專利名稱：新的取代磺酰胺，其制備方法以及含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的取代的磺酰胺，其制備方法以及含有它們的藥物組合物。
本發(fā)明尤其涉及—式I的取代的磺酰胺及其與合適酸的生理耐受加成鹽 其中—A表示下式基團(tuán) 或 -R1表示a)氫原子，b)含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基以及可以被一個(gè)或多個(gè)甲基、苯基、吡啶基或噻吩基取代的含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基，其本身可以任意地或者被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代、或者被羥基取代，c)含3—7個(gè)碳原子的鏈烯基(例如—CH2—CH＝CH2)，或者d)含3—7個(gè)碳原子的炔基(例如—CH2≡C—CH)；以及—D表示a)含2—6個(gè)碳原子的飽和直鏈烴鏈，它被一個(gè)或多個(gè)氧或硫原子間隔，或者被環(huán)戊烷環(huán)間隔，或者被偕二甲基取代，或者b)下式基團(tuán) 或 與本發(fā)明最接近的現(xiàn)有技術(shù)的EP0330065A中進(jìn)行了說明，它涉及下式的磺酰胺 也就是說該化合物中磺酰胺官能團(tuán)總是與苯環(huán)連接，而該苯環(huán)本身可以是取代或未取代的，但是該申請(qǐng)沒有包括或提示上述式I中所定義的所有式A的雙環(huán)基。
因此，該參考文獻(xiàn)EP0330065A不能影響本申請(qǐng)的專利性。
本申請(qǐng)還涉及式I化合物的制備方法，其特征在于將式II的磺酰氯A—SO2Cl(I)(其中A如上所定義)與式III的胺反應(yīng) 其中R1和D如上所定義。
此外，可以在合適的溶劑(例如N，N—二甲基乙酰胺)中通過其中R1僅僅是氫原子的式I化合物(即式I″化合物)與氫化鈉反應(yīng) 其中A和D如上所定義，然后與式II″的鹵化物反應(yīng)R′1X(II′)其中R′如上所定義，并且X表示鹵原子，制備其中R1具有除氫之外的上述含義的式I化合物，即相應(yīng)于式I′的化合物 其中A和D如上所定義，并且R′1表示α)含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基以及可以被一個(gè)或多個(gè)甲基、苯基、吡啶基或噻吩基取代的含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基，其本身可以任意地或者被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代、或者被羥基取代，β)含3—7個(gè)碳原子的鏈烯基(例如—CH2—CH＝CH2)，或者χ)含3—7個(gè)碳原子的炔基(例如—CH2—C≡CH)。
式I化合物可以用生理耐受的酸轉(zhuǎn)化為加成鹽，因此該鹽也是本發(fā)明的一部分。可用于形成那些鹽的可提及的酸是例如無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸和磷酸，有機(jī)酸如乙酸、丙酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、草酸、苯甲酸甲磺酸和羥乙磺酸。
所有用作原料的式II磺酰氯已在文獻(xiàn)中描述。如下列實(shí)施例中所述，式III的原料是按照已知的方法，根據(jù)D和R1的含義由已知產(chǎn)物制備的。
本發(fā)明的化合物具有有價(jià)值的生理性質(zhì)和治療性質(zhì)。尤其是下面所證明的那些化合物的性質(zhì)·在體外—一方面；其抗缺氧活性，該活性在缺氧—再氧合作用的過程中可防止離體大鼠心臟機(jī)能障礙，并且限制因缺氧所致的心細(xì)胞壞死?！硪环矫嫫浞乐惯^量細(xì)胞內(nèi)鈣的能力由此可以防止因鈣異常所致大鼠心細(xì)胞壞死；以及·在體內(nèi)其在豬內(nèi)因冠狀狹窄所致心肌局部缺血中的抗局部缺血活性。
