專利名稱：抗菌化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及碳代青霉烯并且特別是含有羧基取代的苯基基團的這類化合物。本發(fā)明還涉及它們的制備方法、制備它們的中間體、它們作為抗菌劑的應(yīng)用以及含有它們的藥物組合物。本發(fā)明化合物是抗菌素并可用于通常用抗菌素治療的任何疾病的治療，例如用于治療哺乳動物包括人的細(xì)菌感染。
碳代青霉烯于1974年首先由發(fā)酵培養(yǎng)基中分離出來并且發(fā)現(xiàn)具有廣譜抗菌活性。由于這一重要的研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生了新的碳代青霉烯衍生物并已發(fā)表了許多專利和科學(xué)論文。
到目前為止，成為商品銷售的第一種碳代青霉烯是亞氨基青霉烯(imipenem)(N-亞胺甲基硫霉素)，此化合物具有廣譜抗菌活性。
本發(fā)明提供了具有廣譜抗菌活性的化合物，菌包括革蘭氏陽性和陰性菌，需氧菌和厭氧菌。它們對β-內(nèi)酰胺酶具有良好的穩(wěn)定性，另外本發(fā)明代表性的化合物具有良好的藥物動力學(xué)。
此處所指的碳代青霉烯衍生物是根據(jù)通常接受的半系統(tǒng)命名法命名的
因此本發(fā)明提供了一種式(Ⅰ)化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯
其中R1是1-羥乙基、1-氟乙基或羥甲基;
R2是氫或C1-4烷基;
R3是氫或C1-4烷基;
R4是羥基或羧基;
且苯環(huán)可任意地被一或二個選自鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲?；?、二-C1-4烷基氨基甲?；?、氨基、C1-4烷氨基、二-C1-4烷氨基、磺酸、C1-4烷基S(O)n-(其中n是0-2)、N-C1-4烷基亞磺酰氨基、C1-4烷酰氨基和C1-4烷?；?N-C1-4烷基)氨基的取代基進一步取代，條件是苯環(huán)至少被一個羧基取代，術(shù)語烷基包括所有直鏈和支鏈結(jié)構(gòu)，例如C1-4烷基包括正丁基和2-甲基丙基。
R1較優(yōu)選地是1-羥乙基。
R2是氫或C1-4烷基，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基和正丁基。
R2較優(yōu)選地是氫或甲基和R2特別是甲基。
R3是氫或C1-4烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基和正丁基。
R3較優(yōu)選地是氫或甲基。
R4是羥基或羧基。
苯環(huán)上合適的取代基包括，例如鹵素氟、氯、溴、碘;
C1-4烷基甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基和2-甲基丙基;
C1-4烷氧基甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基和2-甲基異丙氧基;
C1-4烷氧羰基甲氧羰基、乙氧羰基和丙氧羰基;
C1-4烷基氨基甲酰基甲基氨基甲?；?、乙基氨基甲?；捅被柞；?
C1-4烷氨基甲氨基、乙氨基和丙氨基;
二-C1-4烷氨基二甲氨基、二乙氨基和甲乙氨基;
C1-4烷基S(O)n-甲硫基、甲基亞磺酰基和甲磺?；?
C1-4烷酰氨基乙酰氨基和丙酰氨基;
N-C1-4烷基-亞磺酰氨基N-甲基亞磺酰氨基和N-乙基亞磺酰氨基;
C1-4烷酰基(N-C1-4烷基)氨基N-甲基乙酰氨基和N-乙基乙酰氨基。
本發(fā)明包括式Ⅰ化合物的所有差向異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，其中5位上的絕對立體化學(xué)如式(Ⅰ)中所示。當(dāng)鍵表示為鍥形時，意指在三維中此鍵由紙面向前，而當(dāng)鍵表示為影線時，意指在三維中此鍵由紙面向后。式(Ⅰ)化合物有許多另外的光學(xué)活性中心，即在基團R1中(當(dāng)R1是1-羥乙基或1-氟乙基時);在6-位上;在1-位上(當(dāng)R2是C1-4烷基時)以及在吡咯烷環(huán)的2′和4′位上
優(yōu)選的化合物是那些其中β-內(nèi)酰胺的兩個質(zhì)子相對于彼此是反式構(gòu)型的那些化合物。當(dāng)R1是1-羥乙基或1-氟乙基時，較優(yōu)選地是8-取代基為R-構(gòu)型。因此優(yōu)選的一組化合物是式(Ⅲ)的化合物及其藥物上可接受的鹽和體內(nèi)易水解的酯
其中R2、R3和R4如上定義。
當(dāng)R2是C1-4烷基如甲基時，具有1R構(gòu)型形式的化合物是優(yōu)選的。
優(yōu)選的化合物是那些其中在2′-和4′-位上吡咯烷環(huán)具有如下絕對立體化學(xué)的化合物
合適的一組本發(fā)明化合物是式(Ⅳ)的化合物及其藥物上可接受的鹽和體內(nèi)易水解的酯
其中R3、R4和苯環(huán)上的任意取代基如上述式(Ⅰ)中的定義。
另一方面，合適的一組化合物是其中R3是氫、甲基或乙基及R4和苯環(huán)上的任意取代基如上述式(Ⅰ)中定義的式(Ⅳ)化合物。
另一方面，合適的一組化合物是式(Ⅳ)的化合物，其中苯環(huán)任意地被一或二個選自甲基、乙基、羥基、羧基、氰基、氟、氯、溴、三氟甲基、甲氧羰基、乙氧羰基、氨基甲酰基、磺酸、硝基、甲氧基、乙氧基和丙氧基的取代基進一步取代，條件是苯環(huán)至少被一個羧基取代;R3和R4如上述式(Ⅰ)中的定義。
合適的一組本發(fā)明化合物是式(Ⅳ)的化合物，其中R3是氫或甲基;
R4是羥基或羧基;
和苯環(huán)任意地被一或二個選自甲基、乙基、羥基、羧基、氰基、氯、溴、硝基、甲氧基和乙氧基的取代基進一步取代，條件是苯環(huán)至少被一個羧基取代。
合適的一組本發(fā)明化合物是式(Ⅳ)的化合物，其中R3是氫;
R4是羥基;
和苯環(huán)任意地被一或二個選自甲基、羥基、氯和羧基的取代基進一步取代，條件是苯環(huán)至少被一個羧基取代。
合適的一組本發(fā)明化合物是式(Ⅳ)的化合物，其中R3是氫;
R4是羧基;
和苯環(huán)任意地被一個選自甲基、羥基、氯和羧基的取代基進一步取代。
本發(fā)明具體的化合物例如是下列的式(Ⅳ)化合物(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S，)-2-(2-(2-羧基-5-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羥基-3-氯-6-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲硫基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基亞磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4，5-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羥基-4-羧基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基-N-甲基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲氧基羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基-4-氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
及其藥物上可接受的鹽和體內(nèi)易水解的酯。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物例如是下列的式(Ⅳ)化合物(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氟代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羥基-3-氯-6-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基-5-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4，5-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;和(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基-N-甲基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
及其藥物上可接受的鹽和體內(nèi)易水解的酯。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物例如是下列的式(Ⅳ)化合物(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(6-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基-3-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;和(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
及其藥物上可接受的鹽和體內(nèi)易水解的酯。
合適的藥物上可接受的鹽包括酸加成鹽例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽以及與磷酸和硫酸形成的鹽。另一方面合適的鹽是堿鹽例如如鈉或鉀的堿金屬鹽，如鈣或鎂的堿土金屬鹽、如三乙胺、嗎啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、普魯卡因、二芐胺、N，N-二芐基乙胺或氨基酸如賴氨酸的有機胺鹽。
無疑地，根據(jù)羧酸功能基的數(shù)目及所述陽離子的價數(shù)，可以有一、二或三個成鹽陽離子。
優(yōu)選的藥物上可接受的鹽是鈉和鉀鹽。但是，在制備過程中為了便于鹽的分離，在所選擇的溶劑中具有較低溶解度的鹽是優(yōu)選的，無論是否是藥物上可接受的。
體內(nèi)易水解的酯是那些能在人體內(nèi)水解產(chǎn)生母體羥基或羧基化合物的藥物上可接受的酯。這種酯可以通過用藥例如給試驗動物靜脈注射試驗化合物并連續(xù)地檢測試驗動物的體液來確定。對于羥基的合適的體內(nèi)易水解的酯包括乙酰氧基、丙酰氧基、新戊酰氧基、C1-4烷氧羰基氧基如乙氧羰基氧基、苯乙酰氧基和2-苯并〔C〕呋喃酮基。對于羧基的合適的體內(nèi)易水解的酯包括如甲氧基甲基的C1-6烷氧基甲基酯;如新戊酰氧基甲基的C1-6烷酰氧基甲基酯;如1-環(huán)己氧基羰基氧基乙基的C3-8-環(huán)烷氧基羰基氧基C1-6烷基;如5-甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基的1，3-二氧雜環(huán)戊烯-2-酮基甲基酯;2-苯并〔C〕呋喃酮基酯和如1-乙氧羰基氧基乙基的C1-6烷氧羰基氧基乙基酯以及在本發(fā)明化合物中任何羧基基團上可形成的酯;
為了將式(Ⅰ)化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯用于對包括人的哺乳動物的治療，特別是治療感染，通常根據(jù)藥物上常規(guī)方法將其配制成藥物組合物。
因此，本發(fā)明另一方面提供了一種藥物組合物，其包含式(Ⅰ)化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯和藥物上可接受的載體。
對于需要治療的疾病，本發(fā)明藥物組合物可以以常規(guī)的方法用藥，例如通過口服、直腸或非腸道施藥。為了這些目的，通過本領(lǐng)域公知的方法可以將本發(fā)明化合物配制成如片劑、膠囊、水或油狀溶液或懸浮液、乳劑、可分散的粉劑、栓劑和無菌可注射的水溶液或油狀溶液或懸浮液的形式。
除了本發(fā)明化合物之外，本發(fā)明的藥物組合物還可含有一種或多種已知藥物或與一種或多種已知藥物共同施藥，此已知藥物選自于其它臨床應(yīng)用的抗菌劑(例如其它的β-內(nèi)酰胺類或氨基糖苷類)、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(例如克拉維酸)、腎小管阻滯劑(如內(nèi)磺舒)和代謝酶抑制劑(例如脫氫肽酶抑制劑，如Z-2-酰氨基-3-取代的丙烯酸酯例如cilastatin)以及N-酰化的氨基酸例如betamipron(見EP-A-178911)。
本發(fā)明合適的藥物組合物是以單位劑量形式適于口服的藥物組合物，例如含100mg到1g之間的本發(fā)明化合物的片劑或膠囊。
本發(fā)明優(yōu)選的藥物組合物是適于靜脈、皮下或肌內(nèi)注射的藥物組合物，例如含1到50%w/w本發(fā)明化合物的無菌注射劑。
組合物的具體實例如下，將其制成1%水溶液，冷凍干燥，通過加入0.9%的氯化鈉水溶液可配制成所需的濃度，最好是1mg-10mg/ml組合物1實施例7的化合物 50mg組合物2實施例7化合物 50mg甘氨酸 31mg更多的組合物的具體實例如上，但其中用下列任一式(Ⅰ)化合物代替實施例7化合物(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(6-羧基-2-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基-3-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;和(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
及其藥物上可接受的鹽。
為了抵抗細(xì)菌引起的感染，將本發(fā)明的藥物組合物用藥于人體，其方式同于亞氨基青霉烯所使用的一般方法，本發(fā)明化合物的適當(dāng)允許量是按照其藥物動力學(xué)的劑量標(biāo)準(zhǔn)制定的，與臨床使用的亞氨基青霉烯相當(dāng)。這樣，每個患者可以接受0.05至5g，優(yōu)選地是0.1至2.5g的本發(fā)明化合物的每日靜脈、皮下、肌內(nèi)劑量，每天服藥1至4次，優(yōu)選地是每天1或2次。靜脈、皮下和肌內(nèi)劑量可以通過團注射給定。另外，靜脈劑量可以通過一定時間內(nèi)連續(xù)灌輸給定。另外，每個患者可接受的每日口服劑量大約相當(dāng)于每日的非腸道劑量。這樣，每天合適的口服劑量是0.05至5g的本發(fā)明化合物，每日服藥1至4次。
另一方面，本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯的制備方法，此方法包括將式(Ⅴ)化合物脫保護，其中苯環(huán)任意地被進一步取代如在式(Ⅰ)中
其中R2如上定義;R10是基團R3或氨基保護基;R13是基團R1、被保護的羥甲基或1-(被保護的羥基)乙基;R11是氫或羧基保護基;R12是氫或氨基保護基;R13是羧基、羥基、被保護的羧基或被保護的羥基和苯環(huán)上的任意的取代基是任意地被保護的;其中至少存在一個保護基;如果需要接下來(i)形成藥物上可接受的鹽;
(ii)酯化以形成體內(nèi)易水解的酯。
一般，保護基可以選自文獻公開的或化學(xué)人員公知的適于保護所述基團的任何基團，并可以通過常規(guī)方法引入。
保護基可以通過如文獻中公開的或化學(xué)人員公知的適于脫除所述保護基的任何常規(guī)方法脫除，所選擇的方法要有效地除去保護基而最小程度地影響分子中的其它基團。
式(Ⅴ)化合物是新的并且構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。
為了方便起見下面給出了保護基的具體實例，其中“低級的”指所用基團具有1-4個碳原子?？梢岳斫獾竭@些實例不是詳盡無遺的。而下列給出的脫除保護基的方法的具體實例同樣也不是詳盡無遺的。當(dāng)然沒有特別提到的所用保護基和脫保護方法也在本發(fā)明范圍內(nèi)。
羧基保護基可以是脂肪醇或芳香脂肪醇形成酯的殘基或硅烷醇形成酯的殘基(所述醇或硅烷醇優(yōu)選地是含有1-20個碳原子)。
