是苯基，萘基，2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，2-，3-或4-吡啶基，嘧啶基，咪唑基，噻唑基，三唑基，四唑基，吡唑基，吡咯基，噁唑基或異噁唑基，上述每個芳基或雜芳基可以是未取代的或者被下列基團取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、Cl、Br、F、I、NR7R7、CO2R7、CONR7R7、SO3H、SO2NHR7、OH、NO2、W、SO2C1-6烷基、SO2W、SC1-6烷基、NR7COH、NR7COW或NR7COC1-6烷基;
W是CmF2m+1，其中m是1-4;和每個R7分別是H或C1-6烷基。
式(Ⅰ)代表的本發(fā)明優(yōu)選化合物是下述化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物，即其中R是未取代或取代苯基，若被取代時則可被1-3個下列基團取代氯、氟、硝基、甲基、三氟甲基、甲氧基、羥基、磺酰氨基、氨磺?；?、羧基、羰C1-4烷氧基、氨甲酰基、氰基或四唑-5-基;
R1是C2-8烷基;
X是單鍵或S;
R2是氫，氯，氟或三氟甲基;
R3是氫，甲基，或COC1-5烷基;
R4是氫，或C1-3烷基;
R5是CO2H或四唑-5-基;
R6是苯基或2-噻吩基;和每個n分別是1或2。
本文采用的烷基、鏈烯基、烷氧基和鏈炔基等詞的含義是直鏈或支鏈碳鏈，其長度由位于該詞前面的數(shù)字標(biāo)出。式(Ⅰ)化合物的范圍包括它們的外消旋混合物和單一的對映體化合物，D對映體的活性一般較強，因此，D對映體優(yōu)于L對映體。
本發(fā)明的具體化合物包括(但不是限制于)下列化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和水合物N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-丁酰基苯基丙氨酸，N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸，N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，
N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-乙基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-丙基苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-乙?；交彼幔琋-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕高苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸，N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩)丙氨酸，和N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯基丙氨酸。
本發(fā)明還涉及含有藥用載體和有效量式(Ⅰ)化合物的藥用組合物。
本發(fā)明還包括拮抗血管緊張素Ⅱ受體的方法，它包括將有效量的式(Ⅰ)化合物給予需要該化合物的受試者。本發(fā)明還包括產(chǎn)生抗高血壓活性的方法和用本發(fā)明化合物治療充血性心衰、腎衰和青光眼的方法。
本發(fā)明的化合物和藥用組合物及本發(fā)明方法按本文描述的方法制備或?qū)嵤?，并用實例解釋之。試劑、咪唑環(huán)上的保護基和官能團及分子的其它部分必須與指出的化學(xué)位移一致。合成的步驟必須符合咪唑環(huán)及分子的其它部分上的官能團和保護基。
下面的方法可用于制備式(Ⅰ)化合物，具體地講用于制備下述化合物即式中R是2-氯苯基或4-羧基苯基;R1是正丙基或正丁基;X是單鍵或S;R2是氫、氯或氟;R3是氫、甲基或COC1-5烷基;R4是氫或C1-3烷基;R5是CO2H或四唑-5-基;R6是苯基或2-噻吩基;每一個n分別是1或2。
起始原料2-R1X-咪唑是本專業(yè)熟知的(J.Org.Chem.454038，1980)，可按已知方法合成。例如，按下法可將咪唑轉(zhuǎn)變成2-正丁基咪唑，即，將咪唑與原甲酸三乙酯和對甲苯磺酸反應(yīng)得二乙氧基原甲酰胺咪唑，然后用正丁基鋰處理得該原甲酰胺咪唑的2-鋰衍生物，再用正丁基碘于適宜溶劑〔如四氫呋喃(THF)〕中烷基化。
通過已知方法將1-R(CH2)1-4基團連于2-R1X-咪唑上，例如，用R-(CH2)1-4溴化物、甲磺酸酯或乙酸酯(如2-氯芐基溴)，于適宜溶劑〔如二甲基甲酰胺(DMF)〕中，在適宜的酸受體(如烷基鈉、碳酸鈉或鉀、金屬氫化物，最好是氫化鈉)存在下，于25-100℃(最好是50℃)反應(yīng)。得到的1-R(CH2)1-4-2-R1X-咪唑按下法進行5-位的羥甲基化例如，在乙酸鈉存在下于乙酸中與甲醛反應(yīng)，得到1-R(CH2)1-4-2-R1X-5-羥甲基咪唑中間體。
另外，按下法可制得1-R(CH2)1-4-2-R1-5-羥甲基咪唑中間體將亞氨基醚，R1-C(＝NH)-O-烷基(例如正戊脒甲基醚)于液氨中加壓下與二羥基丙酮反應(yīng)，得2-R1-5-羥甲基咪唑。二乙酸酯中間體用三氟乙酸(triflate)2-氯芐酯進行N-烷基化，再用堿水(如10%NaOH液)處理得到的1-R(CH2)1-4-2-R1-5-乙酰氧基甲基咪唑，得1-R(CH2)1-4-2-R1-5-羥甲基咪唑中間體。
按美國專利4，194，049號中描述的方法可制得式中R基團直接與咪唑環(huán)氮原子相連接的化合物。例如，在路易斯酸(如鹽酸，氯化鋅或氯化鋁)存在下，于惰性溶劑(如四氫呋喃，二氯甲烷或甲苯)中，在25-150℃下將適宜取代的芐胺與R1-腈(如戊腈)反應(yīng)。得到的脒在適宜溶劑(如C1-4烷醇)與鹵代丙醛(如溴代丙醛)反應(yīng)，被轉(zhuǎn)變成1-R-2-R1-咪唑5-甲醛衍生物。在有機溶劑(如C1-4烷醇)中，用金屬氫化物還原劑(如硼氫化鈉)將5-甲醛化合物還原，可制得5-羥甲基咪唑。
此外，按下法可制備2-R1S-咪唑化合物在堿(如三乙胺)存在下，于適宜溶劑(如二甲基甲酰胺)中用氯乙酸C1-6烷基酯(如氯乙酸甲酯)使被1-3個取代基取代的芐胺烷基化、所述取代基選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、NO2、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、或CmF2m+1，式中m是1-4。制得的烷氨基烷基酯化合物在適宜溶劑(如二甲苯)中用甲酸對氨基和酯基進行N-處理，然后進行α-碳原子的C-處理。該中間體在惰性有機溶劑(如C1-4烷醇)中與酸性硫代氰酸鹽(最好是硫代氰酸鉀)反應(yīng)產(chǎn)生1-RCH2-2-巰基-5-烷酸酯咪唑化合物。在適宜堿(如碳酸鈉)存在下，于適宜溶劑中，將酯基咪唑化合物的游離巰基與鹵素-R8化合物(最好是正丙基溴)反應(yīng)，其中R8是C2-10烷基、C3-10鏈烯基、(CH2)0-8C3-6環(huán)烷基或適宜取代的(CH2)0-8苯基。在適宜的溶劑(如四氫呋喃)中，于-78℃至25℃(最好低于-10℃)下，用適宜試劑(最好是氫化二異丁基鋁)將上述的酯還原成5-羥甲基咪唑中間體。
上述中間體的5-羥甲基與鹵化劑(如亞硫酰氯)反應(yīng)得取代的5-氯甲基咪唑，它再與式(Ⅱ)的胺反應(yīng)
式中R4、R6和n的定義同式(Ⅰ)化合物。所述胺是D，L-，D-或L-β-芳基或β-雜芳基丙氨酸酯，它與5-氯甲基化合物在堿的存在下(如三乙胺)于適宜溶劑(最好是二甲基甲酰胺)中，在0-110℃(最好在90℃)反應(yīng)。當(dāng)與氮原子連接的R4取代基是H時，上述產(chǎn)物胺在堿(如三乙胺)存在下，于惰性溶劑(最好是二氯甲烷)中任意與C1-5C(O)鹵化物(如丁酰氯)反應(yīng)，得酰胺。得到的取代的式(Ⅰ)酯化合物在適宜溶劑(最好是C1-4烷醇)中用堿水(如NaOH或KOH水溶液)水解成相應(yīng)的式(Ⅰ)羧酸。
此外，在四氫呋喃中用適宜試劑(如脫水鉻酸-硅膠)處理，最好是在適宜溶劑(如苯，二氯甲烷，二甲苯，優(yōu)選的是甲苯)中于25-140℃(優(yōu)選的是約100℃)下用活化的二氧化錳處理，1-R(CH2)n-2R1X-5-羥甲基咪唑中間體的羥甲基可被氧化成醛基。1-R(CH2)n-2-R1X-咪唑-5-甲醛按上述方法與式(Ⅱ)胺化合物反應(yīng)，得亞胺化合物，后者于適宜溶劑(如C1-4烷醇)中用適當(dāng)?shù)脑噭?如堿性硼氫化物，優(yōu)選的是氰基硼氫化鈉)還原，可得到式(Ⅰ)的酯化合物。按上述方法也可制得式(Ⅰ)的N-?；汪人峄衔?。
用上述方法，以相應(yīng)的烷酸酯(參見美國專利4，340，598號)為原料可制得咪唑環(huán)5-位的亞烷基橋n為2或3的式(Ⅰ)化合物。
用醚裂解劑(如三溴化硼或硼酸)可將R為C1-6烷氧基的式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)變成R為羥基的式(Ⅰ)化合物。