這些活性使得本發(fā)明化合物適于用作防止或治療局部缺血疾病(特別是在心血管領(lǐng)域心絞痛、心肌梗塞和局部缺血心臟病后遺癥(節(jié)律疾病、心機(jī)能不全))和外周血管疾病的藥物。
本發(fā)明化合物也可以用于腦領(lǐng)域，特別是用于治療腦血管意外和與慢性腦循環(huán)疾病有關(guān)的缺乏現(xiàn)象；用于眼科學(xué)領(lǐng)域；尤其是用于治療因血管造成的視網(wǎng)膜疾??；以及用于局部缺血造成的感覺神經(jīng)疾病。
劑量是可以變化的，尤其是根據(jù)患者的年齡和體重、給藥途徑、疾病的性質(zhì)和有關(guān)的治療改變，其范圍是1—200mg活性成分，每天1—3次。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，它含有式I化合物或其生理耐受鹽作為活性成分，該活性成分與一種或多種合適的藥物賦形劑混合或結(jié)合。
所得到的藥物組合物通常是含1—200mg活性成分的劑型。它們可以是例如片劑、糖衣丸、明膠膠囊、栓劑或可注射或可飲用的溶液，并且可以根據(jù)情況通過口、直腸或腸道途徑給藥。
下列實(shí)施例用于說明本發(fā)明。除非另外說明，所有熔點(diǎn)均采用Kofler熱板測定。實(shí)施例1N—乙基—N—(3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基〕—(異喹啉—5—基)磺酰胺
1)在攪拌下，向0.1mol N—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪和0.1mol三乙胺在250ml苯中的混合物中滴加0.1mol 3—氯—2，2—二甲基丙酰氯。攪拌反應(yīng)一夜后，將該混合物轉(zhuǎn)入燒瓶中，并用水洗滌。分離下式的所需產(chǎn)物，為油狀，產(chǎn)率為54％。 2)將0.053mol所得產(chǎn)物與0.063mol碘化鈉在600ml甲乙酮中加熱回流24小時(shí)。經(jīng)HPLC監(jiān)測后，再加入0.063mol碘化鈉，然后再回流24小時(shí)。使其回復(fù)到室溫，蒸發(fā)，溶于乙醚，并用常規(guī)(Normal)硫代硫酸鈉洗滌。得到下式的所需產(chǎn)物，為油狀，產(chǎn)率為95％。 3)在攪拌下、于100℃，將上述獲得的碘化的化合物與兩個(gè)當(dāng)量的氰化鈉在100ml二甲基甲酰胺中加熱6小時(shí)。蒸發(fā)掉二甲基甲酰胺，將殘余物溶于水中，并用乙醚萃取。不需進(jìn)一步純化，即可以使用如此得到的腈(產(chǎn)率為54％，為油狀)。
4)將上述得到的腈溶于250ml四氫呋喃中，并將所得到的溶液與10當(dāng)量的甲硼烷—二甲硫反應(yīng)。將該反應(yīng)混合物加熱回流6小時(shí)。用25ml甲醇溶劑分解后，蒸發(fā)，并用在80ml甲醇中的40ml濃鹽酸水解，將其蒸發(fā)，溶于水中，并用乙醚萃取，將水相堿化，并用乙酸乙酯萃取。得到油狀的所需胺，產(chǎn)率為90％。
5)在室溫，向在65ml二氯甲烷中的0.017mol上述得到的胺和0.034mol三乙胺中分批加入0.017mol(異喹啉—5—基)磺酰氯鹽酸鹽。將反應(yīng)物攪拌過夜，然后轉(zhuǎn)入燒瓶中，用于100ml常規(guī)氫氧化鈉溶液洗滌，將有機(jī)相干燥。然后在二氧化硅柱上于CH2Cl2/CH3OH(95∶5)體系中進(jìn)行色譜，收集6.3克所需產(chǎn)物，為油狀。
6)將上一步驟中制備的2.8g(0.005mol)磺酰胺溶于30ml二甲基乙酰胺中，并與化學(xué)計(jì)量量的60％氫化鈉反應(yīng)。當(dāng)氣體停止發(fā)生時(shí)，加入0.005mol碘乙烷，并將反應(yīng)混合物攪拌過夜。用水充分稀釋該混合物，用乙醚萃取，干燥并蒸發(fā)，得到油狀的實(shí)施例1的標(biāo)題產(chǎn)物，產(chǎn)率為64％。N—乙基—N—(3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基〕—(異喹啉—5—基)磺酰胺二富馬酸鹽的熔點(diǎn)為143—146℃。實(shí)施例2—5