羧基保護基的實例包括直或支鏈(1-12C)烷基(如異丙基、叔丁基);低級烷氧基低級烷基(如甲氧基甲基、乙氧基甲基、異丁氧基甲基);低級脂族酰氧基低級烷基(如乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基);低級烷氧羰基氧基低級烷基(如1-甲氧羰基氧基乙基、1-乙氧羰基氧基乙基);芳基低級烷基(如對甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對硝基芐基、二苯甲基和2-苯并〔C〕呋喃酮基);三(低級烷基)甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基);三(低級烷基)甲硅烷基低級烷基(如三甲基甲硅烷基乙基);二芳基(低級烷基)甲硅烷基(如叔丁基二苯基甲硅烷基)以及(2-6C)鏈烯基(如烯丙基和乙烯基乙基)。
除去羧基保護基特別適合的方法包括例如酸、堿、金屬或酶催化的水解反應(yīng)，除去如對-硝基芐氧羰基的基團的方法為氫解，除去如鄰硝基芐氧羰基的基團的方法為光解。
羥基保護基的實例包括低級鏈烯基(如烯丙基);低級烷?；?如乙酰基);低級烷氧羰基(如叔丁氧羰基);低級鏈烯氧羰基(如烯丙氧羰基);芳基低級烷氧羰基(如芐氧羰基、對-甲氧基芐氧羰基、鄰-硝基芐氧羰基、對-硝基芐氧羰基);三低級烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基)和芳基低級烷基(如芐基)。
氨基保護基的實例包括甲酰基、芳烷基(如芐基和取代的芐基如對-甲氧基芐基、硝基芐基和2，4-二甲氧基芐基，和三苯甲基);二-對-甲氧苯甲基和呋喃基甲基;低級烷氧羰基(如叔丁氧羰基);低級鏈烯氧羰基(如烯丙氧羰基);芳基低級烷氧羰基(如芐氧羰基、對-甲氧基芐氧羰基、鄰-硝基芐氧羰基、對-硝基芐氧羰基);三烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基);亞烷基(如亞甲基);亞芐基和取代的亞芐基。
適于除去羥基和氨基保護基的方法包括，例如酸、堿、金屬或酶催化的水解反應(yīng)，除去如對-硝基芐氧羰基的基團的方法為氫解，除去如鄰-硝基芐氧羰基的基團的方法為光解。
在式(Ⅰ)化合物中優(yōu)選的羧基和羥基的保護基是烯丙基。脫除烯丙基的優(yōu)選方法是被鈀催化，用四(三苯基膦)鈀和Meldrum′s酸，在偶極非質(zhì)子傳遞溶劑四氫呋喃混合物中，例如二甲亞砜/四氫呋喃、二甲基甲酰胺/四氫呋喃或1，3-二甲基四氫嘧啶/四氫呋喃，或醇/四氫呋喃混合物中，例如異丙醇/四氫呋喃或乙醇/四氫呋喃，最好是在室溫下進行。另外，在二氯甲烷中，可以用甲苯胺代替Meldrum′s酸。當(dāng)加入鈉鹽如2-乙基己酸鈉，通過鈉鹽沉淀這些條件可使產(chǎn)物分離出來。
在下列式(Ⅶ)、(Ⅷ)、(Ⅸ)、(Ⅺ)、(Ⅻ)和(ⅩⅣ)中苯環(huán)如在上述式Ⅰ中定義的任意地被進一步取代。
本發(fā)明的另一方面是式(Ⅰ)和(Ⅴ)的化合物可以通過下述方法制備a)使式(Ⅵ)與式(Ⅶ)化合物反應(yīng)
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18如上定義和L是離去基團，或b)將式(Ⅷ)的化合物成環(huán)
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18如上定義和R14、R15和R16分別選自C1-6烷氧基、芳氧基、二-C1-6烷基氨基和二芳基氨基或者R14-R16中的任意兩個表示鄰-亞苯二氧基;且其中的任何功能基團是任意地被保護的，如果需要繼續(xù)進行(ⅰ)脫除任意保護基;
(ⅱ)形成藥物上可接受的鹽;
(ⅲ)酯化以形成體內(nèi)易水解的酯。
在式(Ⅵ)化合物中，較合適地是L是羥基活性酯例如磺酸酯(如C1-6烷基磺酰氧基、三氟甲基磺酰氧基、苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基)，磷酸酯(例如二芳基磷酸酯如二苯基磷酸酯)或L是鹵化物(例如氯)。另一選擇是L是可很容易地被置換的亞砜〔例如-SOCH＝CH-NHCOCH3〕，優(yōu)選的L是二苯基磷酸酯(-OP(O)(OPh)2〕。
在碳代青霉烯文獻中式(Ⅵ)化合物和其制法是公知的，例如見EP-A-126587、EP-A-160391、EP-A-243686和EP-A-343499。
式(Ⅵ)化合物與式(Ⅶ)化合物的反應(yīng)典型地是在有堿例如有機堿如二異丙基乙胺或無機堿如堿金屬碳酸鹽如碳酸鉀的存在下進行。反應(yīng)較便利地是在-25℃和室溫之間的溫度下進行，較合適的是約-20℃。反應(yīng)通常在有機溶劑如乙腈或二甲基甲酰胺中進行。反應(yīng)通常以在有關(guān)類似反應(yīng)的文獻中描述的相似方法進行。
式(Ⅶ)化合物是新的并構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。
式(Ⅶ)化合物可以通過式(Ⅸ)化合物的脫保護制備
其中R10、R12和R18如上定義和R17是保護基，例如C1-6烷酰基或C1-6烷氧羰基。R17優(yōu)選的等價基團是乙?；褪宥⊙豸驶?。通過常規(guī)脫保護方法可將式(Ⅸ)化合物轉(zhuǎn)變成式(Ⅶ)化合物，例如在含水鏈烷醇、鏈烯醇例如烯丙基醇或四氫呋喃中通過堿性水解可脫去乙?；?br> 式(Ⅸ)化合物是新的并構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。
式(Ⅸ)化合物可以通過就地生成的式(Ⅹ)化合物的活性衍生物與式(Ⅺ)化合物反應(yīng)來制備
其中R10、R12、R17和R18如上定義。式(Ⅹ)化合物的活性衍生物包括酰鹵、酸酐和‘活化的’酯例如1H-苯并〔1，2，3〕三唑-1-基、五氟苯基和2，4，5-三氯苯基酯或相應(yīng)于(Ⅹ)的硫代羧酸的苯并咪唑-2-基酯。式(Ⅹ)和(Ⅺ)化合物的反應(yīng)可用常規(guī)方法進行，例如在有Vilsmeier試劑存在下(可就地生成(Ⅹ)的活性衍生物)在-30至+25℃的溫度范圍，優(yōu)選地是在-20至+5℃的范圍內(nèi)進行，或者在室溫下在有磺酰氯的存在下進行。
式(Ⅹ)和(Ⅺ)化合物可通過化學(xué)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備例如下文實施例中的方法，EP-A-126587中描述的方法或與其相似的方法。
在式(Ⅷ)化合物中，較合適地是R14、R15和R16分別選自C1-6烷氧基如甲氧基、乙氧基、異丙氧基或正丁氧基;芳氧基如任意的苯氧基;二-C1-6烷基氨基如二甲氨基或二乙氨基;二芳基氨基如二苯基氨基或者R14-R16中的任意兩個表示鄰-亞苯二氧基。優(yōu)選地是R14-R16每一個都相同并且是C1-6烷氧基如甲氧基、乙氧基、異丙氧基或正丁氧基或者是苯氧基。
在本領(lǐng)域公知的常規(guī)條件下將式(Ⅷ)化合物環(huán)化以形成式(Ⅴ)化合物。典型的條件是在基本上為惰性的有機溶劑如甲苯、二甲苯或乙酸乙酯中在60-150℃的溫度范圍加熱。典型地是反應(yīng)是在氮氣中進行并且在有殘基清除劑如氫醌的存在下進行。
可以制成式(Ⅷ)化合物并就地環(huán)化。通常式(Ⅷ)化合物可通過式(Ⅻ)和(ⅩⅢ)化合物的反應(yīng)制備
PR14R15R16(ⅩⅢ)其中R2、R10、R11-R16和R18如上定義。較合適地式(ⅩⅢ)化合物是亞磷酸鹽或是功能相同的這類化合物。
式(Ⅻ)和(ⅩⅢ)化合物間的反應(yīng)通常是在有劑溶劑如甲苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙腈或二甲基甲酰胺中進行。典型地是反應(yīng)是在升高了的溫度下如60-150℃進行。
式(Ⅻ)化合物可以通過許多本領(lǐng)域公知的方法制備。例如式(Ⅻ)化合物可以通過式(ⅩⅣ)化合物
其中R2、R10、R12、R13和R18如上定義，與式(ⅩⅤ)化合物
其中R11如上定義，進行酰化反應(yīng)來制備。
式(ⅩⅣ)化合物可通過式(ⅩⅥ)和(Ⅶ)化合物反應(yīng)制備
其中R2和R13如上定義。式(ⅩⅥ)化合物是本領(lǐng)域公知的并且可以用本領(lǐng)域公知的常規(guī)的酰化方法與式(Ⅶ)化合物反應(yīng)來制備。
式(Ⅶ)、(Ⅻ)和(ⅩⅣ)化合物是新的，因此構(gòu)成了本發(fā)明的一個方面。
下列生物試驗方法、數(shù)據(jù)以及實施例用于闡明本發(fā)明。
生物活性本發(fā)明藥物上可接受的碳代青霉烯化合物是有用的抗菌劑，其在體外對用于篩選對病原菌有活性的常規(guī)試驗室微生物，革蘭氏陰性和革蘭氏陽性菌二種，具有廣譜活性。具體化合物的抗菌譜和效價可以在常規(guī)試驗系統(tǒng)中測定。特別是本發(fā)明碳代青霉烯對β-內(nèi)酰胺酶顯示出良好的穩(wěn)定性并且通常特別是顯示出良好的藥物動力學(xué)，特別是就半衰期而言。一般，化合物比亞氨基青霉烯顯示出明顯地進步。
用常規(guī)方法也可以在體內(nèi)測定本發(fā)明化合物的抗菌性質(zhì)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)通常碳代青霉烯化合物對溫血動物相對而言沒有毒性，這一判斷適于本發(fā)明化合物。以超出能防止細(xì)菌感染所需化合物的劑量給小鼠施用本發(fā)明有代表性的化合物，觀測到服用本發(fā)明化合物沒有明顯的中毒癥狀或副作用。
根據(jù)常規(guī)體外試驗系統(tǒng)利用診斷敏感性試驗(Diagnostic Sensitivity test)獲得下列具有代表性化合物的結(jié)果。根據(jù)通過接種物大小是104CFU/點的瓊脂-稀釋法測定的最小抑制劑濃度(MIC)描述抗菌活性。
在下列實施例中，該實施例代表本發(fā)明的范圍(a)NMR譜除另有說明外是在200MHz或400MHz，在DMSO-d6/CD3COOD中測定;
(b)烯丙氧基意思是丙烯-1-基氧基基團-OCH2CH＝CH2;
(c)THF意思是四氫呋喃;
(d)DMF意思是二甲基甲酰胺;
(e)DMSO意思是二甲亞砜;
(f)Meldrum′s酸是2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮;
(g)溶劑的蒸發(fā)是在減壓下進行;
(h)以份數(shù)給出的溶劑和固體的相對量是重量份數(shù)。
實施例1(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;
氬氣氛下向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(230mg，0.33mM)和Meldrum′s酸(380mg，2.64mM)在DMF(2ml)和THF(1ml)混合物中的溶液中加入四(三苯基膦)鈀(38mg，0.033mM)。氬氣氛避光下將溶液攪拌45分鐘，緩慢加入THF(10ml)，隨即加入乙醚(10ml)沉淀出產(chǎn)物。將獲得的懸浮液攪拌10分鐘，過濾收集產(chǎn)物，先用THF然后用乙醚洗滌，并干燥給出標(biāo)題產(chǎn)物(90%)。
NMRδ 1.17(d，6H);1.78(五重峰，1H);2.62-2.73(m，2H);3.22(dd，1H);3.41(五重峰，1H);3.50-3.68(m，2H);3.99(t，1H);4.08(t，1H);4.19(dd，1H);7.45(dd，1H);7.50(d，1H);8.29(d，1H).
Ms(+ve FAB)492(M+H)+.
原料如下制備3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯的制備將3-羥基-4-硝基苯甲酸(20g，0.11M)溶于DMF(230ml)中，攪拌下加入無水碳酸鉀(45g，0.33M)。加入烯丙基溴(23ml，0.27M)，并于室溫將混合物攪拌18小時，蒸發(fā)除去溶劑，剩余物倒入水中，產(chǎn)物被萃取到乙醚中。乙醚溶液用2M氫氧化鈉水溶液、水、鹽水洗滌，并用MgSO4干燥。蒸除溶劑，得到3-烯丙氧基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯(25g)。
NMR(CDCl3)δ 4.73-4.76(m，2H);4.83-4.87(m，2H);5.30-5.55(m，4H);5.94-6.14(m，2H);7.68-7.76(m，2H);7.83(d，1H).
將粗制的酯(10g，38mM)溶于乙醇(20ml)中并于氬氣氛室溫下將其加到攪拌著的SnCl2·2H2O(42.9g，0.19M)的乙醇(60ml)懸浮液中。將混合物加熱回流30分鐘，冷卻并傾入冰中，用碳酸氫鈉水溶液調(diào)堿性至PH8后，用乙酸乙酯萃取混合物。將合并的萃取液用水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥并蒸發(fā)，得到3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯(8.2g)。
NMR(CDCl3)δ 4.22(br，2H);4.57-4.63(m，2H);4.75-4.79(m，2H);5.22-5.47(m，4H);5.93-6.15(m，2H);6.67(d，1H);7.48(d，1H);7.58(dd，1H).
吡咯烷-4-基硫醇側(cè)鏈的制備將(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷的環(huán)己胺鹽(2.5g，6.6mM)用2M鹽酸水溶液處理并用乙酸乙酯萃取。萃取液用水和鹽水洗滌并用MgSO4干燥。蒸除溶劑給出游離酸。
Vilsmeier試劑是通過在-10°氬氣氛下用草酰氯(0.58ml，6.6mM)處理二氯甲烷(35ml)中的DMF(0.56ml，7.2mM)30分鐘。將(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷一次加到此試劑中，隨即加入N-甲基嗎啉(0.87ml，7.9mM)并于-10°繼續(xù)攪拌30分鐘。冷至-20°后，滴加溶于二氯甲烷(20ml)中的3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯(1.54g，6.6mM)和N-甲基嗎啉(0.87ml，7.9mM)，令溫度升至5°并繼續(xù)攪拌2小時。用二氯甲烷稀釋后，混合物用2M鹽酸水溶液、水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，將其用MgSO4干燥并蒸除溶劑。用乙醚(0-10%)-二氯甲烷梯度液洗脫通過中壓色譜法將粗品純化給出(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷(2.7g)。
NMR(CDCl3)δ 2.30(s，3H);2.49(br，1H);2.63(br，1H);3.40(dd，1H);4.03(五重峰，1H);4.16(dd，1H);4.56(t，1H);4.62-4.67(m，4H);4.79-4.83(m，2H);5.18-5.48(m，6H);5.94-6.16(m，3H);7.56(d，1H);7.72(dd，1H);8.47(d，1H);9.19(br，1H).
向吡咯烷-4-基硫醇的轉(zhuǎn)化將(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷(1.3g，2.66mM)溶于烯丙醇中并將溶液用氬氣吹洗。加入1M氫氧化鈉水溶液(2.66ml，1mM)并將混合物于室溫攪拌60分鐘，加入2M鹽酸水溶液(1.33ml，1mM)并用稀碳酸氫鈉水溶液將PH調(diào)至8。蒸除溶劑，剩余物在乙酸乙酯和水之間分配，有機層用稀碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌并干燥(MgSO4)，蒸除溶劑給出膠狀(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇，其可就此應(yīng)用或任意地通過硅膠中壓色譜法純化。
NMR(CDCl3)δ 1.84(d，1H);2.38(br 1H);2.73(br，1H);3.31-3.49(m，2H);4.05-4.22(br m，1H);4.51(t，1H);4.59-4.68(m，4H);4.78-4.84(m，2H);5.08-5.47(br+m，6H);5.77-6.17(m，3H);7.58(d，1H);7.72(dd，1H);8.47(d，1H);9.10(br，1H).
