專(zhuān)利名稱(chēng)：9-氨基喜樹(shù)堿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備式(Ⅰ)9-氨基-20-(s)-喜樹(shù)堿的新方法 它是一種已知的抗癌藥Wani等，J，Med.Chem.1987，30，1774-1779;Hsiang等，Cancer，Rew.49，4385-4389，8月15，1989;CancerRes.49，1465-1469，3月15日，1989。
對(duì)于9-氨基喜樹(shù)堿的全合成方法已廣泛描述(US-A-4，894，456和US-A-5，053，512)。然而，該產(chǎn)品的全合成既不理想又不適合大規(guī)模生產(chǎn)，因?yàn)樗ㄌ嗟闹虚g步驟，不僅使合成太長(zhǎng)，而且尤其是使合成昂貴。
半合成9-氨基喜樹(shù)堿已有描述，例如在1984年公開(kāi)的JP-A-59-51289中，從天然產(chǎn)物喜樹(shù)堿起始CancerChemotherapyReports部分1，54卷，第6期，1970年12月，461-470;J.Med.Chem.，，1980，23，554-560;Science，246卷，1989年11月，1046-1048。該半合成方法包括天然產(chǎn)物喜樹(shù)堿的硝化，隨后還原9-硝基衍生物。然而，這種硝化起初產(chǎn)生不需要的12-硝基基樹(shù)堿衍生物(70%)和需要的喜樹(shù)堿衍生物(30%)的70/30混合物。因此僅生成少量的9-硝基衍生物。
分離兩種硝化產(chǎn)物后，本身無(wú)生物活性的12-硝基衍生物(見(jiàn)例如Wani C.，NicholasA.W.，Wall M.E.，J.Med.Chem.，1986，29，2358)然后必須排放，這將引起廢物處理問(wèn)題。有關(guān)除去不需要的12-硝基衍生物副產(chǎn)品的嚴(yán)重缺點(diǎn)尤其與大規(guī)模生產(chǎn)有關(guān)，因?yàn)樾枰占统ゴ罅康臒o(wú)用12-硝基衍生物。
而且，半合成方法之后，需要大量的昂貴天然喜樹(shù)堿以便產(chǎn)生少量所需的抗癌藥9-氨基喜樹(shù)堿。這種方法的低總產(chǎn)率使生成大量的所需化合物變得困難。因此需要一種比上述概括半合成9-氨基喜樹(shù)堿方法提高產(chǎn)率的方法。
我們開(kāi)發(fā)了一種滿(mǎn)足這種目的的新方法，同時(shí)解決了由不斷產(chǎn)生恒量不需的12-硝基喜樹(shù)堿引起的廢產(chǎn)物處理問(wèn)題。根據(jù)本發(fā)明，在容易而且溫和反應(yīng)條件下該12-硝基衍生物通過(guò)轉(zhuǎn)變成9-氨基喜樹(shù)堿而被循環(huán)進(jìn)入本方法，得到高產(chǎn)率而清潔的反應(yīng)產(chǎn)物。
因此，本發(fā)明提供了一種從式(Ⅱ)的12-硝基喜樹(shù)堿制備式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿的新方法，其步驟在下面方案Ⅰ中舉例說(shuō)明方案Ⅰ 其中X為一種可還原除去的基團(tuán)。
該方法包括將式(Ⅱ)的12-硝基衍生物還原轉(zhuǎn)化成式(Ⅲ)的12-氨基衍生物。該中間體依次轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的重氮衍生物，它就地轉(zhuǎn)變成式(Ⅳ)的化合物，其中X為一種可還原除去的基團(tuán)如一種鹵原子。
硝化式(Ⅳ)的12-取化衍生物具有高選擇性，并產(chǎn)生相應(yīng)的式(Ⅴ)9-硝基-12-取代衍生物。隨后還原式(Ⅴ)的化合物，得到式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿，可一步直接得到式(Ⅰ)的化合物，或也可分兩步得到式(Ⅰ)的化合物，首先將一種式(Ⅴ)的化合物還原成一種式(Ⅵ)的化合物，然后，將一種式(Ⅵ)的化合物，然后，將一種式(Ⅵ)的化合物還原成一種式(Ⅰ)的化合物。式(Ⅵ)的化合物可不必分離。