按照與實(shí)施例1所述方法類似的方法制備下列實(shí)施例的目的化合物2)N—芐基—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺，相應(yīng)的2，5—富馬酸鹽的熔點(diǎn)是174—176℃。3)(1R)—N—乙基—N—(3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基}—10—茨佛磺酰胺，相應(yīng)的二鹽酸鹽的熔點(diǎn)是243—245℃。4)(1S)—N—乙基—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基}—10—茨佛磺酰胺，相應(yīng)的二鹽酸鹽的熔點(diǎn)是243—245℃。5)(1R)—N—芐基—N—(3，3—二甲基—4—〔4—(2.，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基}—10—茨佛磺酰胺，相應(yīng)的二鹽酸鹽的熔點(diǎn)是188--191℃。實(shí)施例6N—芐基—N—{〔4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕苯基〕甲基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺
1)在100℃和攪拌下，將0.2mol氟芐腈、0.2mol碳酸鉀和0.2molN—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪加熱8小時(shí)。然后用水稀釋，并用乙醚萃取，用常規(guī)鹽酸萃取有機(jī)相，合并水相，并在冷卻條件下用濃氫氧化鈉溶液使其堿化，用乙醚萃取。得到狀的所需腈，產(chǎn)率為40％。
2)用在150ml四氫呋喃中的1當(dāng)量氫化鋁鋰還原所得到的腈。分解后，用CH2Cl2/CH3OH/NH4OH(95∶5∶0.5)作洗脫劑，將所得到的油進(jìn)行閃式色譜。得到油狀的所需胺，產(chǎn)率為37％。
3)按照實(shí)施例1第5)段所述方法將上述得到的胺與(異喹啉—5—基)磺酰氯偶合。按照實(shí)施例1第6)段所述方法，用芐基溴代替碘乙烷進(jìn)行烷基化作用。由此得到實(shí)施例6的實(shí)物，其鹽酸鹽的熔點(diǎn)為152—155℃。實(shí)施例7順—N—乙基—N—{2—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基甲基〕環(huán)丙基甲基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺 1)制備順/反2—氰基環(huán)丙—1—基甲酸甲酯混合物 將0.5mol丙烯腈和0.5mol氯乙酸甲酯的混合物倒入50ml甲苯和0.5mol氫化鈉的懸浮液中。將該反應(yīng)混合物攪拌一夜，然后用含16ml甲醇的150ml乙醚極緩慢地使其分解。將其轉(zhuǎn)入燒瓶中，用乙醚稀釋，用飽和氯化鈉溶液洗滌，干燥并蒸發(fā)。
經(jīng)蒸餾收集順/反混合物，B.p/15mm＝120－140℃(產(chǎn)率20％)。2)制備順/反2—氰基環(huán)丙—1—基甲酸混合物 將11.7g(0.093mol)上述得到的2—氰基環(huán)丙—1—基甲酸甲酯與100ml當(dāng)量氫氧化鈉溶液和50ml乙醇攪拌過夜使其水解。蒸發(fā)掉乙醇，加入100ml當(dāng)量鹽酸，將其蒸發(fā)干燥至恒重。
將沉淀溶于100ml乙腈，濾掉氯化鈉，并蒸發(fā)。得到順/反2—氰基環(huán)丙—1—基甲酸混合物，熔點(diǎn)為80—90℃(產(chǎn)率為81％)。