R為CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物于甲醇或乙醇中用氫氧化鈉或鉀水溶液堿水解，或于鹽酸水溶液中酸水解，可制備R為羧基的式(Ⅰ)化合物。
式(Ⅰ)的四唑化合物按下法制備將上述的式(Ⅰ)的酸化合物于適宜溶劑(如苯)中與鹵化劑(如亞硫酰氯)反應(yīng)，得相應(yīng)的酰鹵化合物。后者與濃氨水反應(yīng)被轉(zhuǎn)變成伯酰胺化合物，接著該酰胺于乙腈/二甲基甲酰胺中用草酰氯/二甲基甲酰胺脫氫得腈類化合物，它是合成式(Ⅰ)的四唑化合物的前體。該腈于適宜溶劑(四氫呋喃)中與疊氮化物(最好是由疊氮化鈉和氯化鋁反應(yīng)直接制備的疊氮化鋁)反應(yīng)，得到四唑化合物。
按本專業(yè)已知的方法，用適宜的有機或無機酸，可制得式(Ⅰ)化合物藥學(xué)上可接受的酸成鹽。例如，本發(fā)明的堿在水混溶的溶劑(如乙醇)中與適宜的無機或有機酸反應(yīng)，然后除去溶劑，分離出生成的鹽，或者在酸能溶的水不混溶溶劑(如乙醚或氯仿)中反應(yīng)，直接分離或除去溶劑后分離出生成的鹽。適宜酸的代表實例是馬來酸，富馬酸，苯甲酸，抗壞血酸，Pamoic acid，琥珀酸，雙亞甲基水楊酸，甲磺酸，乙二磺酸，乙酸，丙酸，酒石酸，水楊酸，檸檬酸，葡萄糖酸，天冬氨酸，硬脂酸，棕櫚酸，衣康酸，乙醇酸，對氨基苯甲酸，谷氨酸，苯磺酸，鹽酸，溴氫酸，硫酸，環(huán)己基氨磺酸，磷酸和硝酸。
按已知方法，用有機或無機堿，包括無毒的堿金屬和堿土金屬堿(例如鈣、鋰、鈉和鉀氫氧化物)、氫氧化銨和無毒的有機堿(如三乙胺，二環(huán)己基胺，丁胺，哌嗪，麥格魯胺(meglumine)，膽堿，二乙醇胺和三甲胺)，可制得具有羧基的式(Ⅰ)化合物的藥學(xué)上接受的堿成鹽。
用體外和體內(nèi)方法評價了式(Ⅰ)化合物的抗血管緊張素Ⅱ的活性。用本發(fā)明化合物與125Ⅰ-血管緊張素Ⅱ競爭性鍵合于血管的血管緊張素Ⅱ受體上的能力和它們阻斷兔離體主動脈對血管緊張素Ⅱ的收縮反應(yīng)的能力來測定體外拮抗活性。體內(nèi)活性是用本發(fā)明化合物抑制清醒大鼠對外源性血管緊張素Ⅱ的升壓反應(yīng)和降低腎素依賴的高血壓型大鼠血壓的效率來評價的。
鍵合放射標(biāo)記的鍵合測定是對前人描述方法(參見Cunther et al.，CirC.ReS.47278，1980)的改良。將大鼠腸系膜動脈的特定部分于Tris緩沖液中與80PM125Ⅰ-血管緊張素Ⅱ在25℃保溫1小時，溶液中加有或不加血管緊張素Ⅱ拮抗劑。迅速過濾保溫液，用r-計數(shù)器將收集于濾紙上的鍵合125Ⅰ-血管緊張素Ⅱ受體定量，用IC50表示血管緊張素Ⅱ拮抗劑的效力，即替代50%的特異性鍵合血管緊張素Ⅱ所需的拮抗劑濃度。本發(fā)明化合物的IC50實例是約0.6-30μM。
主動脈用兔主動脈測量本發(fā)明化合物對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的血管收縮的拮抗能力。切一段兔胸主動脈管，放于裝有生理鹽水的器官浴中。將主動脈管固定于金屬支承物上，并與連有記錄器的力量轉(zhuǎn)換器相接。記錄無拮抗劑情況下或與拮抗劑一起保溫30分鐘后對血管緊張素Ⅱ的累積濃度反應(yīng)曲線。用平均有效濃度通過劑量比率方法計算拮抗劑的解離常數(shù)(KB)。本發(fā)明化合物的KB舉例是約0.15-15μM。
清醒大鼠對血管緊張素Ⅱ的升壓反應(yīng)的抑制對大鼠的中心股動脈和股靜脈以及胃分別插管(參見Cellai et al.，Kidney Int.1549，1977)。手術(shù)2-3天后將大鼠放于固定籠中，用壓力換能器連續(xù)地監(jiān)測血壓并用多種波動記錄儀記錄。比較在靜注或口服(劑量為3-300mg/kg)本發(fā)明化合物前后的不同時間大鼠對靜注血管緊張素Ⅱ(劑量為250mg/kg)所引起的平均動脈壓變化。對血管緊張素Ⅱ產(chǎn)生50%抑制作用所需的化合物劑量(即IC50)被用來評價該化合物的效力。N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸的IC50是11mg/kg(靜注)和45mg/kg(口服)。
抗高血壓活性通過測定本發(fā)明化合物降低清醒大鼠平均動脈壓的能力來評價它們的抗高血壓活性，所述清醒大鼠是通過結(jié)扎左腎動脈而獲得腎素依賴型高血壓模型的(參見Cangiano et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.208310，1979)。按上述方法將腎動脈結(jié)扎的大鼠進行中心插管，在腎動脈結(jié)扎7-8天后，此時血漿腎素濃度最高，將清醒大鼠放于固定器中，連續(xù)地記錄靜注或口服本發(fā)明化合物前后的平均動脈血壓。降低平均動脈血壓30mmHg所需的化合物劑量(IC30)被用作藥效的評價指標(biāo)。N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基咪唑-5-基｝甲基-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸的IC30為15mg/kg(靜注)和70mg/kg(口服)。
本發(fā)明采用的眼內(nèi)壓降低作用可按Watkins等人描述的方法測定，參見J.Ocular Pharmacol.，1(2)161-168(1985)。
式(Ⅰ)化合物被摻入方便的劑型中，例如注射劑，對于口服的活性化合物而言，制成膠囊或片劑。采用固體或液體的藥用載體。固體載體包括淀粉，乳糖，硫酸鈣二水合物，石膏粉，蔗糖，滑石粉，明膠，瓊脂，果膠，阿拉伯樹膠，硬脂酸鎂和硬脂酸。液體載體包括糖漿，花生油，橄欖油，食鹽水和水。同樣，載體或稀釋劑也可包括各種延長釋放物質(zhì)，例如甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，單獨使用或與蠟混合使用。固體載體的用量是可變的，但最好是每劑量單位含約25mg至1g。用液體載體時，劑型最好是糖漿，酏劑，乳化劑，軟明膠膠囊，滅菌注射液(如安瓿)，或水的或非水的液體混懸液。
就局部的眼科給藥而言，適用的藥用組合物包括溶液，混懸液，油膏和固體插入物。典型的藥學(xué)上可接受的載體是例如，水，水與水可混溶溶劑(如低級烷醇或植物油)的混合物，水溶的眼科學(xué)可接受的無毒聚合物(如纖維素衍生物，例如甲基纖維素)。藥用制劑也可含有無毒的輔劑，例如乳化劑，防腐劑，潤濕劑，稠化劑(如聚乙二醇)，抗菌劑(如季銨化合物)，緩沖劑(如堿金屬氯化物)，抗氧化劑(如偏亞硫酸氫鈉)，和其它常規(guī)成分(如山梨醇單月桂酸酯)。
此外，就本發(fā)明目的而言，適宜的眼用載體可用作載體介質(zhì)，包括常用的磷酸鹽緩沖載體系統(tǒng)。
藥用制劑也可以是固體插入劑型，例如可采用水溶的固體聚合物作為藥物載體。還可采用水不溶的固體插入劑，例如由亞乙基乙烯乙酸酯共聚物制備的固體插入劑。
藥用制劑可按下述的常規(guī)制藥技術(shù)制得就片劑而言，必要時包括混合、制粒和壓片;或者是通過混合，填充和溶解各成分，以得到理想的口服、非腸道或局部應(yīng)用的產(chǎn)品。
在藥物劑量單位中，如上所述，式(Ⅰ)化合物的劑量是一個有效無毒量，其范圍是0.01-200mg活性化合物/kg體重，最好為0.1-100mg/kg。選定的劑量通過口服、直腸、局部、注射或連續(xù)灌輸，給予需要拮抗血管緊張素受體的病人，每天1-6次。人用的口服劑量單位最好含有10-500mg活性化合物。一般非腸道給藥的劑量較低。采用口服給藥對病人來說是安全、有效和方便的。局部用制劑含有0.0001-0.1(W/V%)的活性成分，最好含0.0001-0.01(W/V%)。作為用于人眼的局部劑量單元劑型，其活性化合物的含量在50ng至0.05mg之間，最好為50ng-5μg。
本發(fā)明拮抗哺育動物(包括人)的血管緊張素Ⅱ受體的方法包括將有效量的式(Ⅰ)化合物施予需要這種拮抗的受試者。本發(fā)明產(chǎn)生抗高血壓活性的方法和治療充血性心衰、青光眼及腎衰的方法包括將有效量的式(Ⅰ)化合物給予需要預(yù)定活性的受試者，以產(chǎn)生所述的活性。
下述實施例解釋本發(fā)明化合物和藥用組合物的制備。這些實施例對上述的和下面要求授權(quán)的本發(fā)明范圍并不構(gòu)成限制。
實施例1N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑用氯乙酸甲酯(10.9g，0.1mol)處理2-氯芐胺(14.2g，0.1mol)和三乙胺(13.9ml，0.1mol)的二甲基甲酰胺(100ml)溶液，并于50℃加熱3.5小時，冷卻該反應(yīng)液，并用乙醚稀釋，濾除固體，濃縮的濾液于硅膠上閃層析，用己烷和乙酸乙酯(6∶5)洗脫，得15.3g(71%)2-〔N-(2-氯苯基)甲基〕氨基乙酸甲酯。該產(chǎn)物(15.2g，0.071mol)溶于混合二甲苯(100ml)中，用98%甲酸(2.74ml，0.0711mol)處理，回流2.5小時，并用Dean-Stark分水器分水。蒸發(fā)，得17.1(99%)2-〔N-(2-氯苯基)甲基-N-甲?；嘲被宜峒柞?。將該甲?；a(chǎn)物(17g，0.071mol)溶于甲酸甲酯(13.3ml，0.216mol)，并滴入甲醇鈉混合物中，后者是將金屬鈉(1.79g，0.0778mol)置于四氫呋喃(325ml)中，然后慢慢地加入甲醇(3.15ml，0.0778mol)而制得的。上述合并的混合物于室溫下攪拌18小時，蒸干。將粗產(chǎn)物溶于50%的甲醇水溶液(200ml)中，用炭處理，過濾，濾液用冰浴冷卻，慢慢地加入濃鹽酸(12N14.3ml，0.171mol)，然后加入硫代氰酸鉀(8.6g，0.0885mol)的水(20ml)溶液。反應(yīng)混合物于油浴中90℃保溫2.5小時，冷卻至-10℃，生成的沉淀濾出，用冷的乙醇-水洗沉淀，于60℃干燥得14.7g(74%)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑，mp72-74℃。