在上面引用的JP-A-59-51289中和在出版的文獻(xiàn)(例如見(jiàn)Chem.pharm，Bull.1991，39，3183)中已公開(kāi)了關(guān)于喜樹(shù)堿分子的很多化學(xué)問(wèn)題，包括將12-氨基轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的12-鹵代衍生物，但它僅用于合成生物學(xué)上用于評(píng)價(jià)的化合物的目的。12取代化合物的生物學(xué)上無(wú)用(例如見(jiàn)Crow，R.T.，Crothers，D.M.J.Med.Chem.1992，35，4160)及化學(xué)困難阻止了對(duì)12-取代喜樹(shù)堿衍生物的其它可能改變的任何努力。
尤其是，在該分子12-取代衍生物上引入硝基不是已知的，并且看起來(lái)成問(wèn)題，因?yàn)樗赡芤鹧苌锏幕旌衔锸聦?shí)上，環(huán)體系的不同位置可能發(fā)生反應(yīng)。
而且，對(duì)于除去化合物(Ⅴ)或(Ⅵ)的X基，必須強(qiáng)調(diào)雖然還原除去喹啉中鹵原子是眾所周知的(例如見(jiàn)Jones，G.雜環(huán)化合物化學(xué)，32，I.P.604-611)，其中一般來(lái)說(shuō)存在堿被認(rèn)為是有利的，以便得到溫和的反應(yīng)條件，相反，盡管對(duì)喜樹(shù)堿化學(xué)問(wèn)題進(jìn)行了幾年的努力，但是還不知道怎么除去喜樹(shù)堿衍生物的基團(tuán)(例如除去鹵素基團(tuán))，更不用說(shuō)已經(jīng)知道喜樹(shù)堿衍生物對(duì)堿極其敏感，因此依靠堿將是成問(wèn)題的。
令人驚奇的是，現(xiàn)在我們發(fā)現(xiàn)在有機(jī)或無(wú)機(jī)非親核堿存在下可以從喜樹(shù)堿中除去例如鹵原子。本發(fā)明包括這方面并且也基于觀察到喜樹(shù)堿分子中9-氨基的極弱堿性和親核性質(zhì)。確實(shí)，還原式(Ⅴ)9-硝基-12-取代衍生物中的9-硝基將產(chǎn)生9-氨基功能度，如此形成的9-氨基然后可作為原地產(chǎn)生的弱非親核堿，且原則上促進(jìn)還原除去X基，而不分解。
另一方面，在式(Ⅴ)化合物中彼此對(duì)位上存在兩個(gè)取代基可以預(yù)料將有不希望的影響，妨礙雙還原步或使其變難;可以預(yù)料所需產(chǎn)物的低產(chǎn)率或分解。無(wú)論如何，上面結(jié)合反應(yīng)順序的全合成示意方案從來(lái)沒(méi)有報(bào)導(dǎo)過(guò)，以前也未認(rèn)識(shí)或開(kāi)發(fā)其潛在應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種制備式(Ⅰ)9-氨基喜樹(shù)堿的方法， 該方法包括(1)還原式(Ⅱ)的化合物
所以得到式(Ⅲ)的化合物 (2)將式(Ⅲ)的化合物轉(zhuǎn)變成一種式(Ⅳ)的化合物 其中X為可還原除去的基團(tuán);
(3)一種式(Ⅳ)的化合物與一種硝化試劑反應(yīng)，得到一種式(Ⅴ)的化合物
其中X如上面定義，和(4)一步還原一種式(Ⅴ)的化合物，得到式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿，或也可以(5)還原一種式(Ⅴ)的化合物，得到式(Ⅵ)的化合物 其中X如上面定義，和(6)還原除去式(Ⅵ)化合物中的X基，得到式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿。
X基優(yōu)選為一種鹵素，如Cl，I，Br或F，更優(yōu)選Cl或Br。