3)制備分離的順和反異構(gòu)體形式的1—氰基—{2—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕羰基}環(huán)丙烷
將12.2g(0.075mol)羰基二咪唑一次加入8.4g(0.075mol)2—氰基環(huán)丙—1—基甲酸和50ml CH2Cl2的懸浮液中，在氣體停止發(fā)生后攪拌2小時(shí)。滴加在100ml CH2Cl2中的20g(0.075mol)4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪，并將其撐拌一夜。將其全部倒入燒瓶中，用水洗滌，干燥并蒸發(fā)。經(jīng)閃式色譜得到8.3g(35％)反式異構(gòu)體(油狀)和11.1g(47％)順式異構(gòu)體，熔點(diǎn)為108—110℃。
4)制備順—2—{〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕甲基}環(huán)丙—1—基甲基胺 在攪拌下將22.7g(0.3mol)甲硼烷—二甲硫滴加至8.3g上面得到的順式腈在315ml四氫呋喃中的溶液中。將其加熱回流6小時(shí)，恢復(fù)到室溫，用20ml甲醇緩慢地分解，并保持回流，直到氣體停止發(fā)生。然后將其蒸發(fā)，并溶于50ml甲醇10ml濃鹽酸中，加熱回流，直到氣體停止發(fā)生。
蒸發(fā)掉乙醇，在冷卻條件下將水相堿化，用乙醚萃取，干燥并蒸發(fā)。產(chǎn)量為2.3g(29％)。
5)制備下式的順式化合物 向2.3g(0.008mol)順—{{2—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕甲基}環(huán)丙—1—基}甲基胺和0.8g三乙胺在25mlCH2Cl2中的溶液中分批加入1.1g(0.004mol)(異喹啉—5—基)磺酰氯。將反應(yīng)物放置一夜，然后轉(zhuǎn)入燒瓶中，用當(dāng)量氫氧化鈉溶液洗滌，然后用水洗滌，并蒸發(fā)。用CH2Cl2/CH3OH(95∶5)作洗脫劑進(jìn)行閃式色譜，得到1.2g所需產(chǎn)物，產(chǎn)率為57％。
6)制備實(shí)施例7的標(biāo)題化合物用0.1g 60％氫化鈉處理在15ml二甲基乙酰胺中的1.2g(0.0024mol)上面5)得到的磺酰胺。然后加入0.4g碘乙烷，將該混合物在室溫?cái)嚢枰灰?。將其用水稀釋，并用乙醚萃取。用CH2Cl2/CH3OH(95∶5)作洗脫劑進(jìn)行閃式色譜，得到1g所需物質(zhì)(產(chǎn)率為80％)。將其溶于5ml乙酸乙酯，并向其中加入在乙醚中的3當(dāng)量鹽酸，形成鹽。將其過濾，干燥，并在5ml甲基氰中結(jié)晶該產(chǎn)物，得到順—N—乙基—N—{2—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基甲基〕環(huán)丙基甲基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺三鹽酸鹽，熔點(diǎn)為175℃。實(shí)施例8按照與實(shí)施例7所述類似的方法，制備反—N—乙基—N—{2—〔4—2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基甲基〕環(huán)丙基甲基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺，不同的是從第4)段開始，用相應(yīng)的反式化合物代替順式化合物。實(shí)施例8標(biāo)題產(chǎn)物的三鹽酸鹽在162—165℃熔融 實(shí)施例9如實(shí)施例7所述方法制備順—N—芐基—N—{2—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基甲基〕環(huán)丙基甲基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺，不同的是在第6)段用芐基溴代替碘乙烷。