(ⅱ)1-(2-氯苯基)甲基-5-羧甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑?qū)?-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代-1H-咪唑(2g，7.08mmol)、乙酸乙酯(20ml)、5%碳酸鈉溶液(40ml)和丙基溴(4ml，44mmol)于60℃加熱18小時，分出有機層，用硫酸鎂干燥，濃縮得2.23g粗產(chǎn)物，用乙醚研磨，得1.63g(71%)5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑，mp68-71℃(己烷中結(jié)晶)。
(ⅲ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯將5-羧甲基-1-(2-氯苯基)甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑(3.74g，11.5mmol)溶于無水四氫呋喃(50ml)中，充氬下冷卻至-78℃，滴入氫化二異丁基鋁甲苯液(1M，30ml)，于-78℃攪拌1.5小時，慢慢升溫至室溫，將反應(yīng)液倒于冰冷的稀乙酸中，用二氯甲烷提取產(chǎn)物，用水、50%碳酸鈉溶液和食鹽水依次洗有機提取液，干燥，濃縮，得產(chǎn)物，淡褐色固體(3.32g)，于乙醇/水中結(jié)晶，得1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑，mp98-101℃。
將1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑(10g，0.0337mol)和亞硫酰氯(75ml)的混合物回流1小時，減壓蒸發(fā)，殘余物用甲苯共沸蒸餾3次，用乙醚研磨固體，收集得10.4g(88%)1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑鹽酸鹽。
將苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(0.863g，4mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(20ml)中，先用三乙胺(1.04g，10.2mmol)，再用1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-2-硫代丙基-1H-咪唑鹽酸鹽(1g，2.8mmol)的二甲基甲酰胺(10ml)溶液處理，充氬下于蒸汽浴上加熱3小時，倒入水中，用乙酸乙酯提取產(chǎn)物，水洗，干燥，濃縮，用含15%乙酸乙酯的二氯甲烷于硅膠上閃層析，得0.78g(61%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，油狀物，其NMR與結(jié)構(gòu)完全一致。
(ⅳ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸將氫氧化鉀(0.29g，5.1mmol)的水(4ml)溶液加入N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(0.78g，1.7mmol)的乙醇(10ml)溶液中，短暫地加熱至回流，于室溫下攪拌1小時，蒸去乙醇，用乙醚提取水層，用10%的鹽酸酸化至pH4，收集沉淀，干燥，得0.4g(51%)L-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸半鹽酸鹽，mp130-132℃。
實施例2N-丁?；?N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)N-丁酰基-N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯將丁酰氯(0.38g，3.57mmol)加入N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(1.35g，2.95mmol)、二氯甲烷(50ml)和三乙胺(0.448g，4.43mmol)的混合物中，于室溫下攪拌48小時后，蒸發(fā)溶劑，殘余物用乙酸乙酯處理，濾除不溶物，分別用5%碳酸氫鈉液和水洗乙酸乙酯液，干燥，濃縮，于硅膠層析純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷作梯度洗脫，得0.81g(52%)標(biāo)題化合物甲基酯，油狀物。
(ⅱ)N-丁?；?N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸將N-丁?；?N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(1.36g，2.58mmol)的乙醇(20ml)溶液和氫氧化鉀(0.436g，7.75mmol)的水(10ml)溶液于室溫下攪拌2小時，減壓濃縮，用乙醚洗水層，并用活性炭處理，用稀鹽酸酸化至pH3.5，將膠狀產(chǎn)物提取入乙酸乙酯中，用無水硫酸鎂干燥，濃縮得0.7g(53%)N-丁?；?N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸，mp70-74℃。
此外，在中和之前，直接從反應(yīng)混合物中可分離出所述酸的鈉鹽。該粗堿反應(yīng)溶液用于用水平衡的反相閃柱層析，用水(3次排空體積)洗去柱中的無機物，產(chǎn)物用乙腈/水(50∶50)洗脫，減壓移去乙腈，凍干，得理想的鈉鹽。
實施例3N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯方法A用Curtis和Brown〔J.Org.Chem.，45，20(1980)〕的方法將咪唑轉(zhuǎn)變成1-二乙氧基-原酰胺衍生物。在1g對甲苯磺酸存在下，將咪唑(12.8g，0.19mol)與118.4g(0.8mol)原甲酸三乙酯反應(yīng)，得20.6g(61%)1-二乙氧基原酰胺咪唑，bp65-70℃(0.1mm)。將該產(chǎn)物(17.0g，0.1mol)溶于無水四氫呋喃(250ml)中，冷卻至-40℃，于-40℃至-35℃，加入正丁基鋰(2.5M己烷溶液，40ml，0.1mol)，15分鐘后于-40℃加入碘代正丁烷(22.1g，0.12mol)，室溫下攪拌過夜，用乙醚和0.3N鹽酸提取，用稀鹽酸反復(fù)提取有機層，合并水提液，用碳酸氫鈉液中和，用二氯甲烷提取，硫酸鎂干燥，濃縮，用Kugelrohr裝置閃蒸餾得14.8g(85%)2-正丁基咪唑。
將2-正丁基咪唑(9.7g，0.078mol)溶于甲醇(50ml)中，并滴入甲醇鈉的甲醇液(250ml，用2.31g，0.0934mol氫化鈉制得)中，1小時后蒸干，將鈉鹽溶于無水二甲基甲酰胺(150ml)中，加入2-氯芐基溴(16.3g，0.079mol)，充氬下于50℃加熱17小時，注入冰水中，用乙酸乙酯提取，將提取液洗滌，干燥，濃縮，得18.5g粗產(chǎn)物，于硅膠上層析，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)洗脫，得11.9(61%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑，油狀物，經(jīng)硅膠薄層析，用4∶1乙酸乙酯/己烷層開，Rf值0.59。
充氬下，將2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑(95.5g，0.384mol)，37%甲醛(500ml)，乙酸鈉(80g)和乙酸(60ml)的混合物加熱回流40小時，減壓濃縮，殘余物與500ml20%氫氧化鈉液一起攪拌4小時，用水稀釋，二氯甲烷提取，水洗提取液，干燥，濃縮，粗產(chǎn)物(117g)于600g硅膠上閃層析，用乙酸乙酯至含10%甲醇的乙酸乙酯梯度洗脫，得8.3g起始原料，24.5g起始原料和產(chǎn)物的混合物及44g(41%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑，mp86-88℃(乙酸乙酯中結(jié)晶)，再洗脫得雙(4，5-羥甲基)衍生物，mp138-140℃(乙酸乙酯中結(jié)晶)。