例如可用適當(dāng)?shù)倪€原劑或在適當(dāng)還原劑存在下用適當(dāng)催化劑通過(guò)催化還原將式(Ⅱ)的化合物還原成式(Ⅲ)的化合物。例如，可按照J(rèn).March，高等有機(jī)化學(xué)，第3版，1103中描述進(jìn)行。例如，在大約-20℃到大約60℃在適當(dāng)溶劑如稀或濃含水HCl，稀含水質(zhì)子酸，水，乙醇，甲醇，或其混合物中用還原劑如SnCl2，或其它金屬或金屬鹽和Zn或Fe及其鹽可進(jìn)行還原幾分鐘到幾天的一段時(shí)間如從大約5分鐘到大約3天，如從4小時(shí)到24小時(shí);或在大約0℃到大約100℃的某一溫度下在大約1atm到大約100atm的壓力下在適當(dāng)溶劑如二甲基甲酰胺(DMF)，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷或其混合物中在氫分子或氫源如甲酸三乙基銨，甲酸，三下基氫化錫，環(huán)己二烯等存在下，通過(guò)使用還原硝基的催化量金屬如鈀，氧化鉑，鉑，銠或釕來(lái)還原一段時(shí)間，如從幾分鐘如5分鐘到H2停止消耗如大約3天。
用一種適當(dāng)?shù)脑噭┤缫环N鹵化銅(Ⅰ)通過(guò)生成不需要從反應(yīng)混合物中分離的一種重氮衍生物可將式(Ⅲ)的化合物轉(zhuǎn)變成一種式(Ⅳ)的化合物，于大約-20℃到大約100℃的溫度下用適當(dāng)?shù)闹氐噭┤鏝aNO2或含水稀質(zhì)子酸如HCl，HBr或H2SO4中或在有機(jī)溶劑中的有機(jī)亞硝酸化物可進(jìn)行重氮化反應(yīng)一段時(shí)間，可以從幾分鐘到幾小時(shí)，如從大約5分鐘到大約24小時(shí)。然后在大約0℃到大約100℃的某一溫度下任選在可用于溶劑的相應(yīng)氫鹵酸存在下所得的溶液可與從化學(xué)計(jì)算量到大量過(guò)量如過(guò)量近10-倍摩爾的鹵化銅(Ⅰ)如CuCl或CrBr反應(yīng)，或與碘離子反應(yīng)一段時(shí)間，可以從幾分鐘到1天例如從大約5分鐘到大約1天。
可在大約-20℃到大約100℃的某一溫度下用硝化試劑如硝酸，硝酸和硫酸的混合物或其它硝化試劑如硝酸鉀或硝酸和三氟化硼如三氟化硼單水合物(例如見(jiàn)Olah，G.A.等Synthesis1085，1992)，或硝酸/三氟甲磺酸酐(出處同上，1087，1992)硝化式(Ⅳ)化合物一段時(shí)間來(lái)得到式(Ⅴ)的化合物，時(shí)間可以從幾分鐘到幾天，如從大約5分鐘到大約3天，如從約4小時(shí)到約24小時(shí)。
于大約0℃到大約100℃的某一溫度下在從1atm到大約100atm壓力下，任選一種無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿存在下在適當(dāng)?shù)娜軇┤鏒MF，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷，或其混合物中在適當(dāng)?shù)拇呋瘎┐嬖谙禄蛘咴诰鄺l件下如在鈀或鉑鹽和適當(dāng)?shù)牧谆虻潴w存在下或者在非均相條件下如在鈀，氧化鉑，鉑，銠或釕等存在下或者懸浮在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)上如在碳上，在CaCO3上，在BaSC4上，在氧化鋁上等等用適當(dāng)?shù)倪€原劑如氫分子或甲酸三乙銨，甲酸，三丁基氫化錫，環(huán)己二烯，等等可以將式(Ⅴ)的一種化合物一步還原成式(Ⅰ)的化合物，還原時(shí)間可以從大約1小時(shí)到大約3天。
當(dāng)另外以?xún)刹綄⑹?Ⅴ)的化合物還原成式(Ⅰ)化合物時(shí)，可以用適當(dāng)?shù)倪€原劑如上述一步還原式(Ⅴ)化合物的那些還原劑進(jìn)行第一步較短時(shí)間，如從幾分鐘到幾小時(shí)，例如從大約5分鐘到大約24小時(shí)，如果需要，分離式(Ⅵ)的中間體，然后按照上述一步還原式(Ⅴ)化合物的相同還原步驟進(jìn)行第二步還原式(Ⅵ)化合物;或者在適當(dāng)溶劑如苯，甲苯，CHCl3，丙腈，DMF，或其混合物中在自由基引發(fā)劑如2，2′-偶氮二異丁腈(AIBN)或三(三甲基)硅烷(tristrimethylsilane)等等存在下利用自由基消除鹵原子的試劑如正-Bu3SnH來(lái)進(jìn)行第二步，溫度可以從室溫到溶劑回流溫度，時(shí)間從幾分鐘到幾小時(shí)，例如從大約5分鐘到大約24小時(shí)。
優(yōu)選將式(Ⅱ)的化合物還原成式(Ⅲ)化合物的還原劑例如是在稀或濃含水HCl中的SnCl2，溫度從約0℃到約60℃，時(shí)間從約1小時(shí)到約2天;或者通過(guò)催化還原，5%或10%Pd/C和DMF中的分子氫，或PtO2和分子氫，溫度從室溫到大約60℃，時(shí)間從大約1小時(shí)到大約24小時(shí)，氫壓力從大約1atm到大約10atm。