由此得到順—N—芐基—N—{2—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基甲基〕環(huán)丙基甲基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺三鹽酸鹽，其熔點(diǎn)為202—204℃ 實(shí)施例10N—(吡啶—3—基甲基)—N—〔3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕丁基〕—(異喹啉—5—基)磺酰胺 1)制備下式的胺 將7.3g(0.02mol)實(shí)施例1第4)段所得到的胺與2.14g(0.02mol)3—吡啶甲醛(pyridinecarbonaldehyde)在80ml乙醇中加熱回流。待該混合物恢復(fù)到室溫后，分批加入0.8g硼氫化鈉。氣體發(fā)生停止后，將反應(yīng)物放置4小時(shí)，然后用水稀釋，用乙醚萃取。干燥并蒸發(fā)后，得到6.5g油狀所需產(chǎn)物，該產(chǎn)物不需進(jìn)一步純化即可使用。
2)制備實(shí)施例10的標(biāo)題混合物按照實(shí)施例1第5)段所述方法，將上面得到的胺與(異喹啉—5—基)磺酰氯鹽酸鹽縮合，得到實(shí)施例10的標(biāo)題化合物，其四鹽酸鹽在高于260℃熔融。實(shí)施例11—14按照實(shí)施例10所述方法制備下列實(shí)施例的目的產(chǎn)物11)用2—吡啶甲醛代替實(shí)施例10第1)段的3—吡啶甲醛，制備N—(吡啶—2—基甲基)—N—(3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕丁基〕—(異喹啉—5—基)磺酰胺。所得到的游離堿在110—113℃熔融。
12)用4—吡啶甲醛代替實(shí)施例10第1)段的3—吡啶甲醛，制備N—(吡啶—4—基甲基)—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕丁基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺。標(biāo)題產(chǎn)物的四甲磺酸鹽在143—146℃熔融。
13)用2—噻吩甲醛(thiophenecarbonaldehyde)代替實(shí)施例10第1)段的3—吡啶甲醛，制備N—(噻吩—2—基甲基)—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕丁基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺。標(biāo)題產(chǎn)物的三鹽酸鹽在188—190℃熔融。
14)用3—噻吩甲醛代替實(shí)施例10第1)段的3—吡啶甲醛，制備N—(噻吩—3—基甲基)—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕丁基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺。標(biāo)題產(chǎn)物的三鹽酸鹽在158—160℃熔融。實(shí)施例15N—乙基—N—{{4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕甲基}芐基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺 1)制備下式的腈 向25g(0.17mol)對(duì)氰基苯甲酸在250ml二氯甲烷中的懸浮液中加入27.6g(0.17mol)羰基二咪唑。當(dāng)氣體停止發(fā)生后，使反應(yīng)物再反應(yīng)2小時(shí)。然后將其快速滴加到至溶于100ml二氯甲烷中的45.3g(0.17mol)1—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫放置過夜后，用水洗滌，然后用氫氧化鈉洗滌，然后再用水洗滌。用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，得到65.8g油狀所需產(chǎn)物。