被保護的碳代青霉烯的制備于0°將(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(930mg，1.9mM)的溶液溶于無水乙腈(6ml)中。加入于乙腈(10ml)中的(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇(850mg，1.9mM)并將氬氣通過此溶液。冷至-20°后，滴加在乙腈(5ml)中的二-異丙基乙基胺(258mg，2mM)，在2小時內(nèi)將溫度升至5°并于此溫度下維持16小時。蒸除溶劑，剩余物通過中壓色譜法純化，用氯仿至乙酸乙酯梯度洗脫，給出膠狀(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(487mg)。
NMR(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.36(d，3H);2.47(br，1H);2.71(br，1H);3.25，3.29(dd 重疊 m，2H);3.44(dd，1H);3.79(五重峰，1H);4.13(br m，1H);4.20-4.29(m，2H);4.57(t，1H);4.60-4.68(m，6H);4.81(m，2H);5.18-5.47(m，8H);5.80-6.14(m，4H);7.57(d，1H);7.73(dd，1H);8.46(d，1H);9.05(br，1H).
Ms(+ve FAB)696(M+H)+，718(M+Na)+.
(1R，5S，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯如下制備于0°氬氣氛下向(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-氧代碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯〔由2-重氮基-3-氧代-4-(R)-甲基-4-〔(3S，4R)-3-(1-(R)-羥乙基)-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-4-基〕-丁酸烯丙基酯和辛酸銠就地制得見例如EP-A-208889〕和二-異丙乙胺(1.1當(dāng)量)的乙腈溶液中滴加二苯基氯代磷酸酯(1.1當(dāng)量)。將溶液于室溫下攪拌30分鐘形成相應(yīng)的2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯。
實施例2利用實施例1中描述的方法由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制得(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸。
NMR δ 1.18(d，6H);1.74(m，1H);2.66(m，部分模糊，2H);3.21(dd，1H);3.38-3.64(m，3H);3.93-4.04(m，2H);4.17(dd，1H);6.96(d，1H);7.58(dd，1H);8.80(d，1H).
Ms(+ve FAB)492(MH)+;514(M+Na)+.
原料如下制備除了用4-羥基-3-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸外，用實施例1中描述的方法將4-羥基-3-硝基苯甲酸烯丙基化給出4-烯丙氧基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.74-4.86(m，4H);5.28-5.57(m，4H);5.93-6.13(m，2H);7.12(d，1H);8.21(dd，1H);8.51(d，1H).
利用實施例1中描述的還原2-烯丙氧基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法。除了溶劑是甲醇外，在處理中用氨水溶液代替碳酸氫鈉，將上述硝基化合物還原給出4-烯丙氧基-3-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 3.72(br，2H);4.58-4.65(m，2H);4.74-4.80(m，2H);5.22-5.46(m，4H);5.94-6.14(m，2H);6.79(d，1H);7.42(d，1H);7.47(dd，1H).
除了用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯外，利用實施例1中描述的方法，將上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合給出(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-5-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.31(s，3H);2.51(br，1H);2.64(br，1H);3.39(dd，1H);4.03(五重峰，1H);4.16(dd，1H);4.56(t，1H);4.59-4.66(m，4H);4.77-4.82(m，2H);5.16-5.48(m，6H);5.79-6.18(m，3H);6.91(d，1H);7.82(dd，1H);8.98(br，1H);9.05(d，1H).
利用實施例1中描述的制備被保護的碳代青霉烯的方法，將上述硫代乙酸酯脫去乙?；纬上鄳?yīng)的硫醇，無需進一步純化將其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，給出(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-5-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.19(d，3H);1.35(d，3H);2.52(br，1H);2.66(br，1H);3.19-3.34(dd 重疊 m，2H);3.43(dd，1H);3.84(五重峰，1H);4.11(br m，1H);4.20-4.31(m，2H);4.55(t，1H);4.59-4.68(m，6H);4.81(m，2H);5.17-5.45(m，8H);5.89-6.16(m，4H);6.90(d，1H);7.81(dd，1H);8.90(br，1H);9.06(d，1H).
Ms(+ve FAB)696(MH)+;718(M+Na)+.
實施例3利用實施例1中描述的方法由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制得(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸。
NMR δ 1.12(d，6H);1.95(m，部分模糊 ，1H);2.82(m，部分模糊 ，1H);2.82(m，部分模糊 ，1H);2.99(br m，1H);3.19(dd，1H);3.38(quintet，1H);3.64(m，1H);3.82(m，1H);3.94(五重峰，1H);4.16(dd，1H);7.63(dd，1H);8.05(d，2H);9.04(d，1H).
Ms(+ve FAB)520(MH)+;542(M+Na)+.
原料如下制備除了用2-硝基苯-1，4-二羧酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸外，利用實施例1中描述的方法將2-硝基苯-1，4-二羧酸烯丙基化給出2-硝基苯-1，4-二羧酸二烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.84-4.91(m，4H);5.31-5.48(m，4H);5.93-6.12(m，2H);7.62(d，1H);8.34(dd，1H);8.58(d，1H).
利用實施例1中描述的還原2-烯丙氧基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，在處理中除了用氨水溶液代替碳酸氫鈉外，將上述硝基化合物還原給出2-氨基苯-1，4-二羧酸二烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.78-4.82(m，4H);5.26-5.44(m，4H);5.82(br，2H);5.95-6.09(m，2H);7.27(dd，1H);7.36(d，1H);7.95(d，1H).
除了用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯外，利用實施例1中描述的方法將上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合給出(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2，5-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.29(s+br m，4H);2.81(br，1H);3.54(dd，1H);4.05(五重峰，1H);4.21(dd，1H);4.49-4.68(br m，3H);4.82-4.86(m，4H);5.02-5.48(br+m，6H);5.70-6.15(br+m，3H);7.79(dd，1H);8.14(d，1H);9.38(br s，1H);11.59(br s，1H).
利用實施例1中描述的制備被保護的碳代青霉烯的方法，將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基形成相應(yīng)的硫醇，無需進一步純化將其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，給出(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2，5-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.36(d，3H);2.30(m，1H);2.80(br，1H);3.23，3.29(dd 重疊 m，2H);3.59(dd，1H);3.81(br，1H);4.12(br，1H);4.19-4.29(m，2H);4.60(m，5H);4.78-4.90(m，4H);5.02-5.47(br+m，8H);5.68-6.13(br+m，4H);7.78(d，1H);8.13(d，1H);9.40(s，1H);11.68(s，1H).
Ms(+ve FAB)724(MH)+;746(M+Na)+.
實施例4利用實施例1中描述的方法由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制得(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸。
NMR δ 1.12(d，6H);1.77(m，部分不可見，1H);2.68-2.81(m，部分不可見，2H);3.19(dd，1H);3.37(m，1H);3.56(t，1H);3.69(t，1H);3.94(五重峰，1H);4.12-4.19(m，2H);7.75(m，部分不可見，1H);7.88(m，部分不可見，1H);8.25(dd，1H).
Ms(+ve FAB)520(MH)+，542(M+Na)+.
原料如下制備除了用3-硝基苯-1，2-二羧酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，且反應(yīng)在95°下進行1小時外，利用實施例1中描述的方法將3-硝基苯-1，2-二羧酸烯丙基化給出3-硝基苯-1，2-二羧酸二烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.79-4.86(m，2H);4.88-4.93(m，2H);5.29-5.47(m，4H);5.91-6.16(m，2H);7.69(t，1H);8.34-8.41(m，2H).
利用實施例1中描述的還原3-烯丙氧基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，在處理中除了用氨水溶液代替碳酸氫鈉外，將上述硝基化合物還原給出3-氨基苯-1，2-二羧酸二烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.70-4.74(m，4H);5.01(br，2H);5.23-5.40(m，4H);5.89-6.03(m，2H);6.79(dd，1H);7.92(dd，1H);7.24(t，1H).
除了用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯外，利用實施例1中描述的方法將上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合給出(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2，3-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.29(s，3H);2.35(br，1H);2.75(br，1H);3.49(dd，1H);4.04(五重峰，1H);4.17(dd，1H);4.52(dd，1H);4.65(br d，2H);4.72-4.77(m，4H);5.08-5.43(br+m，6H);5.76-6.09(br+m，3H);7.44-7.58(m，3H);8.60(dd，1H);10.12(br s，1H).
利用實施例1中描述的制備被保護的碳代青霉烯的方法，將上述硫代乙酸酯脫去乙?；纬上鄳?yīng)的硫醇，無需進一步純化將其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，給出(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2，3-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.21(d，3H);1.35(d，3H);2.33(br，1H);2.75(br，1H);3.23，3.30(dd 重疊 m，2H);3.51(dd，1H);3.79(br m，1H);4.10(br，1H);4.18-4.29(m，2H);4.52(t，1H);4.60-4.66(m，4H);4.73(m，4H);5.16-5.40(m，8H);5.79-6.05(m，4H);7.43(dd，1H);7.54(t，1H);8.62(d，1H).
MS(+ve FAB)724(MH)+;746(M+Na)+.
實施例5按照實施例1中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸。
NMR δ 1.18(d，6H);1.81(m，部分模糊，1H);2.72-2.87(m，部分模糊，2H);3.23(dd，1H);3.47(五重峰，1H);3.50(m，1H);3.74(t，1H);3.99(五重峰，1H);4.14-4.23(m，2H);7.13(td，1H)，7.52(td，1H);8.01(dd，1H);8.54(dd，1H).
MS(+ve FAB)476(MH)+;498(M+Na)+.
起始物制備如下用實施例1中描述的方法，只是用2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，使2-硝基苯甲酸烯丙基化，得到2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.80-4.85(m，4H);5.28-5.44(m，4H);5.89-6.09(m，2H);7.58-7.79(m，3H);7.89-7.94(m，1H).
用實施例1中描述的用來還原3-烯丙氧基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，只是在操作中用氨的水溶液代替碳酸氫鈉，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.76-4.80(m，4H);5.24-5.44(m，4H);5.68(br，2H);5.94-6.13(m，2H);6.60-6.68(m，2H);7.26(td，1H);7.90(dd，1H).
用實施例1中描述的方法，只是用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.28(s+m，4H);2.85(br，1H);3.53(dd，1H);4.04(五重峰，1H);4.21(dd，1H);4.46-4.68(br m，3H);4.81(d，2H);4.97-5.47(br+m，4H);5.67-6.12(br+m，2H);7.11(t，1H);7.56(td，1H);8.08(dd，1H);8.72(d，1H);11.61(br s，1H).
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，用實施例1中描述的制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.29(m，1H);2.83(br，1H);3.24，3.32(dd 重疊 m，2H);3.76(br，1H);4.12(br m，1H);4.18-4.31(m，2H);4.60(br m，5H);4.78(br m，2H);5.04-5.46(br+m，6H);5.65-6.02(br+m，3H);7.02(t，1H);7.58(t，1H);8.08(d，1H);8.73(d，1H);11.72(s，1H).
Ms(+ve FAB)640(MH)+;662(M+Na)+.
實施例6(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽在氬氣氛下，向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(250mg，0.38mM)和Meldrum酸(331mg，2.30mM)于DMSO(3ml)和THF(1ml)混合物中的溶液中加入四(三苯基膦)鈀(44mg，0.038mM)。在氬氣避光條件下，將溶液攪拌1小時。加入2-乙基己酸鈉(126mg，0.76mM)的THF(3ml)溶液，并將混合物傾入THF(30ml)中，伴隨劇烈攪拌。將生成的沉淀物離心，并除去上層清液。將產(chǎn)物再懸浮于THF中洗滌兩次，然后離心過濾，最后在高真空下干燥，得到標(biāo)題產(chǎn)物(153mg，75%)。
NMR δ 1.11(d，6H);1.70(m，部分模糊，1H);2.32(s，3H);2.78(m，1H);2.95(dd，1H);3.19(dd，1H);3.35(五重峰，1H);3.62(dd，1H);3.79(t，1H);3.96(五重峰，1H);4.14(dd，1H);4.25(t，1H);6.98(d，1H);7.23(t，1H);7.68(d，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，(Na 鹽)+;534(Na2鹽)+.
起始物制備如下用實施例1中描述的方法，只是用2-甲基-6-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，將2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基化，得到2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.43(s，3H);4.87(d，2H);5.30-5.48(m，2H);5.94-6.14(m，1H);7.47(t，2H);7.55(d，1H);8.00(s，1H).
2-氨基-6-甲基苯甲酸烯丙基酯將氯化亞錫二水合物(15.3g，67.8mM)懸浮于甲醇(25ml)中，并加入2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯(3.0g，13.6mM)的甲醇(5ml)溶液。將混合物在回流下加熱1小時，冷卻，并除去溶劑。剩余物用乙酸乙酯(100ml)處理，用880氨使其呈堿性，并用水(50ml)稀釋。將有機層從錫鹽的漿液中傾析出來，并再用兩份乙酸乙酯萃取。將合并的有機萃取物用稀氨水、水、鹽水洗滌，并用MgSO4干燥，得到2-氨基-6-甲基苯甲酸烯丙基酯，是一油狀物(1.94g，75%)。
NMR(CDCl3)δ 2.45(s，3H);4.46(br，2H);4.81(dt，2H);5.25-5.45(m，2H);5.94-6.14(m，1H);6.53(d，2H);7.08(t，1H).
側(cè)鏈吡咯烷-4-基硫代乙酸酯的制備將(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷(2.3g，8.6mM)，2-氨基-6-甲基苯甲酸烯丙基酯(1.5g，7.8mM)，和2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉(2.5g，10mM)溶于甲苯(30ml)中，并在室溫下攪拌18小時。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(150ml)稀釋，然后用2M的HCl水溶液(30ml，3次)，水、NaHCO2的飽和水溶液和鹽水洗滌。用MgSO4干燥并蒸去溶劑，得到(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷，是一膠狀物(3.4g，97%)，其不需進一步純化即可使用。
NMR(CDCl3)δ 2.29(s，重疊，m，4H);2.47(s，3H);2.75(br，1H);3.49(dd，1H);4.04(五重峰，1H);4.17(m，1H);4.49(m，1H);4.63(d，2H);4.83(dt，2H);5.10-5.45(m，4H);5.27-6.11(m，2H);6.99(d，1H);7.35(t，1H);8.26(d，1H);10.22(br，1H).
按照實施例1中描述的用于4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷的方法，將上述的硫代乙酸酯脫去乙?；?，得到硫醇。
該硫醇不需進一步純化即可使用，令其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-3-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.29(br，1H);2.76(br，1H);3.24(dd，1H);3.29(五重峰，1H);3.50(dd，1H);3.75(五重峰，1H);4.06-4.19(重疊，m，3H);4.50(t，1H);4.63(d，4H);4.81(d，2H);5.17-5.47(m，6H);5.78-6.13(m，3H);6.98(d，1H);7.35(t，1H);8.29(d，1H);10.39(br，1H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+;676(M+Na)+.
實施例7用實施例6中描述的方法，由被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
部分 NMR δ 1.13(d，3H);1.16(d，3H);3.19(dd，1H);3.99(m，2H);4.15(dd，1H);7.28(dd，1H);7.80(d，1H);8.45(d，1H).
Ms(+ve FAB)512(MH)+，(Na 鹽)+;534(Na2鹽)+.
起始物制備如下用實施例1中描述的方法，但用5-甲基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，使5-甲基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，得到5-甲基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.47(s，3H);4.82(dt，2H);5.28-5.43(m，2H);5.92-6.08(m，1H);7.39(dd，2H);7.49(d，1H);7.86(d，1H).
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-5-甲基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.23(s，3H);4.78(dt，2H);5.20(br，2H);5.24-5.44(m，2H);5.94-6.14(m，1H);6.60(d，1H);7.09(dd，1H);7.68(d，1H).
