專(zhuān)利名稱(chēng)：神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(ntps)的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)，尤其是涉及具有穩(wěn)定生物活性的NTPS的技術(shù)領(lǐng)域。
(NTPS)神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽制備傳統(tǒng)工藝是采用透析法制備，存在產(chǎn)量低、活性低的問(wèn)題。一般用于治療各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦活素或與腦活素相似的同類(lèi)產(chǎn)品，均系從成年豬腦中來(lái)源，而從幼年哺乳類(lèi)動(dòng)物腦中制備N(xiāo)TPS活性的物質(zhì)，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。
本發(fā)明目的在于提供一種采用中空纖維超濾技術(shù)制備出濃度高、產(chǎn)量高、活性高的(NTPS)，且系選取健康幼年哺乳類(lèi)動(dòng)物的腦可以制成口服液，也可是制成注射藥。
本發(fā)明的目的可通過(guò)以下的技術(shù)措施來(lái)達(dá)到選取健康幼年哺乳類(lèi)動(dòng)物的腦，用任何機(jī)械方式搗碎—→接下來(lái)進(jìn)行-20℃深凍→融解后按每10L液體加1ml濃HCl，攪勻→加熱80℃，15min→恢復(fù)室溫，凍存→融解后，離心3000rpm，30分鐘→取上清液→過(guò)正壓截 下面結(jié)合附圖進(jìn)一部說(shuō)明本發(fā)明所述方法及其產(chǎn)品的圖譜附

圖1為本發(fā)明的NTPS的紫外光譜掃描分析圖譜；附圖2為本發(fā)明的NTPS的HPLC的圖譜；本發(fā)明的目的還可以通過(guò)以下技術(shù)措施來(lái)達(dá)到凍融方法可重復(fù)1至數(shù)次、加HCl的劑量可從1ml至數(shù)十毫升，目的是破壞勻漿的膠體平衡，加溫方式是從60—80℃之間任一溫度、截留柱系采用中空纖維超濾柱，截留分子量≤50000Da及≤10000Da，正壓0.5×104Pa，其組合方式可為單一柱或多柱串聯(lián)使用。制備的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)活性保持冷凍干燥方法-40℃速凍，維持2小時(shí)30分鐘，于半小時(shí)升溫至0℃，持續(xù)3小時(shí)后在1小時(shí)內(nèi)升溫至37℃—38℃維持30小時(shí)。制備的刺激肽(NTPS)是一類(lèi)具有促進(jìn)神經(jīng)元存活和突起生長(zhǎng)，促進(jìn)神經(jīng)元內(nèi)線(xiàn)粒體脫氫酶活力的分子量為5000—10000Da的多肽或蛋血混合物。
本發(fā)明制備出的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)截留分子量≤50000Da時(shí)可用于制成神腦口服液，截留分子量≤10000Da時(shí)制成注射用藥。當(dāng)要成為神腦口服液時(shí)，在制備過(guò)程到除菌一步則要加調(diào)味劑而后分裝成品。用于制注射用藥，則在制備過(guò)程到分裝一步，而后凍干、包裝成品。
本發(fā)明的目的采用中空纖維過(guò)濾技術(shù)制備刺激肽，與傳統(tǒng)工藝透析法制備相比具有濃度高、產(chǎn)量高、活性高的特點(diǎn)，其比較強(qiáng)果如下表。(含量測(cè)定采用改良Lowry’s法，活性測(cè)定見(jiàn)方法專(zhuān)利)中空纖維法與透析法生產(chǎn)的NTPS比較中空纖維法透析法NTPS的產(chǎn)量 2.01.5(ml/g腦)多肽含量 1.75 0.12(mg/ml)
活性單位 876(in/ml)本發(fā)明制備的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)的健康幼年哺乳類(lèi)動(dòng)物選自如人、豬、牛、馬、羊、狗、兔。
本發(fā)明制備的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)可制成口服液和肌肉注射，或與其他藥物配伍靜脈滴入給藥。
本發(fā)明的具體實(shí)施方法如下神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)是一種用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物，其制備方法是采用中空纖維法，選取健康幼年哺乳類(lèi)動(dòng)物的腦經(jīng)任何機(jī)構(gòu)方式搗碎、深凍、融解加HCL加熱、凍存、離心，上清液、過(guò)正壓截留柱、除菌、分裝、凍干、包裝流程制得注射用藥或除菌后加調(diào)味劑、分裝流程制成口服液，它們實(shí)際上是一種多肽混合物，生物活性穩(wěn)定，具有刺激神經(jīng)元突起生長(zhǎng)和支持存活的作用。與透析法相比制備的NTPS具有產(chǎn)量高、濃度高、活性高等特點(diǎn)。
本發(fā)明涉及的是一種治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物——促腦康，是從健康幼年哺乳動(dòng)物如乳豬、新生牛等大腦提取的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)，分子量為≤10000Da及≤50000Da它實(shí)際是一種多肽混合物，生物活性穩(wěn)定，具有刺激神經(jīng)元突起生長(zhǎng)和支持存活作用。臨床應(yīng)用可采用口服和肌肉注射給藥，也可與其它藥物配伍靜脈滴入，在治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面顯示出良好的效果。
權(quán)利要求
1.一種穩(wěn)定的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTPS)的制備方法，其特征是所述的制備方法，選取健康幼年哺乳類(lèi)動(dòng)物的腦，用任何機(jī)械方式搗碎→-20℃深凍→融解后按每10L液體加1ml濃Hcl，攪勻→加熱80℃，15min→恢復(fù)室溫，凍存→融解后，離心3000rpm，30分鐘→取上清液→過(guò)正壓
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽制備方法，其特征是凍融方法，可重復(fù)1至數(shù)次、加HCl的劑量可從1ml至數(shù)十毫升、加溫方式是從60-80℃之間任一溫度、截留柱系采用中空纖維超濾柱，截留分子量≤50000Da及≤10000Da，正壓0.5×104Pa，其組合方式可為單一柱或多柱串聯(lián)使用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽制備方法，其特征是制備的刺激肽活性保持冷凍干燥方法-40℃速凍，維持2小時(shí)30分鐘后，于半小時(shí)升溫至0℃，持續(xù)3小時(shí)后在1小時(shí)內(nèi)升溫至37℃—38℃維持30小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽制備方法，其特征是制備的刺激肽(NTPS)是一類(lèi)具有促進(jìn)神經(jīng)元存活和突起生長(zhǎng)，促進(jìn)神經(jīng)元內(nèi)線(xiàn)粒體脫氫酶活力的分子量為5000—10000Da的多肽或蛋血混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種神經(jīng)生長(zhǎng)刺激肽(NTP
文檔編號(hào)C07K1/34GK1120547SQ9411634
公開(kāi)日1996年4月17日 申請(qǐng)日期1994年10月10日 優(yōu)先權(quán)日1994年10月10日
發(fā)明者孔祥平 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第458醫(yī)院