將按實施例1(ⅲ)方法由2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑制得的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑鹽酸鹽(0.6g，1.18mmol)的溶液按實施例1(ⅲ)描述的方法與苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽反應(yīng)，經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/乙酸乙酯(2∶1)洗脫，得0.244g(31%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，油狀物。
方法B將方法A制備的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑(5.4g，0.0194mol)的甲苯(25ml)溶液加入活性的二氧化錳(27g)和甲苯(325ml)混懸液中，安裝Dean Stark分水器，加熱回流1小時，在100℃保溫17小時，濾出固體，濾液濃縮，粗產(chǎn)物于硅膠上閃層析，用6∶4烷/乙酸乙酯洗脫，得4.16g(78%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，油狀物。
充氬下，并安裝上Dean-Stark分水器，將2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(6.03g，22mmol)，苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(4.93g，23mmol)，二異丙基乙胺(2.97g，23mmol)和甲苯(300ml)加熱回流18小時，蒸發(fā)溶劑，加入乙醚，過濾除去二異丙基乙胺鹽酸鹽，蒸去乙醚，得9.81g粗亞胺，N-〔｛2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕苯丙氨酸甲酯。
將上述的亞胺溶于用冰水預(yù)冷卻的甲醇(50ml)中，在25℃一點一點地加入氰基硼氫化鈉(0.92g，14.62mmol)，幾小時內(nèi)加完，蒸去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯和水中，用5%碳酸氫鈉液和水依次洗有機層，干燥，濃縮，得3.24g產(chǎn)物，其NMR和TLC與方法A制備的產(chǎn)物一致。
方法C將方法B制備的2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(10mmol)溶于甲醇(50ml)中，用苯丙氨酸甲酯游離堿(10mmol)和氰基硼氫化鈉(20mmol)處理，并用含氯化氫氣體的乙醚調(diào)pH至6.5，于25℃攪拌3天，后處理與方法B相同。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例2(ⅱ)的方法，用0.232g(0.53mmol)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯為原料，經(jīng)后處理和干燥，得0.185g(82%)標(biāo)題化合物，白色固體，mp141-143℃。
實施例4N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯方法A將正丁基鋰的己烷溶液(2.5M5ml，12.6mmol)于0℃加入二異丙基胺(1.27g，12.6mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液中，于0℃攪拌15分鐘，冷卻至-78℃，將實施例3(ⅰ)方法B制備的亞胺，N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕苯丙氨酸甲酯(5.51g，12.6mmol)的四氫呋喃(35ml)溶液滴入，充氬下于-78℃攪拌30分鐘，于-78℃加入碘甲烷(2.06g，14.5mmol)的四氫呋喃(15ml)溶液，緩慢升溫至室溫，攪拌18小時，蒸去溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯中，濾除不溶物，濃縮得產(chǎn)物8.18gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯，不純化，直接用于反應(yīng)。
將上述產(chǎn)物(8.18g)溶于甲醇(75ml)中，冷卻至0℃，一點一點地加入氰基硼氫化鈉(1.4g，2.2mmol)，于室溫下攪拌48小時，濃縮，殘余物溶于乙酸乙酯中，用5%碳酸氫鈉液和水分洗，干燥，濃縮，得5.5g粗產(chǎn)物，經(jīng)硅膠閃層析，用乙酸乙酯/己烷(9∶1)洗脫，得1.4gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯。
方法B將2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛(0.264g，0.995mmol)溶于甲醇(5ml)，于-10℃加入α-甲基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(0.44g，1.91mmol)，三乙胺(97mg，0.955mmol)，氰基硼氫化鈉(252mg，4mmol)和甲醇(10ml)的混合物中，在25℃攪拌4天，用乙酸乙酯常規(guī)處理，得粗產(chǎn)物(30%收率)，其TLC和NMR與方法A制備物一致。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸按實施例3(ⅱ)的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，得標(biāo)題化合物，白色固體，mp157-159℃。
實施例5N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯安裝Dean-Stark分水器，充氬下將2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-1H-咪唑-5-甲醛(0.6g，2.12mmol)，β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(0.4g，2.16mmol)和甲苯(25ml)的溶液回流8小時，蒸去溶劑，得1.1g標(biāo)題亞胺化合物，桔紅色油，其NMR與結(jié)構(gòu)相符。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯將N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(1.1g)溶于甲醇(15ml)中，冷卻至0℃，一點一點地加入氰基硼氫化鈉(0.55g)，升溫至室溫，攪拌18小時，加水終止反應(yīng)，用二氯甲烷提取，水洗，干燥，濃縮，得0.84g粗產(chǎn)物，經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷洗脫，得0.46g(按醛計算，收率49%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，油狀物。
(ⅲ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸將實施例5(ⅱ)制備的甲酯(0.46g)、氫氧化鉀(0.18g)，水(2ml)和乙醇(3ml)于25℃攪拌2天，蒸去乙醇，加入水(6ml)，慢慢滴入稀鹽酸液至有沉淀生成，冷卻，過濾，用水洗產(chǎn)物，空氣干燥，得0.34g標(biāo)題化合物，白色固體，mp89-91℃。
實施例6N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸(ⅰ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯用6.45g(14.5mmol)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(實施例5(ⅰ))，按實施例4(ⅰ)(方法A)的方法制得了6gN-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝亞甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯粗產(chǎn)物，按所述方法，但用硼氫化鈉(1.1g)代替氰基硼氫化鈉將上述亞胺還原，經(jīng)硅膠層析，用乙酸乙酯洗脫后，得2.8g(兩步計算，收率34%)產(chǎn)物，油狀物，其NMR符合下述結(jié)構(gòu)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按實施例5(ⅲ)的方法制得了標(biāo)題化合物，白色固體，mp109-112℃(乙腈中結(jié)晶)。