2)制備下式的胺
用大約15分鐘，向溶于280ml四氫呋喃中的10g(0.0278mol)前一步驟得到的產(chǎn)物中滴加21ml甲硼烷—二甲硫。將其回流一夜，使其冷卻，然后用含有幾滴硫酸的43.7ml甲醇溶劑分解?；亓?小時(shí)后，將其蒸發(fā)至干，溶于二氯甲烷中，用水洗滌，并用硫酸鎂干燥。蒸發(fā)得到5g油狀所需產(chǎn)物。
3)制備下式化合物 按照實(shí)施例1第5)段所述方法，將上面得到的胺〔15g(0.014mol)〕與(異喹啉—5—基)磺酰氯鹽酸鹽縮合，用CH2Cl2/CH3OH)95∶5)作洗脫劑、在二氧化硅上經(jīng)閃式色譜純化，得到2.4g純化合物。
(4)按照實(shí)施例1，段6)中描述的操作方法處理上面得到的2.48(0.004mol)化合物。在硅膠上用CH2Cl2/CH3OH(95∶5)作洗脫劑通過閃式色譜純化后，得到2.1g游離堿，將其用3.5ml 3.5N鹽酸乙醚溶液處理，得到該標(biāo)題化合物的三鹽酸鹽，熔點(diǎn)為220—222℃。實(shí)施例16藥理學(xué)研究證明本發(fā)明產(chǎn)物的心保護(hù)活性；在體外·一方面對(duì)受缺氧—再氧合循環(huán)作用的離體大鼠心臟以及對(duì)缺氧壞死所影響的大鼠心細(xì)胞的活性，·另一方面對(duì)過量細(xì)胞內(nèi)鈣模型因鈣異常所致心細(xì)胞壞死的活性，以及在體內(nèi)其在豬內(nèi)因冠狀狹窄所致心肌局部缺血中的活性。A—體外研究1—材料與方法1.1.—離體大鼠心臟的缺氧—再氧和作用在靜脈注射肝素(1ml/kg)后，將通過腹膜內(nèi)用戊巴比妥鈉(30mg/kg，腹膜內(nèi)注射)麻醉的雄性Wistar大鼠(325—375g，Charles River品種)的心臟取出，在76mmHg恒壓下按照Lan-gendorff的技術(shù)快速灌注，并用鉑電極以5Hz進(jìn)行電刺激。通過與壓力敏感器(P23—Gould)連接并插入左心室的聚乙烯氣囊記錄等容量收縮，同此得到10mmHg的舒張壓。
所使用的生理溶液保持在37℃，其組成如下(mM)NaCl，118；KCl，4.7；KH2PO4，1.2；MgCl2，1.2；CaCl2，1.3；NaHCO3，25；葡萄糖，8；pH7.4；95％O2＋5％CO2。
穩(wěn)定20—30分鐘后，使心臟缺氧60分鐘(用95％N2＋5％CO2進(jìn)行，PO2＜60mmhg)，然后使其再氧合30分鐘；在事先將用于試驗(yàn)的化合物保溫15分鐘，用于缺氧過程中。對(duì)于離體試驗(yàn)，該化合物在動(dòng)物被處死前3小時(shí)經(jīng)口服(1ml/kg)給藥。1.2.—對(duì)大鼠心細(xì)胞的研究從新生大鼠的心臟得到心肌細(xì)胞一級(jí)培養(yǎng)物。在放入培養(yǎng)基中后第4—6天使用該心細(xì)胞。1.2.1.缺氧所致大鼠心細(xì)胞壞死在37℃和壓力室中，在氮?dú)夥障拢瑢⑷毖跫?xì)胞培養(yǎng)3或4小時(shí)。僅僅在基缺氧時(shí)用于試驗(yàn)分子處理該細(xì)胞。通過分光光度法測量培養(yǎng)3或4小時(shí)后的上清液中釋出乳酸脫氫酶的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，估測缺氧所致的細(xì)胞壞死。1.2.2.因鈣異常所致心細(xì)胞壞死首先在補(bǔ)充有1mM EDTA的無鈣或鎂的緩沖液中將所有心細(xì)胞培養(yǎng)30分鐘。除去上清液后，將細(xì)胞在3.8mM鈣離子緩沖液中培養(yǎng)4小時(shí)。將該細(xì)胞用試驗(yàn)分子處理兩次此時(shí)加至EDTA緩沖液中，然后轉(zhuǎn)入3.8mM Ca2+緩沖液中。2—結(jié)果2.1.對(duì)受缺氧—再氧合作用的離體大鼠心臟的影響表1示出了本發(fā)明化合物，所用濃度(10-6M，3×10-7M或5×10-7M)，缺氧60分鐘后發(fā)生收縮從20％減少到63％，再氧合30分鐘后發(fā)生收縮從35％減少到95％。它們還改善了再氧合過程中心功能的恢復(fù)所處理心臟的室壓實(shí)際上達(dá)到了其缺氧前初始值的48％—89.7％，而對(duì)照心臟的室壓限制在其初始值的22.5％—33.5％。