使上述胺與(2R，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例6中描述的方法，只是用上述胺代替2-氨基-6-甲基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用二氯甲烷/二乙基醚梯度液(100∶0至90∶10)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.28，2.34(2s 重疊 m，7H);2.80(br，1H);3.54(dd，1H);4.03(五重峰，1H);4.19(br m，1H);4.51(br，1H);4.62(br，2H)4.79(d，2H);5.18(br，2H);5.29-5.46(m，2H);5.82(br，1H);5.95-6.11(m，1H);7.36(dd，1H);7.86(d，1H);8.51(d，1H);11.52(br s，1H).
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基成相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);1.93(br，1H);2.34(s，3H);2.80(br，1H);3.24(dd，1H);3.32(m，1H);3.57(dd，1H);3.75(br，1H);4.15-4.29(重疊 m，3H);4.61(d+m，4H);4.78(m，2H);5.00-5.46(m，6H);5.76-6.13(m，3H);7.36(dd，1H);7.86(d，1H);8.59(d，1H);11.58(br，1H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+;676(M+Na)+.
實施例8用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽，只是產(chǎn)品沉淀不是僅使用THF稀釋，而還需進一步使用兩倍體積的二乙醚進行稀釋。
NMR δ 1.21(d，6H);2.03(m，部分模糊，1H);2.91(五重峰，1H);3.11(dd，1H);3.28(dd，1H);3.45(五重峰，1H);3.64-3.76(m，1H);3.91(t，1H);4.05(t，1H);4.23(dd，1H);4.40(t，1H);7.49(dd，1H);8.03(d，1H);8.54(d，1H).
Ms(+ve FAB)532/534(MH)+，(Na 鹽)+;554/556(Na2鹽)+.
起始物制備如下用實施例1中描述的方法，將5-氯-2-硝基苯甲酸烯丙基化，只是用5-氯-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到5-氯-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.83(dt，2H);5.30-5.45(m，2H);5.89-6.08(m，1H);7.59(dd，1H);7.70(d，1H);7.81(d，1H).
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-5-氯苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.78(dt，2H);5.27-5.44(m，2H);5.60(br，2H);5.93-6.13(m，1H);6.60(d，1H);7.21(dd，1H);7.86(d，1H).
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，只是用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.28(s 重疊 m，4H);2.78(br，1H);3.52(dd，1H);4.03(五重峰，1H);4.19(dd，1H);4.45-4.70(br m，3H);4.81(d，2H);5.21(br，2H);5.29-5.46(m，2H);5.83(br，1H);5.91-6.11(m，1H);7.50(dd，1H);8.02(d，1H);8.72(d，1H);11.54(br s，1H).
Ms(+ve FAB)467/469(MH)+.
將上述硫代乙酸酯脫乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.28(五重峰 1H);2.81(br，1H);3.25(dd，1H);3.30(t，1H);3.58(dd，1H);3.77(br，1H);4.13(br，1H);4.19-4.30(重疊 m，2H);4.51-4.86(m，7H);5.05-5.45(m，6H);5.70-6.09(m，3H);7.50(dd，1H);8.02(d，1H);8.71(d，1H);11.61(s，1H).
Ms(+ve FAB)674/676(MH)+;696/698(M+Na)+.
實施例9用實施例1描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，只是要將生成的粗產(chǎn)物酸溶于水中，并在CHP20P樹脂上進行色譜法提純，用水洗脫。
NMR δ 1.16(d，6H);1.82(m，部分模糊，1H);2.83(m，部分模糊，2H);3.23(dd，1H);3.42(五重峰，1H);3.59(m，1H);3.72(t，1H);4.99(五重峰，1H);4.20(dd 重疊 m，2H);7.09(dd，1H);7.15(t，1H);7.36(d，1H).
Ms(+ve FAB)492(MH)+;514(Na 鹽)+.
起始物制備如下將3-羥基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用3-羥基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到3-烯丙氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.66(dt，2H);4.79(dt，2H);5.28-5.44(m，4H);5.87-6.08(m，1H);7.24(dd，2H);7.51(t，1H);7.62(dd，1H).
Ms(CI)264(MH)+;281(M+NH4)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法將上述硝基化合物還原，只是使用的溶劑是乙醇，得到3-烯丙氧基-2-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.57(dt，2H);4.78(dt，2H);5.24-5.44(m，4H);5.90-6.15(m 重疊 br，2H);6.54(t，1H);6.85(dd，1H);7.52(dd，1H).
Ms(CI)234(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，只是用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-6-烯丙氧基羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.31(s 重疊 br m，4H);2.72(br，1H);3.40(br t，1H);3.98(五重峰，1H);4.22(br t，1H);4.53(br，1H);4.57-4.68(br m，4H);4.76(m，2H);5.21(br，2H);5.22-5.45(m，4H);5.85(br，1H);5.92-6.13(m，2H);7.07(dd，1H);7.17(t，1H);7.46(dd，1H);8.95(br d，1H).
Ms(+ve FAB)489(MH)+;511(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基得到相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-6-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.35(d，3H);2.31(br，1H);2.75(br，1H);3.24(dd，1H);3.33(t，1H);3.44(t，1H);3.66(五重峰，1H);4.10-4.20(m，3H);4.50(t，1H);4.56-4.78(m，8H);5.14-5.45(m，8H);5.78-6.13(m，4H);7.08(dd，1H);7.18(t，1H);7.48(dd，1H);8.93(br s，1H).
Ms(+ve FAB)696(MH)+;718(M+Na)+.
實施例10用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.21(d，6H);2.05(m，1H);2.98(五重峰，1H);3.17(dd，1H);3.27(dd，1H);3.42(五重峰，1H);3.75(dd，1H);3.95(t，1H);4.04(五重峰，1H);4.23(dd，1H);4.48(t，1H);7.39(t，1H);7.69(dd，1H);7.83(dd，1H).
Ms(+ve FAB)510/512(MH)+;532/534(MH)+，(Na 鹽)+;554/556(Na2鹽)+.
起始物制備如下將3-氯-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用3-氯-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到3-氯-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.81(dt，2H);5.29-5.45(m，2H);5.87-6.07(m，1H);7.52(t，2H);7.71(dd，1H);8.00(dd，1H)Ms(CI)259/261(M+NH4)+.
使用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，只是使用的溶劑是乙醇，得到2-氨基-3-氯代苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.80(dt，2H);5.26-5.44(m，2H);5.95-6.11(m，1H);6.25(br，2H);6.61(t，1H);7.40(dd，1H);7.86(dd，1H).
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-6-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.32(s，3H);2.38(br，1H);2.72(br，1H);3.43(dd，1H);3.99(五重峰，1H);4.22(dd，1H);4.56(br t，1H);4.66(m，2H);4.78(dt，2H);5.17-5.44(m，4H);5.87(br，1H);5.91-6.11(m，1H);7.26(t，1H);7.59(dd，1H);7.82(dd，1H);9.25(br，1H).
Ms(+ve FAB)467/469(MH)+;489/491(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-6-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.33(d，3H);2.32(br，1H);2.72(br，1H);3.23(dd，1H);3.31(五重峰，1H);3.45(t，1H);3.69(dd，1H);4.12-4.26(重疊 m，3H);4.53(t，1H);4.58-4.79(m，6H);5.16-5.43(m，6H);5.81-6.17(m，3H);7.21(t，1H);7.57(dd，1H);7.82(br d，1H);9.17(br，1H).
Ms(+ve FAB)674/676(MH)+;696/698(M+Na)+.
實施例11用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.24(d，3H);1.25(d，3H);2.21，2.28(m被s重疊，4H);3.10(五重峰，1H);3.20(dd，1H);3.34-3.48(重疊 m，2H);3.91(dd，1H);4.03-4.17(重疊 m，2H);4.27(dd，1H);4.72(t，1H);7.32(t，1H);7.50(br d，1H);7.79(dd，1H).
Ms(+ve FAB)490(MH)+;512(MH)+，(Na 鹽)+;534(Na2鹽)+.
起始物制備如下將3-甲基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但使用3-甲基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到3-甲基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.36(s，3H);4.79(dt，2H);5.27-5.45(m，2H);5.88-6.07(m，1H);7.45(t，2H);7.51(dd，1H);7.87(dd，1H).
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-6-甲基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.17(s，3H);4.79(dt，2H);5.22-5.45(m，2H);5.88-6.13(m，1H);6.59(t，1H);7.19(dd，1H);7.82(dd，1H).
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.29，2.31(2s重疊 m，7H);2.78(br，1H);3.51(dd，1H);4.02(五重峰，1H);4.23(br m，1H);4.54(br t，1H);4.65(br d，2H)4.78(dt，2H);5.23(br m，2H);5.26-5.45(m，2H);5.88(br，1H);5.92-6.12(m，1H);7.20(t，1H);7.43(d，1H);7.82(d，1H);9.66(br s，1H).
Ms(+ve FAB)447(MH)+;469(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基得到相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.33(d，3H);2.26(s 重疊 br m，4H);2.79(br，1H);3.23(dd，1H);3.32(五重峰，1H);3.54(dd，1H);3.68(br，1H);4.21(dd 重疊 m，3H);4.52(t，1H);4.58-4.79(m，6H);5.15-5.43(m，6H);5.83-6.07(m，3H);7.17(t，1H);7.42(d，1H);7.82(d，1H);9.68(br s，1H).
Ms(+ve FAB)654(MH)+;676(M+Na)+.
實施例12用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.06(d，6H);1.87(m，部分模糊，1H);2.72(dt，1H);2.88(dd，1H);3.12(dd，1H);3.30(五重峰，1H);3.55(dd，1H);3.72(五重峰，1H);3.90(五重峰，1H);4.08(dd，1H);4.19(t，1H);7.02(dd，1H);7.92(d，1H);8.49(d，1H).
Ms(+ve FAB)532/534(MH)+，(Na 鹽)+;554/556(Na2鹽)+.
起始物制備如下將4-氯-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用4-氯-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到4-氯-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.82(dt，2H);5.30-5.43(m，2H);5.89-6.06(m，1H);7.64(dd，1H);7.76(d，1H);7.86(d，1H).
用實施例6中描述的還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-4-氯代苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.77(dt，2H);5.24-5.44(m，2H);5.60(br，2H);5.92-6.12(m，1H);6.60(dd，1H);6.66(d，1H);7.81(d，1H).
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.23(m，1H);2.29(s，3H);2.79(br，1H);3.52(dd，1H);4.04(五重峰，1H);4.18(br m，1H);4.46-4.69(br m，3H);4.80(d，2H);5.20(br，2H);5.34-5.45(m，2H);5.83(br，1H);5.91-6.11(m，1H);7.08(dd，1H);8.00(d，1H);8.83(br s，1H);11.67(s，1H).
Ms(+ve FAB)467/469(MH)+;489/491(M+Na)+將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.28(五重峰，1H);2.79(br，1H);3.24(dd，1H);3.29(五重峰，1H);3.59(dd，1H);3.78(br，1H);4.05-4.19(br+重疊 m，3H);4.50-4.85(m，7H);5.05-5.41(m，6H);5.70-6.08(m，3H);7.08(dd，1H);7.99(d，1H);8.82(d，1H);11.73(br s，1H).
Ms(+ve FAB)674/676(MH)+;696/698(M+Na)+.
實施例13用實施例1中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸。
NMR δ 1.31(d，6H);1.97(m，部分模糊，1H);2.91(重疊 m，2H);3.36(dd，1H);3.58(五重峰，1H);3.74(dd，1H);3.86(五重峰，1H);4.11(五重峰，1H);4.32(dd 重疊 m，2H);8.19(dd，1H);8.73(d，1H);8.81(d，1H).
Ms(+ve FAB)520(MH)+.
起始物制備如下將3-羧基-4-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用3-羧基-4-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，并且反應(yīng)是在95°下進行1小時，得到3-烯丙氧基羰基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.86(m，4H);5.30-5.48(m，4H);5.79-6.14(m，2H);7.93(d，2H);8.31(dd，1H);8.46(d，1H).
將上述硝基化合物還原，使用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，只是溶劑是乙醇，得到3-烯丙氧基羰基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.79(m，4H);5.22-5.46(m，4H);5.90(br，1H);5.94-6.14(m，1H);6.64(d，1H);7.93(dd，1H);8.65(d，1H).
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2，4-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.20，2.21(s 重疊 m，4H);2.74(br，1H);3.47(dd，1H);3.97(五重峰，1H);4.12(dd，1H);4.40-4.62(br m，3H);4.76(d，4H);5.14(br，2H);5.22-5.40(m，4H);5.80(br，1H);5.89-6.07(m，2H);8.15(dd，1H);8.71(d，1H);8.76(d，1H);11.77(s，1H).
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基得到相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2，4-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.29(五重峰，1H);2.81(br，1H);3.25(dd，1H);3.30(t，1H);3.59(dd，1H);3.80(br，1H);4.25(dd 重疊 m，3H);4.60(m，5H);4.82(m，4H);5.00-5.48(m，8H);5.70-6.12(m，4H);8.21(dd，1H);8.78(d，1H);8.82(d，1H);11.92(s，1H).
Ms(+ve FAB)724(MH)+;746(M+Na)+.
實施例14用實施例1中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸。
NMR δ 1.31(d，6H);1.92(m，部分模糊，1H);2.91(重疊 m，2H);3.37(dd，1H);3.59(五重峰，1H);3.71-3.91(重疊 m，2H);4.12(五重峰，1H);4.29，4.33(dd 重疊 t，2H);7.43(t，1H);8.08(d，2H).
Ms(+ve FAB)520(MH)+.
起始物制備如下將3-羧基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用3-羧基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，并且反應(yīng)是在95°下進行1.5小時，得到3-烯丙氧基羰基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.81(m，4H);5.29-5.44(m，4H);5.87-6.07(m，2H);7.65(t，1H);8.20(d，2H).
用實施例6中描述的方法將上述硝基化合物還原，只是溶劑是乙醇，得到3-烯丙氧基羰基-2-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.78(dt，4H);5.25-5.45(m，4H);5.93-6.13(m，2H);6.56(t，1H);8.05(br，2H);8.13(d，2H).
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用中壓色譜法提純，用二乙醚的二氯甲烷梯度液(二乙醚0至20%)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2，6-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.18，2.23(s 重疊 m，4H);2.68(br，1H);3.41(dd，1H);3.92(五重峰，1H);4.16(dd，1H);4.39(br，1H);4.53(br，2H);4.72(dt，4H);5.11(br，2H);5.20-5.40(m，4H);5.77(br，1H);5.89-6.04(m，2H);7.19(t，1H);7.99(d，2H);11.05(s，1H).
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基得到相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2，6-二烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.35(d，3H);2.27(dt，1H);2.74(五重峰，1H);3.24(dd，1H);3.30(t，1H);3.55(dd，1H);3.70(br 五重峰，1H);4.12-4.30(重疊 m，3H);4.47(t，1H);4.55-4.75(m，4H);4.78(d，4H);5.05-5.44(m，8H);5.70-6.12(m，4H);7.27(t，1H);8.07(d，2H);11.19(s，1H).
Ms(+ve FAB)724(MH)+;746(M+Na)+.
實施例15用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.18(d，6H);1.82(m，部分模糊，1H);2.74(dt，1H);2.86(dd，1H);3.22(dd，1H);3.41(五重峰，1H);3.56-3.75(重疊 m，2H);3.84(s，3H);3.99(五重峰，1H);4.17，4.19(t 重疊 dd，2H);7.23(dd，1H);7.29(t，1H);7.35(dd，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na 鹽)+;550(Na2鹽)+.
