專利名稱：：紅根草鄰醌類化學(xué)修飾物及它們的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物及它的半合成。紅根草系唇形科丹參屬植物(SalviaprionitisHance)，民間將其全草用于治療腹瀉、菌痢、急慢性扁桃腺炎；咽喉炎并有抗結(jié)核活性(藥學(xué)通報(bào)，15，428)，楊保津等[植物學(xué)報(bào)1988，30(5)524—527]研究紅根草的化學(xué)成分，從紅根草中分離得到新天然產(chǎn)物紅根草鄰醌(化合物I)化合物I對(duì)P388白血病細(xì)胞有很強(qiáng)的抑制活性，在1μg/ml濃度時(shí)，抑制率為92.7％，在100-1000μg/ml時(shí)，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌(例枯草桿菌，金黃色葡萄球菌等)有明顯拮抗作用，但該化合物還有一定缺點(diǎn)。本發(fā)明設(shè)計(jì)以有生物活性的紅根草鄰醌作為先導(dǎo)化合物，然后設(shè)計(jì)出一系列紅根草鄰醌類化學(xué)修飾物。本發(fā)明是通過(guò)下列步驟完成1.將紅根草的乙醇提取物經(jīng)氯仿——水分配，得氯仿提取物，將該提取物進(jìn)行硅膠柱層析及制備薄層層析(展開(kāi)劑為二氯甲烷∶環(huán)乙烷＝1∶1V/V)純化后即得化合物I。2.化合物I用相應(yīng)的鹵化劑(例NBS等)使R1鹵化，分離得化合物II其中R1＝F、Cl、Br、IR2＝OH3.化合物II在K2CO3存在下脫HR1后，得化合物III4.化合物III經(jīng)水解得化合物IV5.化合物IV由相應(yīng)的酰化試劑的存在下，使R1的羥基被相應(yīng)的?；〈?，分別得化合物V—XI?；衔颮1R2IIBr(F、Cl、I)OHIIIR1—R2＝0IVOHOHVOCOCH3OHVIOCOCH2CH3OHVIIOCO(CH2)2CH3OHVIIIOCOCH＝CH2OHIXOHXOCO(CH2)2COOHOHXIHH該類二萜類化合物進(jìn)行抗腫瘤的藥理試驗(yàn)證明其對(duì)P388淋巴白血病細(xì)胞株和SGC7901人體胃癌細(xì)胞、A549人體肺癌細(xì)胞具有明顯抑制作用，體內(nèi)對(duì)小鼠Lewis肺癌有效。人體癌細(xì)胞抑制試驗(yàn)采用MTT法，P388小鼠淋巴白血病細(xì)胞采用排染法，體外藥理試驗(yàn)結(jié)果由表1所示。表1，紅根草鄰醌化學(xué)修飾物對(duì)P388淋巴白血病細(xì)胞株的抑制作用(抑制％)</tables>表2，化合物IV對(duì)人體癌細(xì)胞的抑制率(9％)小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，選用平均體重為17.29的小鼠，瘤型為L(zhǎng)ewis肺癌，劑量為20mg/kg腹腔注射化合物V，對(duì)照組小鼠瘤重分別為(克)1.98，2.08，2.73，3.16，2.48，2.37，2.96，1.93，1.95，1.50；注射化合物V后的瘤重則明顯減小，分別為(克)1.38，1.04，1.64，1.20，1.22，1.35，1.24抑制率為42.7％。選用裸鼠品系為BALB/C—nn/nμundemice，(由中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所提供)鼠重平均為25克，每批用鼠30只，其中給藥組，對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組各10只，瘤型為A549和LAX-83人體肺癌，A549是由美國(guó)引進(jìn)的人體肺癌細(xì)胞株，然后接種于裸小鼠體內(nèi)，成為裸小鼠人體肺癌移植瘤模型，LAX-83是中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所裸鼠實(shí)驗(yàn)室于1983年建立的人體肺癌裸小鼠移植瘤模型，實(shí)驗(yàn)方法采用采塊法，隨機(jī)分組，接種48小時(shí)后腹腔給藥，隔天一次，共三周，陽(yáng)性對(duì)照藥為MMC，2mg/kg，停藥后48小時(shí)處死動(dòng)物，分別稱取體重和瘤重，按公式[(C-T)/C]×100計(jì)算腫瘤抑制率。結(jié)果由表3、表4所示。