優(yōu)選將式(Ⅲ)化合物轉(zhuǎn)變成式(Ⅳ)化合物的試劑例如是NaNO2，亞硝酸戊酯，亞硝酸叔丁酯，或有機(jī)亞硝酸化合物，在含水或有機(jī)溶劑如濃HCl或HBr，稀HCl或HBr，DMF，二噁烷或CH2Cl2中，溫度從大約-20℃到大約60℃，時(shí)間從大約10分鐘到大約12小時(shí)。所得的溶液然后可以與從化學(xué)計(jì)算量到10當(dāng)量的鹵化銅(Ⅰ)如CuCl或CrBr反應(yīng)，或與碘離子反應(yīng)，優(yōu)選在可用作溶劑的相應(yīng)氫鹵酸水溶液存在下，溫度從室溫到大約80℃，時(shí)間可以從幾分鐘到幾小時(shí)，如從大約5分鐘到大約12小時(shí)。
優(yōu)選將式(Ⅳ)化合物轉(zhuǎn)變成式(Ⅴ)化合物的試劑為硝酸，或硝酸和硫酸的混合物，或硝酸鉀，或硝酸和三氟化硼單水合物，或硝酸/三氟甲磺酸酐，溫度從大約-20℃到大約60℃，時(shí)間從幾分鐘到幾小時(shí)，例如從大約5分鐘到大約24小時(shí)。
優(yōu)選式(Ⅴ)化合物一步還原成式(Ⅰ)化合物的還原劑為分子氫，甲酸三乙銨，甲酸，或環(huán)己二烯，在適當(dāng)?shù)拇呋瘎┤玮Z，氧化鉑，鉑和銠等等存在下或者支持在碳，CaCO3，BaSO4，硅石或氧化鋁中，在適當(dāng)?shù)娜軇┤鏒MF，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷，或其混合物中，任選在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)堿如吡啶或2，6-烷基二取代吡啶如2，6-二甲基吡啶等，或無(wú)機(jī)堿如碳酸鈉或碳酸鈣等存在下，溫度從大約室溫到大約80℃，時(shí)間從大約1小時(shí)到大約2天，壓力從大約1atm到大約50atm，更優(yōu)選從大約1atm到大約10atm。
當(dāng)用替代方法，用兩步還原式(Ⅴ)化合物時(shí)，優(yōu)選第一步試劑與上述一步還原式(Ⅴ)化合物的那些還原劑相同，還原較短時(shí)間，如從幾分鐘如5分鐘到大約6小時(shí)，如果需要，分離式(Ⅵ)中間體衍生物，然后按照上述一步還原式(Ⅴ)化合物的相同還步驟第二步還原式(Ⅵ)化合物。
優(yōu)選自由基消除鹵素的試劑為正-Bu3SnH，在自由基引發(fā)劑如AIBN，或三(三甲基)硅烷等存在下，在適當(dāng)溶劑如苯，甲苯，CHCl3，丙腈，DMF，或其混合物存在下，溫度從室溫到溶劑回流溫度，時(shí)間從幾分鐘到幾小時(shí)，如從5分鐘到24小時(shí)。
溫和的反應(yīng)條件，是本發(fā)明方法的特征，使式(Ⅱ)化合物C20位上的(s)構(gòu)型保留在最后化合物式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿上。
式(Ⅱ)的原料化合物是已知化合物，可以用已知方法制備。
本發(fā)明在其范圍內(nèi)也包括制備式(Ⅰ)9-氨基喜樹(shù)堿的方法，包括(a)硝化式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿
得到9-硝基-20-(s)-喜樹(shù)堿和12-硝基-2-(s)-喜樹(shù)堿;
(b)從12-硝基-20-(s)-喜樹(shù)堿中分離9-硝基-2-(s)-喜樹(shù)堿;
(c)還原分離的9-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿，因此生成9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿;
(d)將分離的12-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿再循環(huán)到該方法步驟(1)到(4)中或方法步驟(1)到(3)，(5)和(6)中，因此生成9-氨基喜樹(shù)堿。
本發(fā)明的另一目的是制備上式(Ⅶ)喜樹(shù)堿的方法，它包括從上式(Ⅳ)化合物中還原除去X基。