起始物制備如下將3-甲氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用3-甲氧基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到3-甲氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 3.93(s，3H);4.79(dt，2H);5.27-5.43(m，2H);5.87-6.07(m，1H);7.25(dd，1H);7.49(t，1H);7.62(dd，1H).
Ms(CI)255(M+NH4)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，只是溶劑是乙醇，得到2-氨基-3-甲氧基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 3.86(s，3H);4.78(dt，2H);5.24-5.43(m，2H);5.60(br，2H);5.96-6.11(m，1H);6.57(t，1H);6.85(dd，1H);7.52(dd，1H).
Ms(CI)208(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-6-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.32，2.37(s 重疊 m，4H);2.71(br，1H);3.40(dd，1H);3.87(s，3H);3.98(五重峰，1H);4.22(dd，1H);4.52(br t，1H);4.64(d，2H);4.77(dm，2H);5.22(br，2H);5.24-5.43(m，2H);5.87(br，1H);5.94-6.13(m，1H);7.08(dd，1H);7.20(t，1H);7.46(dd，1H);8.90(br，1H).
Ms(+ve FAB)463(MH)+;485(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基得到相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.26(d，3H);1.36(d，3H);2.32(br，1H);2.77(br，1H);3.23(dd，1H);3.34(t，1H);3.45(t，1H);3.65(dd，1H);3.87(s，3H);4.23(dd 重疊 m，3H);4.51(br t，1H);4.60-4.80(m，6H);5.17-5.46(m，6H);5.80-6.09(m，3H);7.09(d，1H);7.21(t，1H);7.47(d，1H);8.85(br，1H).
Ms(+ve FAB)670(MH)+;692(M+Na)+.
實施例16用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.17(d，6H);1.82(m，部分模糊，1H);2.68-2.87(重疊 m，2H);3.21(dd，1H);3.32-3.65(重疊 m，3H);3.88(五重峰，1H);4.12-4.23(重疊 m，2H);7.37(dd，1H);8.19(d，1H);8.93(d，1H).
Ms(+ve FAB)566(MH)+，(Na 鹽)+;588(Na2鹽)+.
起始物制備如下將2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，只是用2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.86(dt，2H);5.31-5.46(m，2H);5.89-6.09(m，1H);7.89(d，1H);7.96(dd，1H);8.21(d，1H).
Ms(EI)275M+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，只是溶劑是乙醇，得到2-氨基-4-三氟甲基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.80(dt，2H);5.27-5.45(m，2H);5.60(br，2H);5.95-6.11(m，1H);6.84(dd，1H);6.90(br s，1H);8.00(d，1H).
Ms(CI)245(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-三氟甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.27，2.29(s 重疊 m，4H);2.80(br，1H);3.53(dd，1H);4.05(五重峰，1H);4.21(dd，1H);4.53(br t，1H);4.62(br，2H);4.85(d，2H);5.21(br，2H);5.31-5.47(m，2H);5.89(br，1H);5.95-6.11(m，1H);7.36(d，1H);8.19(d，1H);9.10(d，1H);11.67(s，1H).
Ms(+ve FAB)501(MH)+;523(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-三氟甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.23(d，3H);1.36(d，3H);2.30(五重峰，1H);2.79(br，1H);3.24(dd，1H);3.29(t，1H);3.60(dd，1H);3.79(m，1H);4.18-4.31(重疊 m，3H);4.60(m，6H);4.82(t，1H);5.08-5.48(m，6H);5.76-6.10(m，3H);7.36(d，1H);8.18(d，1H);9.10(d，1H);11.78(s，1H).
Ms(+ve FAB)708(MH)+;730(M+Na)+.
實施例17用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(6-羧基-2-羥基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.18(d，6H);1.77(m，1H);2.23(s，3H);2.67-2.85(重疊 m，2H);3.22(dd，1H);3.34-3.68(重疊 m，3H);3.98(五重峰 1H);4.15-4.22(重疊 m，2H);7.07(d，1H);7.41(d，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na 鹽)+;550(Na2鹽)+.
起始物制備如下將3-羥基-4-甲基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用3-羥基-4-甲基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到3-烯丙氧基-4-甲基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.40(s，3H);4.46(dt，2H);4.78(dt，2H);5.25-5.44(m，4H);5.87-6.12(m，2H);7.36(d，1H);7.72(d，1H).
Ms(EI)277M+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，只是溶劑是乙醇，得到3-烯丙氧基-2-氨基-4-甲基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 2.27(s，3H);4.33(dt，2H);4.77(dt，2H);5.24-5.48(m，4H);5.88-6.19(m+br，4H);6.44(d，1H);7.58(d，1H).
Ms(CI)247(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-6-烯丙氧基羰基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.31，2.35，2.49(2s 重疊 m，7H);2.67(br，1H);3.39(dd，1H);3.97(五重峰，1H);4.21(br t，1H);4.35(d，2H);4.55(t，1H);4.63(d，2H);4.76(dt，2H);5.18-5.42(m，6H);5.88(br，1H);5.93-6.12(m，2H);7.07(d，1H);7.56(d，1H);9.11(s，1H).
Ms(+ve FAB)503(MH)+;525(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-6-烯丙氧基羰基-3-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.36(d，3H);2.34(s 重疊 br m，4H);2.72(br，1H);3.24(dd，1H);3.32(五重峰，1H);3.46(dd，1H);3.67(五重峰，1H);4.11-4.29(重疊 m，3H);4.32(d，2H);4.53(t，1H);4.60-4.78(m，6H);5.17-5.45(m，8H);5.85-6.10(m，4H);7.07(d，1H);7.58(d，1H);9.13(br s，1H).
Ms(+ve FAB)710(MH)+;732(M+Na)+.
實施例18由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-3-氯-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽，使用實施例6中描述的方法，只是將DMSO/THF溶液緩慢地溫?zé)醽砣芙獯呋瘎?br> NMR δ 1.12(d，3H);1.15(d，3H);1.74(m，1H);2.65(m，2H);3.18(dd，1H);3.32-3.66(重疊 m，3H);3.95(五重峰，1H);4.02(t，1H);4.13(dd，1H);7.58(d，1H);8.60(d，1H).
Ms(+ve FAB)570/572(MH)+。
起始物制備如下3-氯-4-羥基-5-硝基苯甲酸將硫酸(83%，20ml)在冰浴中冷卻，攪拌著加入3-氯-4-羥基苯甲酸(4g，22mM)。10分鐘后，倒入硝酸(70%，1.43ml，22mM)，并將混合物在0°下攪拌2小時。傾入到冰上后，將固體過濾，并從乙醇水溶液中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，是黃色晶體(2.1g，44%)。
NMR(DMSO-d6)δ 8.17(d，1H);8.35(d，1H).
Ms(-ve FAB)217/219(MH)-.
4-烯丙氧基-3-氯-5-硝基苯甲酸烯丙基酯將3-氯-4-羥基-5-硝基苯甲酸(2.5g，11.5mM)溶于DMF(30ml)中，并攪拌著加入無水K2CO3(6.36g，41.3mM)。倒入烯丙基溴(2.92ml，33.7mM)，并在室溫下將混合物攪拌18小時。蒸發(fā)除去溶劑，剩余物用水處理，將其PH值調(diào)至5.5，然后將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。合并的萃取物用NaH2PO4水溶液，水，鹽水洗滌，并用MgSO4干燥。蒸發(fā)后剩余物用硅膠色譜處理，用汽油/EtOAc(10∶1)混合物洗脫，得到3-氯-4-羥基-5-硝基苯甲酸烯丙基酯混合物，其中僅含有少量的所需的4-烯丙氧基-3-氯-5-硝基苯甲酸烯丙基酯。將該混合物(1.95g，～7.6mM)溶于丙酮(15ml)，并加入無水K2CO3(1.57g，11.4mM)和烯丙基溴(1ml，11.6mM)。將混合物回流2天，冷卻，傾入到水中，并用二氯甲烷萃取三次。合并的萃取物用碳酸氫鈉的飽和水溶液，水和鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥，蒸發(fā)后得到標(biāo)題化合物，是一油狀物(1.88g，80%)。
NMR(CDCl3)δ 4.74(dt，2H);4.85(dt，2H);5.31-5.48(m，4H);5.93-6.20(m，2H);8.30(d，1H);8.36(d，1H).
MS(CI)297/299M+。
4-烯丙氧基-5-氨基-3-氯代苯甲酸烯丙基酯在氬氣氛下，將氯化亞錫二水合物(7.13g，31.6mM)在乙醇(10ml)中加熱回流。得到一溶液。移去熱源，倒入上述硝基化合物(1.88g，6.3mM)的乙醇液。然后繼續(xù)回流3小時，將混合物冷卻并除去溶劑。將剩余物溶于乙酸乙酯，并用880氨處理至堿性。從沉淀的錫鹽中傾析出有機相，漿液用更多的溶劑做類似地再萃取。然后合并的有機相用稀氨，水和鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。蒸發(fā)后得到4-烯丙氧基-5-氨基-3-氯代苯甲酸烯丙基酯，是一油狀物(1.34g，80%)。
NMR(CDCl3)δ 4.02(br，2H);4.55(dt，2H);4.79(dt，2H);5.25-5.47(m，4H);5.92-6.23(m，2H);7.33(d，1H);7.46(d，1H).
Ms(CI)268/270(MH)+.
側(cè)鏈吡咯烷-4-基硫代乙酸酯的制備使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-5-烯丙氧基羰基-3-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.31(s，3H);2.55(br，1H);2.63(br，1H);3.39(dd，1H);4.02(五重峰，1H);4.15(dd，1H);4.55(m，部分模糊，1H);4.59-4.65(m，4H);4.81(dt，2H);5.21-5.47(m，6H);5.83-6.18(m，3H);7.83(d，1H);8.97(d，1H);9.10(br，1H).
Ms(+ve FAB)523/525(MH)+;545/547(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-5-烯丙氧基羰基-3-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.27(d，3H);1.36(d，3H);2.62(br，2H);3.23(dd 重疊 m，2H);3.43(dd，1H);3.87(t，1H);4.07(m，1H);4.20-4.29(dd 重疊五重峰，2H);4.51-4.72(m，7H);4.80(dt，2H);5.18-5.45(m，8H);5.82-6.10(m，4H);7.83(d，1H);8.99(d，1H);9.10(br，1H).
Ms(+ve FAB)730/732(MH)+;752/754(M+Na)+.
實施例19用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.16(d，6H);1.79(m，1H);2.70(m，1H);3.21(dd，1H);3.43(五重峰，1H);3.50-3.68(重疊 m，3H);3.81(s，3H);3.95-4.08(m，2H);4.19(dd，1H);6.69(dd，1H);7.96(d，1H);8.29(d，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na 鹽)+;550(MH)+，(Na2鹽)+.
起始物制備如下將4-甲氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用4-甲氧基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到4-甲氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 3.91(s，3H);4.75(dt，2H);5.24-5.42(m，2H);5.87-6.07(m，1H);7.32(dd，1H);7.56(d，1H)7.90(d，1H).
Ms(CI)238(MH)+;255(M+NH4)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-4-甲氧基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 3.72(s，3H);4.70(dt，2H);5.21-5.39(m，2H);5.91-6.10(m，1H);6.14(dd，1H);6.28(d，1H);7.66(d，1H).
Ms(CI)208(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用二氯甲烷/二乙基醚的梯度液(100∶0至80∶20)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR δ 2.11(m，1H);2.27(s，3H);2.83(五重峰，1H);3.45(br，1H);3.85(s，3H);4.03(t，1H);4.13(dd，1H);4.42-4.63(br m，3H);4.79(d，2H);4.95-5.44(br+m，4H);5.70-6.13(br+m，2H);6.75(dd，1H);8.02(d，1H);8.27(br s，1H).
Ms(+ve FAB)463(MH)+;485(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR δ 1.17(d，6H);2.08(br m，1H);2.36(br m，1H);3.26(dd，1H);3.39-3.57(m，2H);3.85(s，3H);3.96-4.06(m，2H);4.13(dd，1H);4.27(dd，1H);4.38-4.81(重疊 m，7H);4.95-5.42(重疊 m，6H);5.68-6.09(m，3H);6.76(dd，1H);7.99(d，1H);8.27(br s，1H).
Ms(+ve FAB)670(MH)+;692(M+Na)+.
實施例20用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.17(d，6H);1.81(m，1H);2.56-2.83(重疊 m，2H);3.21(dd，1H);3.41(五重峰，1H);3.56(dd，1H);3.70(t，1H);3.98(五重峰，1H);4.10(t，1H);4.17(dd，1H);6.92(dd，1H);7.43(d，1H);8.37(d，1H).
起始物制備如下將5-羥基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用5-羥基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到5-烯丙氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 4.78(t，4H);5.27-5.48(m，4H);5.91-6.13(m，2H);7.29(m，2H);8.13(d，1H).
Ms(CI)264(MH)+;281(M+NH4)+.
使用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到5-烯丙氧基-2-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 4.45(dt，2H);(4.76(dt，2H);5.18-5.43(m，4H);5.92-6.12(m，2H);6.31(br s，2H);6.77(d，1H);7.03(dd，1H);7.24(d，1H).
Ms(CI)233(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用二氯甲烷/二乙醚的梯度液(100∶0至90∶10)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(DMSO-d6)δ 2.02(m，1H);2.29(s，3H);2.79(五重峰，1H);3.97-4.12(重疊 m，2H);4.35-4.65(重疊 m，5H);4.81(dt，2H);4.95-5.47(m，6H);5.65-5.90(br，1H);5.94-6.15(m，2H);7.28(dd，1H);7.48(d，1H);8.26(br，1H);10.85(br d，1H).
Ms(+ve FAB)489(MH)+;511(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙酰基得到相應(yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基-2-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR δ 1.17(2xd，6H);2.07(m，1H);2.84(m，1H);3.24(dd，1H);3.48(重疊 m，2H);4.01(重疊 m，2H);4.13(dd，1H);4.27(dd，1H);4.42-4.82(m，9H);4.98-5.46(m，8H);5.70-5.85(m，1H);5.95-6.12(m，3H);7.26(dd，1H);7.50(d，1H);8.46(br，1H).
Ms(+ve FAB)696(MH)+;718(M+Na)+.
實施例21用實施例6描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4，5-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.15(d，3H);1.18(d，3H);1.78(m，1H);2.69(m，1H);3.19(dd，1H);3.40(五重峰，1H);3.45-3.63(重疊 m，3H);3.76(s，3H);3.81(s，3H);3.97(五重峰 重疊 m，2H);4.05(dd，1H);7.50(s，1H);8.38(s，1H).
Ms(-ve FAB)534(M-H)-.
起始物制備如下將4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到4，5-二甲氧基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 3.91(s，3H);3.92(s，3H);4.77(dt，2H);5.25-5.43(m，2H);5.88-6.07(m，1H);7.31(s，1H);7.63(s，1H).
Ms(CI)268(MH)+;285(M+NH4)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-4，5-二甲氧基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 3.83(s，3H);3.87(s，3H);4.78(dt，2H);5.24-5.43(m，2H);5.50(br，1H);5.95-6.14(m，1H);6.21(s，1H);7.35(s，1H).
