專利名稱：γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺單銨鹽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用作生化檢驗(yàn)試劑的芳香胺類有機(jī)化合物γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺單銨鹽(以下用Ⅰ表示)的制備方法。
Ⅰ是測定轉(zhuǎn)肽酶的良好底物，臨床檢驗(yàn)中已有肯定價(jià)值。德國專利2259512公開了一種制備方法，以2-硝基-5-氨基苯甲酸與鄰苯二甲酰-L-谷氨酸酐(以下用Ⅲ表示)在三-叔丁胺存在下縮合，縮合物再進(jìn)行肼解，得產(chǎn)品。上述文獻(xiàn)中沒有提供原料的合成方法及質(zhì)量要求;縮合及肼解條件不明確;肼解后產(chǎn)品Ⅰ與鄰苯二甲酰肼的分離方法未見文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo);產(chǎn)品Ⅰ的精制方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均未見任何資料介紹。
本發(fā)明的目的是解決上述現(xiàn)有技術(shù)尚有不足的問題，給出一種制備Ⅰ的有效方法。
Ⅰ 結(jié)構(gòu)式為
(1)以純度99.5%以上的3-羧基-4-硝基苯胺(以下用Ⅱ表示)為原料之一，其結(jié)構(gòu)式為
(3)將以上兩種原料進(jìn)行縮合?？s合的溫度為140℃～142℃，(4)將以上縮合物進(jìn)行肼解，肼解的溫度為40℃～50℃，(5)將所得產(chǎn)品Ⅰ與鄰苯二甲酰肼進(jìn)行分離，分離的條件為
(6)對分離出的產(chǎn)品Ⅰ進(jìn)行精制，精制溶劑為乙二醇-水-丙酮。
(7)用色譜法檢測兩種原料的純度，用分光光度法測定成品Ⅰ的含量，用酶法測定成品Ⅰ的活性。
實(shí)施例，經(jīng)色譜法檢測，取純度99.5%的Ⅱ11.60g與〔α〕25D-43°的Ⅲ19.20g，在140℃條件下縮合，然后在45℃條件下肼解，所得產(chǎn)品Ⅰ與鄰苯二甲酰肼在39℃條件下分離，過程約15小時(shí)，將分離出的產(chǎn)品Ⅰ在乙二醇-水-丙酮溶劑中精制，即得純度ε為1.17×104的成品Ⅰ8.8g。
本發(fā)明方法制備的產(chǎn)品Ⅰ，經(jīng)分光光度法測定其純度ε值為1.17×104，無雜質(zhì)，與Sigma公司進(jìn)口產(chǎn)品Ⅰ基本一致，臨床應(yīng)用酶法進(jìn)行活性檢測，在未加激活劑的情況下，相當(dāng)于Sigma公司產(chǎn)品活性92%。用本發(fā)明方法制備的成品Ⅰ經(jīng)江蘇省臨床檢驗(yàn)中心、南京軍區(qū)總醫(yī)院等6家醫(yī)院試用，證明性能良好。
權(quán)利要求
1.一種用作生化檢驗(yàn)試劑的γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺單銨鹽的制備方法，其特征是(1)、以純度99.5%以上的3-羧基-4-硝基苯胺為原料之一，(2)、以[α]25D-43°(C1.75，1，4-二氧六環(huán))的鄰苯二甲酰-L-谷氨酸酐為原料之二，(3)、將以上兩種原料進(jìn)行縮合，縮合的溫度為140℃～142℃，(4)、將以上縮合物進(jìn)行肼解，肼解的溫度為40℃～50℃，(5)、將所得產(chǎn)品與鄰苯二甲酰肼進(jìn)行分離，分離的條件為35℃～39℃，15小時(shí)，(6)、對分離出的產(chǎn)品進(jìn)行精制，精制溶劑為乙二醇-水-丙酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是用色譜法檢測兩種原料的純度。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是用分光光度法測定成品的含量，用酶法測定成品的活性。
全文摘要
一種用作生化檢驗(yàn)試劑的γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺單銨鹽的制備方法，以純度99.5％以上的3-羧基-4-硝基苯胺和[α]
文檔編號C07C237/02GK1076688SQ9210733
公開日1993年9月29日 申請日期1992年3月21日 優(yōu)先權(quán)日1992年3月21日
發(fā)明者陳文浩, 朱巧慶, 程光炘, 董純定 申請人:中國藥科大學(xué), 珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)麗珠醫(yī)藥(集團(tuán))有限公司