可以通過(guò)使用適當(dāng)還原劑如分子氫或甲酸三乙銨，甲酸，環(huán)己二烯等，在適當(dāng)催化劑如鈀，氧化鉑，鉑，銠或釕等存在下，或支持在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)如碳，CaCO3，BaSO4，氧化鋁等上，在適當(dāng)?shù)娜軇┤鏒MF，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷，或其混合物中，在適當(dāng)有機(jī)三如吡啶或2，6-烷基二取代吡啶如2，6-二甲基吡啶等存在下，從大約0℃到大約100℃的溫度下，在從大約1atm到大約100atm的壓力下把式(Ⅳ)化合物的X基還原消除大約1小時(shí)到大約3天，得到式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿。
當(dāng)在式(Ⅳ)化合物中X為鹵素時(shí)，優(yōu)選還原劑為分子氫，甲酸三乙銨，甲酸或環(huán)己二烯，在適當(dāng)催化劑如鈀，氧化鉑，鉑和釕等存在下，或支持在碳，CaCO3，BaSO4，硅石或氧化鋁上，在DMF，MeOH，乙酸，CHCl3，二噁烷，或其混合物中，在大約室溫到大約80℃的溫度下，還原時(shí)間從大約1小時(shí)到大約24小時(shí)，在有機(jī)堿，優(yōu)選吡啶，2，6-二甲基吡啶存在下，在大約1atm到大約50atm，更優(yōu)選從大約1到大約10atm的壓力下。
式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿和式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿作為局部異構(gòu)酶Ⅰ(topoisomerateⅠ)的抑制劑是有用的。它的用于治療癌癥，尤其是白血病，結(jié)腸癌和直腸癌。因此這類(lèi)化合物可用于改善患有這類(lèi)某種癌癥的病人病情。它們也能用于緩解這類(lèi)癌癥。
因此可以按其需要對(duì)宿主，典型的人給入有效量的9-氧基喜樹(shù)堿或喜樹(shù)堿?？梢酝ㄟ^(guò)適當(dāng)途徑如口服或非經(jīng)腸道如靜脈內(nèi)給入活性化合物，通過(guò)這些途徑對(duì)每kg體重的病人可以給0.1到60mg的活性化合物。優(yōu)選的劑量范圍是每kg體重1到40mg。
為給藥目的，式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿或式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿可以與藥物載體或稀釋劑一起配制成藥物組合物。根據(jù)給藥路線(xiàn)，可以使用任何適當(dāng)?shù)妮d體或稀釋劑。適當(dāng)類(lèi)型的組合物記載于US-A-5106742和WO91/05556中。
下面實(shí)施例舉例說(shuō)明本發(fā)明化合物及中間體的制備方法，不限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例112-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿于0-5℃向12-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿(20g)在濃HCl(300ml)中的攪拌溶液/懸浮液中加入無(wú)水SnCl2(41.9克)，然后所得混合物于室溫下繼續(xù)攪拌過(guò)夜。過(guò)濾固體，用少量濃HCl洗。黃色固體懸浮在水中，用分批加入的碳酸氫鈉固體將pH調(diào)到大約為2。過(guò)濾收集固體，用水洗至中性，然后用乙醇和乙醚洗。干燥后得到10.5克標(biāo)題化合物。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.88(3H，t，J＝7.2Hz);1.83(2H，m);5.22(2H，s);5.40(2H，s);6.19(2H，bs);6.50(1H，s)6.9-7.4(3H，m);8.44(1H，s).