實施例7N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸(ⅰ)2-正丁基-1-〔(2-氯苯基)甲基〕-5-(2-羥乙基)-1H-咪唑?qū)ⅰ?-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯(按美國專利4，340，598號的方法制備)(1.06g，3.3mmol)的四氫呋喃(40ml)溶液冷卻至-78℃，滴入氫化二異丁基鋁的四氫呋喃溶液(9.24mmol)，充氬下于-78℃攪拌2小時，再于室溫攪拌18小時，在冷卻下加入甲醇，然后加入乙酸(5ml)和水(20ml)，濃縮，用二氯甲烷提取，用5%碳酸氫鈉液和水洗提取液，干燥，濃縮液于硅膠上層析，用乙酸乙酯/己烷梯度洗脫，得0.657g(68%)2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-(2-羥基)乙基-1H-咪唑，油狀物。
(ⅱ)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯充氮下，將三氟甲磺酸酐(0.954g，3.38mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液冷卻至-78℃，滴入2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-(2-羥乙基)-1H-咪唑(0.9g，3.07mmol)、二異丙基乙胺(0.44g，3.38mmol)和二氯甲烷(10ml)的溶液，于-78℃攪拌15分鐘，加入苯丙氨酸甲酯的游離堿(由1.33g(6.15mmol)鹽酸鹽制得)的二氯甲烷(10ml)溶液，于-78℃攪拌2小時，再于室溫下攪拌18小時，用水洗反應(yīng)混合物，干燥，濃縮，得粗產(chǎn)物，經(jīng)閃層析，用含5%甲醇的乙酸乙酯洗脫，得0.9g(65%)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯(ⅲ)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸按實施例2(ⅱ)的方法，用0.9g(1.99mmol)N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸甲酯，0.33g氫氧化鉀和15ml水及25ml乙醇，反應(yīng)后得0.54g產(chǎn)物，用乙醚研磨得標(biāo)題化合物，mp78-80℃(游離堿)，mp232-233℃(二鹽酸鹽)。
實施例8N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(ⅰ)2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑?qū)?-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑(按實施例3(ⅰ)方法A制備)(10.2g，0.0368mol)的四氫呋喃(100ml)溶液一點一點地用N-氯代琥珀酰亞胺(NCS)(4.92g，0.0368mol)處理，加入NCS后，于45℃攪拌3小時，蒸去四氫呋喃，用水和乙酸乙酯分配殘余物，用水洗有機層，干燥，濃縮，殘余物用乙醚攪拌結(jié)晶，得5.1g(44%)2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑，mp134-135℃(乙腈中結(jié)晶)。
(ⅱ)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3(ⅰ)方法A的方法制備中間體甲酯。用2-正丁基-4-氯-1-(2-氯苯基)甲基〕-5-氯苯基-1H-咪唑鹽酸鹽代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基〕-5-氯甲基-1H-咪唑鹽酸鹽，制得了N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯。該酯按實施例3(ⅱ)的方法水解，即用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-氯-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯，制得了標(biāo)題化合物。
實施例9N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(3-噻吩基)丙氨酸用β-(3-噻吩基)丙氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按實施例5的方法，制得了標(biāo)題化合物。
實施例10N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-呋喃基)丙氨酸用β-(2-呋喃基)丙氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按實施例5的方法制得了標(biāo)題化合物。
實施例11N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕酪氨酸用酪氨酸甲酯代替β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯，按實施例5的方法制得了標(biāo)題化合物。
實施例12N-〔｛1-〔(2-氯-6-氟苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸將2-正丁基咪唑(3.75g，0.03mol)的無水二甲基甲酰胺(4ml)溶液加入氫化鈉(0.95g)的二甲基甲酰胺(18ml)溶液中，無氣體逸出后，充氬下攪拌1小時，慢慢加入2-氯-6-氟芐基氯(5.5g，0.031mol)的二甲基甲酰胺(7ml)溶液，室溫下攪拌17小時，用冰水稀釋，乙酸乙酯提取，有機層經(jīng)洗滌，干燥和濃縮，得7.63g(94%)2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑，其NMR與結(jié)構(gòu)一致。產(chǎn)物不經(jīng)純化用于下步反應(yīng)。
按實施例1(ⅱ-ⅲ)的方法，用7.63g2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑粗產(chǎn)物制得了2.8g2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑，mp106-108℃(乙酸乙酯中結(jié)晶)。上述產(chǎn)物用二氧化錳氧化，并按上述的方法后處理，得0.88(63%)2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，mp88-90℃(乙酸乙酯中結(jié)晶)。
用2-正丁基-1-(2-氯-6-氟苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-甲醛，按實施例3的方法制得了標(biāo)題化合物。
實施例13N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸用β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，按實施例7的方法制得了標(biāo)題化合物二鹽酸鹽，mp227-228℃。
實施例14N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸用α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，按實施例7的方法制備了標(biāo)題化合物。
實施例15N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-乙基苯丙氨酸按實施例4(ⅰ)方法A的方法，用α-乙基苯丙氨酸甲酯代替α-甲基苯丙氨酸甲酯，制得了N-〔｛1-(2-氯苯基)甲基-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基-α-乙基苯丙氨酸甲酯，該酯用實施例2(ⅱ)的方法水解，然后用鹽酸處理，得標(biāo)題化合物二鹽酸鹽，mp209-211℃。
實施例16N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-丙基苯丙氨酸按實施例15的方法，用α-丙基苯丙氨酸甲酯代替α-乙基苯丙氨酸甲酯，制得標(biāo)題化合物的二鹽酸鹽，mp208-210℃。
實施例17N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-N-乙?；奖彼嵊靡宜狒谑覝叵绿幚鞱-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基〕乙基〕苯丙氨酸甲酯(按實施例3(ⅰ)方法A制備)，得標(biāo)題化合物的N-乙?；奖彼峒柞?，按實施例2(ⅱ)的方法將該酯水解得標(biāo)題化合物，非晶形固體。