表2表明，與對(duì)照動(dòng)物的心臟比較，接受口服實(shí)施例2化合物治療的大鼠心臟受到了保護(hù)，防止了因離體進(jìn)行的缺氧—再氧合所致的改變1.與對(duì)照動(dòng)物的心臟相比，缺氧60分鐘后和再氧合30分鐘后所發(fā)生的收縮分別減少了50％和37％；2.比對(duì)照動(dòng)物(其初始值33.5％)更早恢復(fù)心臟室壓(其初始值的33.5％)。
表1本發(fā)明化合物對(duì)受缺氧—再氧合作的離體大鼠心臟的收縮及功能恢復(fù)的影響
表2給大鼠口服實(shí)施例2化合物對(duì)復(fù)到離體缺氧—再氧合作用的離體心臟的收縮及功能恢復(fù)的影響
2.2.—對(duì)心細(xì)胞的研究2.2.1.—對(duì)缺氧所致大鼠心細(xì)胞壞死的影響表3表明，本發(fā)明化合物從10-6M開始以濃度依賴的方式減少缺氧壞死。根據(jù)具體的化合物，最大的保護(hù)為49.4—76.4％。
表3因缺氧所致大鼠心細(xì)胞壞死
/p><p>結(jié)果以百分?jǐn)?shù)表示，它僅與缺氧所致細(xì)胞壞死有關(guān)(壞死指數(shù)為100)。2.2.2—對(duì)因鈣異常所致大鼠心細(xì)胞壞死的影響表4表明，該化合物限制因鈣異常所致壞死。在10-6M或10-5M濃度的最大保護(hù)達(dá)到70—93％。
表4因鈣異常所致大鼠心細(xì)胞壞死
結(jié)果以百分?jǐn)?shù)表示，它僅與鈣異常所致細(xì)胞壞死有關(guān)(壞死指數(shù)為100)。B—體內(nèi)研究1—材料與方法該研究在3個(gè)月的重18—23公斤的雌性和雄性“LargeWhite”豬上進(jìn)行。
用Zoletil(15mg/kg，肌內(nèi)注射(麻醉動(dòng)物。通過灌注6—8mg/kg/小時(shí)硫噴妥鈉保持麻醉。
立即插管，并用空氣＋O2的混合物換氣。
通過縱向切開胸骨以及在第4和第5根肋骨之間切口，施行“T”胸廓切開術(shù)。
切開心包使心臟懸于心包支架上，并將心臟固定在胸肌的四個(gè)點(diǎn)上。
將電磁流環(huán)置于左冠狀室間支脈前的水平，并將可充氣的氣囊立即置于該環(huán)的下游，此二者設(shè)計(jì)為通過流量控制影響冠狀狹窄。將與Triton微弦音計(jì)(sonomicrometer)連接的壓電晶體，依垂直于心軸的環(huán)狀面植入左心室壁的心內(nèi)膜下。那些晶體用于記錄由狹窄的冠狀動(dòng)脈所供應(yīng)的區(qū)域中心內(nèi)ECGs值。2—實(shí)驗(yàn)方案通過給氣囊充氣，使冠狀流量減少50—60％，造成心肌缺血。
施行具有可再生和可逆作用的兩個(gè)同樣的3分鐘狹窄，通過間隔55分鐘的恢復(fù)分離。
在狹窄前10分鐘通過5分鐘靜脈輸注進(jìn)行治療·在第一次狹窄前輸注溶劑·在第二次狹窄前輸注產(chǎn)物或溶劑。3—研究的參數(shù)·局部缺血區(qū)域心內(nèi)ECGs值的變化在于所測量的ST部分的增加，以毫伏(mV)計(jì)。4—結(jié)果在對(duì)照組進(jìn)行的兩個(gè)冠狀狹窄造成了同樣的心電圖變化。與第一次冠狀狹窄的影響相比，在第二次冠狀狹窄前通過靜脈內(nèi)施用1或3mg/kg本發(fā)明化合物，使得心內(nèi)心電圖的ST部分的增加減少了48—66％。
權(quán)利要求