Ms(CI)238(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用已烷∶乙酸乙酯2∶1至2∶3的梯度液洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4，5-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR δ 2.24(m，1H);2.29(s，3H);2.81(br，1H);3.52(dd，1H);3.89(s，3H);3.97(s，3H);4.06(五重峰，1H);4.21(m，1H);4.45-4.70(br m，3H);4.80(d，2H);5.05-5.46(br+m，4H);5.70-6.14(br+m，2H);7.50(s，1H);8.48(s，1H);11.69(s，1H).
Ms(+ve FAB)493(MH)+;515(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4，5-二甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.25(d，3H);1.36(d，3H);2.26(m，1H);2.81(br，1H);3.25(dd，1H);3.32(m，1H);3.57(dd，1H);3.75(br，1H);3.89(s，3H);3.97(s，3H);4.23(dd 重疊 m，3H);4.54(t，1H);4.56-4.69(m，4H);4.78(m，2H);5.17-5.45(m 重疊 br，6H);5.70-6.13(m，3H);7.48(s，1H);8.46(s，1H);11.74(s，1H).
Ms(+ve FAB)700(MH)+;722(M+Na)+.
實施例22用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽，只是需要二乙醚來沉淀產(chǎn)物。
NMR δ 1.17(d，3H);1.19(d，3H);1.84(m，部分模糊，1H);2.78(m，1H);2.90(dd，1H);3.21(dd，1H);3.42(五重峰，1H);3.58(dd，1H);3.75(五重峰，1H);4.00(五重峰，1H);4.17(m，2H);7.22(六重峰，1H);7.71(dd，1H);8.55(dd，1H).
Ms(+ve FAB)516(MH)+，(Na 鹽)+;538(Na2鹽)+.
起始物制備如下將5-氟-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用5-氟-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，且粗產(chǎn)物用硅膠色譜法提純，用己烷/乙酸乙酯的梯度液(100∶0至20∶80)洗脫，得到5-氟-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 4.82(dt，2H);5.28-5.45(m，2H);5.92-6.08(m，1H);7.69(m，1H);7.79(dd，1H);8.23(dd，1H).
Ms(CI)243(M+NH4)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-5-氟代苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 4.75(dt，2H);5.23-5.42(m，2H);5.95-6.11(m，1H);6.81(dd，1H);7.19(m，1H);7.41(dd，1H).
Ms(CI)196(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙基氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用二氯甲烷/二乙醚的梯度液(100∶0至90∶10)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(DMSO-d6)δ 2.03(m，1H);2.29(s，3H);2.79(m，1H);3.39(br，1H);3.95-4.12(重疊 m，2H);4.47(br，1H);4.58(br，2H);4.81(dt，2H);5.00-5.25(br m，2H);5.19-5.46(m，2H);5.88(br，1H);5.95-6.14(m，1H);7.54(m，1H);7.71(dd，1H);8.39(br，1H);11.00(br，1H).
Ms(+ve FAB)451(MH+);473(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-4-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR δ 1.18(d，3H);1.21(d，3H);2.15(dt，1H);2.88(m，1H);3.28(dd，1H);3.42-3.58(m，2H);3.95-4.16(重疊 m，3H);4.28(dd，1H);4.40-4.85(重疊 m，7H);5.00-5.45(m，6H);5.70-5.86(m，1H);5.95-6.11(m，2H);7.47(m，1H);7.75(dd，1H);8.65(br，1H).
Ms(+ve FAB)658(MH)+;680(M+Na)+.
實施例23用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.12(d，6H);1.82(m，部分模糊，1H);2.62-2.81(重疊 m，2H);3.18(dd，1H);3.37(五重峰，1H);3.50(dd，1H);3.64(五重峰，1H);3.95(五重峰，1H);4.08(t，1H);4.13(dd，1H);6.85(六重峰，1H);8.04(t，1H);8.36(t，1H).
Ms(+ve FAB)516(MH)+，(Na 鹽)+;538(Na2鹽)+.
起始物制備如下將4-氟-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用4-氟-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到4-氟-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 4.78(m，2H);5.26-5.44(m，2H);5.87-6.09(m，1H);7.72(m，1H);7.98-8.12(m，2H).
Ms(CI)225 M+;243(M+NH4)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，得到2-氨基-4-氟代苯甲酸烯丙基酯。
NMR(DMSO-d6)δ 4.74(dt，2H);5.22-5.43(m，2H);5.95-6.14(m，1H);6.37(六重峰，1H);6.53(dd，1H);6.85(br，1H);7.80(dd，1H).
Ms(CI)196(MH)+。
使上述胺與(2S，4S)-4-乙酰基硫代-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸酯，并用色譜法提純，用二氯甲烷/二乙醚的梯度液(100∶0至90∶10)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-氟代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(DMSO-d6)δ 2.05(m，1H);2.29(s，3H);2.82(m，1H);3.35(br，部分模糊，1H);3.96-4.15(重疊 m，2H);4.52(br，3H);4.82(dt，2H);4.95-5.25(br m，2H);5.27-5.46(m，2H);5.85(br，1H);5.95-6.16(m，1H);7.08(六重峰，1H);8.12(dd，1H);8.36(br d，1H);11.45(br d，1H).
Ms(+ve FAB)451(MH+);473(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基羰基-5-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR δ 1.17(d，3H);1.18(d，3H);2.11(dt，1H);2.87(m，1H);3.27(dd，1H);3.41-3.58(m，2H);4.01(五重峰，2H);4.13(dd，1H);4.28(dd，1H);4.35-4.85(重疊 m，7H);4.95-5.45(m，6H);5.60-5.83(m，1H);5.94-6.11(m，2H);7.02(六重峰，1H);8.13(dd，1H);8.45(br d，1H).
Ms(+ve FAB)658(MH)+;680(M+Na)+.
實施例24由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基-N-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽，使用實施例1中描述的方法，只是在碳酸氫鈉水溶液中將沉淀的粗產(chǎn)物酸轉(zhuǎn)化為鈉鹽，并用CHP20P樹脂色譜提純。
NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ 1.06(d，3H);1.15(d，3H);1.52-1.69(m，1H);2.05(m，0.5H);2.19(m，0.5H);3.04(m，1H);3.15，3.16(2xs，重疊 m，5H);3.38(m，1H);3.67(m，1H);3.84(t，0.5H);3.97(五重峰，1H);4.01(t，0.5H);4.12(dd，1H);7.37(t，1H);7.48(m，1H);7.62(d，1H).
Ms(+ve FAB)528(MH)+，(Na 鹽)+;550(Na2鹽)+.
起始物制備如下將3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯(7g，30mM)溶于原甲酸三乙酯(70ml)，用三氟乙酸(10滴)處理，并在回流下加熱5小時。蒸發(fā)除去溶劑，將剩余的油狀物溶于乙醇(70ml)，然后用冰醋酸(8.59ml，150mM)處理，接著用氰基氫硼化鈉(9.43g，150mM)分幾份進行處理。然后將混合物在室溫氬氣氛下攪拌18小時。除去溶劑，剩余物用水(50ml)處理，并萃取到二乙醚中。合并的萃取物用水和鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。除去溶劑后，剩余物用硅膠色譜提純，用二氯甲烷/乙酸乙酯的梯度液(100∶0至95∶5)洗脫，得到3-烯丙氧基-4-甲基氨基苯甲酸烯丙基酯(3.08g，41%)。
NMR(CDCl3)δ 2.92(s，3H);4.60(dt，2H);4.77(dt，2H);4.82(br，1H);5.21-5.47(m，4H);5.94-6.18(m，2H);6.53(d，1H);7.42(d，1H);7.68(dd，1H).
Ms(CI)247(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-4-烯丙氧基羰基-N-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，CDCl3)δ 1.88(br m，1H);2.21(m，1H);2.29(s，3H);3.20，3.22(2xs，3H);3.39(t，1H);3.74(br m，1H);3.99(dd，1H);4.28(t，1H);4.60(m，4H);4.85(d，2H);5.17-5.47(m，6H);5.82-6.15(m，3H);7.59-7.77(m，3H).
Ms(+ve FAB)503(MH)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-4-烯丙氧基羰基-N-甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，CDCl3)δ 1.18(m，3H);1.32(d，3H);1.96(m，1H);2.11(m，1H);3.20，3.22(2xs，3H);3.27-3.49(m，3H);3.93(m，1H);4.16-4.30(m，4H);4.57-4.86(m，8H);5.19-5.49(m，8H);5.84-6.14(m，4H);7.61(d，1H);7.67(d，1H);7.74(dd，1H).
Ms(+ve FAB)710(MH)+;732(M+Na)+.
實施例25用實施例6中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-5-氯-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽。
NMR δ 1.11(d，3H);1.13(d，3H);1.72(m，部分模糊，1H);2.50-2.72(m，2H);3.18(dd，1H);3.38(m，1H);3.50(m，1H);3.60(m，部分模糊，1H);3.95(五重峰，1H);4.04(t，1H);4.14(dd，1H);7.37(d，1H);8.20(d，1H).
Ms(+ve FAB)570/572(MH)+;592/594(M+Na)+.
起始物制備如下將5-氯-2-羥基-3-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用5-氯-2-羥基-3-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到2-烯丙氧基-5-氯-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.64(dt，2H);4.85(dt，2H);5.26-5.48(m，4H);5.92-6.17(m，2H);7.89(d，1H);7.99(d，1H).
Ms(CI)298/300(MH)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，只是溶劑是乙醇，得到2-烯丙氧基-3-氨基-5-氯代苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 3.95(br，2H);4.45(dt，2H);4.80(dt，2H);5.24-5.47(m，4H);5.93-6.20(m，2H);6.88(d，1H);7.17(d，1H).
Ms(CI)268/270(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用二氯甲烷/二乙醚的梯度液(100∶0至95∶5)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-3-烯丙氧基羰基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.31(s，3H);2.48(br，1H);2.66(br，1H);3.39(dd，1H);4.04(五重峰，1H);4.13(dd，1H);4.49(d，2H);4.56(m，1H);4.63(d，2H);4.82(d，2H);5.21-5.49(m，6H);5.82-6.18(m，3H);7.58(d，1H);8.68(d，1H);9.07(br，1H).
Ms(+ve FAB)523/525(MH)+;545/547(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的用來制備被保護的碳代青霉烯的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-3-烯丙氧基羰基-5-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.15(d，3H);1.37(d，3H);2.48(br，1H);2.69(br，1H);3.26(dd 重疊 m，2H);3.41(dd，1H);3.80(五重峰，1H);4.10(br，1H);4.24(dd 重疊 m，2H);4.45(t，1H);4.52-4.69(m，6H);4.82(dt，2H);5.18-5.46(m，8H);5.82-6.10(m，4H);7.57(d，1H);8.68(d，1H);8.95(br，1H).
Ms(+ve FAB)730/732(MH)+;752/754(M+Na)+.
實施例26由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽，使用實施例1中描述的方法，只是在碳酸氫鈉水溶液中將粗產(chǎn)物酸轉(zhuǎn)化為鈉鹽，并用CHP20P樹脂色譜提純。
NMR δ 1.20(d，6H);1.99(m，部分模糊，1H);2.94(m，部分模糊，1H);3.17(dd，1H);3.27(dd，1H);3.42(五重峰，1H);3.77(dd，1H);3.92(五重峰，1H);4.05(五重峰，1H);4.23(dd，1H);4.52(t，1H);6.76(t，1H);7.61(dd，1H);8.11(dd，1H).
Ms(+ve FAB)514(MH)+;536(M+Na)+.
起始物制備如下將2-羥基-3-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用2-羥基-3-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到2-烯丙氧基-3-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 4.64(dt，2H);4.84(dt，2H);5.25-5.47(m，4H);5.98-6.17(m，2H);7.27(t，1H);7.90(dd，1H);8.03(dd，1H).
Ms(CI)264(MH)+.
用實施例6中描述的用來還原2-甲基-6-硝基苯甲酸烯丙基酯的方法，將上述硝基化合物還原，只是溶劑是乙酸乙酯，并且粗產(chǎn)物用硅膠色譜提純，用己烷∶乙酸乙酯6∶1洗脫，得到2-烯丙氧基-3-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 3.84(br，2H);4.47(dt，2H);4.80(dt，2H);5.23-5.45(m，4H);5.96-6.21(m，2H);6.89(dd，1H);6.91(t，1H);7.21(dd，1H).
Ms(CI)234(MH)+.
使上述胺與(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，但用上述胺代替3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯，并用色譜法提純，用己烷∶乙酸乙酯的梯度液(3∶1至2∶1)洗脫，得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-3-烯丙氧基羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR(CDCl3)δ 2.30(s，3H);2.44(br，1H);2.68(br，1H);3.40(dd，1H);4.03(五重峰，1H);4.16(dd，1H);4.48-4.66(重疊 m，5H);4.82(dt，2H);5.19-5.48(m，6H);5.81-6.20(m，3H);7.17(t，1H);7.61(dd，1H);8.60(dd，1H);8.93(br，1H).
Ms(+ve FAB)489(MH)+;511(M+Na)+.
將上述硫代乙酸酯脫去乙?；玫较鄳?yīng)的硫醇，不需進一步純化使其與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，使用實施例1中描述的方法，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-3-烯丙氧基羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR(CDCl3)δ 1.24(d，3H);1.35(d，3H);2.44(br，1H);2.72(br，1H);3.24(dd 重疊 m，2H);3.42(dd，1H);3.78(五重峰，1H);4.08-4.31( 重疊 m，3H);4.43-4.68( 重疊 m，7H);4.81(dt，2H);5.17-5.46(m，8H);5.80-6.17(m，4H);7.17(t，1H);7.61(dd，1H);8.60(dd，1H);8.84(br，1H).
Ms(+ve FAB)696(MH)+;718(M+Na)+.