實施例18N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕高苯基丙氨酸按實施例3(ⅰ)方法B和實施例2(ⅱ)的方法，用高苯基丙氨酸甲酯鹽酸鹽代替苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽，得標(biāo)題化合物的單水合物，mp123℃(軟化)。
實施例19N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基苯丙氨酸按實施例7的方法，用α-甲基苯丙氨酸甲酯代替苯丙氨酸甲酯，制得了標(biāo)題化合物的二鹽酸鹽，mp253.5-255℃。
實施例20N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-N-甲基苯丙氨酸將N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸甲酯(按實施例3(ⅰ)方法B制備)(0.52g，1.18mmol)，88%甲酸(0.31g)和37%甲醛水溶液(0.44g)于蒸汽浴上加熱18小時后，注入10%的鹽酸溶液中，用乙醚提取，用10%氫氧化鈉液酸化水層至pH10，用乙酸乙酯提取，用無水硫酸鎂干燥，減壓除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析，用含50%乙酸乙酯的己烷洗脫，得0.377g(70%)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯丙氨酸甲酯，按實施例2(ⅱ)的方法將其水解，得標(biāo)題化合物，發(fā)泡體(0.265g，77%)，mp59-61℃。
實施例21N-〔｛1-〔(2-甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2-甲基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例22N-〔｛1-〔(3-甲氧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用3-甲氧基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例23N-〔｛1-〔(4-苯基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用4-苯基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例24N-〔｛1-〔(4-甲氧基-3-甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用4-甲氧基-3-甲基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例25N-〔｛1-〔2-(1-金剛烷基)乙基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基苯丙氨酸于-78℃用45分鐘將2-(1-金剛烷基)乙醇(10.7g)、二異丙基乙胺(11ml)和二氯甲烷(70ml)的混合物加入三氟乙(Triflic)酸酐(16.75g)的二氯甲烷(70ml)溶液中，再加入1-乙?；?2-正丁基-5-乙酰氧甲基咪唑的二氯甲烷(50ml)溶液，于室溫下放置4天，濃縮，加入10%氫氧化鈉液(250ml)，于蒸汽浴上加熱，用300ml水稀釋，二氯甲烷提取，干燥，過濾，濃縮，得油狀物，經(jīng)硅膠層析，甲醇/氯仿洗脫，得5-乙酰氧甲基1-〔2-(1-金剛烷基)乙基〕-2-正丁基咪唑。將此乙酰氧基化合物(5.4g)在室溫下與氫氧化鉀(5.2g)的乙醇(200ml)溶液一道攪拌1小時，濃縮，倒入水中，攪拌，過濾得1-〔2-(1-金剛烷基)乙基〕-2-正丁基-5-羥甲基-1H-咪唑。
按實施例3(ⅰ)方法A的方法，用1-〔2-(1-金剛烷基)乙基〕-2-正丁基-5-羥甲基-1H-咪唑代替2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-5-羥甲基-1H-咪唑，制得了標(biāo)題化合物。
實施例26N-〔｛1-〔(3-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法用3-氯芐基溴代替2-氯芐基溴制備了標(biāo)題化合物。
實施例27N-〔｛1-〔(2-溴苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2-溴芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例28N-〔｛1-(2-氰基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2-氰基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例29N-〔｛1-〔(4-氰基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用對氰基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例30N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2-硝基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例31N-〔｛1-〔(3-三氟甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用3-三氟甲基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例32N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用稀丙基溴代替丙基溴制得了標(biāo)題化合物。
實施例33N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-丙烯基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用稀丙基碘化物代替正丁基碘化物制得了標(biāo)題化合物。
實施例34N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代戊基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用1-溴戊烷代替1-溴丙烷，制得了標(biāo)題化合物。
實施例35N-〔｛1-〔(2-溴苯基)甲基〕-2-硫代芐基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用芐基溴代替丙基溴制得了標(biāo)題化合物。
實施例36N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代環(huán)己基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用環(huán)己基溴化物代替丙基溴制得了標(biāo)題化合物。
實施例37N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-4-苯基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸按實施例7的方法，用〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-4-苯基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯(按美國專利4，340，598號方法制備)代替〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯，制得了標(biāo)題化合物。
實施例38N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代庚基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用1-溴庚烷代替1-溴丙烷，制得了標(biāo)題化合物。
實施例39N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代己烯基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用6-溴己烯代替溴丙烷制得了標(biāo)題化合物。
實施例40N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代環(huán)丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例1的方法，用溴代環(huán)丙烷代替溴代丙烷制得了標(biāo)題化合物。
實施例41N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯基丙氨酸按實施例3的方法，用2-硝基芐基溴代替2-氯芐基溴制得了標(biāo)題化合物。
