專利名稱：一種提取卵黃中抗體的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬卵黃中抗體的提取方法。
卵黃能富集機體所產(chǎn)生的抗體，其中抗體的濃度與血清中抗體濃度相近或略高，且卵黃比血清易獲取，因此往往采用含抗體的卵黃進行人工被動免疫接種。但是由于卵黃中含有大量卵磷脂等脂質(zhì)，大大增加了卵黃的粘稠度，將卵黃脂質(zhì)與水溶性蛋白質(zhì)分開是能否更有效地利用其中抗體的關(guān)鍵。近年來，在這方面的研究，主要有PEG提取法(Polson et al.，1985)，生物膠提取法(Hajime HATTA et al.，1990)，乙醇超臨界CO2脫脂法(八田一等，1994)等，雖然在收率及純度上較好，但難以解決試劑用量大、毒性大、操作繁瑣及需高速離心等難題，因此未能在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。
本發(fā)明是對由卵黃中提取抗體的方法的創(chuàng)新，旨在簡化卵黃抗體的提取程序，提高回收率，保持較高的活性，降低成本，且具有一定的防腐作用。
本發(fā)明的要點是，對產(chǎn)蛋雞免疫接種傳染性法氏囊病病毒等抗原，經(jīng)2～3次免疫接種后，將含高效價抗體的卵黃，用磷酸鹽緩沖液(PBS)等稀釋(卵黃∶稀釋液＝1∶3—6)，按0.3—1.2％的比例加入甲醛溶液(含甲醛37％)，混勻，置于-10℃以下溫度經(jīng)4—10小時凍結(jié)，取出快速解凍，卵黃呈膠凍狀，并可出現(xiàn)少量清亮的液體。將卵黃擠壓，即可有液體流出，并將余渣用稀釋液(原體積的1/4)漂洗，收集兩次液體，即為所制備的抗體溶液，凍存。
本發(fā)明提取工藝流程如下 本發(fā)明各成份的添加比例如下卵黃1份稀釋液 3—6份甲醛溶液0.3—1.2％(占卵黃＋稀釋液之和)制備過程無需特殊或貴重的儀器，所用甲醛的量很少，也不需其他化學(xué)藥品，因此，實現(xiàn)本發(fā)明的費用很低。獲得的卵黃中抗體活性高，注射于動物體易吸收，副作用小，保護力強，易保存。本發(fā)明克服了以往卵黃抗體提取法的不足之處，具有很大的實用價值。
實施例將高免卵黃液1份，加0.01M pH7.4磷酸鹽緩沖液3份，混勻，再加入0.5％甲醛溶液(甲醛含量為37％)，混勻，置-10℃條件下結(jié)冰，解凍，去除卵黃固形物，即為富含抗體的提取物。
權(quán)利要求
1.一種提取卵黃中抗體的新方法，其特征在于應(yīng)用甲醛溶液與卵黃、稀釋液磷酸鹽緩沖液混勻，將其置于低溫下凍結(jié)，然后快速解凍提取，即為富含抗體的提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取卵黃中抗體的新方法，其特征在于濃度為37％的甲醛溶液占稀釋卵黃液總量的0.3—1.2％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取卵黃中抗體的新方法，其特征在于卵黃與稀釋液的添加比例為1∶3—6。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種提取卵黃中抗體的新方法。該方法是將高免卵黃用磷酸鹽緩沖液等稀釋液稀釋(卵黃∶稀釋液＝1∶3-6)，加入0.3-1.2％甲醛溶液(含37％甲醛)，混勻，置于-10℃以下溫度，經(jīng)4-10小時凍結(jié)，然后快速解凍，將固形物去除，收集液體，即為富含抗體的提取物。本發(fā)明工藝簡單可行。按本發(fā)明提取的抗體，純度高，收獲率高，活性強，注射于動物體內(nèi)易吸收，防治效果良好。因此，該方法易于推廣應(yīng)用。
文檔編號C07K1/14GK1117974SQ95110458
公開日1996年3月6日 申請日期1995年5月19日 優(yōu)先權(quán)日1995年5月19日
發(fā)明者柴家前, 陳鑫磊, 姚永秀, 張紹學(xué), 牛鐘相 申請人:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)