實施例27(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽將(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-烯丙氧基-4-烯丙氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(20份)的DMF(128份，經(jīng)4
分子篩干燥)溶液加入到冷卻在水浴中的2，2-二甲基-1，3-二噁烷-4，6-二酮(33.2份)中，并將溶液用氬氣清洗10分鐘。然后迅速加入溶于蒸餾過的THF(60份)中的四(三苯基膦)鈀(3.3份)，放出少量的熱量。將反應(yīng)避光，并在室溫下攪拌1.5小時，用hplc控制反應(yīng)。將于蒸餾過的THF(45份)中的2-乙基己酸鈉(9.6份)慢慢加入到攪拌著的溶液中。進一步加入THF(585份)，接著再加入THF(620份)將混合物稀釋。過濾、洗滌并干燥粗產(chǎn)物固體二鈉鹽沉淀。
將粗產(chǎn)物固體鈉鹽溶于甲醇(1100份，hplc級)，并在室溫下攪拌30分鐘，加入蒸餾水(2份)，將溶液過濾。逐漸加入二乙醚(1800份)使產(chǎn)物再沉淀。30分鐘后，將沉淀過濾，并用二乙醚洗滌兩次(每份140份)，干燥，得到純化的二鈉鹽(14份)。
將上述鈉鹽分成四部分(每部分3.5份)。一部分用碳酸氫鈉(1.7份)處理，并通過超聲處理迅速將其溶于蒸餾水(100份)中。將溶液過濾，濾渣用蒸餾水洗滌兩次(每次25份)。將濾液和洗滌液合并，立即加入到Diaion HP20SS樹脂柱(1000份，用蒸餾水裝填)中。柱子用蒸餾水洗脫，合并含有純產(chǎn)物的餾份，并冷凍干燥。將第二部分鈉鹽溶于不純的中間體餾份中，并如上所述裝填到同樣的柱子中。對第三部分和第四部分鈉鹽重復(fù)同樣的步驟。冷凍干燥的產(chǎn)物是二鈉鹽三水合物，其總產(chǎn)量為7份。
NMR譜與實施例1的產(chǎn)物一致。
起始物制備如下3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯的制備將3-羥基-4-硝基苯甲酸(6.5份)，無水碳酸鉀(14份)和烯丙基溴(10.8份)在DMF(70份)中混合，并稍稍加熱至60°。然后在室溫下將混合物攪拌18小時，通過硅藻土過濾，并用DMF(25份)洗滌濾床。蒸發(fā)除去溶劑，將剩余物浸于碳酸氫鈉水溶液(100份)中，并用乙酸乙酯萃取兩次(每次4.5份)。有機溶液用水和鹽水洗滌，并用MgSO4干燥。除去溶劑后，油狀的剩余物用硅膠色譜提純，先用二氯甲烷∶己烷1∶1洗脫，再用二氯甲烷洗脫。合并適當(dāng)?shù)酿s份，得到3-烯丙氧基-4-硝基苯甲酸烯丙基酯(8.8份，94%)。
用工業(yè)用甲醇變性酒精(70份)處理氯化亞錫二水合物(22.6份)，并加熱至60°使其溶解。將上述酯(6.5份)溶于工業(yè)用甲醇變性酒精(2.8份)中，并以能保持輕度回流的速度將其加入到錫鹽的熱溶液中(30分鐘)。最后將混合物在回流下加熱3小時。冷卻后，蒸去溶劑，剩余物用乙酸乙酯(125份)處理，并在冰浴中攪拌。加入氨(濃度0.880g/ml，15份)，保持溫度低于20°，最后在過濾前在室溫下攪拌1小時。濾出的錫鹽用乙酸乙酯洗滌兩次(每次45份)，并蒸去有機溶劑。油狀的剩余物用硅膠色譜提純，先用3∶1的二氯甲烷∶己烷洗脫，然后用1∶1的二氯甲烷∶己烷，最后用二氯甲烷洗脫。合并適當(dāng)?shù)酿s份，得到3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯(4.2份，73%)。
吡咯烷-4-基硫醇側(cè)鏈的制備將(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷(9.5份)和3-烯丙氧基-4-氨基苯甲酸烯丙基酯(8.1份)溶于甲苯(85份)中，并在冰浴中冷卻。加入2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉(9.4份)，并在室溫下將混合物攪拌18小時。用2M鹽酸水溶液，鹽水洗滌，并用MgSO4干燥后，蒸去溶劑。粗產(chǎn)物用硅膠快速色譜提純，先用二氯甲烷洗脫，然后用二氯甲烷∶乙酸乙酯9∶1洗脫。合并適當(dāng)?shù)酿s份，得到(2S，4S)-4-乙?；虼?1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷(12.5份，74%)。
被保護的碳代青霉烯的制備將(1R，5R，6S，8R)-6-(1羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯溶液(15.8份)溶于無水乙腈(40份)，向溶液中吹入氬氣以脫氣，并冷卻至-19°。加入N，N-二異丙基乙基胺(3.75份)，接著加入(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇(12.8份，制備如實施例1)的乙腈(40份)溶液，保持溫度低于-12°。最后在-19°下將混合物攪拌18小時，然后除去溶劑。粗產(chǎn)物用HPLC(15-20μ硅膠，兩個30×10cm的柱體)提純，用二氯甲烷∶乙酸乙酯1∶1洗脫。合并適當(dāng)?shù)酿s份，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(4-烯丙氧基羰基-2-烯丙氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(12份，59%)。
上述每種中間體的NMR譜都與實施例1中相應(yīng)中間體的NMR譜一致。
實施例28(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(262mg，0.40mM)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入四(三苯基膦)鈀(24mg，0.020mM)和N-甲基苯胺(176μl，1.63mM)。在室溫下將溶液攪拌20分鐘。用水(3×5ml)萃取反應(yīng)混合物，用碳酸氫鈉(102mg，1.2mM)處理合并的水相，水相用反相硅膠色譜提純(Nucleosil C18，3.5×20cm)，用乙腈水溶液的梯度液(0-6%)洗脫，冷凍干燥后得到標(biāo)題產(chǎn)物(34mg，15%)，是一白色無定形粉末。
NMR(D2O)δ 1.25(d，3H);1.35(d，3H);2.05(ddd，1H);2.85(ddd，1H);3.07(dd，1H);3.3-3.5(m，1H);3.47(dd，1H);3.6(dd，1H);3.8-3.95(m，1H);4.25(dd，1H);4.2-4.35(m，2H);8.1(s，2H);9.15(s，1H).
起始物制備如下側(cè)鏈吡咯烷-4-基硫代乙酸酯的制備氬氣氛下向(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-羧基吡咯烷-4-基硫代乙酸酯(1.5g，5.5mM)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入SOCl2(4ml，0.055M)。室溫下攪拌4小時后蒸去溶劑。剩余物在甲苯(50ml)中研磨，將混合物蒸發(fā)，并在真空下干燥。將產(chǎn)物溶于二氯甲烷(10ml)中，將得到的溶液滴加到冷卻到0℃的4-硝基鄰氨基苯甲酸(1g，5.5mM)和N-乙基二異丙基胺(1.91ml，11mM)的二氯甲烷(25ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。蒸發(fā)至干后，粗產(chǎn)物用HP20SS樹脂色譜提純，用乙腈在H2O-AcOH1%中形成的梯度液(0-50%)洗脫，冷凍干燥后得到(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯(1.4g，58%)，是一泡沫體。
NMR(DMSO-CF3COOD)δ 1.85-2.35(m，1H);2.20(s，3H);2.6-3.0(m，1H);3.2-3.6(m，1H);3.8-4.2(m，2H);4.3-4.7(m，3H);4.8-5.5(m，2H);5.5-6.2(m，1H);7.87(dd，1H);8.2(d，1H);9.4(dd，1H).
向吡咯烷-4-基硫醇的轉(zhuǎn)化向上述硫代乙酸酯(0.47g，1.07mM)的乙醇(5ml)溶液中加入甲基胺的乙醇溶液(1.02M)(1.26ml，1.29mM)。室溫下攪拌30分鐘后，蒸發(fā)除去溶劑，并使剩余物在乙酸乙酯和鹽酸水溶液中分配。有機層用水，然后用鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)，蒸去溶劑，不需進一步純化待用。
NMR(CDCl3)δ 1.8(d，1H);1.9-2.4(m，1H);2.5-3.1(m，1H);3.2-3.7(m，1H);3.85-4.3(m，1H);4.4-5.0(m，4H);5.0-5.5(m，2H);5.5-6.15(m，1H);7.65-8.3(m，2H);9.57(dd，1H).
被保護的碳代青霉烯的制備向(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(534mg，1.07mM)和N-乙基二異丙基胺(558μl，3.2mM)的無水DMF(10ml)溶液中加入溶于DMF(3ml)，三-正丁基膦(266μl，1.07mM)和水(19μl，1.07mM)的上述(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時，并在4°下靜置過夜。
混合物用HP20SS色譜提純，用乙腈水溶液的梯度液(0-42%)洗脫，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯，是一泡沫體(537mg，78%)。
NMR δ 1.14(m，6H);1.75-2.35(m，1H);2.6-4.8(m，1H);4.9-5.6(m，4H);5.5-6.25(m，2H);7.85(dd，1H);8.2(d，1H);9.37(d，1H).
Ms(+ve FAB)645(MH)+;667(M+Na)+.
實施例29(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(540mg，0.84mM)的二氯甲烷溶液中加入碳酸氫鈉(176mg，2.1mM)水溶液(5ml)。向這個攪拌著的混合物中加入N-甲基苯胺(545μl，5mM)和四(三苯基膦)鈀(141mg，0.12mM)，室溫下攪拌45分鐘后，水層在真空下濃縮，并調(diào)PH值至8。HP20SS樹脂色譜提純，用乙腈水溶液的梯度液(0-6%)洗脫，冷凍干燥后得到標(biāo)題產(chǎn)物(182mg，38%)，是一白色泡沫體。
NMR δ 1.15(d，3H);1.17(d，3H);1.75-1.85(m，1H);2.6-2.75(m，2H);3.19(dd，1H);3.35-3.55(m，2H);3.55-3.67(m，1H);3.9-4.07(m，2H);4.16(dd，1H)，8.2(dd，1H);8.75(d，1H);8.81(d，1H).
Ms(+ve FAB)543(MH)+(Na 鹽)+;565(Na2鹽)+.
起始物制備如下用實施例28中描述的方法制備(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯，只是用2-氨基-5-硝基苯甲酸代替4-硝基鄰氨基苯甲酸(產(chǎn)率58%)。
NMR δ 1.85-2.4(m，1H);2.27(s，3H)，2.65-3.1(m，1H);3.25-3.65(m，1H);3.85-4.3(m，2H);4.4-4.7(m，3H);5.0-5.4(m，2H);5.65-6.15(m，1H);8.38(dd，1H);8.77(2d，2H).
將生成的硫代乙酸酯轉(zhuǎn)化為硫醇，并按實施例28中描述的與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯縮合，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(產(chǎn)率88%)。
NMR δ 1.15-1.25(m，6H);1.9-2.1(m，1H);2.75-2.95(m，1H);3.0-3.2(m，1H);3.23(dd，1H);3.35-3.55(m，2H);3.9-4.1(m，2H);4.12(dd，1H);4.22(dd，1H);4.4-4.7(m，4H);5.14(d，2H);5.33(d，2H);5.7-6.0(m，2H);8.24(dd，1H);8.7(d，1H);8.8(d，1H).
Ms(+ve FAB)667(MH)+;(Na 鹽)+.
實施例30(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-羧基-5-甲氧基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鉀鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲氧基羰基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(500mg，0.665mM)在乙酸乙酯(12ml)和二氯甲烷(12ml)混合物中形成的溶液中加入三苯基膦(87mg，0.33mM)，0.825M的2-乙基己酸鉀的乙酸乙酯溶液(1.77ml，1.46mM)和四(三苯基膦)鈀(77mg，0.065mM)。室溫下將混合物攪拌1小時。經(jīng)離心后沉淀物用乙酸乙酯處理，并在真空下干燥。將得到的固體溶于水(10ml)和乙酸乙酯(10ml)的混合物后，加入10%鈀一碳(350mg)?；旌衔镌谑覝睾统合職浠?小時。濾出催化劑后，化合物用反相色譜(Nucleosil C18，3.5×20cm)提純，用乙腈水溶液的梯度液(0-4%)洗脫，冷凍干燥后得到標(biāo)題化合物，是一泡沫體(90mg，22%)。
NMR δ 1.15(d，6H);1.75-1.9(m，1H);2.65-2.8(m，1H);2.82(dd，1H);3.2(dd，1H);3.35-3.45(m，1H);3.5-3.6(m，1H);3.65-3.75(m，1H);3.85(s，3H);3.95(m，1H);4.15(m，2H);7.63(dd，1H);8.08(d，1H);9.15(d，1H).
起始物制備如下3-氨基-4-羧基苯甲酸甲酯常壓下，在有10%鈀-碳(1g)的存在下，使4-羧基-3-硝基苯甲酸甲酯(3g，13.3mM)的乙醇(20ml)溶液氫化40分鐘。濾出催化劑后，固體用乙醇重結(jié)晶，得到3-氨基-4-羧基苯甲酸甲酯(1.7g，65%)。
NMR δ 3.83(s，3H);7.05(dd，1H);7.45(d，1H);7.8(d，1H).
使上述苯甲酸酯與(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧基羰基)-2-羧基吡咯烷硫代乙酸酯反應(yīng)，如實施例28中描述的制備相應(yīng)的被烯丙基保護的硫代乙酸酯的反應(yīng)得到(2S，4S)-2-(2-羧基-5-甲氧基羰基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR δ 1.75-2.35(m，1H);2.26(s，3H);2.6-3.1(m，1H);3.2-3.65(m，1H);3.9(s，3H);3.7-4.3(m，2H);4.5(dd，1H);4.95-5.45(m，2H);7.15(s，1H);7.35-8.25(m，6H);9.05(br s，1H).
被保護的碳代青霉烯的制備用實施例28中描述的方法，由上述吡咯烷-4-基硫代乙酸酯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲氧基羰基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(產(chǎn)率82%)。
NMR δ 1.16(d，6H);2.0-2.1(m，1H);2.8-3.0(m，1H);3.25(dd，1H);3.4-3.6(m，2H);3.9(s，3H);3.9-4.1(m，2H);4.1-4.3(m，2H);4.4-4.6(m，3H);5.0-5.4(m，4H);5.7-5.9(m，1H);7.1-8.3(m，6H);9.05-9.25(m，1H).
實施例31(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鉀鹽用實施例30中描述的方法，由相應(yīng)的被烯丙基保護的化合物制備標(biāo)題化合物(產(chǎn)率34%)。
NMR δ 1.15(m，6H);1.7-1.85(m，1H);2.6-2.75(m，1H);2.75(dd，1H);3.19(dd，1H);3.3-3.4(m，1H);3.45-3.5(m，1H);3.6-3.7(m，1H);3.75(s，3H);3.9-4.1(m，2H);4.15(dd，1H);7.03(dd，1H);7.51(d，1H);8.44(d，1H).
Ms(+ve FAB)544MH+(K 鹽)+;582(K2鹽)+.
起始物制備如下用實施例30中描述的方法制備(2S，4S)-2-(2-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯，但用2-氨基-4-甲氧基苯甲酸代替3-氨基-4-羧基苯甲酸甲酯。
NMR δ 1.18-2.35(m，1H);2.27(s，3H);2.7-3.1(m，1H);3.2-3.65(m，1H);3.77(s，3H);3.85-4.3(m，2H);4.25-4.65(m，1H);4.85-5.5(m，2H);7.15(dd，1H);7.2-8.4(m，5H);8.4(d，1H).
被保護的碳代青霉烯的制備用實施例28中描述的方法，由上述吡咯烷-4-基硫代乙酸酯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
NMR δ 1.1-1.2(m，6H);1.95-2.1(m，1H);2.8-2.95(m，1H);3.25(dd，1H);3.35-3.55(m，2H);3.75(s，3H);3.9-4.0(m，2H);4.1-4.3(m，2H);4.3-4.6(m，3H);5.0-5.4(m，4H);5.7-5.9;(m，1H);7.1(dd，1H);7.3-8.3(m，5H);8.45(m，1H).
Ms(+ve FAB)725(MH)+.
實施例32(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-乙酰氨基-2-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸，二鈉鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-乙酰氨基-2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(250mg，0.36mM)的二氯甲烷(4ml)溶液中加入碳酸氫鈉(90mg，1mM)的水溶液(4ml)，跟著加入N-甲基苯胺(230mg，2.16mM)和四(三苯基膦)鈀(41mg，0.036mM)。室溫下攪拌15分鐘后，水層用反相色譜(Nucleosil C18，3.5×20cm)提純，用乙腈水溶液的梯度液(4%)洗脫，冷凍干燥后得到標(biāo)題碳代青霉烯，是一泡沫體(59mg，27%)。
NMR(DMSO d6)δ 1.1-1.2(2d，6H);1.65-1.8(m，1H);2.0(s，3H);2.6-2.7(m，2H);3.15(dd，1H);3.4(m，1H);3.5-3.7(m，2H);3.9(m，1H);4.0(m，1H);4.15(dd，1H);7.75(dd，1H);8.15(d，1H);8.45(d，1H).