實施例42N-〔｛1-〔(2-三氟甲基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2-三氟甲基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例43N-〔｛1-〔(2，3-二氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2，3-二氯芐基溴代替2-氯芐基溴制得了標(biāo)題化合物。
實施例44N-〔｛1-〔(2-甲氧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用2-甲氧基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例45N-〔｛1-〔(3-甲氧苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3的方法，用3-甲氧基芐基溴代替2-氯芐基溴，制得了標(biāo)題化合物。
實施例46N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺將實施例5制備的N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸(4.3mmol)混懸于苯(20ml)中，加入亞硫酰氯(12.9mmol)，加熱至50℃反應(yīng)90分鐘，蒸發(fā)至油狀殘余物。將殘余物溶于己烷，再蒸發(fā)，用濃氫氧化銨(40ml)處理該酰氯，于室溫下攪拌16小時，濾出固體，水洗，于50℃真空干燥，得伯酰胺。
充氬下于0℃將草酰氯(98%，13.5mmol)加入二甲基甲酰胺(14.2mmol)的乙腈(50ml)溶液中，3分鐘后，通過漏斗將上述制備的酰胺的二甲基甲酰胺(20ml)溶液加入。5分鐘后，加入吡啶(27.2mmol)，于0℃再攪拌5分鐘，用乙酸乙酯和50%的氯化銨水溶液提取。用水和食鹽水洗乙酸乙酯層，用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)得相應(yīng)的腈衍生物。
充氬和攪拌下，將四氫呋喃(16ml)加入上述制備的腈(6.44mmol)和氯化鋁(13.0mmol)的混合物中，一次加入疊氮化鈉(58.3mmol)，然后用2ml四氫呋喃沖洗，加熱至65℃反應(yīng)22小時，冷卻至室溫，用乙酸乙酯(20ml)稀釋反應(yīng)混合物，并用10%鹽酸(20ml)處理，同時劇烈攪拌5分鐘，用水和食鹽水洗乙酸乙酯層，用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)得N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺實施例47N-〔｛1-〔(2，3-二氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按實施例46的方法，用N-〔｛1-〔2，3-二氯苯基)甲基-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(實施例43制備)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了標(biāo)題化合物。
實施例48N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按實施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-硝基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(實施例41制備)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸制得了標(biāo)題化合物。
實施例49N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按實施例46的方法，用N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸(實施例7制備)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(噻吩基)丙氨酸，制得了標(biāo)題化合物。
實施例50N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(3-噻吩基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按實施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(3-噻吩基)丙氨酸(由實施例9制備)代替N-〔(1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了標(biāo)題化合物。
實施例51N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(苯基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按實施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸(實施例3制備)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸制得了標(biāo)題化合物。
實施例52N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-(2-呋喃基)甲基-α-(1H-四唑-5-基)甲胺按實施例46的方法，用N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝-β-(2-呋喃基)丙氨酸(實施例10制備)代替N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸，制得了標(biāo)題化合物。
實施例53N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸按實施例3〔(ⅰ)方法B和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基芐基溴代替2-氯芐基溴，β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯和硼氫化鈉分別代替苯丙氨酸甲酯和氰基硼氫化鈉，制得了標(biāo)題化合物，mp151-152℃。
實施例54L-N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝〕苯丙氨酸按實施例3〔(ⅰ)方法A和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基芐基溴和L-苯丙氨酸甲酯代替2-氯苯甲基溴化物和苯丙氨酸甲酯，制得了標(biāo)題化合物，〔α〕25＝+32.5°(甲醇)，mp231-232℃(鹽酸鹽)。
實施例55D-N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸按實施例3〔(ⅰ)方法A和(ⅱ)〕的方法，用4-甲酯基芐基溴和D-苯丙氨酸甲酯分別代替2-氯芐基溴和苯丙氨酸甲酯，制得了標(biāo)題化合物，〔α〕25＝-28.9°(甲醇)，mp232-233℃(鹽酸鹽)實施例56N-〔2-｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸按實施例7的方法，用〔2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯代替〔2-正丁基-1-(2-氯苯基)甲基-1H-咪唑-5-基〕乙酸甲酯，制得了標(biāo)題化合物。
實施例57給予活性的式(Ⅰ)化合物的口服劑型按下法制備將配比的各成份過篩，混合并填充入硬膠囊中，所述配比各成份舉例如下成份 用量N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基- 100mg1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸硬脂酸鎂 10mg乳糖 100mg實施例58將蔗糖、硫酸鈣二水合物和口服的活性式(Ⅰ)化合物混合，用10%明膠溶液制粒，將濕粒過篩，干燥，與淀粉、滑石粉和硬脂酸混合，過篩，壓成片。
成份 用量N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕- 75mg2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸硫酸鈣二水合物 100mg蔗糖 15mg淀粉 8mg滑石粉 4mg硬脂酸 2mg實施例59將N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸(50mg)分散于25ml生理鹽水中，制備注射劑。