實(shí)施例212-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿在大氣壓及室溫下在10% pd/C(0.25克)存在下氫化12-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿(1克)在DMF(100ml)中的溶液，直到H2消耗中止。用等量DMF稀釋所得懸浮液，然后過(guò)濾。真空濃縮溶劑到小體積，過(guò)濾收集沉淀的固體，用乙醇和乙醚洗。得到呈黃色固體的標(biāo)題化合物(0.8克)。它與實(shí)施例1的化合物具有相同的物理性質(zhì)。
實(shí)施例312-氯-20(s)-喜樹(shù)堿30ml水中亞硝酸鈉(2.4克)于0-5℃在攪拌的同時(shí)加入12-氨基喜樹(shù)堿(9克)在18%HCl(650ml)中的溶液中。30分鐘后，于70℃反應(yīng)混合物滴到含CuCl(12.2克)和18%HCl(250ml)的燒瓶中。連續(xù)加熱1.5小時(shí)。然后反應(yīng)混合物倒入冰水中，用二氯甲烷萃取含水混合物。真空除去溶劑，用乙醚溶解固體，再過(guò)濾，得到5.5克標(biāo)題化合物。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.89(3H，t，J＝7.3 Hz);1.86(2H，m);5.29(2H，s);5.42(2H，s);6.57(1H，s);7.36(1H，s);7.66(1H，t，J＝7.9Hz)8.0-8.1(2H，m);8.75(1H，s).
實(shí)施例412-溴-20(s)-喜樹(shù)堿于0-5℃同時(shí)攪拌下將30ml水中的亞硝酸鈉(2.4克)加到12-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿(9克)在15%HBr(650ml)中的溶液中。30分鐘后，反應(yīng)混合物于70℃滴入含CuBr(21.3克)和16%HBr(250ml)的燒瓶中。持續(xù)加熱1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取含水混合物。蒸發(fā)溶劑后，通過(guò)用乙醚沉淀分離純產(chǎn)物，得到呈黃色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(6.1克)。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.88(3H，t，J＝7.3 Hz);1.86(2H，m);5.31(2H，s);5.43(2H，s);6.58(1H，s);7.37(1H，s);7.60(1H，t，J＝7.9Hz);8.1-8.2(2H，m);8.74(1H，s).
實(shí)施例59-硝基-12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿(5克)溶解/懸浮在濃H2SO4(70ml)中，冷到0-5℃，同時(shí)機(jī)械攪拌。20分鐘內(nèi)向反應(yīng)混合物中滴入70%HNO3(2.7ml)，然后反應(yīng)瓶溫?zé)岬绞覝?。在室溫下繼續(xù)攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物倒入冰水中，過(guò)濾收集黃色固體，用水，乙醇，乙醚洗。干燥后得到4克標(biāo)題產(chǎn)物。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.89(3H，t，J＝7.2Hz);1.86(2H，m);5.34(2H，s);5.44(2H，s);6.61(1H，s);7.39(1H，s);8.24(1H，d，J＝8.3Hz);8.48(1H，d，J＝8.3Hz);9.22(1H，s).
實(shí)施例69-硝基-12-溴20(s)-喜樹(shù)堿12-溴-20(s)-喜樹(shù)堿(5.5克)溶解/懸浮在濃H2SO4(80ml)中，冷卻至0-5℃，同時(shí)機(jī)械攪拌。70%HNO3(3.1ml)滴入反應(yīng)混合物中，歷時(shí)20分鐘，然后反應(yīng)燒瓶溫?zé)岬绞覝?。在室溫下繼續(xù)攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物倒入冰水中，過(guò)濾收集黃色固體，用水，乙醇，乙醚洗。干燥后得到4.2克標(biāo)題產(chǎn)物。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.88(3H，t，J＝7.3Hz);1.87(2H，m);5.35(2H，s);5.44(2H，s);6.61(1H，s);7.40(1H，s);8.39(1H，d，J＝8.4Hz);8.45(1H，d，J＝8.4Hz);9.20(1H，s).