起始物制備如下5-氨基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯將5-氨基-2-硝基苯甲酸(4g，22mM)溶于DMF(40ml)中，攪拌的同時加入無水碳酸鉀(3.64g，26.4mM)。加入烯丙基溴(3.86g，26.4mM)，并在室溫下將混合物攪拌過夜。蒸發(fā)除去溶劑，將剩余物加到乙腈中。有機層用水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)，并用硅膠色譜提純，用乙腈/石油醚(40/60)洗脫，得到5-氨基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯，是一黃色固體(3.46g，71%)。
NMR(CDCl3)δ 4.4(s，2H);4.7-4.9(m，2H);5.1-5.55(m，2H)5.75-6.25(m，1H);6.5-6.76(m，2H);7.9(d，1H);
5-乙酰氨基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯在氬氣氛及0°下，將乙酰氯(3.18g，40.5mM)的二氯甲烷(10ml)溶液加入到5-氨基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯(3.0g，13.5mM)的二氯甲烷(30ml)溶液中，加入三乙胺(1.88ml，13.5mM)的二氯甲烷(10ml)溶液后，在室溫下將混合物攪拌過夜。蒸去溶劑，剩余物用硅膠色譜提純，用乙酸乙酯/石油醚(50/50)洗脫，得到5-乙酰氨基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯(3.36g，94%)。
NMR(CDCl3)δ2.3(s，3H);4.75-5.0(m，2H);5.2-5.6(m，2H);5.8-6.3(m，2H);7.5-8.2(m，3H).
2-氨基-5-乙酰氨基苯甲酸烯丙基酯將5-乙酰氨基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯(3.2g，12.1mM)和SnCl2·2H2O(13.7g，60.6mM)在甲醇中的懸浮液在60℃下加熱30分鐘，蒸去溶劑后將剩余物加到乙酸乙酯中。有機溶液用稀氨水，鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。硅膠色譜提純，用乙酸乙酯/石油醚(60/40)洗脫，得到2-氨基-5-乙酰氨基苯甲酸酯(2.36g，83%)。
NMR(CDCl3)δ 2.1(s，3H);4.7-4.9(m，2H);5.1-5.55(m，2H);5.55-5.75(s，2H);5.75-6.3(m，1H);6.6(d，1H);7.25(s，1H);7.5(dd，1H);7.85(d，1H).
按實施例28中描述的制備(2S，4S)-1-烯丙氧基羰基-2-(5-乙酰氨基-2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代乙酸酯，但用2-氨基-5-乙酰氨基苯甲酸烯丙基酯代替4-硝基鄰氨基苯甲酸(產(chǎn)率70%)。
NMR(CDCl3)δ 2.1(s，3H);2.3(s，3H);2.26(m，1H);2.6-3.0(m，1H);3.5(m，1H);3.85-4.8(m，7H);5.55(m，4H);5.75-6.5(m，2H);7.5(s，1H);7.7(dd，1H);7.85(s，1H);8.3(d，1H);8.6(d，1H).
被保護的碳代青霉烯的制備用實施例28中描述的方法，由上述吡咯烷-4-基硫代乙酸酯制備(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-烯丙氧基羰基-2-(4-乙酰氨基-2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(產(chǎn)率67%)。
NMR(CDCl3)δ 1.2(d，3H);1.35(d，3H);2.15(s，3H);2.2(m，1H);2.8(m，1H);3.25(dd，1H);3.3(s，1H);3.6(dd，1H);3.8(m，1H);4.1(q，1H);4.25(m，2H);4.4-4.85(m，8H);5.0-5.55(m，6H);5.7-6.1(m，3H);7.4-7.8(m，3H);8.3(s，1H);8.6(s，1H).
實施例33(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-磺基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸三鉀鹽向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-磺基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(500mg，0.575mM)的水溶液(20ml)中加入10%鈀-碳(350mg)和碳酸氫鉀(173mg，1.73mM)。催化氫化反應(yīng)在室溫和常壓下進行1.5小時。濾去催化劑后，化合物用反相色譜(Nucleosil C18，3.5×20cm)提純，用水洗脫，冷凍干燥后得到標(biāo)題化合物，是一泡沫體(150mg，40%)。
NMR δ 1.16(m，6H);1.77(m，1H);2.7(m，2H);3.19(dd，1H);3.4(m，1H);3.5(m，1H);3.65(m，1H);3.97(m，2H);4.15(dd，1H);7.69(dd，1H);8.28(d，1H);8.52(d，1H).
起始物制備如下2-氨基-5-磺基苯甲酸在氬氣氛下，將2-氨基苯甲酸(2g，15mM)的發(fā)煙硫酸溶液(30ml)在80°時加熱2小時。將混合物傾入二乙醚(400ml)中，并將生成的沉淀過濾，用二乙醚洗滌，并在真空下干燥，得到2-氨基-5-磺基苯甲酸(1.8g，57%)。
NMR δ 6.8(d，1H);7.55(dd，1H);8.07(d，1H).
使上述酸與(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧基羰基)-2-羧基吡咯烷硫代乙酸酯反應(yīng)，如實施例28中描述的制備被烯丙基保護的硫代乙酸酯的反應(yīng)，制備(2S，4S)-2-(2-羧基-4-磺基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯(產(chǎn)率61%)。
NMR δ 2.1(m，1H);2.27(s，3H);2.85(m，1H);3.45(m，1H);4.05(m，1H);4.15(m，1H);4.5(m，1H);5.25(m，2H);7.55(m，2H);7.8(d，1H);8.1(m，2H);8.3(s，1H);8.5(d，1H).
將上述硫代乙酸酯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的硫醇，并與(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯縮合，兩個步驟如實施例28中所述，后一步如與被烯丙基保護的碳代青霉烯的縮合，得到(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-磺基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(產(chǎn)率60%)。
NMR δ 1.07(d，6H);2.1(m，1H);2.9(m，1H);3.29(dd，1H);3.5(m，2H);4.0(m，2H);4.05-4.30(m，2H);4.5(m，1H);5.05-5.45(m，4H);7.4-8.6(m，11H).
實施例34(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氨基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸在氬氣氛下，向(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-烯丙氧基羰基-5-氨基羰基苯基氨基甲酰基)-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(440mg，0.51mM)和Meldrum酸(220mg，1.53mM)的DMF(1ml)溶液中加入四(三苯基膦)鈀(60mg，0.052mM)。室溫下將混合物攪拌30分鐘。混合物用二乙醚稀釋，有淺棕色固體沉淀。該固體用二乙醚洗滌三次，并過濾。將該固體(300mg)溶于THF(15ml)和水(10ml)的混合物中，并向其中加入10%鈀-碳(150mg)，使混合物氫化3小時。濾去催化劑，濾液用乙酸乙酯(30ml)和二乙醚(30ml)萃取，將水層冷凍干燥，得到標(biāo)題產(chǎn)物(107mg)。
NMR δ 1.16(s，6H);1.98-2.02(m，1H);2.64-2.91(m，1H);3.08(dd，1H);3.26(dd，1H);3.43(五重峰，1H);3.71(dd，1H);3.89(t，1H);4.03(t，1H);4.21(dd，1H);4.40(t，1H);8.04(dd，1H);8.57(d，1H);8.60(d，1H).
起始物制備如下將4-氨基羰基-2-硝基苯甲酸烯丙基化，使用實施例1中描述的方法，但用4-氨基羰基-2-硝基苯甲酸代替3-羥基-4-硝基苯甲酸，得到4-氨基羰基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯。
NMR δ 4.81-4.90(m，2H);5.29-5.49(m，2H);5.90-6.17(m，1H);8.18(d，1H);8.36(d，1H);8.38(s，1H).
用氯化亞錫，如實施例6中描述的，將4-氨基羰基-2-硝基苯甲酸烯丙基酯還原成4-氨基羰基-2-氨基苯甲酸烯丙基酯。
NMR δ 4.75-4.79(m，2H);5.24-5.44(m，2H);5.96-6.13(m，1H);6.76(d，1H);7.76(dd，1H);8.34(d，1H).
吡咯烷-4-基硫醇側(cè)鏈的制備使上述4-氨基羰基-2-氨基苯甲酸烯丙基酯與4-乙?；虼?1-(4-硝基芐氧基羰基)-2-羧基吡咯烷縮合，使用實施例1中描述的方法，只是提純步驟是用快速色譜，乙酸乙酯作洗脫液，得到(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧基羰基)-2-(2-烯丙氧基羰基-5-氨基羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代乙酸酯。
NMR δ 2.06(五重峰，1H);2.85(m，1H);3.40(dd，1H);4.02(五重峰，1H);4.15(dd，1H);4.53(dd，1H);4.77(m，2H);5.22(dd，2H);5.25-5.42(m，2H);5.95-6.10(m，1H);7.30(br，2H);7.54(d，2H);8.02-8.10(m，3H);8.42-8.48(m，2H);11.05(br，1H).
被保護的碳代青霉烯的制備用氬氣清洗(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基-2-二苯基磷酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(530mg，0.89mM)和1-(4-硝基芐氧基羰基)-2-(2-烯丙氧基羰基-5-氨基羰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇(450mg，0.85mM)的乙腈溶液(20ml)，并在冰浴中冷卻，然后加入N-乙基二異丙基胺(0.45ml，0.47mM)。在5°下將混合物攪拌20小時，除去溶劑，黃色膠狀物用硅膠快速色譜提純，先用乙酸乙酯洗脫，然后用5%的甲醇乙酸乙酯液洗脫，得到(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-烯丙氧基羰基)-5-氨基羰基苯基氨基甲?；?-1-(4-硝基芐氧基羰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥基乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯，是一白色固體(440mg)。
NMRδ 1.17(d，6H);2.02-2.12(m，1H);2.81-2.96(m，1H);3.40-3.60(m，2H);3.95-4.31(m，4H);4.46-4.80(br，3H);5.01-5.43(m，6H);5.89-6.06(m，1H);7.37-8.58(雙重峰和雙重雙峰的復(fù)合峰，11H)。
用于上述反應(yīng)的硫醇是由其硫代乙酸酯用實施例28中描述的方法制備的。
權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)的碳代青霉烯化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯
其中R1是1-羥基乙基、1-氟乙基或羥甲基；R2是氫或C1-4烷基；R3是氫或C1-4烷基；R4是羥基或羧基；并且苯環(huán)可任意地被一或二個選自鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基甲?；1-4烷基氨基甲?；⒍?C1-4烷基氨基甲?；?、氨基、C1-4烷氨基、二-C1-4烷氨基、磺酸、C1-4烷基S(O)n-(其中n是0-2)、N-C1-4烷基亞磺酰氨基，C1-4烷酰氨基和C1-4烷?；?N-C1-4烷基)氨基的取代基進一步取代，條件是苯環(huán)至少被一個羧基取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是1-羥基乙基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R2是氫或甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中的任何一個的化合物，其中R3是氫或甲基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中的任何一個的化合物，其中R3是氫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中的任何一個的化合物，即式(Ⅳ)化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯
其中R3和R4如權(quán)利要求1中的定義，苯環(huán)被任意取代，如權(quán)利要求1所定義。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中苯環(huán)可任意地被一或二個選自甲基、乙基、羥基、羧基、氰基、氯、溴、硝基、甲氧基和乙氧基的取代基進一步取代。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中苯環(huán)可任意地被一或二個選自甲基、羥基、氯和羧基的取代基進一步取代。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它們是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧基;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-三氟甲基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羥基-5-氟代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羥基-3-氯-6-羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲硫基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲亞磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲磺?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4，5-二甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羥基-4-羧基-5-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧基;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲氧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-硝基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-磺基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基-5-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-羥基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基-N-甲基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲氧羰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-硝基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氨基甲酰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-氨基甲?；交被柞；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氰基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-氰基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-6-(N-甲基乙酰氨基)苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基-4-氨基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它們是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，5-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，3-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-甲基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(6-羧基-2-羥基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-2-羥基-3-氯代苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，4-二羧基苯基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2，6-二羧基苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;和(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-氯代苯基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯。
11.一種藥物組合物，其包括根據(jù)權(quán)利要求1-10的任一權(quán)利要求的一種化合物和藥物上可接受的載體。
12.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其包括將式(Ⅴ)化合物脫保護
其中R2如權(quán)利要求1的定義;R10是權(quán)利要求1定義的基團R3，或氨基保護基;R13是權(quán)利要求1定義的基團R1，被保護的羥甲基或1-(被保護的羥基)乙基;R11是氫或羧基保護基;R12是氫或氨基保護基;R18是羧基、羥基、被保護的羧基或被保護的羥基;其中苯環(huán)上的任意的取代基是任意地被保護的并且其中至少存在一個保護基;如果需要可接著進行(ⅰ)形成藥物上可接受的鹽，(ⅱ)酯化以形成體內(nèi)易水解的酯。
13.如權(quán)利要求12定義的式(Ⅴ)化合物。
14.一種制備權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求12定義的式(Ⅴ)化合物的方法，其包括a)將式(Ⅵ)和(Ⅶ)的化合物反應(yīng)
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18如權(quán)利要求12的定義和L是離去基團，或者b)將式(Ⅷ)化合物環(huán)化
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18如權(quán)利要求12中的定義和R14、R15和R16分別選自C1-6烷氧基、芳氧基、二-C1-5烷氨基和二芳氨基或R14-R16中任意兩個表示鄰-苯二氧基;其中任意的功能基是任意被保護的，且如果需要可接著進行(ⅰ)脫除任意保護基;(ⅱ)形成藥物上可接受的鹽;(ⅲ)酯化以形成體內(nèi)易水解的酯。
15.如權(quán)利要求1定義的、非藥物上可接受的鹽的形式的式(Ⅰ)化合物。
16.如權(quán)利要求14定義的式(Ⅶ)或(Ⅷ)化合物。
17.式(Ⅸ)、(Ⅻ)或(ⅩⅣ)的化合物
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18如權(quán)利要求12中的定義和R17是保護基。
18.式(Ⅺ)化合物
其中R10如權(quán)利要求13中的定義，R18是被烯丙基保護的羧基或羥基;苯環(huán)被一或二個選自鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基甲?；1-4烷基氨基甲?；⒍?C1-4烷基氨基甲?；?、氨基、C1-4烷氨基、二-C1-4烷氨基、磺酸、C1-4烷基S(O)n-(其中n是0-2)、N-C1-4烷亞磺酰氨基、C1-4烷酰氨基和C1-4烷?；?N-C1-4烷基)氨基的取代基取代，條件是苯環(huán)至少被一個羧基或被保護的羧基取代;和條件是當(dāng)R18是被烯丙基保護的羧基和R10是氫時，苯環(huán)在6-位上不被硝基或羥基-取代。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的化合物，條件是當(dāng)R18是被烯丙基保護的羧基時，苯環(huán)在6-位上不被硝基或羥基-取代。
全文摘要
式(I)的碳代青霉烯化合物或其藥物上可接受的鹽或體內(nèi)易水解的酯RR并且苯環(huán)可任意地被一或二個選自鹵素、氰基、C
文檔編號C07C229/64GK1066657SQ9210339
公開日1992年12月2日 申請日期1992年4月8日 優(yōu)先權(quán)日1991年4月8日
發(fā)明者M·J·貝茨, M·L·施溫 申請人:帝國化學(xué)工業(yè)公司, 帝國化學(xué)工業(yè)制藥公司