表3，化合物IV對(duì)裸鼠A549人體肺癌模型的抑制作用表4，化合物IV對(duì)裸鼠LAX—83人體肺癌模型的抑制作用下面用實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施實(shí)施例1化合物(II)的制備在一三角瓶中加入紅根草鄰醌200mg(0.68mmol)，用叔丁醇溶解后，加水7ml，冰水冷卻至12℃以下，加入NBS140mg(0.78mmol)，攪拌10分鐘后，撤去冰水冷卻浴，繼續(xù)攪拌3小時(shí)，反應(yīng)混合物于50℃以下蒸除有機(jī)溶劑，殘余物以乙醚提取，乙醚提取液以無(wú)水MgSO4干燥，柱層析純化，得化合物II200mg(75％)，C20H25BrO3，[M]+m/z394(392)，366(364)(M-CO)，267，227，211，200，183，171，155，141，128，115，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.14，1.16(各3H，d，J＝7.0Hz，CH3-16，17)，1.32，1.37(各3H，s，CH3-18，19)，1.85(2H，m，H-2)，3.00(1H，m，H-15)，3.16(2H，m，H-1)，4.32(1H，dd，J＝11.0，1.9Hz，H-3)，7.06(1H，d，J＝8.2Hz，H-7)，7.07(1H，s，H-14)，7.36(1H，d，J＝8.2Hz，H-6)。實(shí)施例2化合物III的制備60mg化合物II加甲醇溶解，加入K2CO31.0g，室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，反應(yīng)混合物減壓蒸除甲醇后，加水稀釋，乙醚提取，乙醚提取液以無(wú)水MgSO4干燥，純化得III(28mg，61％)，C20H24O3，[M]+m/z312，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.10，1.15(各3H，d，J＝7.0Hz，CH3-16，17)，1.25，1.30(各3H，s，CH3-18，19)，1.68(1H，m，H-2)，1.79(1H，m，H-2)，2.37(3H，s，C5-CH3)，2.92(1H，m，H-15)，3.11(1H，m，H-1)，3.28(1H，m，H-3)，7.05(1H，d，J＝7.8Hz，H-7)，7.07(1H，s，H-14)，7.36(1H，d，J＝7.8Hz，H-6)。實(shí)施例3化合物IV，C20H26O4，[M]+m/z330，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.12，1.13(各3H，d，J＝6.0Hz，CH3-16，17)，1.13，1.20(各3H，s，CH3-18，19)，1.46(1H，m，H-2)，1.77(1H，m，H-2)，2.39(3H，s，C5-CH3)，3.02(1H，m，H-15)，3.08(1H，m，H-1)，3.25(1H，m，H-1)，3.54(1H，dd，J＝10.2，1.2Hz，H-3)，7.05(1H，d，J＝7.7Hz，H-7)，7.07(1H，s，H-14)，7.36(1H，d，J＝7.7Hz，H-6)。實(shí)施例4化合物V的制備130mg化合物IV，5ml醋酐和0.5ml吡啶，置45℃水浴上過(guò)夜，反應(yīng)混合物冷至室溫后，倒入碎冰。冰冷下以1096NaHCO3中和，乙醚提取，純化，得化合物4(95mg，65％)，C22H28O5，[M]+m/z372，1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.14，1.15(各3H，寬的單峰，CH3-16，17)，1.21，1.23(各3H，s，CH3-18，19)，1.46(1H，m，H-2)，1.86(1H，m，H-2)，2.19(3H，s，OCOCH3)，2.34(3H，s，C5-CH3)，3.00(3H，m，H-1，H-15)，5.00(1H，dd，J＝9.5，2.1Hz，H-3)，7.04(1H，d，J＝7.7Hz，H-7).7.06(1H，s，H-14)，7.35(1H，d，J＝7.7Hz，H-6)。同法還可制得化合物V—IX。權(quán)利要求1.一類結(jié)構(gòu)式如下的紅根草鄰醌修飾物其中R1為鹵素或羥基或取代?；鵕2為H或OH。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于它由以下步驟制備(1)紅根草鄰醌化合物(化合物I)用相應(yīng)的鹵化劑使R1鹵化得化合物(II)(2)R1鹵化的化合物在K2CO3存在下脫去鹵化氫后，得化合物(III)(3)化合物(III)經(jīng)水解得羥基化合物(IV)(4)化合物(IV)由相應(yīng)的?；噭┐嬖谙拢；疪1的羥基分別得化合物(V—XI)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅根草鄰醌化學(xué)修飾物，其特征在于它們具有抗腫瘤活性可用于治療腫瘤疾病。全文摘要從紅根草中分離得紅根草鄰醌，對(duì)其進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾得紅根草鄰醌類化學(xué)修飾物，經(jīng)藥理試驗(yàn)證明它們對(duì)P388淋巴白血病細(xì)胞，小鼠Lewis肺癌，人體肺癌有較好的效果。文檔編號(hào)C07C50/12GK1127742SQ9511152公開(kāi)日1996年7月31日申請(qǐng)日期1995年1月25日優(yōu)先權(quán)日1995年1月25日發(fā)明者張金生,丁健,樂(lè)秀芳申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所