實(shí)施例79-氯基-12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿在大氣壓及室溫下在10%Pd/C(0.1克)存在下氫化9-硝基-12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿(3克)在DMF(50ml)中的溶液2小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)混合物，真空濃縮溶液。在硅膠柱上層析殘余物，得到標(biāo)題化合物(2.5克)。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.2Hz);1.86(2H，m);5.28(2H，s);5.42(2H，s);6.30(2H，bs);6.56(1H，s);6.75(1H，d，J＝8.4Hz);7.31(1H，s);7.66(1H，d，J＝8.4Hz);8.89(1H，s).
實(shí)施例89-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿在大氣壓及室溫下在10%Pd/C(0.1克)存在下氫化9-硝基-12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿(3克)在DMF(50ml)中的溶液48小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)混合物，真空濃縮溶液。在硅膠柱上層析殘余物，得標(biāo)題化合物(1.5克)。
1NMR(DMSO-d6)，δppm0.87(3H，t，J＝7.3Hz);1.85(2H，m);5.26(2H，s);5.41(2H，s);6.11(2H，s);6.50(1H，s);6.79(1H，m);7.28(1H，s);7.3-7.5(2H，m);8.83(1H，s).
實(shí)施例99-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿在大氣壓及室溫下在10%Pd/C(0.1克)存在下氫化9-硝基-12-溴-20(s)-喜樹(shù)堿(3克)在DMF(50ml)中的溶液6小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)混合物，真空濃縮溶液。在硅膠柱上層析殘余物，得到標(biāo)題化合物(2.0克)。該化合物與實(shí)施例8中得到的化合物具有相同特性。
實(shí)施例10從9-氨基-12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿中得到的9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿按照實(shí)施例8進(jìn)行反應(yīng)，得到呈黃色固體的目的產(chǎn)物，它與真正的產(chǎn)物相同。
實(shí)施例11從12-氯-20(s)-喜樹(shù)堿得到的20(s)-喜樹(shù)堿按照實(shí)施例8進(jìn)行反應(yīng)，只是在吡啶存在下進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)混合物氫化12小時(shí)。通過(guò)柱色譜分離標(biāo)題產(chǎn)物。它與真正產(chǎn)品的樣品相同。
實(shí)施例12從12-溴-20(s)-喜樹(shù)堿得到的20(s)-喜樹(shù)堿按照實(shí)施例11進(jìn)行反應(yīng)，只是反應(yīng)進(jìn)行6小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，它與真正物質(zhì)樣品相同。
權(quán)利要求
1.一種制備式(Ⅰ)9-氨基喜樹(shù)堿的方法 該方法包括(1)還原式(Ⅱ)的化合物 (Ⅱ)所以得到式(Ⅲ)的化合物 (Ⅲ)(2)將式(Ⅲ)的化合物轉(zhuǎn)變成一種式(Ⅳ)的化合物 (Ⅳ)其中X為可還原除去的基團(tuán)；(3)一種式(Ⅳ)的化合物與一種硝化試劑反應(yīng)，得到一種式(Ⅴ)的化合物 (Ⅴ)其中X如上面定義，和(4)一步還原一種式(Ⅴ)的化合物，得到式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿，或也可以(5)還原一種式(Ⅴ)的化合物，得到式(Ⅵ)的化合物 (Ⅵ)其中X如上面定義，和(6)還原除去式(Ⅵ)化合物中的X基，得到式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其中X為鹵素。
3.按照權(quán)利要求1或2的方法，其中通過(guò)使用SnCl2，Zn或Fe作為還原劑或通過(guò)使用鈀，氧化鉑，鉑，銠或釕催化氧化來(lái)實(shí)現(xiàn)步驟(1)。
4.按照前述權(quán)利要求中任一個(gè)的方法，其中通過(guò)式(Ⅲ)化合物的重氮化作用和該重氮化作用產(chǎn)物與CuCl或CuBr反應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)步驟(2)。