1.式I的取代的磺酰胺及其與合適酸的生理耐受加成鹽 其中—A表示下式基團(tuán) 或 —R1表示a)氫原子，b)含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基以及可以被一個(gè)或多個(gè)甲基、苯基、吡啶基或噻吩基取代的含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基，其本身可以任意地或者被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代、或者被羥基取代，c)含3—7個(gè)碳原子的鏈烯基(例如—CH2—CH＝CH2)，或者d)含3—7個(gè)碳原子的炔基(例如—CH2—C≡CH)；以及—D表示a)含2—6個(gè)碳原子的飽和直鏈烴鏈，它被一個(gè)或多個(gè)氧或硫原子間隔，或者被環(huán)戊烷環(huán)間隔，或者被偕二甲基取代，或者b)下式基團(tuán) 或
2.權(quán)利要求1的化合物，該化合物是N—芐基—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)—哌嗪—1—基〕丁基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺及其富馬酸鹽。
3.權(quán)利要求1的化合物，該化合物是N—(吡啶—3—基甲基)—N—{3，3—二甲基—4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕丁基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺及其四鹽酸鹽。
4.權(quán)利要求1的化合物，該化合物是N—乙基—N—{{4—〔4—(2，3，4—三甲氧基芐基)哌嗪—1—基〕甲基}芐基}—(異喹啉—5—基)磺酰胺及其三鹽酸鹽。
5.制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其特征在于將式II的磺酰氯A—SO2Cl(I)(其中A如權(quán)利要求1所定義)與式III的胺反應(yīng) 其中R1和D如權(quán)利要求1所定義。以及如果需要，用可藥用酸將所述化合物轉(zhuǎn)化為其加成鹽。
6.制備相應(yīng)于式I′的化合物的方法 其中A和D如權(quán)利要求1所定義，并且R′1表示α)含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基以及可以被一個(gè)或多個(gè)甲基、苯基、吡啶基或噻吩基取代的含1—7個(gè)碳原子的直鏈烷基，其本身可以任意地或者被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代、或者被羥基取代，β)含3—7個(gè)碳原子的鏈烯基(例如—CH2—CH＝CH2)，或者χ)含3—7個(gè)碳原子的炔基(例如—CH2—CCH)，其特征在于在合適的溶劑中使式I″化合物與氫化鈉反應(yīng) 其中A和D如權(quán)利要求1所定義，然后與式II″的鹵化物反應(yīng)R′1X(II′)其中R′如上所定義，并且X表示鹵原子，以及如果需要，用可藥用酸將所述化合物轉(zhuǎn)化為其加成鹽。
7.權(quán)利要求1—4中任一項(xiàng)的化合物作為藥物。
8.適用于治療心肌局部缺血疾病、腦血管意外和與慢性腦循環(huán)疾病有關(guān)的缺乏現(xiàn)象的藥物組合物，它僅含有至少一種權(quán)利要求1—4中任一項(xiàng)的化合物作為活性成分，或者該活性成分與一種或多種合適的藥用賦形劑結(jié)合。
全文摘要
式I的取代的磺酰胺及其生理耐受鹽，其中A、R
文檔編號(hào)C07D295/12GK1120537SQ9510214
公開日1996年4月17日 申請(qǐng)日期1995年2月24日 優(yōu)先權(quán)日1994年2月25日
發(fā)明者J·L·琵格里昂, J·P·維拉恩, N·維萊紐夫, J·P·伊利奧, J·P·比多亞德 申請(qǐng)人:阿迪爾公司