實施例60在無菌條件下混合下述成份，制得給予式(Ⅰ)化合物的局部眼科用溶液成份 含量(mg/ml)N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕 1.0-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸磷酸氫二鈉 10.4磷酸二氫鈉 2.4
成份 含量(mg/ml)氯代丁醇 5.0羥丙醇甲基纖維素 5.0滅菌水 加至 1.0ml1.0N氫氧化鈉 調(diào)pH至7.4應(yīng)該指出的是本發(fā)明范圍和權(quán)利并不局限于上述的實施例，它包括下述權(quán)利要求范圍內(nèi)的所有改良。
權(quán)利要求
1.制備式(Ⅰ)化合物及其藥學(xué)上可接受鹽的方法，式(Ⅰ)為
式中R是金剛烷基甲基，或苯基，聯(lián)苯基或萘基，上述的每個芳基可以是未取代芳基或者被1-3個下列基團取代，這些基團選自Cl、Br、F、I、C1-6烷基、硝基、CO2R7、C1-6烷氧基、羥基、SC1-6烷基、SO2C1-6烷基、四唑-5-基、SO2NHR7、NHSO2R7、SO3H、PO(OR7)2、CONR7R7、CN、NR7R7、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7CON(R7)2、NR7COW、SO2W或W；R1是C2-10烷基，C3-10鏈烯基，(CH2)0-8C3-6環(huán)烷基，或被下述1-3個基團取代或未取代的(CH2)0-8苯基，所述基團選自C1-6烷基、硝基、Cl、Br、F、I、羥基、C1-6烷氧基、NR7R7、CO2R7、CN、CONR7R7、W、NR7COH、NR7COC1-6烷基、NR7COW、SC1-6烷基、SO2W或SO2C1-6烷基；R2是氫，Cl，Br，F(xiàn)，I，CHO，羥甲基，C1-6烷基，NR7R7，CO2R7，CONR7R7，NO2，CN，苯基或W；X是單鍵，S或O；R3是H，C1-6烷基，C3-6鏈烯基，COC1-5烷基或(CH2)0-3苯基；R4是H，C1-6烷基，C3-6鏈烯基，或(CH2)0-3苯基；R5是CO2R7，CONR7R7或四唑-5-基；每個n分別是0-4；R6是苯基，萘基，2-或3-噻吩基，2-或3-呋喃基，2-，3-或4-吡啶基，嘧啶基，咪唑基，噻唑基，三唑基，四唑基，吡唑基，吡咯基，噁唑基或異噁唑基，上述每個芳基或雜芳基可以是未取代的或者被下列基團取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、Cl、Br、F、I、NR7R7、CO2R7、CONR7R7、SO3H、SO2NHR7、OH、NO2、W、SO2C1-6烷基、SO2W、SC1-6烷基、NR7COH、NR7COW或NR7COC1-6烷基；W是CmF2m+1，其中m是1-4；和每個R7分別是H或C1-6烷基，該方法包括在堿的存在下將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，式(Ⅱ)為
式中R4、R6和n的定義同前，式(Ⅲ)為
式中R1、R2、X和n的定義同前，R的定義除了不包括四唑-5-基、OH或CO2H外，其余同前；然后，必要時進行下述反應(yīng)(ⅰ)將氮原子上的R3取代基是H的式(Ⅰ)化合物在堿的存在下與C1-5C(O)鹵化物反應(yīng)，制備R3是COC1-5烷基的式(Ⅰ)化合物；(ⅱ)將R取代基是C1-6烷氧基的式(Ⅰ)化合物去保護，制備R取代基是羥基的式(Ⅰ)化合物；(ⅲ)將R取代基是CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物水解，制備R取代基是羧基的式(Ⅰ)化合物；(ⅳ)將R取代基是氰基的式(Ⅰ)化合物與疊氮化物反應(yīng)，制備R取代基是四唑-5-基的式(Ⅰ)化合物；(Ⅴ)將R5取代基是CO2C1-6烷基的式(Ⅰ)化合物水解，制備R5取代基是羧基的式(Ⅰ)化合物；(ⅵ)用鹵化劑處理R5是CO2H的式(Ⅰ)化合物，然后再與適宜的取代胺反應(yīng)，制備R5是CONR7R7的式(Ⅰ)化合物，式中R7是氫或C1-6烷基；(ⅶ)用草酰氯/二甲基甲酰胺處理R5是CONH2的式(Ⅰ)化合物，然后再與疊氮化物反應(yīng)，制備R5是四唑-5-基的式(Ⅰ)化合物；和最后，將制得的式(Ⅰ)化合物任意地制成藥學(xué)上可以接受的鹽。
2.按照權(quán)利要求1的方法，制備下述化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，即式(Ⅰ)中R是苯基或由1至3個下述基團取代的苯基，所述基團選自氯、氟、硝基、甲基、三氟甲基、甲氧基、羥基、磺酰氨基、氨磺?；?、氰基、羧基、羰基C1-6烷氧基、氨甲?；⒒蛩倪?5-基;R1是C2-8烷基;X是單鍵或S;R2是氫、氯、氟或三氟甲基;R3是氫、甲基、或COC1-5烷基;R4是氫或C1-3烷基;R5是CO2H或四唑-5-基;R6是苯基或2-噻吩基;每個n分別是1或2。
3.按照權(quán)利要求1的方法，制備N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸和其藥學(xué)上可接受的鹽。
4.按照權(quán)利要求1的方法，制備N-〔｛1-〔(4-羧基苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸及其藥學(xué)上可接受的鹽。
5.按照權(quán)利要求1的方法，制備下列化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基苯丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-甲基-β-(2-噻吩基)丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-硫代丙基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-丁酰基苯丙氨酸;N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕苯丙氨酸N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔2-｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-乙基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-α-丙基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-乙?；奖彼?N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕高苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝乙基〕-α-甲基苯丙氨酸;N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-N-甲基苯丙氨酸。
6.制備N-〔｛1-〔(2-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕苯丙氨酸的方法，該方法包括將2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑與苯丙氨酸甲酯反應(yīng)，然后進行酯水解。
7.制備N-〔｛1-〔(4-氯苯基)甲基〕-2-正丁基-1H-咪唑-5-基｝甲基〕-β-(2-噻吩基)丙氨酸的方法，該方法包括將2-正丁基-1-(4-甲酯基苯基)甲基-5-氯甲基-1H-咪唑與β-(2-噻吩基)丙氨酸甲酯反應(yīng)，然后進行酯水解反應(yīng)。
8.制備藥用組合物的方法，該方法包括將權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受鹽與藥學(xué)上可接受的載體混合。
9.將權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療疾病的藥物，所述疾病包括需要拮抗血管緊張素Ⅱ受體來治療的疾病。
10.將權(quán)利要求1的式(Ⅰ)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療高血壓的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有式(I)結(jié)構(gòu)的血管緊張素II受體拮抗劑及含有這些拮抗劑的藥用組合物和用這些化合物對哺乳動物產(chǎn)生血管緊張素II受體拮抗作用的方法。本發(fā)明化合物用于調(diào)節(jié)高血壓和治療充血性心衰、腎衰和青光眼。式(I)為
文檔編號C07D405/14GK1051555SQ9010894
公開日1991年5月22日 申請日期1990年11月6日 優(yōu)先權(quán)日1989年11月6日
發(fā)明者杰拉爾德·羅伯特·吉拉德, 戴維·泰勒·希爾, 約瑟夫·溫斯托克 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司