5.按照前述權(quán)利要求中任一個(gè)要求的方法，其中步驟(3)中的硝化劑選自硝酸，硝酸與硫酸的混合物，硝酸鉀;硝酸和三氟化硼;及硝酸和三氟甲磺酸酐。
6.按照前述權(quán)利要求中任一個(gè)的方法，其中步驟(4)中的還原劑或用于步驟(5)和(6)的還原劑選自分子氫，甲酸三乙銨，甲酸，三丁基氫化錫和環(huán)己二烯。
7.按照前述權(quán)利要求中任一個(gè)的方法，該方法包括(a)硝化式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿 得到9-硝基-20-(s)-喜樹(shù)堿和12-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿;(b)從12-硝基-20(s)-喜樹(shù)脂中分離9-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿;(c)還原分離的9-硝基20(s)-喜樹(shù)堿，因此生成9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿;(d)將分離的12-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿再循環(huán)到該方法步驟(1)到(4)中或方法步驟(1)到(3)，(5)和(6)中，因此生成9-氨基喜樹(shù)堿。
8.制備權(quán)利要求1中定義的式(1)9-氨基喜樹(shù)堿的方法，該方法包括(ⅰ)在9-氨基喜樹(shù)堿一步生成的條件下還原權(quán)利要求1中定義的式(Ⅴ)的化合物;或(ⅱ)從權(quán)利要求1中定義的式(Ⅵ)化合物中還原除去X基，任選在獲得式(Ⅵ)化合物的條件下通過(guò)還原式(Ⅴ)化合物制備該式(Ⅵ)化合物。
9.按照權(quán)利要求8的方法，其中通過(guò)權(quán)利要求1定義的式(Ⅳ)化合物與硝化試劑反應(yīng)制備式(Ⅴ)化合物，任選通過(guò)權(quán)利要求1定義的式(Ⅲ)化合物轉(zhuǎn)變而制備式(Ⅳ)的化合物，及任選通過(guò)還原權(quán)利要求1定義的式(Ⅱ)化合物而制備式(Ⅲ)化合物。
10.權(quán)利要求1中定義的式(Ⅴ)或(Ⅵ)化合物。
11.制備權(quán)利要求中定義的式(Ⅴ)化合物的方法，該方法包括權(quán)利要求1中定義的式(Ⅳ)化合物與硝化試劑反應(yīng)。
12.制備權(quán)利要求1中定義的式(Ⅵ)化合物的方法，該方法包括在得到式(Ⅵ)化合物條件下還原式(Ⅴ)化合物。
13.制備式(Ⅶ)喜樹(shù)堿的方法， 該方法包括從式(Ⅳ)化合物中還原除去X基， 其中X為一種可還原除去的基團(tuán)，因此得到式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿。
14.一種包括權(quán)利要求1中定義的式(Ⅰ)9-氨基喜樹(shù)堿或權(quán)利要求13中定義的式(Ⅶ)喜樹(shù)堿作為活性成分及可藥用載體或稀釋劑的藥物組合物，式(Ⅰ)的9-氨基喜樹(shù)堿是通過(guò)權(quán)利要求1-9中任一個(gè)中要求的一種方法制備的，式(Ⅶ)的喜樹(shù)堿是通過(guò)權(quán)利要求13中定義的方法制備的。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了制備9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿的新方法，該方法包括還原12-硝基-20(s)-喜樹(shù)堿(II)；將所得12-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿(III)轉(zhuǎn)變成式(IV)的化合物，其中X為可還原除去的取代基，式(IV)化合物與硝化試劑反應(yīng)，得到12位被X取代的相應(yīng)式(V)9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿，單步還原式(V)化合物得到式(I)9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿，或還原式(V)化合物，得到12位被X取代的相應(yīng)式(VI)9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿，從式(VI)化合物中還原除去X基，得到9-氨基-20(s)-喜樹(shù)堿。
文檔編號(hào)C07D491/22GK1113384SQ94190581
公開(kāi)日1995年12月13日 申請(qǐng)日期1994年7月18日 優(yōu)先權(quán)日1993年8月6日
發(fā)明者A·比德西, W·卡布里, I·坎蒂尼, F·薩里尼 申請(qǐng)人:藥制品公司